園林物離體快速繁殖

園林物離體快速繁殖第1頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.1污染污染：是指在組培過程中，由于真菌、細菌等微生物的污染，在培養(yǎng)容器內(nèi)孳生大量的菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。污染的原因與控制：原因:(1)培養(yǎng)基及各種使用器具消毒不徹底;(2)外植體滅菌時不徹底，有菌殘存在細胞組織中；（3）操作時人為因素帶入；（4）環(huán)境不清潔；（5）超凈工作區(qū)域污染。控制：器具滅菌；外植體；接種操作；環(huán)境條件；超凈工作臺。第2頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.2材料死亡材料死亡的原因:外植體滅菌過度；污染；培養(yǎng)基不適宜或配置有問題；培養(yǎng)條件惡化。在生產(chǎn)過程中如何減輕或者避免植物材料的死亡？（1）選用比較溫和的滅菌劑，降低藥劑濃度，縮短消毒時間，選用其他部位，最好在生長季節(jié)取芽。（2）注意環(huán)境和個人衛(wèi)生，嚴格按規(guī)程進行操作。（3）認真配制各種激素、母液、培養(yǎng)基，選用鹽含量較低的培養(yǎng)基，也可試用1/2或1/4培養(yǎng)基，并調整各種激素額配比和用量，在培養(yǎng)基中適當添加抗生素、活性炭及必需的有機營養(yǎng)。（4）改善培養(yǎng)環(huán)境，及時轉移和分瓶。（5）加強組培苗的過渡管理。第3頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.3玻璃化玻璃化現(xiàn)象：玻璃化是試管苗的一種生理失調癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀。第4頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月玻璃化的影響是瓶內(nèi)的小苗過度生長，但有用的苗很少。各種不同的花卉品種，玻璃化發(fā)生頻率各不相同。在情人草中較少見；香石竹中則較普遍。據(jù)報道，已經(jīng)從溫度、光照、激素種類和濃度、瓊脂用量、酸堿度、糖濃度、碳氮比、青霉素、乙烯等方面，對香石竹玻璃化苗的發(fā)生進行了研究。實驗結果表明：玻璃化苗是在芽分化啟動后的生長過程中，由碳水化合物、氮代謝、和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響和控制‘產(chǎn)生玻璃化的主要原因是：激素濃度；溫度；濕度；培養(yǎng)基的硬度；光照時間；培養(yǎng)基成分。減少玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生：可以通過降低培養(yǎng)基的水位；減少培養(yǎng)基中的含氮化合物的用量；增加光照強度；調整培養(yǎng)溫度；降低培養(yǎng)基中細胞分裂素的用量；提高培養(yǎng)基的硬度等措施。第5頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.4褐化褐化：褐化是指在組培過程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基釋放褐色物質，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。第6頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月褐化的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌類化合物，醌類化合物在絡氨酸酶的作用下，與外植體組織中的蛋白質發(fā)生聚合，進一步引起其他酶系統(tǒng)失活，導致組織代謝紊亂，生長受阻，最終逐漸死亡。引起褐變的原因包括外植體本身、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等方面的影響。（1）種類品種（2）材料的年齡和大?。?）光照（4）取材時間和部位（5）溫度此外，培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)方式等對褐化的發(fā)生也有一定影響。針對以上褐化的原因，在生產(chǎn)上我們該如何來減輕褐化現(xiàn)象？第7頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月

