輸血科不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)操作規(guī)程

類別：操作規(guī)程生效日期：2014.10部門：輸血科修改日期：2014.09名稱：輸血科不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)操作規(guī)程新增：不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【目的】檢測(cè)血清中是否存在抗A、抗B以外的不規(guī)則抗體，為交叉配血、ABO血型正確定型（不規(guī)則抗體干擾反定型）以及新生兒溶血病產(chǎn)前、產(chǎn)后診斷提供參考依據(jù)?！痉秶?、有輸血史、妊娠史的患者血標(biāo)本。2、短期內(nèi)多次輸血的患者的血標(biāo)本。3、交叉配血不合的患者的血標(biāo)本。4、有輸血反應(yīng)史的患者的血標(biāo)本。5、有新生兒溶血病史及流產(chǎn)史的患者的血標(biāo)本?！韭氊?zé)】實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)?！驹怼肯蛭⒅z反應(yīng)卡(簡(jiǎn)稱反應(yīng)卡)內(nèi)先后加入篩選細(xì)胞和受檢血清，血清中的IgG抗體與相應(yīng)紅細(xì)胞抗原結(jié)合后便會(huì)和凝膠中的抗人球蛋白再次結(jié)合形成紅細(xì)胞凝集塊，因凝膠具有分子篩的作用，從而在離心后紅細(xì)胞凝集塊仍留在柱子的上部或中部，此稱為陽(yáng)性反應(yīng)，表明受檢血清中有IgG抗體；反之，紅細(xì)胞沉于柱底，為陰性反應(yīng)，表示受檢血清中沒有IgG抗體?！緲?biāo)本采集和處理】1、標(biāo)本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝靜脈血2ml，離心，取上清。2、標(biāo)本保存：室溫放置不超過8小時(shí)，4℃保存不超過72小時(shí)，無溶血及明顯乳糜?！驹O(shè)備與試劑】1、抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒①包裝規(guī)格：每盒內(nèi)裝有Ⅰ號(hào)篩選細(xì)胞、Ⅱ號(hào)篩選細(xì)胞、Ⅲ號(hào)篩選細(xì)胞試劑各一支，5ml/支。②儲(chǔ)存條件及有效期：2-8℃儲(chǔ)存，不能冰凍。不得長(zhǎng)期處于室溫或高溫條件下。使用后，應(yīng)立即旋緊瓶蓋并在2-8℃條件下保存。儲(chǔ)存條件下有效期為3個(gè)月。2、抗人球蛋白檢測(cè)卡（凝膠微柱）①包裝規(guī)格：12卡/盒②儲(chǔ)存條件及有效期：18-25℃避光保存。有效期為自組裝之日起12個(gè)月3、BaSo2005-2醫(yī)用低速離心機(jī)：珠海貝索生物技術(shù)有限公司4、TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)：長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司5、FYQ型免疫微柱孵育器：長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司【操作步驟】1、將孵育箱開關(guān)打開，進(jìn)行預(yù)溫。2、對(duì)反應(yīng)卡進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)明紅細(xì)胞編號(hào)、病人姓名、病區(qū)、床號(hào)、住院號(hào)和檢查日期。3、按標(biāo)記將篩選紅細(xì)胞Ⅰ-Ⅲ號(hào)各1滴（50ul）加入反應(yīng)卡相應(yīng)孔內(nèi)，再各加受檢血清1滴入反應(yīng)卡孔內(nèi)。4、將已加好反應(yīng)物的反應(yīng)卡置孵育箱(37℃)內(nèi)孵育15min，取出后即置TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)內(nèi)離心5min。5、取出用肉眼觀察，根據(jù)原理中標(biāo)明的判讀標(biāo)準(zhǔn)判斷反應(yīng)結(jié)果并記錄。6、如篩選結(jié)果陽(yáng)性，還須用譜細(xì)胞對(duì)受檢血清進(jìn)行檢查，以確定抗體的特異性。【注意事項(xiàng)】1、紅細(xì)胞濃度不可過高，0.8%即可。應(yīng)使用純血清（肝素鈉抗凝管標(biāo)本），如使用血漿有可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。2、加樣時(shí)加樣器傾斜45°，順柱壁緩緩加入，防止形成氣泡。3、應(yīng)做陽(yáng)性、陰性及自身對(duì)照。對(duì)照結(jié)果正確，受檢孔紅細(xì)胞滯留于