化妝品微生物檢驗(yàn)方法

wordword整理版學(xué)習(xí)好幫手學(xué)習(xí)好幫手范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化裝品微生物檢驗(yàn)的根本要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品樣品的采集、保存及供檢樣品制備。儀器和設(shè)備天平。高壓滅菌器。振蕩器。三角瓶，250mL。玻璃珠。琉璃棒?？潭任?，1mL、10mL。研缽或均質(zhì)器。恒溫水浴箱。培育基和試劑生理鹽水成分：氯化鈉 8.5g蒸餾水加至 1000mL溶解后，分裝到加玻璃珠的三角瓶?jī)?nèi)，每瓶90mL，103.43kPa(121℃15lb)20minSCDLP成分：酪蛋白胨17g大豆蛋白胨3g氯化鈉5g磷酸氫二鉀2.5g葡萄糖1g807g蒸餾水1000mLpH7.2～7.3103.43kPa(121℃15lb)20min8025℃左右使用。注：如無(wú)酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。滅菌液體石蠟。80。樣品的采集及留意事項(xiàng)所采集的樣品，應(yīng)具有代表性，一般視每批化裝品數(shù)量大小，隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別從兩個(gè)包裝單位以上的樣品中共取10g10mL20g供檢驗(yàn)樣品，應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有裂開(kāi)，在檢驗(yàn)前不得翻開(kāi)，防止樣品被污染。接到樣品后，應(yīng)馬上登記，編寫(xiě)檢驗(yàn)序號(hào)，并按檢驗(yàn)要求盡快檢驗(yàn)。如不能準(zhǔn)時(shí)檢驗(yàn)，樣品應(yīng)放在室溫陰涼枯燥處，不要冷藏或冷凍。假設(shè)只有一個(gè)樣品而同時(shí)需做多種分析，如細(xì)菌、毒理、化學(xué)等，則宜先取出局部樣品做細(xì)菌檢驗(yàn)，再將剩余樣品做其它分析。在檢驗(yàn)過(guò)程中，從翻開(kāi)包裝到全部檢驗(yàn)操作完畢，均須防止微生物的再污染和集中，所用器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)在無(wú)菌室內(nèi)進(jìn)展，或在相應(yīng)條件下，按無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)展。如檢出糞大腸菌群或其它致病菌，自報(bào)揭露出之日起該菌種及被檢樣品應(yīng)保存一個(gè)月。供檢樣品的制備液體樣品10mL90mL10mL105mL45mL1：1010mL5mL10mL8040℃～44℃水浴1：105.3 固體樣品稱(chēng)取10g，加到90mL滅菌生理鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜置后，取上清液作為1：10的檢液。如有均質(zhì)器，上述水溶性膏、霜、粉劑等，可稱(chēng)10g90mL1min～2min；疏水性膏、10g10mL10mL80,70mL3min～5min。二、菌落總數(shù)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化裝品中菌落總數(shù)的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品菌落總數(shù)的測(cè)定。定義本標(biāo)準(zhǔn)承受以下定義菌落總數(shù)〔Aerobicbacterialcount〕是指化裝品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在肯定條件下培育后〔如培育基成分、培育溫pH值、需氧性質(zhì)等，1g(1mL的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。測(cè)定菌落總數(shù)便于判明樣品被細(xì)菌污染的程度，是對(duì)樣品進(jìn)展衛(wèi)生總評(píng)價(jià)的綜合依據(jù)。儀器和設(shè)備三角瓶，250mL。量筒，200mL。pHpH高壓滅菌器。3.5 試管：15×150mm。9cm。滅菌刻度吸管，10mL、1mL。酒精燈。3.9 恒溫培育箱：36℃±1℃。3.10放大鏡。培育基和試劑3.1。80-養(yǎng)分瓊脂培育基4.2.1成分：蛋白胨20g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂15g卵磷脂1g807g蒸餾水1000mL4.2.2制法：先將卵磷脂加到少量蒸餾水中，加熱溶解，參加吐溫80,將其他成分〔除瓊脂外〕加到其余的蒸餾80pH7.1～7.4,參加瓊脂，103.43kPa(121℃15lb)20min高壓滅菌，儲(chǔ)存于冷暗處備用。0.5%氯化三苯四氮唑〔2,3,5-triphenylterazoliumchloride,TTC〕成分：TTC 0.5g蒸餾水1000mL溶解后過(guò)濾，103.43kPa(121℃15lb)20min4℃冰箱備用。5.