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文檔簡介

第一節(jié)抗原一、概念凡是能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體和效應(yīng)性淋巴細(xì)胞,并能與之結(jié)合引起特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)稱為抗原,又可稱為免疫原??乖碳C(jī)體產(chǎn)生抗體和效應(yīng)淋巴細(xì)胞的特性——免疫原性??乖c相應(yīng)抗體或效應(yīng)淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合的特性——反應(yīng)原性。二、影響免疫原性的因素抗原分子的特性宿主生物系統(tǒng)免疫劑量與途徑異源性分子大小化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)物理狀態(tài)三、抗原決定簇抗原決定簇又稱抗原表位??乖肿又信c淋巴細(xì)胞特異性受體和抗體結(jié)合,具有特殊立體構(gòu)型的免疫活性區(qū)域。表位類型——線性表位/順序表位構(gòu)象表位/不連續(xù)表位含有多個表位的的抗原稱為多價抗原;只有一個抗原表位的抗原稱為單價抗原。四、抗原的交叉性不同物種間存在共同的抗原組成不同抗原分子存在共同的抗原表位不同表位之間有部分結(jié)構(gòu)相同五、抗原的分類依據(jù)抗原性質(zhì)——完全抗原和不完全抗原。根據(jù)抗原加工提呈途徑——外源性抗原和內(nèi)源性抗原。根據(jù)抗原來源——異種抗原、同種異型抗原、自身抗原、異嗜性抗原。超抗原——如金黃色葡萄球菌腸毒素等。六、佐劑先于抗原或與抗原混合同時注入動物體內(nèi),能非特異性地改變或增強(qiáng)機(jī)體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答,發(fā)揮輔佐作用,這類物質(zhì)稱為佐劑或免疫佐劑。PS:鹽類佐劑——鋁鹽油乳佐劑——弗氏佐劑……佐劑主要用于滅活疫苗等!屬于同種異型抗原的物質(zhì)是A、血型抗原B、免疫球蛋白C、滅活的細(xì)菌D、異嗜性抗原E、病毒衣殼蛋白抗原特異性取決于()A.抗原的物理性狀B.抗原的分子量C.抗原決定簇 D.抗原結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性E.抗原的化學(xué)性質(zhì)抗原與相應(yīng)的抗體或效應(yīng)淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合的特性稱為()A.免疫原性B.反應(yīng)原性C.抗原性D.異原性 E.特異性金黃色葡萄球菌分泌的腸毒素是一種()A.異種抗原B.自身抗原C.半抗原 D.同種異型抗原E.超抗原第二節(jié)抗體一、免疫球蛋白與抗體存在于動物血液、組織液及其他外分泌中的具有相似球形結(jié)構(gòu)域的蛋白,稱為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)??贵w是動物機(jī)體收到抗原物質(zhì)刺激后,由B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞分泌的、能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。PS:如果沒有特殊說明,提到免疫球蛋白往往指代抗體。二、抗體的基本結(jié)構(gòu)Ig單體的結(jié)構(gòu)模式圖J鏈J鏈與分泌片IgG——血清中含量最高,半衰期長,抗感染免疫主力IgM——初次免疫應(yīng)答最早產(chǎn)生的免疫球蛋白,在抗感染免疫早期發(fā)揮重要作用IgA——主要以分泌形式存在,粘膜局部免疫發(fā)揮作用IgE——血清含量很少,與嗜堿性粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞高親和力結(jié)合,介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng),在抗寄生蟲免疫中發(fā)揮重要作用多克隆抗體——將抗原物質(zhì)經(jīng)不同途徑注入動物體內(nèi),經(jīng)數(shù)次免疫后,采集動物血液,分離出血清,由此獲得的抗血清即為多克隆抗體。單克隆抗體——由一個B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的抗體。在機(jī)體抗感染免疫早期,發(fā)揮最主要作用的抗體是A、IgAB、IgDC、IgED、IgGE、IgM參與凝集試驗(yàn)的抗體主要是A、IgA和IgMB、IgA和IgGC、IgG和IgMD、IgG和IgEE、IgM和IgE在抗寄生蟲感染中起重要作用的抗體是A.IgGB.IgMC.IgAD.IgDE.IgE體液免疫初次應(yīng)答特點(diǎn)不包括A.