腸桿菌科-志賀氏菌屬（微生物檢驗技術課件）

志賀菌屬細菌鑒定1掌握志賀菌屬細菌主要的生物學性狀23學習目標熟悉志賀菌屬細菌臨床意義掌握志賀菌屬細菌微生物學檢驗志賀菌屬概述志賀菌屬是主要的腸道致病菌之一，是引起人類細菌性痢疾的病原體。在伯杰手冊（1984）中將志賀菌分為4個血清群：A群為痢疾志賀菌，B群為福氏志賀菌，C群為鮑氏志賀菌，D群為宋內(nèi)志賀菌。一、生物學性狀：形態(tài)與染色G-

短桿菌，無鞭毛，無莢膜，有

菌毛，不形成芽胞。志賀菌屬細菌鑒定福氏志賀菌純培養(yǎng)鏡下染色形態(tài)志賀菌屬細菌鑒定2.培養(yǎng)特性兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，因不發(fā)酵乳糖，在腸道選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落（宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵）。福氏志賀菌在SS平板上及中國藍平板上的無色菌落3.生化反應氧化酶陰性，不分解乳糖（宋內(nèi)遲緩分解），分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，A群不分解甘露醇、D群β-半乳糖苷酶+、鳥氨酸脫羧酶試驗陽性。

B．宋內(nèi)志賀菌C.對照KA--

KIA斜面底層產(chǎn)氣

H2S志賀菌屬細菌鑒定MIU-+-

3.生化反應葡乳甘IMRVPC苯丙U硝賴鳥氨對+-+++----+-+-志賀菌屬細菌鑒定IMViC＋＋－－O抗原是分類的依據(jù)，O抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原。志賀菌分為4個血清群，44個血清型。5.抵抗力：較弱，對酸敏感。4.抗原結(jié)構只有O、K抗原，無H抗原。志賀菌屬細菌鑒定（一）致病物質(zhì)——普通菌毛，黏附于腸粘膜上皮細胞，引起炎癥反應定植因子內(nèi)毒素外毒素（Vero毒素）毒素

二、臨床意義

志賀菌屬細菌鑒定腸毒素性神經(jīng)毒性細胞毒性（二）所致疾病細菌性痢疾急、慢性菌痢中毒性菌痢帶菌者三、微生物學檢驗志賀菌屬細菌鑒定（一）檢驗程序（二）檢驗方法1.分離培養(yǎng)：SS平板和中國藍平板。志賀菌屬細菌鑒定SS平板：無色菌落；中國蘭：無色菌落2.鑒定：G-桿菌無芽胞、氧化酶陰性（1）初步鑒定：用KIA和MIU。將在KIA上出現(xiàn)KA--，MIU上出現(xiàn)-+/--，進一步鑒定到屬和種（生化、血清學試驗）。志賀菌屬細菌鑒定KA--

KIA斜面底層產(chǎn)氣

H2SMIU-+/--

（2）最終鑒定：全面生化反應和血清學試驗。2.鑒定：A群：甘露醇-;D群β-半乳糖苷酶+，鳥氨酸+。志賀菌屬細菌鑒定志賀菌屬細菌鑒定血清學試驗生理鹽水對照-志賀多價血清+宋內(nèi)血清+

3.鑒別試驗：（1）志賀菌屬與大腸埃希菌的鑒別，志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關性很高，尤其是與EIEC在生化特征上難以鑒別，在血清學上有交叉反應。下述特性有助于鑒定志賀菌種：①無動力，賴氨酸陰性；②發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外）；

③醋酸鈉-、葡萄糖銨-、粘質(zhì)酸鹽-。志賀菌屬細菌鑒定（2）與類志賀鄰單胞菌鑒別：可用動力和氧化酶試驗加以鑒別，志賀菌屬均為陰性，而類志賀鄰單胞菌為陽性。

（3）與傷寒沙門菌鑒別：傷寒沙門菌在KIA培養(yǎng)基上的表現(xiàn)與志賀菌相似，鑒別點是傷寒沙門菌硫化氫和動力陽性，能與沙門菌屬因子血清（OA-F、O9、Vi）凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集。志賀菌屬細菌鑒定（4）血清學鑒定：凡生化反應符合志賀菌屬者均需作血清學鑒定，可先用志賀菌屬4種多價血清作玻片凝集試驗，凝集者再進一步作定型鑒定。我國現(xiàn)有的定群及定型診斷血清包括痢疾志賀菌1型和2型血清，福氏志賀菌(1～6型)血清，鮑特志賀菌(1～6型)和宋內(nèi)志賀菌血清。

在國內(nèi)各地報告的志賀菌屬感染以（B群）福氏志賀菌為多見，約占總數(shù)的70％以上，其次為（D群）宋內(nèi)志賀菌及A群2型。在B群中又以1b、2a及3型居多。志賀菌屬細菌鑒定志賀菌屬細菌鑒定依據(jù)在腸道選擇平板上為不發(fā)酵乳糖的無色菌落（宋內(nèi)志賀菌培養(yǎng)48~72小時為有色菌落，遲緩發(fā)酵乳糖）G-桿菌、無芽胞、散在排列K