蘇景寬基金申請(qǐng)技巧講座

基金申請(qǐng)技巧講座

第四軍醫(yī)大學(xué)科研部

蘇景寬

第一部分

如何撰寫(xiě)申請(qǐng)書(shū)

一、摘要（限400字）

包括：研究方法、內(nèi)容、目標(biāo)、科學(xué)意義。

如：采用……方法，進(jìn)行……研究，闡明……機(jī)制或揭示……規(guī)律，為……奠定基礎(chǔ)／提供……思路。作用：畫(huà)龍點(diǎn)睛效果：引發(fā)評(píng)議專(zhuān)家的興趣，使其產(chǎn)生探個(gè)究竟的好奇心

——“他到底是怎么做的？”

采用改良的消減雜交技術(shù)建立老年性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞差異表達(dá)基因文庫(kù)并制備基因芯片，利用此芯片篩選出白內(nèi)障相關(guān)基因。通過(guò)基因轉(zhuǎn)染在體和培養(yǎng)的晶狀體上皮細(xì)胞，觀察細(xì)胞的形態(tài)、增殖和凋亡、骨架蛋白及晶狀體蛋白的變化，研究基因的功能。從晶狀體上皮細(xì)胞的角度闡明老年性白內(nèi)障發(fā)生的分子生物學(xué)機(jī)制，為防治白內(nèi)障提供新思路和理論依據(jù)。二、立論依據(jù)

對(duì)基礎(chǔ)研究，著重結(jié)合國(guó)際科學(xué)發(fā)展趨勢(shì)，

論述科學(xué)意義對(duì)應(yīng)用基礎(chǔ)研究，著重結(jié)合學(xué)科前沿，圍繞國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展中的重要科技問(wèn)題論述應(yīng)用前景

在立論依據(jù)的闡述中，對(duì)研究領(lǐng)域、研究方向、

具體科學(xué)問(wèn)題的理解

研究領(lǐng)域：白內(nèi)障的研究，包括發(fā)病機(jī)制、預(yù)防、診斷、

治療措施等研究

研究方向：白內(nèi)障發(fā)病機(jī)制的研究，包括環(huán)境因素、致病

靶點(diǎn)、細(xì)胞水平、分子水平研究等

科學(xué)問(wèn)題：白內(nèi)障發(fā)病過(guò)程中的相關(guān)基因研究，包括致病

基因篩選、功能研究、調(diào)控機(jī)制、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等在研究領(lǐng)域?qū)用鎻难芯糠较蛘归_(kāi)圍繞某一具體科學(xué)問(wèn)題（本項(xiàng)目研究目標(biāo)）進(jìn)行歸納分析提出研究設(shè)想從研究領(lǐng)域切入研究意義國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀分析

1、項(xiàng)目的研究意義

存在問(wèn)題：對(duì)科學(xué)意義的闡述不足或夸大

撰寫(xiě)方法：

從領(lǐng)域入手，提出主要問(wèn)題，引出熱點(diǎn)研究方向。圍繞熱點(diǎn)研究方向進(jìn)行簡(jiǎn)要分析，找出目前尚未解決的具體科學(xué)問(wèn)題，以此為切入點(diǎn)提出假設(shè)，闡述如果解決了該問(wèn)題（研究目標(biāo)），對(duì)該領(lǐng)域甚至相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)貢獻(xiàn)（理論意義或應(yīng)用前景）。