具有潛伏期B.抗體維持時間短C.抗體效價低D.IgM最早產(chǎn)生E.IgG最早產(chǎn)生第三節(jié)免疫系統(tǒng)免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子免疫系統(tǒng)中樞免疫器官外周免疫器官黏膜相關(guān)淋巴組織/黏膜免疫系統(tǒng)免疫器官中樞免疫器官免疫細(xì)胞發(fā)生和發(fā)育成熟的器官骨髓、胸腺、禽類的法氏囊骨髓——動物體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。淋巴干細(xì)胞經(jīng)血流遷入胸腺后,分化發(fā)育成為成熟的T淋巴細(xì)胞。胸腺頸葉胸腺中間葉胸腺胸葉法氏囊是鳥類特有的結(jié)構(gòu),位于泄殖腔后上方,囊壁充滿淋巴組織。法氏囊是禽類的中樞免疫器官,是B淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的場所。外周免疫器官免疫應(yīng)答的發(fā)生部位脾臟和淋巴結(jié)脾臟——動物體中最大的淋巴器官,是血循環(huán)中重要的濾過器,能清除血液中的異物、病菌以及衰老死亡的細(xì)胞,特別是紅細(xì)胞和血小板。牛的脾臟淋巴節(jié)——遍布于淋巴循環(huán)系統(tǒng)的各個部位??梢赃^濾和清除異物,同時也是免疫應(yīng)答的發(fā)生場所。哈德爾氏腺——禽類眼窩內(nèi)的腺體之一,又稱瞬膜腺。在抗原刺激下,產(chǎn)生免疫應(yīng)答,分泌特異性抗體。對禽呼吸道免疫很重要。黏膜相關(guān)淋巴組織黏膜相關(guān)淋巴組織/黏膜免疫系統(tǒng)分布于全身各黏膜附近,無包膜的彌散樣淋巴組織。具有功能獨(dú)特的細(xì)胞。功能相對獨(dú)立。免疫細(xì)胞骨髓是所有血細(xì)胞的來源化驗(yàn)血液時報告中的三項(xiàng)——紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞具體來說紅細(xì)胞血小板中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞肥大細(xì)胞漿細(xì)胞T細(xì)胞單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞髓系樹突狀細(xì)胞淋巴系樹突狀細(xì)胞B細(xì)胞介導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答的細(xì)胞T淋巴細(xì)胞——胸腺依賴性淋巴細(xì)胞,在胸腺中發(fā)育成熟。在血液、淋巴液及外周免疫器官中不斷循環(huán),參與細(xì)胞免疫應(yīng)答。重要的表面標(biāo)志包括TCR、CD3、CD4、CD8等。B淋巴細(xì)胞——骨髓依賴性淋巴細(xì)胞或囊依賴性淋巴細(xì)胞。在哺乳動物骨髓或禽類法氏囊中發(fā)育成熟。大量分泌抗體,介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。重要的表面標(biāo)志包括BCR、Fc受體、補(bǔ)體受體等。K細(xì)胞和NK細(xì)胞無T和B細(xì)胞表面標(biāo)志,具有非特異性殺傷功能。形態(tài)學(xué)上難以與淋巴細(xì)胞相區(qū)分。K細(xì)胞——主要粗在于腹腔滲出液、血液和脾臟。NK細(xì)胞——主要存在于外周血和脾臟。兩種細(xì)胞均可通過抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC作用)殺傷靶細(xì)胞,也可通過表面殺傷抑制受體(KIR)或殺傷活化受體控制(KAR),非特異性殺傷靶細(xì)胞。輔助性細(xì)胞一類在免疫應(yīng)答過程中將抗原提呈給抗原特異性淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞,又稱為抗原提呈細(xì)胞(APC)。表面組成型表達(dá)MHCII類分子??乖岢始?xì)胞單核吞噬細(xì)胞(吞噬殺傷、抗原加工提呈、