操作步驟1：102mL1mL1mL9mL生理鹽水試管中〔留意勿使吸管接觸液面100檢液。吸取2m，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1：1000,1：10000，……等，每種稀釋度應(yīng)更換1支吸管。45℃～50℃8015mL,隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使樣品與培育基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36℃±1℃培育箱內(nèi)培育48h±2h。另取一個(gè)不加樣品的滅菌空平皿，參加約15mL8036℃±1℃48h±2h，為空白比照。為便于區(qū)分化裝品中的顆粒與菌落，可在每100mL801mL0.5TTC有細(xì)菌存在，培育后菌落呈紅色，而化裝品的顆粒顏色無(wú)變化。菌落計(jì)數(shù)方法先用肉眼觀看，點(diǎn)數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大5倍～10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。登記各平皿的菌落數(shù)后，求出同一個(gè)稀釋度各平皿生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。假設(shè)平皿中有連成片狀的菌落或花點(diǎn)樣菌落集中生長(zhǎng)時(shí)，該平皿不宜計(jì)數(shù)。假設(shè)片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以2,以代表全皿菌落數(shù)。菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法30個(gè)～300個(gè)之間的平皿，作為菌落總數(shù)測(cè)定的范圍。當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，即以該平皿菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)〔見(jiàn)表1中例1。30個(gè)～300個(gè)之間，則應(yīng)求出兩菌落總數(shù)之比值來(lái)打算，假設(shè)其比值小于或等于22則報(bào)告其中稀釋度較低的平皿的菌落數(shù)〔見(jiàn)表1中例2及例。假設(shè)全部稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300個(gè)，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之〔見(jiàn)表1中例。假設(shè)全部稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30個(gè)，剛應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之〔見(jiàn)表1中例5。30～300300小于30個(gè)時(shí)，則以30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之〔見(jiàn)表1中例6。假設(shè)全部的稀釋度均無(wú)菌生長(zhǎng)，報(bào)告數(shù)為每gmL10CFU。菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)值報(bào)告之，大于100時(shí)，承受二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，應(yīng)以四舍五入法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面零的個(gè)數(shù)，可用10的指數(shù)來(lái)表示〔見(jiàn)表1報(bào)告方式欄。在報(bào)告菌落數(shù)為“不行計(jì)”時(shí)，應(yīng)注明樣品的稀釋度。例次不同稀釋度平均菌落數(shù)兩稀釋度菌落總數(shù)例次不同稀釋度平均菌落數(shù)兩稀釋度菌落總數(shù)報(bào)告方式10-110-210-3菌數(shù)之比(CFU/mL或CFU/g〕(CFU/mL或CFU/g〕1136516420——16400160001.6×10422760295461.638000380003.8×10432890271602.227100270002.7×1044不行計(jì)4650513——5130005100005.1×105527115——2702702.7×1026不行計(jì)30512——30500310003.1×1047000——＜1×10＜1×10*CFU：菌落形成單位。三、糞大腸菌群范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化裝品中糞大腸菌群的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品中糞大腸菌群的檢驗(yàn)。