老年性白內(nèi)障是與年齡相關(guān)的疾病，隨著年齡的增加，其發(fā)病比率也不斷升高。特別是人類(lèi)趨向老齡化，白內(nèi)障的患病人數(shù)還將持續(xù)增加。目前，它已是人類(lèi)第一位的致盲疾病。迄今為止,治療白內(nèi)障唯一有效的方法是通過(guò)手術(shù)摘除混濁的晶狀體并植入人工晶狀體。雖然手術(shù)后患者可以恢復(fù)良好的視力，但是不可避免的術(shù)后并發(fā)癥以及手術(shù)設(shè)備、材料耗資巨大，治療白內(nèi)障所花費(fèi)的資金已成為世界各國(guó)包括富裕的發(fā)達(dá)國(guó)家嚴(yán)重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。最近的調(diào)查表明，如果把老年性白內(nèi)障的發(fā)病時(shí)間延緩10年，白內(nèi)障手術(shù)的數(shù)量就會(huì)減少45%[1]。所以，一些學(xué)者認(rèn)為通過(guò)預(yù)防白內(nèi)障發(fā)生或延緩其發(fā)展的途徑征服白內(nèi)障已成為一項(xiàng)全球性的社會(huì)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)問(wèn)題[2]。但是慨目前乒我們淚對(duì)老貨年性謊白內(nèi)逝障發(fā)病倦機(jī)理的認(rèn)游識(shí)還不癢十分斯清楚丸。多年疼以來(lái)蝦許多液學(xué)者曠的研領(lǐng)究結(jié)器果證鉗實(shí)晶施狀體趣上皮居細(xì)胞洞在老構(gòu)年性拌白內(nèi)慣障發(fā)時(shí)生中亭起重恰要的塞作用導(dǎo)，但麻對(duì)其炎中進(jìn)有一步黎的基牽因調(diào)松控知遙之甚旅少。世如果辟?gòu)膮⑻雅c老遺年性籠白內(nèi)這障晶狀縮慧體上朝皮細(xì)確胞變藝化的嫩相關(guān)體基因入手濤，研賽究基磁因的蒸生物教學(xué)功沉能，東有可朵能抓謙住引倡起白頂內(nèi)障腫發(fā)生爸、發(fā)勿展的霜主要絡(luò)環(huán)節(jié)桂。據(jù)洞此，列本研紐奉究擬沾利用乎改良嗚的消促減雜叉交技夕術(shù)和貍基因贊芯片渡技術(shù)宰準(zhǔn)確片、全旋面、羽快速違的特螺點(diǎn)，羅以晶鍵狀體狠上皮低細(xì)胞種為研梨究對(duì)摸象，鳥(niǎo)一次癥性篩救選出路老年獎(jiǎng)性白乒內(nèi)障稈全部塵有差季異表捷達(dá)的婆基因阿，從拾中再壘篩選菜出與刷白內(nèi)裕障相陷關(guān)基漲因，鳥(niǎo)并著杯重對(duì)并其功荷能進(jìn)桂行研州究，多從基雙因水徒平闡絹明白厲內(nèi)障角的發(fā)部病機(jī)緊制，娃為防蹲治白秤內(nèi)障蛙提供師新思便路和趴理論鐵依據(jù)梢。2、國(guó)方內(nèi)外悠現(xiàn)狀華分析仆（與抖綜述榴的區(qū)厲別）存在始問(wèn)題霧：A、低昨水平腳重復(fù)廉：不了墳解最旁新進(jìn)臺(tái)展，旅對(duì)國(guó)攪內(nèi)外括現(xiàn)狀缺青乏真權(quán)正了府解，獵提出娃的問(wèn)粥題別膽人已元解決饒。B、文偶獻(xiàn)復(fù)誓習(xí)不殼全：檢索勁文獻(xiàn)尤方法渠不當(dāng)農(nóng)、選勞擇關(guān)藝鍵詞不妥隱，甚凈至人索為縮醫(yī)小檢引索范電圍。C、總特結(jié)表辟達(dá)不晝夠：對(duì)國(guó)葬內(nèi)外罪現(xiàn)狀煩缺乏廟歸納凍分析哀，只是小簡(jiǎn)單貸羅列猾，缺漁乏邏陷輯性傘和針映對(duì)性隱。D、對(duì)方轉(zhuǎn)法原五理理滴解不植夠：對(duì)研恩究方駕法不鴨熟悉透，簡(jiǎn)單移續(xù)植或靠夸大愛(ài)其作渾用，擴(kuò)缺乏險(xiǎn)實(shí)際委應(yīng)用鐵的可割行性圈。撰寫(xiě)山方法襲：要緊緊歌圍繞本次納申請(qǐng)木項(xiàng)目室的主貸題。A、從示領(lǐng)域障切入識(shí)，簡(jiǎn)要住論述國(guó)內(nèi)疼外研轎究成果，并融引出當(dāng)皆前的房誠(chéng)熱點(diǎn)息研究繳方向碎。B、從笛研究求方向酸展開(kāi)煩，較詳慣細(xì)地癥分析國(guó)內(nèi)鄭外的倍研究進(jìn)展，闡款明在帥該方藏向上巴存在燃的問(wèn)敗題。C、圍恰繞存路在的農(nóng)問(wèn)題換，結(jié)鼓合國(guó)玻內(nèi)外榨以往核的研礙究結(jié)果納、當(dāng)前墊的現(xiàn)狀及今務(wù)后的發(fā)展錦趨勢(shì)，詳細(xì)滋論述研和分析這些軟問(wèn)題舅產(chǎn)生砌的原民因，提出阻該方貝面的鄰空白劑點(diǎn)、未知場(chǎng)數(shù)、福以及減研究梁的難鋸點(diǎn)、逝焦點(diǎn)由，從而士為自法己申請(qǐng)伸項(xiàng)目金確立領(lǐng)研究虜目標(biāo)廣奠定菠充分詳?shù)牧⑾陶摶氐A(chǔ)。D、對(duì)師擬采傷用的還技術(shù)鞏方法況進(jìn)行融介紹篩和分鹿析。成熟糖的方妹法重點(diǎn)功介紹刃可以免應(yīng)用慢于本揪研究莊的理提論依帶據(jù)和因?qū)嶒?yàn)部依據(jù)礙。新方擴(kuò)法在濱詳細(xì)繩介紹仆其原梯理的禽基礎(chǔ)羊上，闡如明可逃以應(yīng)晉用于筍本研哈究的缺理論改依據(jù)每和實(shí)厲驗(yàn)依文據(jù)。需特蜂別注絹意的伴問(wèn)題憲：必須準(zhǔn)對(duì)所策運(yùn)用耐的技骨術(shù)方蜓法的忍原理租、流墓程尤舒其是遙在實(shí)餅際運(yùn)毛用中亂可能悠出現(xiàn)福的問(wèn)霜題要科十分伸清楚墨，絕不惠能是梁一種須簡(jiǎn)單少的移駱植。例如袖：抗趕體+功能地基團(tuán)妄，理生論上均可以墊實(shí)現(xiàn)塌融合范，但森存在次“活態(tài)性、蔽表達(dá)命載體西選擇剝、純幣化等護(hù)問(wèn)題蝕。E、提況出本寺項(xiàng)目塞的研座究設(shè)仗想。防治蠶白內(nèi)匆障必獸須針框?qū)ζ湓u(píng)發(fā)病預(yù)的主勿要環(huán)濁節(jié)。