為了防止外植體的褐變，需要選取酚類化合物含量較低的實驗材料，選擇無機鹽含量較低，不加肌醇的培養(yǎng)基，并在較弱的光線或黑暗的條件中進行培養(yǎng)。

在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑是防止褐變的有效措施。常用的抗氧化劑有抗壞血酸（VC）、檸檬酸、半胱氨酸、二硫蘇糖醇和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等。可用抗氧化劑溶液預先處理外植體，或者在抗氧化劑溶液中切割和剝離外植體。必要時還可以將幾種抗氧化劑結合使用。也可以將抗氧化劑加入到培養(yǎng)基中。另一種方法是在培養(yǎng)基中加入0.5～1％的活性炭，吸附對生長有抑制作用的褐色醌類物質。應當注意的是：活性炭也能吸附培養(yǎng)基中的激素類物質，影響莖尖的分化和生長，因此在使用活性炭的場合，需要適當提高培養(yǎng)基中激素的濃度。還有一種辦法是不斷地（每隔1～2d）將培養(yǎng)物轉移到新鮮的培養(yǎng)基上，以擺脫老培養(yǎng)基中褐色物質的不利影響。在使用液體培養(yǎng)基的情況下，這種方法相當有效。第8頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.5黃化黃化：是指在組培過程中由于培養(yǎng)基的成分、環(huán)境、激素、碳水化合物等各種因素引起的幼苗整株失綠，全部或部分葉片黃化、斑駁。這一現(xiàn)象在植物組培中比較常見，特別在部分木本花卉中較為多見。第9頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月引起黃化的原因:是培養(yǎng)基中的Fe的含量不足；各礦物質營養(yǎng)不均衡；培養(yǎng)環(huán)境通氣不良，瓶內(nèi)乙烯含量升高；激素配比失當；糖用量不足或長時間不轉移糖已耗盡；pH變化過大；培養(yǎng)溫度不適；光照不足等。解決方法是，首先在配制母液和培養(yǎng)基的制作過程中，要檢查儀器設備是否準確，還要認真細致地核對每項稱量的每一環(huán)節(jié)；及時轉接培養(yǎng)物；使用透氣的封口膜以改善瓶內(nèi)通氣狀況；適當調節(jié)pH、激素配比和無機鹽濃度；配制培養(yǎng)基時切記不要忘記加糖；控制培養(yǎng)室的溫度；適當增加光照；另外，在培養(yǎng)基在添加抗生素類物質如青霉素、鏈霉素、頭孢霉素等，有時也會出現(xiàn)幼苗黃化現(xiàn)象，應適當減少用量或停止使用。第10頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.6變異和畸形變異和畸形：是指在組培過程中，由于激素、環(huán)境等因素的作用和影響，使組培苗的外部形態(tài)和內(nèi)部生理發(fā)生變化，引起的畸形、矮化、叢生、葉片增厚、莖桿變扁呈掃把狀、甚至中性也發(fā)生變化的現(xiàn)象。第11頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)生變異和畸形的原因主要是由激素的種類和濃度決定’其次,溫度過高也有一定的影響。不同種類和品種發(fā)生變異的頻率和程度各不相同，香石竹在使用BA時比KT更容易發(fā)生叢生變異，而且在較低濃度下，就會產(chǎn)生三葉輪生甚至成叢狀的形態(tài)變異’這些變異植株下地后不能正常地生長和開花，是生產(chǎn)上不能使用的無效苗。一般BA的濃度高于0.5mg/L時，香石竹的叢苗開始明顯增加，BA濃度在0.2mg/L并配合KT0.1-0.3mg/L時，可使香石竹多數(shù)品種的叢生率控制在3%-5%內(nèi)。在非洲菊、勿忘我中也存在比較普遍的多心叢生現(xiàn)象，下地后表現(xiàn)為分宓多，開花難，且花枝細弱，品質差的特點。在非洲菊和勿忘我的黃色品種中比較突出。通過降低細胞分裂素的用量，可以稍有好轉，但增值系數(shù)明顯降低，是生產(chǎn)成本增加。在愈傷組織誘導中，添加2，4-D會加劇變異的發(fā)生。在非洲紫羅蘭葉子誘導不定芽產(chǎn)生時，如果細胞分裂素濃度過高，會出現(xiàn)不定芽只長葉子，不見成苗的情況，而且在這些葉片的表面及邊緣又會在生出不定芽。在非洲菊增值中，當BA大于5mg/L時，葉片就會出現(xiàn)皺縮和黃化。在激素比例不均衡時，也會出現(xiàn)一些畸形苗。因此，可以認為細胞分裂素濃度和種類是引起變異的主要因子。第12頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月

在環(huán)境條件惡化和不適時，也會發(fā)生一些比較明顯的形態(tài)變異和畸形。長時間的過低溫度會使組培苗僵化、節(jié)間矮縮；而溫度過高時，苗會徒長、細弱；有時在激素的共同作用下，還可能出現(xiàn)瓶內(nèi)開花的情況。但瓶內(nèi)開花除了與環(huán)境和激素有關外，還與接種外植體的生理年齡相關。有時由于激素等因素的作用，根部會出現(xiàn)只有1-2條根，但特別粗、極易脫落，從形態(tài)生觀察就不正常，過渡的成活率很低。非洲菊在繁殖階段BA過高，生根時NAA濃度也高時，均會出現(xiàn)根系不正常的現(xiàn)象。根據(jù)各個花卉品種的組培生長習性，可以通過降低細胞分裂素濃度，調整生長素與細胞分裂素的比例，改善環(huán)境條件等措施來減輕變異和畸形的發(fā)生及緩解發(fā)生的程度。

