第1課時(shí)　微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第1課時(shí)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)基礎(chǔ)過關(guān)練題組一培養(yǎng)基的配制1.下表是一種培養(yǎng)基的配方,此培養(yǎng)基提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有(易錯(cuò))牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水g1gg2g200mL類 類 類 類2.關(guān)于培養(yǎng)基中滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及O2的需求,下列敘述錯(cuò)誤的是(深度解析)A.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素B.培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至堿性C.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性D.培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件題組二無(wú)菌技術(shù)3.(2020山西平遙中學(xué)高二期中)下列關(guān)于滅菌和消毒的理解,正確的是(易錯(cuò))A.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身滅菌B.接種疫苗前要對(duì)注射區(qū)域進(jìn)行消毒C.消毒與滅菌的含義本質(zhì)是相同的D.常用的消毒方法有灼燒和高壓蒸汽4.(2020山東濰坊高二期中)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。下列說法錯(cuò)誤的是()A.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法B.密閉空間內(nèi)的空氣常采用紫外線照射消毒C.玻璃實(shí)驗(yàn)器具可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌D.水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過高錳酸鉀消毒的5.(2020山東萊州一中高二月考)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。下列無(wú)菌操作中,錯(cuò)誤的是()A.對(duì)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)基,采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌B.對(duì)錐形瓶、塞上棉塞的試管或吸管等,用干熱滅菌箱進(jìn)行滅菌C.對(duì)操作者的雙手、衣著以及操作空間等,采用紫外線進(jìn)行消毒D.對(duì)試管口、錐形瓶口等部位,通過火焰灼燒進(jìn)行滅菌題組三微生物的純培養(yǎng)6.下列有關(guān)酵母菌純培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具不都進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)過火焰滅菌,然后立即快速挑取菌落D.酵母菌菌種分離使用的是固體培養(yǎng)基7.下列不是細(xì)菌接種過程中的無(wú)菌操作的是()A.灼燒接種環(huán) B.高壓蒸汽滅菌C.在超凈工作臺(tái)操作 D.靠近火焰8.下列有關(guān)平板劃線法的操作錯(cuò)誤的是()A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D.劃線時(shí)要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連9.有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是(深度解析)A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C.將培養(yǎng)皿打開,培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿倒過來放置10.(2020山東威海文登高三期末,)如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5,下列操作方法錯(cuò)誤的是()A.每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行C.第3次劃線操作可從第2次開始劃出,也可從第1次開始D.在第4次劃線區(qū)域中也可以得到菌落11.圖1是酵母菌純培養(yǎng)過程的一些步驟,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:圖1圖2(1)圖1中所表示的接種方法是,請(qǐng)用線條和箭頭在圖2空白圓圈內(nèi)畫出該方法接種的路徑示意圖。

(2)圖示接種方法的目的是。

(3)在進(jìn)行和操作之間要對(duì)用到的培養(yǎng)基作滅菌處理。

(4)滅菌是指,對(duì)培養(yǎng)基的滅菌需要在的條件下維持15~30min。

能力提升練題組一歸納培養(yǎng)基的成分及種類1.(2020山西呂梁高二月考,)有關(guān)培養(yǎng)基配制原則的表述正確的是()A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水以及無(wú)機(jī)鹽B.碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素C.有的培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求D.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好2.(不定項(xiàng))(2020河南南陽(yáng)一中模擬改編,)下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是()A.培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌題組二歸納常見的無(wú)菌技術(shù)3.(2020遼寧丹東高二期末,)關(guān)于消毒和滅菌的方法,描述不正確的是()A.接種用的超凈工作臺(tái)要進(jìn)行滅菌處理B.經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅,所以不能在常溫下長(zhǎng)期保存C.煮沸半小時(shí)后的涼開水中仍含有部分芽孢和孢子D.對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌后,要等其溫度下降再進(jìn)行接種4.(不定項(xiàng))(2020山東棗莊高三第二次調(diào)研改編,)消毒和滅菌是微生物培養(yǎng)中常用的操作方法。下列說法不正確的是()A.微生物接種技術(shù)的方法不同,但核心都是要防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度B.在100℃條件下煮沸5~6分鐘屬于滅菌方法,可殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢C.無(wú)菌技術(shù)中,若處理對(duì)象為液體,則只能消毒,不能滅菌D.高壓蒸汽滅菌鍋只有當(dāng)壓力表的壓力降到一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓時(shí),才能打開蓋子題組三微生物的純培養(yǎng)及應(yīng)用5.()某釀酒廠得到了一批優(yōu)良酵母菌菌種,技術(shù)人員對(duì)其進(jìn)行了純化,獲得了如圖所示的效果圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.該培養(yǎng)皿中獲得的分散開來的菌落較符合要求B.該接種方法是平板劃線法,接種環(huán)在每次劃線后都必須進(jìn)行灼燒滅菌C.該純化過程所用的培養(yǎng)基應(yīng)添加瓊脂,且瓊脂應(yīng)在培養(yǎng)基滅菌之后加入D.由于劃線過程中接種環(huán)上的菌種逐漸減少,平板中部分酵母菌菌落間距離較大6.(2020四川瀘縣一中高三月考,)如圖為微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化醋酸菌的部分操作步驟,請(qǐng)回答下列問題:(1)①是制備培養(yǎng)基時(shí)的操作,該操作需待培養(yǎng)基冷卻至左右時(shí)進(jìn)行。