岸多年傳以來(lái)斤，國(guó)記內(nèi)外愉學(xué)者圾從不檢同的恥角度似探討手白內(nèi)鴿障的肉發(fā)生晌機(jī)理僑。就致晶病的餃環(huán)境膀因素史講，氧化膊因子耳、紫建外線懷輻射菌、晶甲狀體植周?chē)鷤キh(huán)境極中離乖子濃御度改吵變及責(zé)一些駁生長(zhǎng)芹因子譽(yù)、細(xì)嘉胞因色子的潑改變剃均與慢老年賠性白假內(nèi)障賭的發(fā)劇生有距關(guān)。就研笑究的債部位避分，晶狀撞體中纖皮質(zhì)件與核待的蛋掙白質(zhì)嫁改變莖及晶南狀體旱纖維挽的改夢(mèng)變與游白內(nèi)武障的姥形成閉有關(guān)夜，而蹦位于嚷晶狀支體前陪囊膜粥下單兩層的晶狀呀體上犬皮細(xì)驕胞在白咳內(nèi)障插的形賄成中營(yíng)的變螺化更香引人熄關(guān)注蒸。因?yàn)榫疃梵w上參皮細(xì)竄胞是晶拐狀體購(gòu)中唯雁一有奧分裂副活性躬、數(shù)惡量相諸對(duì)穩(wěn)大定的壯細(xì)胞墨，它雜們分遲裂、逃分化坐出晶連狀體泉纖維岔細(xì)胞稼、產(chǎn)祖生晶游體蛋紐奉白，伍終生霉不停落息，雜形成谷了晶駛狀體丙均一雄、對(duì)越稱(chēng)的務(wù)結(jié)構(gòu)哪，對(duì)淘維持牛晶狀刷體的忽透明召起重綱要作兇用。榴不僅碌如此歪，晶狀架體上龍皮細(xì)葵胞還是濕晶狀詠體中受外世來(lái)刺嬸激影度響較早獻(xiàn)的部城位，胸已有災(zāi)研究規(guī)證實(shí)齊老年蒼性白蓄內(nèi)障萍的晶哭狀體潔上皮認(rèn)細(xì)胞櫻還發(fā)資生退行滅性變亞、細(xì)廟胞膜貓通透涌性增鉆加、轟細(xì)胞臘內(nèi)酶帽活性享改變姥、細(xì)恒胞數(shù)晨量減珠少、體凋亡身細(xì)胞認(rèn)增多籍等改慶變，與單擾純老拖化的氧晶狀他體之燥間存拿在差貝異[3痰-5惠]。體外樸實(shí)驗(yàn)斯也證益實(shí)多種摸因素(H躬2O奴2、UV敏-B、晶就狀體芒蛋白索的自日身抗環(huán)體)誘發(fā)饒的白情內(nèi)障藝模型衡中晶狀愉體上晴皮的霜損傷索是晶找狀體宮混濁英的主宅要環(huán)倚節(jié)[6蘭-8缺]。因此任，從懇晶狀舍體上竿皮細(xì)列胞的新變化足入手治探討欣白內(nèi)惕障的齊成因贈(zèng)，有戶可能移抓住定揭示炊白內(nèi)瘋障發(fā)速病機(jī)拘理的移主要矮環(huán)節(jié)膨。而晶狀剝體上貴皮細(xì)蔽胞變收化的濤基因塔調(diào)控問(wèn)機(jī)制是問(wèn)氏題的伐關(guān)鍵紫所在淋，也姑是有雪待我錯(cuò)們深導(dǎo)入研淘究的俱問(wèn)題隔。白內(nèi)析障的跟形成湊與晶狀界體的破老化密不絞可分止，是踢晶狀熄體老削化的捉極端票表現(xiàn)征。晶泛狀體碼的老速化是順多種朱因素帶相互款作用糠的結(jié)廢果，包括蜻基因左的和異非基歲因的傘隨機(jī)或變化期的不拌斷積尖累，也有珠程序臨性的亭、非雨隨機(jī)兩性的宣組織驕特異砌性多種遇基因捉表達(dá)歸的改抖變。目前臟，國(guó)捧內(nèi)外消對(duì)白嚼內(nèi)障宮相關(guān)椒基因真的研頂究主撕要以旁下三巧方面稿：一是炮對(duì)體魂外培魄養(yǎng)的亡晶狀作體白仔內(nèi)障彈模型超及上嘉皮細(xì)凈胞的添研究訪。UV閉-B輻射摩作用姑誘導(dǎo)蒸的白痰內(nèi)障兇中晶性狀體袖上皮喇細(xì)胞點(diǎn)是主砍要的籮靶細(xì)引胞，單其N(xiāo)a屈-K它-A播TP酶的篇活性撕增加塘，蛋我白質(zhì)責(zé)的合蕉成和哭分泌巡壽增加揭；上舊皮細(xì)怖胞的漠凋亡等增加覽，其番中有c-涌fo債s基因及的表馳達(dá)增夸加；到還有躺組蛋爹白H4、H3的低稱(chēng)表達(dá)`和蛋順白酶C、β-肌動(dòng)那蛋白地、γ-肌動(dòng)敏蛋白膽基因購(gòu)的高泡表達(dá)[9巨-1好2]。Ca尾rp榮er等[1些3]利用RT紙-P弱CR京-D立D(械re田ve欄rs喬e撒tr忽an成sc稼ri述pt除io遞n-增po緩ly濫me秧ra身se魚(yú)c殃ha米in傭r馬ea隔ct準(zhǔn)io寒n命di互ff脆er捷en司ti億al辮d洽is控pl員ay滿)技術(shù)的研究H2今O2誘導(dǎo)灑的晶奸體上顯皮細(xì)捆胞的傳基因逝差異春性表獸達(dá)結(jié)篩果顯弊示NA擔(dān)DH脫氫仔酶4亞基鑒、細(xì)匙胞色鏟素b、谷乒氨酰敗胺轉(zhuǎn)岡移酶彼基因餐表達(dá)威減少交以及度細(xì)胞槍因子時(shí)的核滴蛋白戰(zhàn)、替言代拼專(zhuān)接因是子2（al技te補(bǔ)rn窯at磨iv密e腳sp霧li冠ci將ng求f戶ac石to目r）、β-三羥呀基異等丁酰夾輔酶A水解信酶基干因表配達(dá)的羞增加沿。二是閱利用忘轉(zhuǎn)基男因動(dòng)坑物的案研究鴉。波形鞋纖維驢蛋白握基因汁（vi液me俯nt蝴in）、淋雜交查的Ⅲ型中允間纖孩維蛋突白基粉因的除轉(zhuǎn)基刪因小魂鼠表著現(xiàn)出斜白內(nèi)猛障，卡而且減有隨抗小鼠餐年齡養(yǎng)增加挑白內(nèi)乘障加情重的醋趨勢(shì)勿。晶忠狀體機(jī)改變夾的共像同特賽點(diǎn)是意晶狀知體纖輔維細(xì)甩胞分祥化受例抑制[1兩4,代15嶄]。Go遇ng等[1盤(pán)6]報(bào)告款晶狀承體的哄細(xì)胞姓膜蛋送白連脊接蛋語(yǔ)白α3（α3悠C援on拖ne掏xi至n）基厚因敲陣除小殲鼠（kn胸oc司ko秘ut束m誕ou槽se）在京晶狀蘇體形劃成的形早期停及纖心維細(xì)底胞分嚼化早雷期不滿受影玩響，炭其后靜出現(xiàn)鋸與晶斷狀體府蛋白腳溶解母有關(guān)少的核崖性白炸內(nèi)障喝。雖然剩體外挽實(shí)驗(yàn)破和白延內(nèi)障忌轉(zhuǎn)基策因小耳鼠都似提示動(dòng)我們聯(lián)一些困基因緒的變值化與竿白內(nèi)弄障有周關(guān)，京但是園，這帝些變運(yùn)化的辨基因種是否窮與老針年性叉白內(nèi)心障形亞成有據(jù)關(guān)，泳目前溫尚缺資乏進(jìn)癢一步錢(qián)的報(bào)汽告。三是妙對(duì)人垂老年判性白攜內(nèi)障鵲晶體裙上皮珠的研勻究。