定義本標(biāo)準(zhǔn)承受以下定義糞大腸菌群〔Fecalcoliforms〕系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，在44℃±0.5℃培育24h～48h能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。該菌直接來(lái)自糞便，是重要的衛(wèi)生指標(biāo)菌。儀器恒溫水浴箱或隔水式恒溫箱：44℃±0.5℃。溫度計(jì)。顯微鏡。載玻片。接種環(huán)。電磁爐。三角瓶，250mL。3.8 試管：15×150mm。小倒管。pHpH高壓滅菌器。滅菌吸管，10mL、1mL。90mm。4.培育基和試劑4.1 雙倍乳糖膽鹽〔含中和劑〕培育基成分：蛋白胨 40g豬膽鹽 10g乳糖 10g0.4%溴甲酚紫水溶液 5mL卵磷脂 2g吐溫80 14g蒸餾水 1000mL80pH7.40.4%溴甲酚紫水溶液，混勻，分裝試管〔每支試管中加一個(gè)小倒管。68.95kPa(115℃10lb)20min高壓滅菌。4.2 伊紅美藍(lán)〔EMB〕瓊脂成分：蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氫二鉀 2g瓊脂 20g2%伊紅水溶液 20mL0.5%美藍(lán)水溶液 13mL蒸餾水 1000mL制法：先將瓊脂加到900mL蒸餾水中，加熱溶解，然后參加磷酸氫二鉀、蛋白胨，混勻，使之溶解。再以蒸餾水1000mL。校正pH7.2～7.4,分裝于三角瓶?jī)?nèi)，103.43kPa(121℃15lb)15min60℃左右無(wú)菌操作參加滅菌的伊紅美藍(lán)溶液，搖勻。傾注平皿備用。蛋白胨水〔做靛基質(zhì)試驗(yàn)用〕成分：蛋白胨〔或胰蛋白胨〕 20g氯化鈉 5g蒸餾水 1000mL制法：將上述成分加熱溶化，調(diào)pH7.0～7.2.分裝小試管，103.43kPa(121℃15lb)15min靛基質(zhì)試劑5g75mL25mL。試驗(yàn)方法：接種細(xì)菌于蛋44℃±0.524h±2h0.3mL～0.5mL，輕搖試管。陽(yáng)性者于試劑層顯深玫瑰紅色。注：蛋白胨應(yīng)含有豐富的色氨酸，每批蛋白胨買(mǎi)來(lái)后，應(yīng)先用菌種鑒定前方可使用。革蘭氏染色液：染液制備結(jié)晶紫染色液：結(jié)晶紫 1g95%乙醇 20mL1%草酸銨水溶液 80mL將結(jié)晶紫溶于乙醇中，然后與草酸銨溶液混合。革蘭氏碘液：碘 1g碘化鉀 2g蒸餾水加至 300mL將碘與碘化鉀先進(jìn)展混合，參加蒸餾水少許，充分振搖，待完全溶解后，再加蒸餾水至300mL。脫色液：95%乙醇。復(fù)染液：沙黃復(fù)染液：沙黃 0.25g95%乙醇 10mL蒸餾水 90mL將沙黃溶解于乙醇中，然后用蒸餾水稀釋。稀石碳酸復(fù)紅液：稱(chēng)取堿性復(fù)紅10g95100mL10mL5%石90mL,混合，即為石碳酸復(fù)紅液。再取此液10mL90mL,即為稀石碳酸復(fù)紅液。染色法將涂片在火焰上固定，滴加結(jié)晶紫染色液，染1min,水洗。滴加革蘭氏碘液，作用1min,水洗。滴加95%乙醇脫色，約30s,或?qū)⒁掖嫉螡M整個(gè)涂片，馬上傾去，再用乙醇滴滿整個(gè)涂片，脫色10s,水洗。滴加復(fù)染液，復(fù)染1min,水洗，待干，鏡檢。染色結(jié)果革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。注：如用1：10稀釋石碳酸復(fù)紅液做復(fù)染，復(fù)染時(shí)間僅需10s。操作步驟10mL1：10稀釋的檢液，加到10mL〔含中和劑〕培育基中，置44℃±0.5℃培育箱中培育24h～48h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為糞大腸菌群陰性。如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種到伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置36℃±1℃培育18h～24h。同時(shí)取該培育液1～2滴接44℃±0.524h±2h。經(jīng)培育后，在上述平板上觀看有無(wú)典型菌落生長(zhǎng)。糞大腸菌群在伊紅美藍(lán)瓊脂培育基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，外表光滑潮濕，常具有金屬光澤。也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為糞大腸菌群，應(yīng)留意選擇。挑取上述可疑菌落，涂片做革蘭氏染色鏡檢。在蛋白胨水培育液中，參加靛基質(zhì)試劑約0.5mL,觀看靛基質(zhì)反響。陽(yáng)性者液面呈玫瑰紅色；陰性反響液面呈試劑本色。檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告依據(jù)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，平板上有典型菌落，并經(jīng)證明為革蘭氏陰性桿菌，靛基質(zhì)試驗(yàn)陽(yáng)性，則可報(bào)告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。