分泌生物活性物質(zhì))樹突狀細(xì)胞(最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞)B細(xì)胞免疫分子免疫細(xì)胞分泌或表達(dá)的多肽、蛋白質(zhì)執(zhí)行免疫識別、免疫調(diào)節(jié)、免疫效應(yīng)細(xì)胞因子、補(bǔ)體、急性期蛋白以及免疫球蛋白等。補(bǔ)體——存在于正常動物和人血清中的一組不耐熱具有酶活性的球蛋白。熱不穩(wěn)定。(56℃,30min完全滅活)激活途徑分為經(jīng)典途徑、旁路途徑以及MBL途徑。激活后介導(dǎo)細(xì)胞溶解、細(xì)胞粘附、調(diào)理作用、免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)、病毒中和以及免疫復(fù)合物溶解等效應(yīng)。細(xì)胞因子——由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞合成和分泌的一類高活性多功能蛋白質(zhì)多肽分子,介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng),刺激造血功能,并參與組織修復(fù)等。細(xì)胞因子分類白細(xì)胞介素(IL):白細(xì)胞間起免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素(IFN):干擾病毒復(fù)制,免疫調(diào)節(jié),可分為I型干擾素(IFN–α、IFN–β,病毒感染的白細(xì)胞)和II型干擾素IFN-γ(抗原激活的T細(xì)胞)。腫瘤壞死因子(TNF):促炎癥因子和免疫調(diào)節(jié)分子。TNF-α,單核巨噬細(xì)胞,TNF–β,活化的T細(xì)胞集落刺激因子:促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖、分化、成熟。細(xì)胞因子特性理化特性:低分子量分泌型糖蛋白,多數(shù)以單體形式存在。分泌特性:多細(xì)胞來源、短暫的自限性分泌、自分泌與旁分泌特點(diǎn)。細(xì)胞因子生物學(xué)作用特性激素樣活性作用:低量高效。通過受體發(fā)揮作用:需與靶細(xì)胞表面受體結(jié)合。多效性:一種細(xì)胞因子作用多種靶細(xì)胞,表現(xiàn)不同效應(yīng)。冗余性:多種細(xì)胞因子作用同種靶細(xì)胞,介導(dǎo)相似的效應(yīng)。協(xié)同性:兩種細(xì)胞因子對細(xì)胞活性的聯(lián)合作用大于單個細(xì)胞因子效應(yīng)的累加。頡抗性:一種細(xì)胞因子的效應(yīng)抑制或抵消其他細(xì)胞因子的效應(yīng)。細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)性細(xì)胞因子之間可相互誘生。細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)受體的表達(dá)——多數(shù)細(xì)胞因子對自身受體的表達(dá)呈負(fù)調(diào)節(jié),對其他細(xì)胞因子受體表達(dá)呈正調(diào)節(jié)。細(xì)胞因子間生物學(xué)活性相互影響。細(xì)胞因子的主要生物學(xué)功能參與免疫應(yīng)答與免疫調(diào)節(jié)。刺激造血功能。細(xì)胞因子參與神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)信號傳遞。屬于中樞免疫器官的是A、脾臟B、胸腺C、淋巴結(jié)D、扁桃體E、哈德氏腺T細(xì)胞和B細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答的場所是A.骨髓 B.外周免疫器官C.中樞免疫器官 D.胸腺E.血液遞呈初次接觸抗原最有效的細(xì)胞是A、巨噬細(xì)胞B、B淋巴細(xì)胞C、樹突狀細(xì)胞D、胸腺上皮細(xì)胞E、血管內(nèi)皮細(xì)胞TNF-α主要由()產(chǎn)生A.樹突狀細(xì)胞B.單核-巨噬細(xì)胞C.B細(xì)胞 D.紅細(xì)胞E.K細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答的免疫分子是能夠作用于正常細(xì)胞使之產(chǎn)生抗病毒蛋白的免疫分子是由細(xì)胞毒性T細(xì)胞釋放,能夠溶解靶細(xì)胞的免疫分子是具有酶原活性,活化后可清除免疫復(fù)合物的免疫分子是A、抗體B、補(bǔ)體C、抗菌肽D、穿孔素E、干擾素動物機(jī)體抗病毒感染免疫中,在消化道、呼吸道黏膜免疫中起主要作用的免疫分子是動物機(jī)體抗病毒感染免疫中,在特異性免疫階段具有中和病毒和調(diào)理作用的免疫分子是動物機(jī)體抗病毒感染免疫中,在病毒感染初期起主要的非特異性抗病毒作用的免疫分子是A、IgGB、干擾素C、趨化因子D、白介素-2E、分泌型IgA第四節(jié)免疫應(yīng)答什么是免疫應(yīng)答?動物機(jī)體對進(jìn)入體內(nèi)的病原微生物和一切抗原物質(zhì)所產(chǎn)生的復(fù)雜的生物學(xué)過程,最終清除病原微生物和外來抗原物質(zhì),并建立對病原微生物的特異性抵抗力。一、免疫應(yīng)答的概念先天性免疫應(yīng)答獲得性免疫應(yīng)答相互依賴、相互促進(jìn)、不可分割本部分內(nèi)容重點(diǎn)介紹獲得性免疫應(yīng)答二、免疫應(yīng)答的類型產(chǎn)生的部位動物機(jī)體的外周免疫器官及淋巴組織是免疫應(yīng)答產(chǎn)生的部位,其中脾臟和淋巴節(jié)是免疫應(yīng)答的主要場所。