Le嫩e[來(lái)17慈]利用RT胃-P柿CR技術(shù)換研究脈顯示傷前極礎(chǔ)性白書(shū)內(nèi)障漠與核咐性白啦內(nèi)障演上皮巖細(xì)胞過(guò)中纖肺維連哀接蛋裹白、I型膠宏原纖春維、α-平滑引肌蛋燈白、TG膛F-飛β1、TG箭F-績(jī)?chǔ)?、TG印F-算βⅡ型受役體、輔結(jié)締需組織饞生長(zhǎng)凳因子變的基喇因表聾達(dá)有捉差異圾。Ka鐘nt帝or束ow等[1趴8]利用RT部-P辰CR理-D師D研究勾老年反性白旱內(nèi)障艘與正萄常晶蓋狀體辟上皮私的基蠅因差監(jiān)異性津表達(dá)籮的初桑步結(jié)池果是舅老年唇性白澤內(nèi)障的有三匯個(gè)高妨表達(dá)靠基因唉和12個(gè)低惜表達(dá)揮的基蠻因。但就DD煤-P姥CR技術(shù)捎來(lái)講屋，在鞏實(shí)驗(yàn)保中難小以解紹決假句陰性繩、假泉陽(yáng)性敞以及招克隆臉全長(zhǎng)cD尿NA的問(wèn)賴(lài)題。上述使三方稈面的譽(yù)研究伸均取射得了溫不同抓程度殲的研歡究結(jié)說(shuō)果，但由廣于當(dāng)偏時(shí)技羊術(shù)條逃件的渾限制極都未訂能全稀面闡密明與連白內(nèi)靜障相稻關(guān)的只基因雨及其右功能宅。尋找朗白內(nèi)扁障時(shí)痛晶狀勵(lì)體上得皮細(xì)算胞與燈正常券晶狀祖體上搬皮細(xì)征胞間差異貓表達(dá)蝴的基喬因有可秩能揭魯示白努內(nèi)障皺的發(fā)任病機(jī)申理。尋找忽差異福表達(dá)減基因載的經(jīng)那典方父法是憐消減饅雜交坦技術(shù)（su啦bt樹(shù)ra舊ct昂iv攝e論hy提br爭(zhēng)id捐iz墻at揉io布n,每S鄰H），租它是……，但肚是實(shí)黑驗(yàn)操怎作復(fù)誰(shuí)雜。經(jīng)過(guò)腐改進(jìn)旅后的斤抑制花性消首減雜拘交（su遇pp竊re賢ss盤(pán)io侍n地su勒bt勿ra疊ct布iv添e辣hy析br華id挪iz括at塌io度n抗,S跡SH是Di忘at積ch陶en協(xié)ko等19表96年建鑰立的蜂方法孔）……簡(jiǎn)化撲了實(shí)踏驗(yàn)操霉作，交但仍升然問(wèn)重題很耳多。我校同生化蜓教研毯室建立待了改用良消乘減雜稱(chēng)交技擊術(shù)[1筐9，20器]，其特適點(diǎn)是揪：簡(jiǎn)便劣易行蜘，能疊夠獲閱得目雖的細(xì)墨胞特哀異表磁達(dá)的丹全長(zhǎng)喝基因否，對(duì)滑低豐慣度基葡因也挺能有側(cè)效分語(yǔ)離。該方雜法的羅建立詢者已忠利用狂這一誦技術(shù)往從脂福多糖茄刺激筋前后團(tuán)的人拌牙髓摸細(xì)胞振的差垃異表濤達(dá)的儀基因撒中克始隆到價(jià)脂多祥糖刺偷激后臘特異躁表達(dá)掏的基森因，剪其中5個(gè)為扇新基半因。奔同理稻，利膽用此煮方法矮也能棚快速膚、有稿效地拌獲得梯白內(nèi)牧障晶凱狀體將上皮趴細(xì)胞既與正預(yù)常晶悲狀體匠上皮隱細(xì)胞它間差吐異表總達(dá)的兵基因乘，并義克隆歐到全貍長(zhǎng)cD紙NA，為鉛進(jìn)一系步的刑結(jié)構(gòu)搞和功室能研意究打拾下基巡壽礎(chǔ)?；蚩?jī)芯片榨技術(shù)因的出錢(qián)現(xiàn)，揪使檢栗測(cè)差請(qǐng)異表丸達(dá)基克因和俯未知DN鏟A分子瓜變得匪更快病捷、育準(zhǔn)確金、高極效?；虺跣酒渴窃?9迎96年被號(hào)提出廳并開(kāi)湯始研葛制的瞧，該穗技術(shù)據(jù)是將奏成千暖上萬(wàn)堂的DN螺A探針樂(lè)集中頸到1厘米跑見(jiàn)方喇的基隊(duì)片上義，利永用堿項(xiàng)基互廢補(bǔ)原揚(yáng)理，DN魂A探針攜中的衛(wèi)已知叼堿基括序列占與被稿測(cè)定守的未尼知DN惰A分子見(jiàn)雜交瘦后由帶標(biāo)記爪分子臺(tái)標(biāo)記語(yǔ)雜交鄰體，桐經(jīng)自踐動(dòng)閱祥讀設(shè)性備分指析雜稍交結(jié)薪果，善從而對(duì)檢德測(cè)基同因進(jìn)窄行定墨性、專(zhuān)定量堂和結(jié)挨構(gòu)分更析，責(zé)確定獲未知DN蔑A分子捏。由于億目前獻(xiàn)尚沒(méi)英有針蹦對(duì)白圣內(nèi)障擋研究避的現(xiàn)越成基旬因芯余片，求根據(jù)潮本研禮究的蕩需要坦，我牽們將銷(xiāo)篩選塞到的齡差異筒表達(dá)昌的所早有基的因建口立cD蜻NA文庫(kù)害，再慨利用瞎基因形芯片佩技術(shù)制備芽成基帶因芯賀片，以禾此檢測(cè)貨多個(gè)內(nèi)樣本婆中白爭(zhēng)內(nèi)障鋼晶狀擠體上欠皮細(xì)省胞與云正常刷晶狀盟體上丈皮細(xì)豬胞間粘差異綁表達(dá)檢的基敞因，從中進(jìn)一啞步篩欺選出貢白內(nèi)撲障特炮異的逢基因，它鴿們中電可能壁有已唇知基賴(lài)因，儀也可薯能有搜未知宜基因扮。通獸過(guò)以榮上兩儲(chǔ)種技棄術(shù)的鋪有機(jī)類(lèi)結(jié)合植，我馬們能育更快氏捷、盾有效晴、準(zhǔn)屠確地紛得到雹白內(nèi)匹障相蓮關(guān)基膚因。綜上洗所述軍，分粉子生治物學(xué)銅技術(shù)黑的發(fā)扶展為捷研究賣(mài)白內(nèi)拘障發(fā)巖生過(guò)碰程中類(lèi)的功箏能基駐因及暗特異瞧調(diào)控故基因絡(luò)提供幕了有窩利武聰器。本項(xiàng)嗽目從巾晶狀還體上舌皮細(xì)悉胞入襪手，株利用總改良蘇的消涼減雜津交技?xì)q術(shù)和吹基因乖芯片酷技術(shù)廳系統(tǒng)盞研究災(zāi)與白糖內(nèi)障葵相關(guān)值的基敬因，仿并采蠶用對(duì)講體外梢培養(yǎng)顧細(xì)胞糊和在驢體晶孔狀體喝上皮論細(xì)胞籌的基巴因轉(zhuǎn)備染，房誠(chéng)探討以它們資在晶緩狀體蜂上皮茶細(xì)胞沒(méi)變化礙和白米內(nèi)障叔形成塊中的慕作用罪，可刊望闡幸明白輩內(nèi)障預(yù)晶狀與體上繁皮細(xì)汪胞變?cè)缁娜狗肿诱股锝W(xué)機(jī)屯制，右為防筍治白折內(nèi)障危提供愧新的轟思路皂和理農(nóng)論依鏡據(jù)。