四、銅綠假單胞菌范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化裝品中銅綠假單胞菌的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品中銅綠假單胞菌的檢驗(yàn)。定義本標(biāo)準(zhǔn)承受了以下定義銅綠假單胞菌〔Pseudomonasaeruginosa〕屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽(yáng)性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液化明膠，復(fù)原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42℃±1℃條件下能生長(zhǎng)。該菌對(duì)人有致病力，可使傷處化膿，引起敗血癥等。儀器3.1 培育箱：42℃±1℃、36℃±1℃。3.2 三角瓶，250mL。3.3 試管：15×150mm。90mm。滅菌刻度吸管，10mL、1mL。顯微鏡。載玻片。接種針，接種環(huán)。電磁爐。高壓滅菌器。培育基和試劑SCDLP液體培育基3.2。十六烷基三甲基溴化銨培育基成分：牛肉膏3g蛋白胨10g氯化鈉5g十六烷基三甲基溴化銨0.3g瓊脂20g蒸餾水1000mL制法：除瓊脂外，將上述成分混合加熱溶解，調(diào)pH7.4～7.6,參加瓊脂，68.95kPa(115℃10lb)20min后，制成平板備用。乙酰胺培育基成分：乙酰胺 10.0g氯化鈉 5.0g無(wú)水磷酸氫二鉀 1.39g無(wú)水磷酸二氫鉀 0.73g硫酸鎂〔MgSO4.7H2O〕 0.5g酚紅 0.012g瓊脂 20g蒸餾水 1000mL制法：除瓊脂和酚紅外，將其它成分加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH為7.2,參加瓊脂、酚紅，103.43kPa(121℃15lb)20min綠膿菌素測(cè)定用培育基成分：蛋白胨20g氯化鎂1.4g硫酸鉀10g瓊脂18g甘油〔化學(xué)純〕10g蒸餾水1000mLpH至7.4,參加瓊脂和甘油，加熱溶解，分裝于試管內(nèi)，68.95kPa(115℃10lb)20min明膠培育基成分：牛肉膏 3g蛋白胨 5g明膠 120g蒸餾水 1000mL20minpH7.468.95kPa(115℃10lb)20min硝酸鹽蛋白胨水培育基成分：蛋白胨 10g酵母浸膏 3g硝酸鉀 2g亞硝酸鈉 0.5g蒸餾水 1000mLpH為7.2,煮沸過(guò)濾后補(bǔ)足液量，參加硝酸鉀和亞硝酸鈉，溶解混勻，分裝到加有小倒管的試管中，68.95kPa(115℃10lb)20min一般瓊脂斜面培育基成分：蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化鈉 5g瓊脂 15g蒸餾水 1000mLpH為7.～7.4103.43kPa(12℃15lb)20min5.操作步驟增菌培育：取1：1010mL90mLSCDLP36℃±118h～24h。如有銅綠假單胞菌生長(zhǎng)，培育液外表多有一層薄菌膜，培育液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。36℃±1℃培育18h～24h。凡銅綠假單胞菌在此培育基上，其菌落扁平無(wú)定型，向周邊集中或略在集中，外表潮濕，菌落呈灰白色，菌落四周培育基常集中有水溶性色素，此培育基選擇性強(qiáng)，大腸埃希氏菌不能生長(zhǎng)，革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)較差。在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時(shí)也可用乙酰胺培育基進(jìn)展分別，將菌液劃線接種于平板上，置36℃±1℃培育24h±2h染色鏡檢：挑取可疑的菌落，涂片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性者應(yīng)進(jìn)展氧化酶試驗(yàn)。氧化酶試驗(yàn)：取一小塊干凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻璃棒挑取銅綠假單胞菌可疑菌落涂在濾紙上，然后在其上滴加一配制的1%二甲基對(duì)苯二胺試液，在15s～30s之內(nèi)，消滅粉紅色或紫紅色時(shí)，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性；假設(shè)培育物不變色，為氧化酶試驗(yàn)陰性。2～3個(gè)，分別接種在綠膿菌素測(cè)定培育基上，置36℃±1℃培育24h±2h,參加氯仿3mL～5mL1mol/L1mL物中有綠膿菌素存在。36℃±1℃培育24h±2h,觀看結(jié)果。凡在硝酸鹽蛋白胨水培育基內(nèi)的小倒管中有氣體者，即陽(yáng)性，說(shuō)明該菌能復(fù)原硝酸鹽，并將亞硝酸鹽分解產(chǎn)生氮?dú)?。明膠液化試驗(yàn)，取銅綠假單胞菌可疑菌落的純培育物，穿刺接種在明膠培育基內(nèi)，置36℃±1℃培育24h±2h,10min～30min,如仍呈溶解狀或外表溶解時(shí)即為明膠液化試驗(yàn)陽(yáng)性；如凝固不溶者為陰性。4242℃±1℃培育箱24h～48h,銅綠假單胞菌能生長(zhǎng)，為陽(yáng)性，而近似的熒光假單胞菌則不能生長(zhǎng)。