三、獲得性免疫應(yīng)答免疫應(yīng)答的基本過程致敏階段反應(yīng)階段效應(yīng)階段致敏階段——抗原提呈抗原提呈由抗原提呈細(xì)胞完成。表面組成型表達(dá)MHCII類分子的細(xì)胞為專職抗原提呈細(xì)胞,包括巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。受刺激后表達(dá)MHCII類分子的細(xì)胞為非專職抗原提呈細(xì)胞,包括血管內(nèi)皮細(xì)胞、胰腺β細(xì)胞以及胸腺上皮細(xì)胞等。另外,所有有核細(xì)胞均表達(dá)MHCI類分子也可提呈抗原。提呈外源性抗原給CD4+T淋巴細(xì)胞提呈內(nèi)源性抗原給CD8+T淋巴細(xì)胞外源性抗原和內(nèi)源性抗原。外源性抗原和內(nèi)源性抗原加工與提呈。T細(xì)胞對抗原的識別T、B淋巴細(xì)胞對抗原的識別B細(xì)胞對抗原的識別B細(xì)胞可識別胸腺依賴性抗原(TD抗原)和非胸腺依賴性抗原(TI抗原)。TD抗原——抗原激活B細(xì)胞過程中需要Th細(xì)胞輔助。TI抗原——抗原激活B細(xì)胞過程中不需要Th細(xì)胞輔助。TD抗原激活B細(xì)胞TI1——高濃度時與絲裂原受體結(jié)合,活化大多數(shù)B淋巴細(xì)胞,活化B細(xì)胞與BCR特異性無關(guān)。TI2——具有適當(dāng)間隔、高度重復(fù)的決定簇,呈線性排列,能夠使特異性B細(xì)胞的BCR交聯(lián),活化B細(xì)胞反應(yīng)階段——T、B淋巴細(xì)胞活化、增殖與分化T細(xì)胞的活化、增殖與分化Th細(xì)胞活化后表達(dá)高親和力IL-2受體,同時高效分泌表達(dá)一系列細(xì)胞因子。Tc細(xì)胞活化后分化為CTL。B細(xì)胞的活化、增殖效應(yīng)階段——活化后的T、B淋巴細(xì)胞執(zhí)行免疫效應(yīng)CTL、TDTH、B細(xì)胞分泌的抗體以及活化T、B淋巴細(xì)胞分泌的各種細(xì)胞因子發(fā)揮細(xì)胞免疫和體液免疫效應(yīng),這些效應(yīng)細(xì)胞和效應(yīng)分子共同作用清除抗原物質(zhì)。細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫效應(yīng)主要表現(xiàn)在殺傷被感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞,也可引起機(jī)體的免疫損傷。效應(yīng)性T細(xì)胞CTL:識別被感染、腫瘤細(xì)胞等提呈的內(nèi)源性抗原,通過釋放穿孔素、顆粒酶溶解靶細(xì)胞,也可通過釋放腫瘤壞死因子或通過膜表面Fas分子誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。TDTH:釋放多種可溶性細(xì)胞因子,引起局部單核細(xì)胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)。體液免疫體液免疫效應(yīng)是由B細(xì)胞分化成漿細(xì)胞后分泌的抗體介導(dǎo)的,在清除細(xì)胞外病原體方面非常有效??贵w產(chǎn)生的一般規(guī)律潛伏期較長最早產(chǎn)生IgM抗體總量低持續(xù)期短潛伏期顯著縮短抗體含量高,持續(xù)期長抗體大部分為IgG,IgM少抗體的免疫學(xué)功能第五節(jié)超敏/變態(tài)反應(yīng)概念免疫系統(tǒng)對再次進(jìn)入機(jī)體的抗原(變應(yīng)原)做出過于強(qiáng)烈或不適當(dāng)?shù)姆磻?yīng),而導(dǎo)致組織器官損傷。過敏反應(yīng)型(I型)變態(tài)反應(yīng)細(xì)胞毒型(II型)變態(tài)反應(yīng)免疫復(fù)合物型(III型)變態(tài)反應(yīng)遲發(fā)型(IV)變態(tài)反應(yīng)I型超敏反應(yīng)過敏原IgE肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞組胺、5-羥色胺、白三烯、前列腺素等。毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加、皮膚黏膜水腫、血壓下降、呼吸道及消化道平滑肌痙攣。臨床表現(xiàn)呼吸困難、腹瀉、腹痛、全身性休克。常見青霉素過敏、花粉過敏等。獸醫(yī)臨床上,疫苗、蠕蟲感染會引起超敏反應(yīng)。II型超敏反應(yīng)致敏原抗體(IgM和IgG)補(bǔ)體補(bǔ)體激活,溶解細(xì)胞。常見輸血反應(yīng)。獸醫(yī)臨床上,新生幼畜溶血性貧血。