3、參裂考文胳獻(xiàn)A、文晝獻(xiàn)類(lèi)購(gòu)別要暈全：以匪英文火文獻(xiàn)謙為主供，同襯時(shí)也姓要引丈用委中憐文文惜獻(xiàn)--呈-國(guó)內(nèi)爐同行死中知?jiǎng)蛎麑?zhuān)繪家的綿文獻(xiàn)雅。B、引造文信冰息要劣全：文笛章題嘉目、汽作者窩姓名建、具郵體出懲處糾（算包括糖期刊邊名、鈔年份統(tǒng)、卷但期、趨頁(yè)碼誕等）芳。C、文修獻(xiàn)年著代要蓮新：主渴要是樂(lè)近五它年的族文獻(xiàn)鏡，最抓好能些有07年的學(xué)最新榆文獻(xiàn)儀。三、懷研究落方案1、研饒究目乳標(biāo)撰寫(xiě)毅要求合：攤有恥限目授標(biāo)，材與研詠究?jī)?nèi)始容相延呼應(yīng)如：乓明確……關(guān)系隆，揭絲式示……規(guī)律猾，闡明……原理襯（機(jī)棒制）瞎，建收立……方法家等舉例：篩瀉選出腰與老晝年性粉白內(nèi)恨障相沉關(guān)的旗基因黃，明訊確部球分基班因在練白內(nèi)察障形蝴成中剖的作扯用，炒從晶柄狀體狀上皮乞變化光的角做度闡慘明白愚內(nèi)障腦的發(fā)還生機(jī)社理，勿為防忽治白福內(nèi)障懷提供卸線索敏。2、研粱究?jī)?nèi)提容：存在忙問(wèn)題披：內(nèi)容耗過(guò)多旋，一押個(gè)研姿究周槳期難疼以完比成內(nèi)容榜分散石，不嘩能集歷中闡陜明研腳究目碧標(biāo)撰寫(xiě)余要求販：內(nèi)容魯要適靈當(dāng)—確保勺研究陰周期期內(nèi)完翁成為目僵標(biāo)服拾務(wù)—與目城標(biāo)相捕輔相選成要重播點(diǎn)闡眠述—注意巾與技欣術(shù)路縮慧線區(qū)雪別舉例：（1）篩號(hào)選白賺內(nèi)障視相關(guān)紛基因慕：采用縣改良搬的消雀減雜沾交技柱術(shù)，烤獲得覆人老偶年性扭白內(nèi)啟障晶預(yù)狀體昂上皮拐細(xì)胞裹和正望常晶頃狀體趣上皮怨細(xì)胞抄差異網(wǎng)表達(dá)載的基暫因片假段，的建立cD虛NA文庫(kù)虧。制碗備差汗異表秒達(dá)基腳因的晚基因接芯片誦，利僚用基糾因芯輪片技嗓術(shù)從屈多個(gè)迫標(biāo)本刊的老販年性致白內(nèi)眼障晶軌狀體屋上皮臥細(xì)胞懶中篩發(fā)選出詠白內(nèi)遠(yuǎn)障相績(jī)關(guān)基饑因。（2）研坊究白測(cè)內(nèi)障珠相關(guān)往基因峰的結(jié)其構(gòu)：……（3）研漁究白偶內(nèi)障依相關(guān)因基因冒在晶乎狀體排上皮援細(xì)胞攏變化籌中的霉作用：……觀察墻指標(biāo)示如下環(huán)：①存歡活細(xì)估胞數(shù)；②光虜鏡、鐮透射脊電鏡屆下細(xì)匪胞形庫(kù)態(tài)的籮變化；③細(xì)店胞凋漆亡檢謀測(cè)：用嗚原位死末端瘦標(biāo)記導(dǎo)和連明接酶嘴介導(dǎo)PC蓋R方法脂，從閣形態(tài)態(tài)和DN蓮A水平猛分析招細(xì)胞脫凋亡付；④細(xì)混胞增緩殖的辟檢測(cè)：……；⑤細(xì)青胞骨簡(jiǎn)架蛋醉白的籮檢測(cè)：……；⑥晶辛狀體顛蛋白微的檢鉆測(cè)：3、擬尤解決債的關(guān)何鍵問(wèn)室題：存在欲問(wèn)題茅：抓不框住關(guān)粥鍵問(wèn)判題或示抓得柱不準(zhǔn)佛。什么困是關(guān)蘿鍵問(wèn)命題注？--研究背過(guò)程各中對(duì)撫達(dá)預(yù)燃期目感標(biāo)有箭重要丑影響催的某板些研乒究?jī)?nèi)容豎或因們素。--為達(dá)籍預(yù)期與目標(biāo)拒所必翼須掌攪握的研關(guān)鍵詞技術(shù)否或研鵲究手冒段。撰寫(xiě)辯要求析：找出仇關(guān)鍵詞問(wèn)題原，提爹出解心決辦斥法。舉例：（1）建亂立差記異表鞏達(dá)的cD噸NA文庫(kù)：建立訪差異cD盲NA文庫(kù)偉是篩末選老廢年性罵白內(nèi)洽障相借關(guān)基它因的討前提斜。為從使差施異cD塵NA文庫(kù)昨具有蘭代表佳性，驢我們鮮采取慢以下給解決丘方案擱：①選躺擇各鍵種類(lèi)鉛型老菌年性悼白內(nèi)腸障晶絞狀體授的前患囊膜片、取登足夠襪大量壤的標(biāo)毒本（德擬取50例標(biāo)含本）誰(shuí)作為照建庫(kù)小的mR據(jù)NA的來(lái)繡源。②利漏用改側(cè)良的改消減粘雜交真技術(shù)繼可快朵速、呢有效俗地獲么得差賭異表刃達(dá)的影完整cD撞NA片段并。此豬技術(shù)濃是本瘦課題饑組成謙員主愚要的株研究簽成果末，在杯應(yīng)用過(guò)此項(xiàng)鍵技術(shù)嫌中已浙積累近了較銀豐富塌的實(shí)柏驗(yàn)經(jīng)茄驗(yàn)。（2）制綿備基粉因芯習(xí)片：制備還用于翼本研牌究的取芯片溝是篩腥選老認(rèn)年性社白內(nèi)綁障相暮關(guān)基扔因的顯關(guān)鍵它環(huán)節(jié)倍。制領(lǐng)備基娃因芯羽片的擦關(guān)鍵絕是在1平方勇厘米依的基鞭片上拐放上扮成百旅上千黎的不華同基燙因探出針而列不使適它們菊發(fā)生辦任何拐混淆胡。在張制作估基因襲芯片蓋時(shí)做艇到：裙①?lài)?yán)凳格按刪操作診程序電進(jìn)行哀；②滅在標(biāo)借本的侵處理竊及RN態(tài)A提取杰時(shí)避州免污俱染，按否則雖即會(huì)包造成災(zāi)嚴(yán)重碎的損幣失。犧只要慰嚴(yán)格衰按操端作程棕序進(jìn)頂行操臉作就傘可以店避免條發(fā)生柳差錯(cuò)虧。（3）在界體基漿因轉(zhuǎn)汗染：在體綠基因售轉(zhuǎn)染紫是進(jìn)長(zhǎng)行白席內(nèi)障貴相關(guān)寄基因語(yǔ)功能臨研究而的關(guān)櫻鍵。瓣在體刷的晶動(dòng)狀體燥上皮蓋細(xì)胞突大部禍分處量在靜誘息狀每態(tài)，購(gòu)只有輩位于膚赤道原前區(qū)羨的少網(wǎng)量細(xì)膀胞具朗有分瘡裂活抖性，壓而且始晶狀戚體表僵面有塊一層涉膠原賢性質(zhì)用的囊亡膜包盤(pán)裹。在體姻晶狀箏體的耗基因評(píng)轉(zhuǎn)染曠的關(guān)謹(jǐn)鍵是沉如何據(jù)使大濫量分?jǐn)_裂后堪細(xì)胞記轉(zhuǎn)染撿，如鳳何使較病毒凈穿過(guò)單晶狀引體的希囊膜臨，針對(duì)宰以上怕問(wèn)題裳我們榴擬采買(mǎi)取下詠列方砌法解噴決：?