6.檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告被檢樣品經(jīng)增菌分別培育后，經(jīng)證明為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗(yàn)皆為陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌；如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽復(fù)原產(chǎn)氣和42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。五、金黃色葡萄球菌范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化裝品中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)。定義本標(biāo)準(zhǔn)承受以下定義金黃色葡萄球菌〔Staphylococcusaureus〕為革蘭氏陽(yáng)性球菌，呈葡萄狀排列，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽(yáng)性。該菌是葡萄球菌中對(duì)人類(lèi)致病力最強(qiáng)的一種，能引起人體局部化膿性病灶，嚴(yán)峻時(shí)可導(dǎo)致敗血癥。儀器和設(shè)備顯微鏡。3.2 恒溫培育箱：36℃±1℃。離心機(jī)。滅菌吸管，1mL、10mL。滅菌試管：15×150mm。載玻片。酒精燈。培育基和試劑SCDLP3.2。7.5%的氯化鈉肉湯成分：蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化鈉 75g蒸餾水加至 1000mL制法：將上述成分加熱溶解，調(diào)pH7.4,分裝，103.43kPa(121℃15lb)15min高壓滅菌。BairdParker氏培育基成分：胰蛋白胨 10g牛肉膏 5g酵母浸膏 1g丙酮酸鈉 10g甘氨酸 12g氯化鋰〔LiCl·6H2O〕 5g瓊脂 20g蒸餾水 950mLpH7.0±0.2增菌劑的配制：3050mL110mL25℃±1℃校正pH95mL,103.43kPa(121℃15lb)15min95mL505mL，搖勻后傾注平板。培育基應(yīng)是致密不透亮的。使用前在冰箱貯存不得超過(guò)48h±2h。血瓊脂培育基成分：養(yǎng)分瓊脂 100mL脫纖維羊血〔或兔血〕 10mL制法：將養(yǎng)分瓊脂加熱溶化，待冷至50℃左右無(wú)菌操作參加脫纖維羊血，搖勻，制成平板，置冰箱內(nèi)備用。甘露醇發(fā)酵培育基成分：蛋白胨10g氯化鈉5g甘露醇10g牛肉膏5g0.2%麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1000mL制法：將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH7.4，參加甘露醇和指示劑，混勻后分裝試管中，68.95kPa(115℃10lb)20min兔〔人〕血漿制備3.8%檸檬酸鈉溶液，103.43kPa(121℃15lb)30min1〔人42023rpm～3000rpm3min～5min。血球下沉，取上面血漿。操作步驟1：1090mLSCDLP36℃±1℃24h±2h。7.5%氯化鈉肉湯。1～2BairdParker接種到血瓊脂平板，置36℃±1℃培育箱培育24h～48h光滑，四周有溶血圈。在BairdParker氏培育基上為圓形，光滑，凸起，潮濕，直徑2mm～3mm,顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，四周為一混濁帶，在其外層有一透亮帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹(shù)膠的軟度。偶然會(huì)遇到非脂肪溶解的類(lèi)似菌落，但無(wú)混濁帶及透亮帶。挑取單個(gè)菌落分純?cè)谘傊桨迳?，?6℃±124h±2h。染色鏡檢：挑取分純菌落，涂片，進(jìn)展革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性菌，排列成葡萄狀，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為0.5μm～1μm。甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述分純菌落接種到甘露醇發(fā)酵培育基中，在培育基液面上參加2mm～3mm高的滅菌液36℃±124h±2h,金黃色葡萄球菌應(yīng)能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。血漿凝固酶試驗(yàn)：吸取1：40.5mL,放入滅菌小試管中，參加待檢菌24h±2h0.5mL?；靹?，放36℃±1℃恒溫箱或恒溫水浴中，每半個(gè)小時(shí)觀看一次，6h之內(nèi)如呈現(xiàn)凝塊即為陽(yáng)性。同時(shí)以血漿凝固酶陽(yáng)性和陰性菌株肉湯培育物及肉湯培育基各0.5mL1：40.5mL,混勻，