第13頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.7增值率低下或過剩

增值率的高低，直接影響組培生產(chǎn)的成本和效益，也關系到一個有市場前景的優(yōu)良品種能否很快轉化為有競爭的產(chǎn)品，在生產(chǎn)上要千方百計的提高增殖率。但也要考慮到通過調整細胞分裂素濃度提高增殖率的同時，會出現(xiàn)增殖過剩，小苗分化過度，密集叢生，微型化，不能分株，甚至產(chǎn)生各種各樣的形態(tài)變異，有的即使能分株，進行生根，但下地后還會保持旺盛的分生，以至發(fā)蓬過大不能正常的生產(chǎn)和開花。第14頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月增值率低下或旺盛的原因關聯(lián)性品種特性激素濃度配比第15頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月組培苗瘦弱或徒長的原因（1）細胞分裂素濃度過高（2）溫度過高（3）光照不足（4）培養(yǎng)基水分過多（5）通氣不良第16頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.8組培苗瘦弱或徒長正常的組培苗應當葉色濃綠，植株粗壯。如果在增殖階段出現(xiàn)芽苗瘦弱，徒長或節(jié)間過長，這種苗應當轉入生根培養(yǎng)時能夠生根，在環(huán)境條件較好的情況下。也會稍轉粗壯，但總體看來，苗的株型，葉色，葉片大小等性狀還是差于生產(chǎn)正常的增殖苗；有時即便是正?；蚪训脑鲋趁?，若生根階段培養(yǎng)基不適宜或培養(yǎng)的環(huán)境條件得不到保障，往往根原基及根還未形成，就很快表現(xiàn)出小苗徒長，節(jié)間明顯伸長，葉片變細，變薄，變嫩并出現(xiàn)黃化。這樣的苗進行過度培養(yǎng)時，會出現(xiàn)萎焉和爛根，很容易死亡，過度成活率極低。第17頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月措施（1）根據(jù)品種特點減少細胞分裂素用量.加速繼代轉瓶的速度，適當降低接種密度。（2）利用空調降低培養(yǎng)室溫度。（3）提高光照強度和延長光照時間，充分利用較強的自然光作光源，調整擺放位置和密度（4）調整培養(yǎng)基硬度，改用透氣膜作封口，進行培養(yǎng)基及環(huán)境因子的綜合調整，力求獲得最優(yōu)質健壯的組培瓶苗。第18頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.9不生根或生根率低在進行組培生產(chǎn)時，經(jīng)常會碰到有的種類長時間不會生根或生根率很低，有時又是平時生根良好的品種突然長根不良或長根時間延長，無論是何種原因導致生根不好，這些苗出瓶后，在過度培養(yǎng)中，都和難再長出新的根系，多數(shù)情況下，這種苗移栽入基質后，不能適應外面的環(huán)境條件，有的很快死亡，有的1~2d后就開始腐爛。第19頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月原因分析（1）種類和品種間的差異（2）激素種類和濃度（3）環(huán)境條件（4）繁殖苗基部受損第20頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月改善措施（1）對于難生根的品種，借鑒相關或相似種類的文獻資料，從激素的種類和水平，環(huán)境條件等方面進行綜合調控。必要時添加有機物或減少鹽分含量調整溫度，光照和通氣狀況，改用濾紙橋進行液體培養(yǎng)。（2）掌握各個種類的操作要領和質量要求，切削繁殖苗基部時，刀要快，用力要均勻，做到平整而無損傷。（3）用于生根的苗，其基部要盡量不帶愈傷組織，以利于提高生根的質量。第21頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.10出瓶過渡苗死亡率高過渡是組織生產(chǎn)的最后一關，也是難度比較大的一個環(huán)節(jié)。是從室內(nèi)各種條件相對可控，向自然環(huán)境轉變的一個過渡時期，稍不小心，就會使組織苗全軍覆滅。有很多組培室能夠大量生產(chǎn)組培瓶苗，但由于過渡技術掌握不好，在過渡環(huán)節(jié)中組培苗死亡率高，而使生產(chǎn)無法正常進行。污染控制和提高過渡成活率是組培生產(chǎn)，特別是大規(guī)模工廠化生產(chǎn)的兩個最關鍵技術，他直接關系到組培室能否生存和發(fā)展。第22頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月主要原因（1）組培苗質量差（2）環(huán)境條件不適（3）過渡苗的管理不精致第23頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月措施（1）有針對性地調整配方，改善培養(yǎng)條件，努力提高組培苗質量，培養(yǎng)葉色濃綠，株型矮壯，生根良好，大小適中，群體整齊的小苗（2）及時出瓶，根據(jù)各個種類和品種的特性，盡快移栽到適宜的培養(yǎng)基質中。清洗和移栽時要盡量小心，不要損傷小苗的葉片和根系，無根小苗可采取蘸取根水或生根粉后移栽，促進組培苗在栽培基質中生根。（3）改善過渡培養(yǎng)的環(huán)境條件，有條件的單位和企業(yè)可采用自控溫室，并配合噴灌使用，能大大提高過渡的成活率，但設備的投入較大。（4）采取配套的管理措施，加強過渡苗的肥水管理和病蟲害防治。（5）加強過渡苗的肥水管理和病蟲害防治。第24頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月5.4.11計劃、生產(chǎn)與銷售環(huán)節(jié)組培苗工廠化生產(chǎn)是一個系統(tǒng)工程，它包括從品種的選擇→外植體選取→滅菌和消毒→初代培養(yǎng)→擴繁和繼代→生根培養(yǎng)→過渡培養(yǎng)→商品苗→銷售→田間栽培等一系列過程，只要其中的任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都會影響到整個生產(chǎn)計劃和任務的完成，所以在制定計劃時要充分考慮到各種可能發(fā)生的情況，同時又不能把余地留的太大，以免生產(chǎn)過多造成浪費和增加成本，或者不能按訂單提供相應的產(chǎn)品。第25頁，課件共28頁，創(chuàng)作于2023年2月實際操作中碰到的問題（1）品種不對路（2）數(shù)量不能滿足市場需求（3）生產(chǎn)過量（4）不能按預定時