、龠x循用反很轉(zhuǎn)錄包病毒程的慢死病毒禽載體終（le迫nt差iv雪ir煎al斥v媽ec蔽to狹r），桿它克府服了終一般嗚反轉(zhuǎn)篩錄病首毒只浮能轉(zhuǎn)質(zhì)染有構(gòu)分裂賽能力站細(xì)胞傲的局嗓限性倒，對(duì)城分裂至后細(xì)醋胞也惑能有生效的顆轉(zhuǎn)染總。這嗓對(duì)在尤體晶夏狀體那的基臣因轉(zhuǎn)移染有岡很大兇的優(yōu)悄越性礙。②扛采用駐直徑1-努2μ獨(dú)m玻璃乒微管瞞在顯刺微鏡匯下將胖病毒遞載體痛注入敬晶狀紙?bào)w的晶前囊頸膜下始，既礎(chǔ)不破夏壞晶蒙狀體唐的完喝整性輝，又續(xù)可使各病毒集接觸嬸到囊懷膜下爸的上布皮細(xì)謠胞。4、研呢究方捐法存在卻問(wèn)題廉：過(guò)于黎簡(jiǎn)單安：在勤方案誘中只宵有方王法名蹦稱(chēng)而令無(wú)具呆體步踩驟。過(guò)于盜繁雜放：大附量羅賞列一楚些常諒規(guī)的寨實(shí)驗(yàn)僚方法葬。撰寫(xiě)結(jié)要求裹：以研更究項(xiàng)作目的余需求獵為前夏提，蘆盡量隙采用獄最適貍合的陰方法州和手凍段，萍并將若其操難作步強(qiáng)驟和挽關(guān)鍵塵環(huán)節(jié)洪體現(xiàn)俯在技炕術(shù)路獵線當(dāng)劍中。5、技粗術(shù)路提線存在飼問(wèn)題穗：不清共楚，夜不詳陳細(xì)，沖不可榆行。撰寫(xiě)蘆要求萄：清晰樂(lè)、詳訓(xùn)細(xì)、屑注意叛邏輯紀(jì)性。撰寫(xiě)棚方法煙：—以時(shí)頁(yè)間順押序?yàn)轭I(lǐng)主線叫設(shè)計(jì)失技術(shù)攜路線—以研治究?jī)?nèi)寸容為級(jí)主線獨(dú)設(shè)計(jì)亮技術(shù)逮路線—分大協(xié)小標(biāo)狹題，僚突出糧邏輯漁關(guān)系尼?！敿?xì)遮地寫(xiě)室清楚號(hào)每個(gè)債具體維步驟蹈。（1）人蜓晶狀叛體上末皮細(xì)鼓胞的捏獲得既：老年臂性白閃內(nèi)障崗晶狀些體上香皮細(xì)蛾胞取奴自白粱內(nèi)障箭患者吩手術(shù)鄰中取攪出的浸前囊和膜（蔑晶狀俱體上衫皮細(xì)喬胞緊犬貼于害前囊嚼膜）禍，直擔(dān)徑約5m漆m。正貸常晶往狀體叛上皮假細(xì)胞搶取自撈角膜砍移植熟供體招眼的隱晶狀遭體，缺在顯飾微鏡若下撕謙下前命囊膜距，直乏徑約8m并m。按令文獻(xiàn)秩提供釀的方座法去丘除晶款狀體贊纖維柴細(xì)胞宮，仔燒細(xì)清澆洗以叫去除膚血細(xì)債胞污悔染。（2）建踩立差團(tuán)異cD拌NA文庫(kù)德：從50例白冊(cè)內(nèi)障義手術(shù)偉患者撿的前事囊膜威上取釘下的吊晶狀各體上圣皮細(xì)剝胞作會(huì)為實(shí)此驗(yàn)組越，從25例正艦常晶當(dāng)狀體犁前囊細(xì)膜上竹取下遣的晶厲狀體咐上皮烤細(xì)胞之作為芝對(duì)照跪組，喚利用喇改良爹的消臥減雜闖交技歌術(shù)[1識(shí)9，20亦]，獲律得差挨異表左達(dá)的cD枝NA，并認(rèn)建立鎮(zhèn)文庫(kù)總。主要兄的實(shí)見(jiàn)驗(yàn)流合程如瓦下：正常爆晶狀守體上世皮細(xì)搖胞歸白石內(nèi)障餓晶狀抵體上蜓皮細(xì)末胞Pr箱om付eg隔a饑Po沖ly賣(mài)AT狡tr托ac滾t?竟S盾ys恰te浴m潤(rùn)10局00mR蓮NA分離mR息NA分離ol祝ig割o-主dT餅18反轉(zhuǎn)持錄nt葉ec學(xué)h害Ca錄p-遞fi吃nd沒(méi)er方法陜反轉(zhuǎn)浮錄cD妄NABi念ot咬in褲-2名1-蹤蝶dU做TPpe糖nd慢in哨g-胳cD霧NA隨機(jī)撕引物PC季R雜交Se艦ph慌ac牙ry住l鉆S-植40腳0柱除鹽醬及小逢片段鏈親球和素-生物止素磁縫性分播離除去仔雜交土體及猶過(guò)量窯正常斜晶狀侄體上謙皮細(xì)首胞cD約NA“長(zhǎng)距偉離”P(pán)C思R目的cD遼NA的特者異擴(kuò)碼增克隆激、鑒午定、撫轉(zhuǎn)化建立趣差異應(yīng)基因先文庫(kù)（3）制咐備基滑因芯犧片篩鴨選白夸內(nèi)障煮相關(guān)里基因榆：①弦基因凈芯片嚼的制眉備：……拍…②白內(nèi)琴障相李關(guān)基最因的前篩選委：……（4）白藥內(nèi)障勻相關(guān)爛基因伴的結(jié)饒構(gòu)分終析：①綠序列蘿測(cè)定場(chǎng)：..必.帥..父.②序列侍的計(jì)光算機(jī)案分析勒：..笑.重..搜.③獲得鑄全長(zhǎng)趟基因艘：..早.若..栽.（5）基燙因轉(zhuǎn)辦染：①刺培養(yǎng)句人晶花狀體丙上皮裙細(xì)胞糖的轉(zhuǎn)雕染：……②在體遮晶狀字體的身轉(zhuǎn)染少：……6、可揮行性注分析對(duì)實(shí)狡驗(yàn)方薦案設(shè)宅計(jì)的桂分析理論擔(dān)分析研究予手段按方法翁分析預(yù)實(shí)負(fù)驗(yàn)結(jié)追果分旱析對(duì)相總關(guān)條竄件的鎮(zhèn)分析所用隆特殊券實(shí)驗(yàn)率材料網(wǎng)（試緊劑）盲的分篩析對(duì)所子具備喪的實(shí)度驗(yàn)條聚件進(jìn)斃行分馳析對(duì)項(xiàng)扁目組槳成員雙搭配注及其梅運(yùn)用省技術(shù)挑方法幕的能以力分朝析(1宣)關(guān)于棟建立盆差異cD贊NA文庫(kù)味：老年瘋性白宮內(nèi)障恥晶狀至體上徹皮細(xì)針胞與永正常艦晶狀贊體上拐皮細(xì)殿胞是來(lái)處在栗不同脅狀態(tài)錄下的艱細(xì)胞藝，細(xì)娛胞基工因表旋達(dá)的冊(cè)改變是細(xì)慈胞蛋扎白功煤能等誰(shuí)改變腫的基暑礎(chǔ)。譯尋找挎這些孩有差模異的幣基因是編探索埋細(xì)胞銀功能線、狀接態(tài)變明化原怎因的母突破旱口。立利用盲的消減槐雜交燒技術(shù)取是篩許選差釘異表后達(dá)基絞因的獨(dú)有效拿方法滴。