(2)該實(shí)驗(yàn)中純化醋酸菌的接種方法是;完成步驟④的操作,接種共需要次灼燒處理,其中最后一次灼燒的目的是

。

(3)劃線的某個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后,第一次劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,第二次劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落,其他劃線上有菌落,造成劃線上無(wú)菌落可能的操作失誤有

(回答2個(gè))。

(4)接種結(jié)束后,將④倒置培養(yǎng),皿底上標(biāo)注。

7.(2020四川眉山高三第三次診斷,)某同學(xué)配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后,對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至室溫,按如表處理:組別處理A組打開培養(yǎng)皿蓋,距地面米處暴露15分鐘B組打開培養(yǎng)皿蓋,距地面米處暴露15分鐘C組打開培養(yǎng)皿蓋,距地面米處暴露15分鐘D組打開培養(yǎng)皿蓋,距地面米處暴露15分鐘E組不打開培養(yǎng)皿蓋將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)2~3天,觀察每個(gè)培養(yǎng)皿中的菌落特征和數(shù)目。回答下列問題:(1)上述實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?。若E組的培養(yǎng)基表面有菌落生長(zhǎng),說明。

(2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長(zhǎng)提供和?！霸诰凭珶艋鹧娓浇边M(jìn)行相關(guān)操作是為了。

(3)實(shí)驗(yàn)過程特別強(qiáng)調(diào)溫度控制,請(qǐng)簡(jiǎn)要說明下列溫控措施的目的:①“待培養(yǎng)基冷卻至室溫”的目的有

。

②“將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)”的目的是。

(4)培養(yǎng)微生物時(shí)將培養(yǎng)皿倒置的目的是。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理。

