對(duì)位紅檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)位紅檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)第1頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月任務(wù)：對(duì)位紅檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法一、液相色譜法高效液相色譜法凝膠凈化液相色譜法反相高效液相色潽法二、分光光度法--紫外可見分光光度計(jì)第2頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月1.對(duì)位紅的簡(jiǎn)介對(duì)位紅亦稱對(duì)硝苯胺紅，常溫下呈固態(tài)，密度1.50g/cm3,熔點(diǎn)248-252℃。是一種常用的紅色顏料，屬于重氮系列化工合成染色劑，主要應(yīng)用于機(jī)油，蠟，油彩，汽油等工業(yè)產(chǎn)品。對(duì)位紅的熔點(diǎn)即已達(dá)到250℃，明顯不能采用氣相色譜法來進(jìn)行檢驗(yàn)，因?yàn)闃悠泛茈y汽化。所以我們采用液相色譜法來對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。第3頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月1.1高效液相色譜法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，靈敏可靠，結(jié)果令人滿意應(yīng)用范圍：食品及調(diào)味品中對(duì)位紅、蘇丹紅的檢測(cè)對(duì)位紅檢測(cè)主要儀器與試劑：LC2010-AB型高效液相色譜儀(配有紫外可見光檢測(cè)器)(Shimazdu公司,日本)。甲醇(色譜純,美國TEDIA公司),正己烷(分析純,成都市科龍化工試劑廠),氯仿(分析純,重慶川東化工有限公司),丙酮(分析純,成都市科龍化工試劑廠),無水硫酸鈉(分析純,重慶北碚化學(xué)試劑廠),蘇丹紅(97.5%)、蘇丹紅(90.0%)、蘇丹紅!(97.0%)、蘇丹紅?(91.0%)、對(duì)位紅(95.5%)標(biāo)準(zhǔn)品(Dr.EhrenstorferGmbH公司,德國),層析用氧化鋁(中性,100~200目)(上海陸都化學(xué)試劑廠),1cm(內(nèi)徑)&5cm(高)注射器管(上海金塔醫(yī)用器材有限公司)。標(biāo)準(zhǔn)溶液:精密稱取蘇丹紅、蘇丹紅、蘇丹紅!、蘇丹紅?、對(duì)位紅標(biāo)準(zhǔn)品各10.0mg(按其標(biāo)稱含量折算),用丙酮溶解并定容至250mL,分別配成40mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用丙酮配成0.16、0.32、0.64、1.28、2.56mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。第4頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月檢測(cè)操作步驟1、流動(dòng)相的配制及預(yù)處理2、標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3、樣品溶液配制4、液相色譜儀的開機(jī)5、液相色譜工作站設(shè)置6、走基線7、進(jìn)樣8、數(shù)據(jù)采集9、標(biāo)樣及試樣進(jìn)樣第5頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月1.2凝膠凈化液相色譜法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，填充完凝膠柱后可重復(fù)使用，實(shí)際用量少于歐盟及國標(biāo)方法，并且用淋洗液替代劇毒而又昂貴的乙腈進(jìn)行提取，自制凝膠柱凈化富集避免了歐盟方法用乙腈直接萃取進(jìn)樣對(duì)色譜柱壽命的影響及雜質(zhì)峰的干擾，也避免了國標(biāo)方法中采用氧化鋁柱凈化活度難以控制的麻煩，一次進(jìn)樣可同時(shí)檢測(cè)食品中對(duì)位紅、蘇丹紅的含量應(yīng)用范圍：食品及調(diào)味品中對(duì)位紅、蘇丹紅的檢測(cè)儀器及試劑：Agilent1100高效液相色譜儀(含二極管陣列檢測(cè)器、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器)層析柱<1.6cm×50cm,填充Bio2BeadsS2X3凝膠。蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及對(duì)位紅標(biāo)準(zhǔn)品,純度均大于95%,配制時(shí)用少量三氯甲烷溶解,乙腈定容為0.5000g·L-1儲(chǔ)備液(按實(shí)際含量折算),使用時(shí)用乙腈稀釋至所需濃度。第6頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月色譜條件色譜柱ZorbaxSB2C18(4.6mm×250mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈(A)+酸性水溶液(用乙酸調(diào)至約pH4.0);洗脫程序:0～9minA90%;9～12min;A線性變化到100%,保持5min后回到初始比例;流速1.0mL·min-1;柱溫35℃;進(jìn)樣量20μL;二極管陳列檢測(cè)器,程序可變波長見表1。第7頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月1.3反相高效液相色潽法簡(jiǎn)介：在推薦參考方法的基礎(chǔ)上,對(duì)分離和色譜條件加以改進(jìn)、優(yōu)化、選擇,用于幾種含對(duì)位紅食品采用擬定的方案進(jìn)行分離檢測(cè)。結(jié)果:方法的檢出限為011μg/ml,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)(r)019999,在014-116μg/ml添加水平間,加標(biāo)的回收率95%～105%,RSD019%～911%。改進(jìn)的方法準(zhǔn)確可靠,檢測(cè)效率高,具有實(shí)際應(yīng)用意義。應(yīng)用：測(cè)定食品中對(duì)位紅的殘留量第8頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器、試劑及色譜條件儀器設(shè)備Waters2695型高效液相色譜儀。Waters、996型二極管陣列紫外檢測(cè)器。MilliQplus型超純水器,美國Millipore公司產(chǎn)品。超聲波清洗器。試劑對(duì)位紅標(biāo)準(zhǔn)品(95%,AcrosOrganics,USA);乙腈(分析純和色譜純)。色譜條件色譜柱,MERCKLichrocart250-4Lichrospher100RP-18,4×250mm,5μm;流動(dòng)相:水+乙腈(5+95);流速:110ml/min;檢測(cè)波長:485nm;進(jìn)樣量:10μl。第9頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月2.1.分光光度法--紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用范圍：檢定物質(zhì)

根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。2.與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照

將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。3.比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性4.純度檢驗(yàn)

5.推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)

6.氫鍵強(qiáng)度的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。7.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定8.反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究9.在有機(jī)分析中的應(yīng)用

第10頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月簡(jiǎn)介在分光光度計(jì)中，將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí)，便可得到與眾不同波長相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。如以波長（λ）為橫坐標(biāo)，吸收強(qiáng)度（A）為縱坐標(biāo)，就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法，稱為分光光度法，也稱為吸收光譜法。用紫外光源測(cè)定無色物質(zhì)的方法，稱為紫外分光光度法。第11頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月測(cè)定所需儀器：UV7504型紫外可見分光光度計(jì)，比