改提良的消奏減雜子交技座術(shù)是派我們避研究縮慧組成領(lǐng)員建詞立的股方法俯，應(yīng)粒用此方牛法已魚(yú)經(jīng)從廢脂多柜糖刺西激前評(píng)后的利人牙盟髓細(xì)礎(chǔ)胞的達(dá)差異暖表達(dá)的該基因族中克申隆到瞇脂多芒糖刺反激后隨特異架表達(dá)顛的基偉因，陶其中5個(gè)為葛新基夾因，橫這一遺研究崇成果藍(lán)進(jìn)一概步證列實(shí)了出該方梨法的可命操作譽(yù)性，做而且千我們令在運(yùn)孔用此腦方法破過(guò)程谷中也首積累屋了較豐擔(dān)富的該經(jīng)驗(yàn)店，因猜此，短本研暖究利賭用這冶一方宴法從井兩種啊狀態(tài)的閱晶狀圾體上涉皮細(xì)極胞中轟篩選溪差異奶表達(dá)己的基推因并炎建立cD乎NA文庫(kù)浩是可較行的維。7、創(chuàng)糕新性存在朱問(wèn)題：梨對(duì)創(chuàng)際新點(diǎn)作提煉答不夠把運(yùn)眨用新巴技術(shù)嬸、新豬方法膠理解悠為創(chuàng)杯新與研漿究目賽標(biāo)、掉研究許內(nèi)容奮相混妹淆對(duì)創(chuàng)廈新的鳴理解：原始意創(chuàng)新楊：填扔補(bǔ)空賢白或址修改能傳統(tǒng)尺的理渾論發(fā)明稱(chēng)創(chuàng)造俘新技列術(shù)、訂新方腐法跟蹤易創(chuàng)新示：補(bǔ)奏充、截完善副現(xiàn)有測(cè)理論修改湊、完鋒善現(xiàn)扣有技磁術(shù)方示法（1＋1＞2）提煉平方法甩：用逆?zhèn)认蛩疾呔S方舞法提傲煉創(chuàng)光新點(diǎn)（1）基達(dá)因篩倘選方街法上辛的創(chuàng)燒新：首次影采用蓋改良蝦的消陽(yáng)減雜旨交技誰(shuí)術(shù)建立四白內(nèi)曲障晶拋狀體宋上皮鴨細(xì)胞健差異脈表達(dá)攝基因斬文庫(kù)免，并排制備菌相應(yīng)烘的基斬因芯臺(tái)片，利軍用此森基因慨芯片篩選者出老量年性嘩白內(nèi)詢障相剖關(guān)基豆因。上面述兩俘種方聲法的擺有機(jī)藏結(jié)合城使我鍬們能快速糾、準(zhǔn)多確、吳定性渾、定睡量地挑獲得產(chǎn)多個(gè)嘗白內(nèi)涌障相曾關(guān)基鍛因。通淺過(guò)分秩析這押些基念因的沸結(jié)構(gòu)緊、研毯究它暑們的失功能扭，揭篇示老齒年性治白內(nèi)鋪障晶潛狀體含上皮梯細(xì)胞大變化啦的分惠子生貍物學(xué)爆機(jī)制砌，為抹防治他白內(nèi)鑰障提逃供新網(wǎng)的思繪路。（2）基籃因功綿能研條究上他的創(chuàng)奧新：..區(qū)..盡..8、年崖度研睡究計(jì)尸劃及傅預(yù)期小研究請(qǐng)結(jié)果年度僵研究踩計(jì)劃蜂：按年霧度列越出研緣瑞究?jī)?nèi)坡容及忠其階增段目帖標(biāo)擬組役織的奔重要分學(xué)術(shù)瓦交流床活動(dòng)拘、國(guó)妙際合慮作與賤交流元計(jì)劃預(yù)期遙研究根結(jié)果壁：理論賢成果柴：建改立/豐富/補(bǔ)充/填補(bǔ)..舒..跪..技術(shù)伐方法矩：建嘆立/完善….糠..專(zhuān)涌利：光可望陷獲得……論朗文：吉國(guó)際鏟、國(guó)傘內(nèi)人才殼培養(yǎng)猶：青猛年科咬技骨立干、打博碩巴研究旅生四、馳研究亡基礎(chǔ)1、研積究工漠作積許累存在欺問(wèn)題硬：內(nèi)容罪過(guò)簡(jiǎn)名；閘與申六請(qǐng)項(xiàng)揭目無(wú)莊關(guān)。撰寫(xiě)挺要求梯：介紹見(jiàn)與申淺請(qǐng)項(xiàng)動(dòng)目直淘接相窮關(guān)的艱預(yù)實(shí)岡驗(yàn)研循究結(jié)年果；提供辜相關(guān)搭的研堆究論事文、禁成果終及專(zhuān)廊利等毫材料輝；以往搖應(yīng)用啄與申蜘請(qǐng)項(xiàng)學(xué)目有滑關(guān)的書(shū)技術(shù)屬方法釘?shù)慕?jīng)計(jì)歷；工作頭積累揚(yáng)也要披包括溫項(xiàng)目圣組成歇員的對(duì)所有遣信息不。（1）有耍關(guān)消津減雜騎交技熔術(shù)和求基因似芯片回技術(shù)捎的工攔作基折礎(chǔ):本研鍵究所量用的?；驖u篩選察技術(shù)南主要膏是改孔良的蜂消減確雜交怠技術(shù)瓦，此折技術(shù)慕是我敢們研陪究組矮成員肆主要閉參與誼建立便的，墾并利石用此蠅技術(shù)免從脂惑多糖區(qū)刺激挪前后籌的人迷牙髓登細(xì)胞鑄的差道異表座達(dá)的濕基因固中克灶隆到斗脂多諒糖刺溪激后優(yōu)特異貧表達(dá)鋪的基陳因，課其中5個(gè)為節(jié)新基獸因，諷有關(guān)堅(jiān)此技勵(lì)術(shù)的菜研究杯論文酸有：..箱..勢(shì)..（2）有臘關(guān)基喘因轉(zhuǎn)蹲染方靈面的漢研究逮工作揭基礎(chǔ)禮：..顏..民..（3）有載關(guān)老摘年性值白內(nèi)蚊障相過(guò)關(guān)基婆因的栽研究塘基礎(chǔ)菊：..趨..動(dòng)..2、工抗作條王件實(shí)驗(yàn)尋室整洋體實(shí)暖力和纖規(guī)模慈（地雹位、肅課題淚、成圖果等蒜）實(shí)驗(yàn)霧室所破具備貓的與代申請(qǐng)偷項(xiàng)目掌相關(guān)援的主叨要儀蹦器設(shè)扭備腦實(shí)愉驗(yàn)室執(zhí)所在塌單位仰具備療的申蟲(chóng)請(qǐng)項(xiàng)搖目所預(yù)需的兼實(shí)驗(yàn)央條件3、項(xiàng)寫(xiě)目組滾人員述簡(jiǎn)歷所有正人員攤均需座介紹秩（重減點(diǎn)是檢項(xiàng)目唯負(fù)責(zé)允人）聲介紹造內(nèi)容伏根據(jù)刷在項(xiàng)客目中素的分捎工有子所側(cè)陽(yáng)重粗列濫出與華申請(qǐng)量項(xiàng)目斷相關(guān)槽的研翻究論害文及濕成果第二穩(wěn)部分撰寫(xiě)頌申請(qǐng)彎書(shū)時(shí)穴常見(jiàn)距問(wèn)題蒸解析1、對(duì)顏立論糞依據(jù)梅、實(shí)狗驗(yàn)方惱案、郵研究?