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藥物敏感性試驗(yàn)醫(yī)學(xué)、藥品01概念結(jié)果觀察操作方法應(yīng)用目錄030204基本信息藥物敏感性試驗(yàn),是針對(duì)藥物對(duì)機(jī)體敏感的實(shí)驗(yàn),一般使用的實(shí)驗(yàn)方法多為皮膚敏感試驗(yàn)。概念概念藥物敏感性試驗(yàn)是針對(duì)藥物對(duì)機(jī)體敏感的實(shí)驗(yàn),在嚴(yán)重感染難于控制或用臨床多種抗生素?zé)o效的病人才做的,當(dāng)然現(xiàn)代提倡做藥敏,以免亂用抗生素??咕帉?duì)細(xì)菌性傳染病的控制起到了非常重要的作用,但由于養(yǎng)殖過(guò)程中不科學(xué)的、盲目的濫用抗菌藥,很多致病性細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性,使得抗菌藥對(duì)細(xì)菌性疾病的控制效果越來(lái)越差,不但造成藥物浪費(fèi),而且還延誤病情,給養(yǎng)殖戶造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。隨著新型致病菌的不斷出現(xiàn),抗菌藥的防治效果越來(lái)越差。并且各種致病菌對(duì)不同的抗菌藥物的敏感性不同,同一細(xì)菌的不同菌株對(duì)不同抗菌藥物的敏感性也有差異。長(zhǎng)期以來(lái),各種致病菌耐藥性的產(chǎn)生使各種常用抗菌藥物往往失去藥效,以及不能很好的掌握藥物對(duì)細(xì)菌的敏感度,所以一個(gè)正確的結(jié)果,可供臨床醫(yī)師選用抗菌藥物的參考,并提高療效。這就需要利用藥敏實(shí)驗(yàn)進(jìn)行藥物敏感度的測(cè)定,以便準(zhǔn)確有效的利用藥物進(jìn)行治療。但由于藥敏試驗(yàn)要求比較嚴(yán)格,條件比較高,僅僅在大中專院?;蚩蒲袉挝挥袟l件的可以操作,一些養(yǎng)殖廠或一些門(mén)診難有條件進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的操作。1.實(shí)驗(yàn)材料:1.1普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:可去生化試劑店購(gòu)買(mǎi),做不同細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)可選擇不同的培養(yǎng)基,如做大腸桿菌的藥敏試驗(yàn)可選擇普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂或麥糠凱培養(yǎng)基。做沙門(mén)氏菌可選擇血清培養(yǎng)基。操作方法操作方法3.1藥敏片法3.1.1在“超凈臺(tái)”中,用經(jīng)(酒精燈)火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物,以劃線方式將細(xì)菌涂布到平皿培養(yǎng)基上。具體方式;用滅菌接種環(huán)取適量細(xì)菌分別在平皿邊緣相對(duì)四點(diǎn)涂菌,以每點(diǎn)開(kāi)始劃線涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二點(diǎn)劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細(xì)菌均勻密布于平皿。(另:可挑取待試細(xì)菌于少量生理鹽水中制成細(xì)菌混懸液,用滅菌棉拭子將待檢細(xì)菌混懸液涂布于平皿培養(yǎng)基表面。要求涂布均勻致密)3.1.2將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停,取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面。為了使藥敏片與培養(yǎng)基緊密相貼,可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果,要求藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上;一般可在平皿中央貼一片,外周可等距離貼若干片(外周一般可貼七片),每種藥敏片的名稱要記住。3.1.3將平皿培養(yǎng)基置于37℃溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)后,觀察效果。3.2牛津杯法3.2.1在“超凈臺(tái)”中,用經(jīng)(酒精燈)火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物,以劃線方式將細(xì)菌涂布到平皿培養(yǎng)基上。具體方式;用滅菌接種環(huán)取適量細(xì)菌分別在平皿邊緣相對(duì)四點(diǎn)涂菌,以每點(diǎn)開(kāi)始劃線涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二點(diǎn)劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細(xì)菌均勻密布于平皿。結(jié)果觀察結(jié)果觀察在涂有細(xì)菌的瓊脂平板上,抗菌藥物在瓊脂內(nèi)向四周擴(kuò)散,其濃度呈梯度遞減,因此在紙片周圍一定距離內(nèi)的細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制。過(guò)夜培養(yǎng)后形成一個(gè)抑菌圈,抑菌圈越大,說(shuō)明該菌對(duì)此藥敏感性越大,反之越小,若無(wú)抑菌圈,則說(shuō)明該菌對(duì)此藥具有耐藥性。其直徑大小與藥物濃度、劃線細(xì)菌濃度有直接關(guān)系。三.判定標(biāo)準(zhǔn):1.藥敏實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,應(yīng)按抑菌圈直徑大小作為判定敏感度高低的標(biāo)準(zhǔn)。表—1藥物敏感實(shí)驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)抑菌圈直徑(毫米)敏感度20以上極敏15—20高敏10—14中敏10以下低敏0不敏應(yīng)用應(yīng)用藥物敏感實(shí)驗(yàn)后,應(yīng)選擇高敏藥物進(jìn)行治療,也可選用兩種藥物協(xié)助使用,以減少耐藥菌株。在選擇高敏藥物時(shí)應(yīng)考慮藥物的吸收途徑,因?yàn)槲覀兯幟魧?shí)驗(yàn)是藥液直接和細(xì)菌接
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