血清糖鏈抗原125（CA125）定量檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血清糖鏈抗原125(CA125)定量檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程××醫(yī)院檢驗(yàn)科臨床免疫室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號:XXX生效日期：共頁第頁1.目的規(guī)范操作流程，保證血清糖鏈抗原125(CA125)定量檢測的準(zhǔn)確性和可靠性。2.原理采用雙抗體夾心法原理，整個過程18min完成。2．2·第2步孵育：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測定。檢測結(jié)果由機(jī)器自動從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過2點(diǎn)定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。3.標(biāo)本要求3．1．1血清標(biāo)本采集用標(biāo)準(zhǔn)樣本試管或含分離膠的試管。標(biāo)本在2~8℃可穩(wěn)定7天，－20℃可穩(wěn)定3個月。含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。心 (大約15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可進(jìn)行檢測。3．3·患者準(zhǔn)備的一般要求：患者在采血前24h內(nèi)應(yīng)避免運(yùn)動和飲酒，不宜改變飲食習(xí)慣和睡眠習(xí)慣。一般主張?jiān)诮?2h后空腹取血，門診患者提倡靜坐15min后再采血。4.試劑與儀器4．2·試劑使用：試劑盒中的試劑是一個整體，打開后可立即使用，不能被分開。正確操作需要的所有信息可通過相應(yīng)的試劑條碼讀取。素結(jié)合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐劑。CA5定標(biāo)液、腫瘤標(biāo)志物質(zhì)控品(PreciControlTumorMarker)1和2、分析杯和Elecsys分析吸頭(移液管吸頭加樣槍頭)、通用稀釋液、ProCell系統(tǒng)緩沖液、CleanCell檢測池洗液、SysWash(附加洗液)、SysClean系統(tǒng)清洗、ProCellM系統(tǒng)緩沖液、ProbeWashM清洗液、廢物袋。4．5．1存放在2~8℃。為了確保使用前自動混勻期間提供足夠量的磁性微粒，試劑盒器上，8周(交替貯存在冰箱內(nèi)和儀器上，室溫20~25℃，開瓶使用時間累計約20h)。5.操作步驟5．1．1在使用前分析儀自動使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過各試劑條形碼可讀取其詳細(xì)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無法自動讀取信息時，請輸入標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。儀將自動調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。6.校準(zhǔn)CA125ⅡRIA。每批Elecsys試劑套裝都有條形碼標(biāo)簽，條形碼含有特定批次試劑對應(yīng)的特定定標(biāo)信息。預(yù)先確定的一級定標(biāo)曲線適用于采用相關(guān)定標(biāo)液試劑盒進(jìn)行測定的分析儀。6．2·定標(biāo)頻率：必須使用新鮮試劑對每個試劑批進(jìn)行一次定標(biāo)(即試劑盒上機(jī)登入后的24h內(nèi))。下列情況建議重新定標(biāo)：使用同一批試劑的1個月后(28天)；7天后(在分析儀上使用同一試劑盒)；根據(jù)需要：質(zhì)控結(jié)果超出范圍時，比如質(zhì)控結(jié)果在規(guī)定的限值外；若兩水平質(zhì)控均在控，則定標(biāo)曲線可延至試劑及質(zhì)控批號更換。6．3·定標(biāo)驗(yàn)證：分析儀的軟件會自動檢查定標(biāo)曲線的有效性及任何偏離。7.質(zhì)控腫瘤標(biāo)志物質(zhì)控品(PreciControlTumorMarker)1和2以及其他合適的質(zhì)控品。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每24h或每一次定標(biāo)后測定一次。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如果出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，每個實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該采取糾正措施。8.結(jié)果判斷8．1·結(jié)果計算：對每一個標(biāo)本，××分析儀會自動計算CA125含量，單位是U／ml或定)。如果測定值低于最低檢測限，報告為＜0．600U／ml，如果測定值高于檢測范圍，報告為＞5000U／ml(結(jié)果達(dá)到25000U／ml樣本應(yīng)作50倍稀釋)。8．3·檢測結(jié)果的不確定度：具體參見AFP標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的相關(guān)內(nèi)容。9.生物參考區(qū)間本實(shí)驗(yàn)室血清CA125生物參考區(qū)間為≤35U／ml。10.性能參數(shù) 定不受干擾。對于接受高劑量生物素治療的患者(即＞5mg／d)，必須在末次生物素治療后至少8h采集樣本。類風(fēng)濕因子低于1200U／ml時，檢測結(jié)果不受影響。CA125濃度低于50000U／ml時無高劑量鉤狀效應(yīng)。體外對27種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)。未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測結(jié)果。少數(shù)病例中針對分析物特異性抗體、鏈霉親和素或釕抗體的極高滴度抗體會影響檢測結(jié)果。通過適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計可將影響因素降到最低。11.臨床意義11．1·CA125發(fā)現(xiàn)存在于羊膜和體腔上皮中，這些組織是存在于胎兒的器官中。成人器11．2·檢測值升高有時可見于多種良性婦科疾病(如卵巢囊腫、卵巢變性、內(nèi)膜炎、子宮肌瘤、宮頸炎)。輕度升高可發(fā)生于妊娠早期和多種良性疾病(如急性和慢性胰腺炎、胃腸道疾病、腎功能衰竭、自身免疫病等)。明顯升高也可見于肝硬化、肝炎。各種惡性腫瘤引起的腹水也可見CA125升高。CA125升高可見于卵巢癌患者外，還可見于子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、胃腸道癌和其他惡性腫瘤。盡管CA125是非特異的指標(biāo)，卻是迄今為止用于監(jiān)測卵巢癌患者治療效果、觀察疾病發(fā)展最重要的指標(biāo)。在最初診斷中，CA125的敏感性依賴于FIGO分期。高腫瘤分期與高CA125水平相關(guān)。11．3·CA125檢測的敏感性和特異性通過比較診斷為卵巢癌(FIGO分期Ⅰ~Ⅳ)的患者和良性婦科腫瘤的患者進(jìn)行評估。cutoff值為65U／m