；A(chǔ)久應(yīng)闡杰述的失內(nèi)容洲以及廣三者喬關(guān)系翻的理貫解立論贈(zèng)依據(jù)：闡鋤述背倚景和擋理由常，回貌答“尋為什渡么”實(shí)驗(yàn)件方案：是罰申請(qǐng)魯書(shū)的滿核心智，回子答“贏怎么見(jiàn)做”研究比基礎(chǔ)：展衰示積碌累和醫(yī)實(shí)力額，回上答“愧做了愧啥”一、癢對(duì)部平分撰贊寫(xiě)內(nèi)娛容及焰其相勵(lì)互關(guān)敵系的霸理解2、對(duì)片研究設(shè)目標(biāo)裳的確吧定國(guó)內(nèi)埋外現(xiàn)按狀分給析中艱提出心的具副體科孫學(xué)問(wèn)蛛題就格是項(xiàng)底目的普研究仙目標(biāo)悔，研文究目可標(biāo)具宴體到盲什么叮程度蛛，要根據(jù)量研究他周期華、資窗助強(qiáng)謙度來(lái)囑確定待。3、研禍究目軟標(biāo)、臭研究鋼內(nèi)容手、研育究方托法的拜關(guān)系依據(jù)目標(biāo)逮確定跡研究鉛內(nèi)容皂根據(jù)把內(nèi)容交選擇排研究勇方法4、研述究?jī)?nèi)園容與僅技術(shù)洽路線商的區(qū)敏別研究翅內(nèi)容：根娘據(jù)總血體目份標(biāo)分肯若干面分題虎，重傷點(diǎn)回區(qū)答活做什停么—觀察番指標(biāo)改、階常段目每標(biāo)技術(shù)糧路線：重鬼點(diǎn)回羨答怎歲么做—在具底體步庸驟中鞭體現(xiàn)鴨研凝究?jī)?nèi)參容和蔽研究飯方法5、對(duì)閘擬解散決的籍關(guān)鍵功問(wèn)題盼與可少行性桶分析宇撰寫(xiě)霧時(shí)的布區(qū)別二者噴相同觀之處第：擬解浩決的各關(guān)鍵瞧問(wèn)題削在可歸行性況分析光時(shí)也術(shù)要提城及二者接不同欲之處湯：撰寫(xiě)忙擬解蓋決關(guān)允鍵問(wèn)腔題，重點(diǎn)嗓回答如何憤解決。解決稀辦法始包括津：通各過(guò)研跨究思奏路的嘆設(shè)計(jì)莫巧妙運(yùn)用顛最新?lián)癯霈F(xiàn)阻的研灰究方攝法通過(guò)映不同攏方法牢各自險(xiǎn)優(yōu)點(diǎn)比的有影機(jī)結(jié)孕合在進(jìn)槳行可算行性劑分析株時(shí)，重點(diǎn)旋回答能夠貴解決聞。分析桃問(wèn)題鞠角度往：通核過(guò)對(duì)際現(xiàn)有必理論扭分析莖提供勉理論坐依據(jù)通過(guò)倘對(duì)預(yù)襲研結(jié)但果分羅析提韻供實(shí)糾驗(yàn)依贏據(jù)通過(guò)刮對(duì)他膝人研歉究成蝦果描且述提遼供佐輛證6、創(chuàng)手新點(diǎn)敬、研喉究目褲標(biāo)和亡預(yù)期塊研究愈結(jié)果郊的區(qū)蹤蝶別三者剝的共愛(ài)同點(diǎn)：都喉包含環(huán)一個(gè)路“新奇”字留。三者患的不捐同點(diǎn)：概擠念的私外延飲不同復(fù)。創(chuàng)狀新伯點(diǎn)：①形態(tài)喇學(xué)證悼實(shí)在娘腦下白垂體倆中確有神經(jīng)藝?yán)w維存在②進(jìn)一修步實(shí)紐奉驗(yàn)證皮實(shí)是肽能膜神經(jīng)研究擺目標(biāo)族：通過(guò)請(qǐng)各種育形態(tài)疤學(xué)研軟究充源分證中明在木腦下睛垂體桑中確有肽能折神經(jīng)支配預(yù)期奇研究擔(dān)結(jié)果始：提出甲腦下膊垂體肽能今神經(jīng)靜和體責(zé)液雙牛重調(diào)立節(jié)假說(shuō)仍，對(duì)稅原有番理論案提出痕挑戰(zhàn)悉。二、潛尚需瞎注意造的幾牙個(gè)問(wèn)深題1、在捏項(xiàng)目鴿設(shè)計(jì)穩(wěn)過(guò)程每中要海樹(shù)立格整體培觀念猛，要講述草一個(gè)眉完整妥的故支事。2、文沿字表欺達(dá)要捆精雕絲式細(xì)琢捷，每傭一句庫(kù)話說(shuō)賴(lài)明什纖么要做設(shè)到心催中有終數(shù)。3、文移獻(xiàn)回倍顧不扭能回嚇避?chē)?guó)遷內(nèi)外倡最新惡研究落進(jìn)展系，尤其荷是不贈(zèng)同學(xué)藍(lán)派的嘴觀點(diǎn)透。4、重束點(diǎn)內(nèi)柱容、逼觀點(diǎn)魔要用巷黑體瓜強(qiáng)調(diào)士。第三炮部分基金填申報(bào)竿相關(guān)命規(guī)定顏及要肯求一、哄基嚴(yán)金申稠報(bào)管部理規(guī)嬸定申請(qǐng)水者基本余資格：項(xiàng)開(kāi)目的疊實(shí)際著負(fù)責(zé)耍人；音正式納受聘候，年役工作午不少州于六縣月；啊在職反研究芬生只駝可申張請(qǐng)面朱上項(xiàng)纏目限項(xiàng)男規(guī)定：高擱級(jí)專(zhuān)未業(yè)技謝術(shù)職僑務(wù)的游科技列工作練者申譯請(qǐng)與擋承擔(dān)押（含定參加再）面扛上、侍重點(diǎn)蹦、重渡大等潤(rùn)類(lèi)別宮基金蒙項(xiàng)目吼的數(shù)來(lái)量（墾不包擔(dān)括執(zhí)符行期鼓一年擺及在聲一年廈以內(nèi)隔的基她金項(xiàng)臨目）侄累計(jì)批不得冬超過(guò)鳥(niǎo)三項(xiàng)項(xiàng)目訪管理彈相關(guān)扯規(guī)定面上狗項(xiàng)目普管理賺辦法面上感項(xiàng)目宿包括自由火申請(qǐng)陵項(xiàng)目汽、青回年科消學(xué)基育金項(xiàng)旅目和地欲區(qū)科曠學(xué)基準(zhǔn)金項(xiàng)使目，戚資助蘭期限侵一般寺為三年面上命項(xiàng)目意的申襯請(qǐng)采忌取集中報(bào)受理方式申請(qǐng)?jiān)抡唔毧芊稀兑?guī)定》要求沃，并斥具有儲(chǔ)高級(jí)界專(zhuān)業(yè)陡技術(shù)拆職務(wù)蔥或已諸獲得壺博士庫(kù)學(xué)位糟。具習(xí)有中稼級(jí)專(zhuān)伯業(yè)技么術(shù)職罩務(wù)但徹未獲怎得博茶士學(xué)桃位的陸研究戴人員占，經(jīng)經(jīng)兩名釣具有總高級(jí)喬專(zhuān)業(yè)忽技術(shù)像職務(wù)遺的同粘行專(zhuān)罪家推雙薦，赴亦可鄉(xiāng)豐申請(qǐng)侄。在差職研怖究生策作為候申請(qǐng)悅者須鋸征得梢導(dǎo)師辜同意青年榨科學(xué)圍基金匹項(xiàng)目目的申攜請(qǐng)者坡限在款受