III型超敏反應(yīng)致敏原抗體(IgM和IgG)補(bǔ)體吞噬細(xì)胞常見血清病、Arthus反應(yīng)、葡萄球菌性心內(nèi)膜炎。IV型超敏反應(yīng)致敏原TDTH免疫細(xì)胞常見結(jié)合菌素變態(tài)反應(yīng)、接觸性變態(tài)反應(yīng)。輸血反應(yīng)屬于典型的A、移植物排斥反應(yīng)B、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)C、細(xì)胞毒型變態(tài)反應(yīng)D、過敏反應(yīng)型變態(tài)反應(yīng)E、免疫復(fù)合物型變態(tài)反應(yīng)屬于典型的細(xì)胞毒型(II型)變態(tài)反應(yīng)是A、血清病B、青霉素過敏反應(yīng)C、結(jié)核菌素肉芽腫D、新生畜溶血性貧血E、自身免疫復(fù)合物病124. 結(jié)核菌素變態(tài)反應(yīng)屬于典型的()A.移植物排斥反應(yīng)B.遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)C.細(xì)胞毒型變態(tài)反應(yīng)D.過敏反應(yīng)型變態(tài)反應(yīng)E.免疫復(fù)合物型變態(tài)反應(yīng)抗感染免疫是動物機(jī)體抵抗病原體感染的能力。涉及先天性免疫和獲得性免疫。先天性免疫——第一道防線動物體內(nèi)的非特異性免疫因素介導(dǎo)的對所有病原微生物和外來抗原物質(zhì)的免疫反應(yīng)。是機(jī)體在種系發(fā)育和進(jìn)化過程中逐漸建立起來的一系列天然防御功能,智能識別自身和非自身,對異物無特異性區(qū)別作用。物理性屏障皮膚角化層和黏膜表面的上皮細(xì)胞。分泌物皮膚和黏膜表面分泌物(唾液、淚液、汗液、腸液),這些分泌物中含有抗微生物物質(zhì)(如酶類、防御素以及脂肪酸等)。微生物代謝產(chǎn)物及營養(yǎng)競爭定殖在皮膚和黏膜表面的非致病性細(xì)菌,可以產(chǎn)生一些對病原微生物具有毒性的代謝產(chǎn)物,同時也可以通過占位效應(yīng)和競爭營養(yǎng)成分抑制病原性微生物的定殖。PS:另外還包括血腦屏障、血胎屏障等??扇苄苑肿优c膜結(jié)合受體補(bǔ)體——通過旁路途徑和MBL途徑激活溶菌酶乙型溶素干擾素抗菌肽C-反應(yīng)蛋白模式識別受體炎癥反應(yīng)紅:炎癥初期由于動脈性充血,局部氧合血紅蛋白增多,故呈鮮紅色。腫:主要是由于滲出物,特別是炎性水腫所致。慢性炎癥時,組織和細(xì)胞的增生也可引起局部腫脹。熱:熱是由于動脈性充血及代謝增強(qiáng)所致,部分細(xì)胞因子也可引起發(fā)熱。痛:局部炎癥病灶內(nèi)鉀離子、氫離子的積聚,尤其是炎癥介質(zhì)諸如前列腺素、5-羥色胺、緩激肽等的刺激是引起疼痛的主要原因。免疫細(xì)胞的參與中性粒細(xì)胞單核巨噬細(xì)胞樹突狀細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞獲得性免疫——中堅(jiān)力量三大特點(diǎn):特異性;具有一定免疫期;具有免疫記憶。1、抗胞外細(xì)菌感染抗毒素性免疫溶菌殺菌作用調(diào)理吞噬作用一、抗細(xì)菌、真菌感染主要依靠抗體2、抗胞內(nèi)細(xì)菌感染巨噬細(xì)胞Tc細(xì)胞NK細(xì)胞Th細(xì)胞3、抗真菌感染吞噬細(xì)胞NK細(xì)胞細(xì)胞因子二、抗病毒感染病毒感染初期通過干擾素等細(xì)胞因子和NK細(xì)胞執(zhí)行抗病毒作用。獲得性免疫應(yīng)答啟動后,IgG成為抗病毒主要抗體,通過中和作用、調(diào)理作用和ADCC作用清除病毒及被感染細(xì)胞;CTL成為細(xì)胞免疫的中堅(jiān),擔(dān)負(fù)消滅胞內(nèi)病毒的作用,在病毒性疾病康復(fù)過程中發(fā)揮重要作用。三、抗寄生蟲免疫1、抗原蟲感染單細(xì)胞動物,免疫反應(yīng)與細(xì)菌類似。1、抗蠕蟲感染IgE嗜酸性粒細(xì)胞肥大細(xì)胞對于成蟲,通過I型超敏反應(yīng),促排對于幼蟲,利用單核吞噬細(xì)胞或CTL來殺傷。第七節(jié)免疫防治主動免疫——動物機(jī)體免疫系統(tǒng)對自然感染的并與微生物或疫苗接種產(chǎn)生免疫應(yīng)答,獲得對某種病原微生物特異性抵抗力。天然主動免疫——感染。人工主動免疫——疫苗接種。被動免疫——動物機(jī)體免從母體獲得特異性抗體或經(jīng)人工給予免疫血清,從而獲得對某種病原微生物特異性抵抗力。天然被動免疫——母源抗體(胎盤、初乳、卵黃)。人工被動免疫——抗血清或卵黃抗體接種。疫苗