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第1課時(shí)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)基礎(chǔ)過關(guān)練1.C培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),該培養(yǎng)基中牛肉膏提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、磷酸鹽和維生素等,蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有氮源和維生素等,NaCl為無(wú)機(jī)鹽,因此該培養(yǎng)基提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源、碳源和維生素5類。易錯(cuò)警示對(duì)微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)認(rèn)識(shí)不全面而出錯(cuò)無(wú)機(jī)鹽和水是微生物生長(zhǎng)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),絕不能誤認(rèn)為水和無(wú)機(jī)鹽不是微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2.B維生素是乳酸桿菌生長(zhǎng)繁殖所必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),因此要在培養(yǎng)乳酸桿菌的培養(yǎng)基中添加維生素,A正確;培養(yǎng)霉菌時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)基調(diào)至酸性,B錯(cuò)誤;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性,C正確;厭氧微生物在有氧時(shí)無(wú)氧呼吸受抑制,因此培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件,D正確。歸納總結(jié)培養(yǎng)基配制的原則(1)目的要明確:根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制培養(yǎng)基的種類,因?yàn)椴煌奈⑸飳?duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求不同。(2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào):注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。(3)環(huán)境要適宜:不同微生物適宜生長(zhǎng)的pH不同,同時(shí)不同微生物需氧情況也可能不同。3.B醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身消毒,A錯(cuò)誤;接種疫苗前要對(duì)注射區(qū)域進(jìn)行消毒,B正確;滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,C錯(cuò)誤;常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外線消毒和化學(xué)藥物消毒等,灼燒和高壓蒸汽都是滅菌的方法,D錯(cuò)誤。易錯(cuò)警示混淆滅菌和消毒消毒是使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,對(duì)被消毒物基本無(wú)害的措施。滅菌是使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子,主要將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。4.D巴氏消毒法可以殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物,并且不破壞牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分,因此牛奶的消毒常采用巴氏消毒法,A正確;密閉空間內(nèi)的空氣常采用紫外線照射消毒,B正確;玻璃實(shí)驗(yàn)器具可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌,C正確;水廠供應(yīng)的自來水通常經(jīng)過氯氣消毒,D錯(cuò)誤。5.C對(duì)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)基,采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌,A正確;對(duì)錐形瓶、塞上棉塞的試管或吸管等,用干熱滅菌箱進(jìn)行滅菌,B正確;對(duì)操作者的雙手應(yīng)用酒精進(jìn)行消毒,C錯(cuò)誤;對(duì)試管口、錐形瓶口等部位,通過火焰灼燒進(jìn)行滅菌,D正確。6.C接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理,接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理,吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理,培養(yǎng)基等常用濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌鍋)處理,A正確;轉(zhuǎn)換劃線角度后,為避免雜菌污染,需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線,B正確;為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需要冷卻后再挑取菌落,防止高溫使菌種死亡,C錯(cuò)誤;酵母菌菌種分離使用的是固體培養(yǎng)基,因?yàn)榉稚⒌慕湍妇诠腆w培養(yǎng)基上可形成菌落,D正確。7.B在細(xì)菌接種的前后都需要灼燒接種環(huán),A不符合題意;高壓蒸汽滅菌一般用于培養(yǎng)基的滅菌,而在細(xì)菌接種過程中不需要高壓蒸汽滅菌,B符合題意;細(xì)菌接種過程應(yīng)該在超凈工作臺(tái)上操作,以防止雜菌的污染,C不符合題意;細(xì)菌接種過程應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行,以防止雜菌的污染,D不符合題意。8.D接種過程中需注意的內(nèi)容:①無(wú)菌操作;②灼燒后的接種環(huán)冷卻后再取菌液;③劃線時(shí)不要將培養(yǎng)基表面劃破,最后一次的劃線與第一次的劃線不能相連。因此,D錯(cuò)誤。9.C整個(gè)倒平板過程要防止雜菌的污染,因此該過程需要注意:①滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁;②打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰;③培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開;④等待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿倒過來放置。歸納總結(jié)倒平板的過程需要進(jìn)行無(wú)菌操作,要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌。10.C每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌,可以殺死接種環(huán)上殘留的微生物,A正確;劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行,B正確;結(jié)合題干信息,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5,平板劃線過程要保證每次劃線的菌種來自上一次劃線的末端,C錯(cuò)誤;在5個(gè)劃線區(qū)域中,只要有單個(gè)活細(xì)菌,通過培養(yǎng)就可獲得所需菌落,D正確。11.答案(1)平板劃線法(2)分離、純化酵母菌,得到單個(gè)菌落(3)調(diào)pH倒平板(4)使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子壓力為100kPa、溫度為121℃解析(1)題圖1中所表示的接種方法是平板劃線法,該方法接種的路徑示意圖見答案。(2)用平板劃線法進(jìn)行接種的目的是對(duì)酵母菌分離、純化,得到單個(gè)菌落。(3)在進(jìn)行調(diào)pH和倒平板操作之間要對(duì)用到的培養(yǎng)基作滅菌處理。(4)滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。對(duì)培養(yǎng)基的滅菌常采用高壓蒸汽滅菌,需要在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下維持15~30min。能力提升練1.C培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中,不需要加入氮源,A錯(cuò)誤;碳源和氮源必須具有一定比例,但碳元素的含量不一定最多,自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基不需要加入碳源,B錯(cuò)誤;配制培養(yǎng)基時(shí)還需要考慮微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求,C正確;營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過高可能會(huì)造成微生物滲透失水死亡,D錯(cuò)誤。2.AB培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì),A正確;培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物,B正確;固體培養(yǎng)基中去除凝固劑(如瓊脂)即可制成液體培養(yǎng)基,C錯(cuò)誤;微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),可以形成肉眼可見的菌落,但不是單個(gè)細(xì)菌,D錯(cuò)誤。3.A接種用的超凈工作臺(tái)用紫外線消毒處理,A錯(cuò)誤;巴氏消毒法不能殺滅所有的微生物,因此經(jīng)巴氏消毒法處理的食品不能在常溫下長(zhǎng)期保存,B正確;煮沸僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,不能殺死全部芽孢和孢子,C正確;對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌后,要等其溫度下降再進(jìn)行接種,以防溫度過高殺死微生物,D正確。4.BCD微生物接種技術(shù)的方法不同,但核心都是要防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度,A正確;在100℃條件下煮沸5~6分鐘屬于煮沸消毒法,B錯(cuò)誤;無(wú)菌技術(shù)中,若處理對(duì)象為液體,可以用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌,C錯(cuò)誤;高壓蒸汽滅菌鍋只有當(dāng)壓力表的壓力降到0時(shí),才能打開蓋子,D錯(cuò)誤。5.C題圖所示的分離方法為平板劃線法,該培養(yǎng)皿中獲得的分散開來的菌落較符合要求,A正確;接種環(huán)在每次劃線后都必須進(jìn)行灼燒滅菌,殺死接種環(huán)上殘留的菌種,B正確;該純化過程所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,應(yīng)加入一定量的瓊脂,對(duì)培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)該在加入瓊脂之后進(jìn)行,C錯(cuò)誤;由于劃線過程中接種環(huán)上的菌種逐漸減少,平板中部分酵母菌菌落間距離較大,D正確。6.答案(1)倒平板50℃(2)平板劃線法6殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者(3)接種環(huán)灼燒后未冷卻;劃線未從第一次劃線末端開始(4)菌種及接種日期等信息解析(1)①是制備培養(yǎng)基時(shí)倒平板的操作,需要將培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)進(jìn)行。(2)根據(jù)步驟④可知,該實(shí)驗(yàn)純化醋酸菌的接種方法是平板劃線法,平板劃線時(shí),每次劃線后接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒,第一次劃線前也要進(jìn)行灼燒,因此完成步