Vaccine影響疫苗免疫效果的因素遺傳因素營養(yǎng)狀況環(huán)境因素疫苗質(zhì)量病原的血清型與變異疾病的影響母源抗體病原微生物之間的干擾作用可用于人工主動免疫的免疫原是A、佐劑B、類毒素C、內(nèi)毒素D、外毒素E、抗毒素規(guī)?;u場禽流感滅活疫苗免疫首選途徑是A、滴鼻B、點(diǎn)眼C、飲水D、刺種E、注射新生動物通過母源抗體而獲得對某種病原的免疫力屬于A、先天性免疫B、天然被動免疫C、天然主動免疫D、人工被動免疫E、人工主動免疫從細(xì)菌或病毒中提取蛋白成分制備的疫苗屬于A、重組疫苗B、弱毒活疫苗C、基因缺失苗D、亞單位疫苗E、合成肽疫苗傳染病病愈后獲得的對這種疾病的抵抗力為A.人工主動免疫B.人工被動免疫C.天然主動免疫 D.天然被動免疫E.非特異性免疫126. 常用于制備滅活疫苗的化學(xué)藥物是A.乙醇B.甲醛C.乙醚D.3%鹽酸 E.50%甘油生理鹽水第八節(jié)免疫學(xué)技術(shù)利用免疫反應(yīng)的特異性原理,建立各種檢測與分析技術(shù),以及建立這些技術(shù)的各種制備方法。免疫學(xué)技術(shù)免疫檢測技術(shù)/免疫血清學(xué)技術(shù)細(xì)胞免疫技術(shù)免疫制備技術(shù)主講教師:鄭先哲免疫血清學(xué)技術(shù)免疫血清學(xué)技術(shù)凝聚性反應(yīng)標(biāo)記抗體技術(shù)凝集試驗(yàn)沉淀試驗(yàn)補(bǔ)體參與的反應(yīng)中和反應(yīng)免疫印跡技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)免疫酶標(biāo)記技術(shù)放射免疫測定化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,在有電解質(zhì)存在下,復(fù)合物相互凝聚形成肉眼可見的凝聚小塊或沉淀物,根據(jù)是否產(chǎn)生凝集現(xiàn)象來判斷相應(yīng)抗體或抗原,稱為凝聚性試驗(yàn)。一、凝聚性反應(yīng)1、凝集試驗(yàn)細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原,或吸附在紅細(xì)胞、乳膠顆粒性載體表面的可溶性抗原,與相應(yīng)抗體結(jié)合,在有適當(dāng)電解質(zhì)存在下,經(jīng)過一定時間,形成肉眼可見的凝集團(tuán)塊,稱為凝集試驗(yàn)。一、凝聚性反應(yīng)凝集試驗(yàn)直接凝集試驗(yàn)間接凝集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)一、凝聚性反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗(yàn)成為直接凝集現(xiàn)象。玻片法可做定性試驗(yàn);試管法可做定量試驗(yàn)。間接凝集試驗(yàn)將可溶性抗原(或抗體)先吸附于一種與免疫無關(guān)的、一定大小的不溶性顆粒(統(tǒng)稱為載體顆粒)的表面,然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在有電解質(zhì)存在的適宜條件下,所出現(xiàn)的特異性凝集反應(yīng)稱為間接凝集反應(yīng)。敏感性由于直接凝集試驗(yàn),但特異性較差。協(xié)同凝集試驗(yàn)葡萄球菌A蛋白(SPA)能與多種哺乳動物IgG分子的Fc片段結(jié)合。SPA與IgG結(jié)合后,后者的Fab片段暴露于外,并保持抗體活性。覆蓋有特異性抗體的金黃色葡萄球菌與相應(yīng)抗原結(jié)合時,就可產(chǎn)生凝集反應(yīng),該方法稱為協(xié)同凝集試驗(yàn)。2、沉淀試驗(yàn)可溶性抗原(如細(xì)菌外毒素、內(nèi)毒素、菌體裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液等)與相應(yīng)的抗體結(jié)合,在適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的白色沉淀,稱為沉淀試驗(yàn)。一、凝聚性反應(yīng)沉淀試驗(yàn)環(huán)狀沉淀試驗(yàn)瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)免疫電泳技術(shù)一、凝聚性反應(yīng)雙向雙擴(kuò)散雙向單擴(kuò)散免疫電泳對流免疫電泳火箭免疫電泳環(huán)狀沉淀試驗(yàn)在小口徑試管內(nèi)先加入已知抗血清,然后緩慢沿管壁加入待檢抗原于血清表面,使之成為分界清晰的兩層,作用數(shù)分鐘后,觀察兩層液面交界處是否出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀,從而判定相應(yīng)的抗原或抗體。瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)利用可溶性抗原和抗體在半固體凝膠中進(jìn)行反應(yīng),當(dāng)抗原抗體分子相遇,并達(dá)到適當(dāng)比例時,就會相互結(jié)合、聚集,出現(xiàn)白色沉淀線,從而判定相應(yīng)的抗體和抗原。瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)雙向雙擴(kuò)散:抗原抗體在瓊脂凝膠內(nèi)相向擴(kuò)散,在兩孔間比例最合適的位置上出現(xiàn)沉淀帶,如抗原抗體的濃度基本平衡時,此沉淀帶的位置主要決定于兩者的擴(kuò)散系數(shù)。但如抗原過多,則沉淀帶向抗體孔增厚或偏移,反之亦然。瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)雙向單擴(kuò)散:在含有特異抗體的瓊脂板中打孔,并在孔中加入定量的抗原,當(dāng)抗原向周圍擴(kuò)散后與瓊脂中抗體相結(jié)合,即形成白色沉淀環(huán),其直徑或面積與抗原濃度呈正相關(guān)。同時用標(biāo)準(zhǔn)抗原制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可用以定量檢測未知標(biāo)本的抗原濃度。免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù)是凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)與電泳技術(shù)相結(jié)合的免疫檢測技術(shù),在抗原抗體凝膠擴(kuò)散的同時,加入電泳的電場作用,使抗體或抗原在凝膠中的擴(kuò)散移動速度加快,縮短了試驗(yàn)時間;同時限制了擴(kuò)散移動的方向,使集中朝電泳的方向擴(kuò)散移動,增加了試驗(yàn)的敏感性。免疫電泳技術(shù)免疫電泳:先將抗原加到瓊脂板的小孔內(nèi)進(jìn)行電泳,然后在瓊脂板中央挖一橫槽,加入已知相應(yīng)的免疫血清,兩者經(jīng)一定時間相互擴(kuò)散后,就會在抗原、抗體比例最適處形成沉淀弧。根據(jù)沉淀弧的數(shù)量、位置和外形,即可分析樣品中所含成分。免疫電泳技術(shù)對流免疫電泳:在瓊脂板上,使抗原和抗體在電場作用下定向移動,當(dāng)抗原抗體相遇且二者濃度比例合適時,即可出現(xiàn)白色沉淀線。免疫電泳技術(shù)火箭免疫電泳:電泳時,含于瓊脂凝膠中的抗體不發(fā)生移動,而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當(dāng)抗原與抗體分子達(dá)到適當(dāng)比例時,形成一個形狀如火箭的不溶性免疫復(fù)合物沉淀峰,峰的高度與樣品中的抗原濃度呈正相關(guān)。病毒可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體,中和抗體與病毒結(jié)合后使病毒失去吸附細(xì)胞的能力,從而喪失感染力,病毒與其特異性中和抗體相遇之后發(fā)生的作用,類似于化學(xué)反應(yīng)中的相應(yīng)酸堿相遇之后發(fā)生的中和反應(yīng),所以這種作用稱為中合作用。二、中和反應(yīng)中和試驗(yàn)是以測定病毒的感染力為基礎(chǔ),以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力。中和試驗(yàn)常用的有兩種方法:一種是固定病毒量與等量系列倍比稀釋的血清混合,另一種是固定血清用量與等量系列對數(shù)稀釋(即十倍遞次稀釋)的病毒混合。二、中和反應(yīng)利用補(bǔ)體能與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合的性質(zhì),建立檢測抗原或抗體的免疫學(xué)試驗(yàn),即所謂補(bǔ)體參與的檢測技術(shù)。一類是補(bǔ)體與細(xì)胞的免疫復(fù)合物結(jié)合后,直接引起溶細(xì)胞的可見反應(yīng);另一類是補(bǔ)體與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合后不引起可見反應(yīng),但可用指示系統(tǒng)來測定補(bǔ)體是否已被結(jié)合,從而間接地檢測反應(yīng)系統(tǒng)是否存在抗原-抗體復(fù)合物。三、補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體參與的檢測技術(shù)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)免疫黏附血凝試驗(yàn)被動紅細(xì)胞溶血試驗(yàn)三、補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒試驗(yàn)單向輻射紅細(xì)胞溶解試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)利用抗原抗體復(fù)合物同補(bǔ)體結(jié)合,把含有已知濃度的補(bǔ)體反應(yīng)液中的補(bǔ)體消耗掉使?jié)舛葴p低的現(xiàn)象,以檢出抗原或抗體的試驗(yàn),為高敏度檢出方法之一,特別是根據(jù)抗原物質(zhì)的特性,抗原抗體反應(yīng)不能用沉淀反應(yīng)或凝集反應(yīng)觀察時也可以利用此法。該試驗(yàn)包括兩個反應(yīng)系統(tǒng),一為檢測系統(tǒng),即已知抗原(或抗體)、被檢抗體(或抗原)以及補(bǔ)體;另一系統(tǒng)為指示系統(tǒng),包括綿羊紅細(xì)胞溶血素和補(bǔ)體。被動紅細(xì)胞溶解試驗(yàn)將已知抗原吸附到紅細(xì)胞上,在有相應(yīng)抗體及補(bǔ)體存在時,出現(xiàn)紅細(xì)胞溶解,該方法稱為被動紅細(xì)胞溶解試驗(yàn)。該試驗(yàn)比間接血凝試驗(yàn)更敏感。標(biāo)記抗體技術(shù)是將已知抗體標(biāo)記上易顯示的物質(zhì),通過檢測標(biāo)記物來反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的情況,從而間接地測出被檢抗原的存在與否或量的多少。免疫標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、敏感度高、檢測速度快、能定性和定量甚至定位、且易于觀察。四、標(biāo)記抗體技術(shù)標(biāo)記抗體技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)免疫酶標(biāo)記技術(shù)放射免疫測定化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)四、標(biāo)記抗體技術(shù)熒光抗體技術(shù)、放射免疫測定法和酶免疫測定法,通常被稱為三大標(biāo)記技術(shù)。金免疫技術(shù)常用的免疫標(biāo)記物質(zhì)類別標(biāo)記物用途熒光素FITC、RB200、TRITC鑭系元素螯合物免疫組化、免疫分析測定放射性核素3H、14C、32P、57Gr、125I、131I免疫分析測定酶HRP、AP免疫組化、免疫分析測定化學(xué)發(fā)光物L(fēng)uminol、lucigenin免疫分析測定金屬顆粒膠體金、鐵蛋白免疫組化、免疫分析測定四、標(biāo)記抗體技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)熒光抗體技術(shù)的基本原理是,將合適的熒光素,以化學(xué)方法與特異抗體共價鍵牢固結(jié)合,此結(jié)合熒光的抗體,不僅保留原有的特異反應(yīng),而且顯示熒光。除可用熒光顯微鏡對結(jié)果進(jìn)行觀察,還可將熒光抗體技術(shù)與激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀等設(shè)備配合使用。四、標(biāo)記抗體技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)直接法:用特異熒光抗體直接滴加于待檢抗原標(biāo)本上,由于標(biāo)記抗體與抗原發(fā)生特異結(jié)合,使之呈熒光,根據(jù)熒光分布和形態(tài)確定抗原性和部位。炭疽桿菌24h培養(yǎng)物直接熒光抗體檢測免疫熒光抗體技術(shù)間接法:間接法可用于檢測抗原和抗體。抗原或標(biāo)本加上抗體或標(biāo)本(第一抗體)混合后,加熒光抗體(第二抗體)。在熒光顯微鏡下檢測熒光分布。本法靈敏度高,可對多種抗原進(jìn)行試驗(yàn)。免疫熒光抗體技術(shù)雙標(biāo)記法:采用不同熒光標(biāo)記物分別標(biāo)記不同的抗體,進(jìn)行同一標(biāo)本的熒光染色,若有相應(yīng)的兩種抗原存在便同時見到兩種或多種熒光色澤。免疫熒光抗體技術(shù)流式細(xì)胞術(shù):是一種在功能水平上對單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細(xì)胞,并能同時從一個細(xì)胞中測得多個參數(shù),與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn)。免疫酶標(biāo)記技術(shù)酶標(biāo)記抗體技術(shù)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶催化反應(yīng)的高敏感性而建立起來的檢測技術(shù)。四、標(biāo)記抗體技術(shù)免疫酶標(biāo)記技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):將

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