血清鈣Ca比色法測定

血清鈣Ca比色法測定1檢驗?zāi)康闹笇?dǎo)本室工作人員規(guī)范操作本檢測項目，確保檢測結(jié)果的準確。2實驗原理在堿性條件下，加入8-羥基喹啉能防止鎂和鐵的干擾鈣離子的測定情況下，Ca2+和鄰甲酚酞絡(luò)合酮形成紫色復(fù)合物鈣+O-CPC堿性環(huán)境鈣－O-CPC復(fù)合物其鈣離子與鄰甲酚酞絡(luò)合酮復(fù)合物的顏色與鈣濃度成正比，可用利用其吸光度的變化來測定鈣離子的含量。3標本采集3.1病人準備：無特殊要求。3.2類型：血清、肝素血漿或尿液。3.3標本存放：血清/血漿穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定7天；4～8℃保存可穩(wěn)定3周；-20℃保存可穩(wěn)定8個月。尿液穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定4天；-20℃保存可穩(wěn)定3個月；對24h尿液標本加濃鹽酸10ml，并加熱標本，使草酸鈣溶解。3.4標本運輸：室溫條件下運輸3.5標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。4.實驗材料：4.1試劑：上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司CA試劑盒,國械注進20142405056YZB/GER5724-2014）4.1.1試劑組成R1氨基乙醇緩沖液:1mol/L，pH10.6R2鄰甲酚酞絡(luò)合酮:0.3mmol/L;8－羥基喹啉:13.8mmol/L;鹽酸:122mmol/L4.1.2試劑準備：試劑為即用式。4.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：15－25°C下保存期限：見試劑標簽上的有效期機上穩(wěn)定期：42天。4.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。4.2校準品：使用羅氏多項生化校準品提供的Ca校準品對自動分析儀進行校準。4.3質(zhì)控品：使用正常值、病理值復(fù)合控制品。5儀器AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀。6操作步驟6.1樣品的準備：將標好號的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位置。6.2試劑的檢測：儀器開機后，檢查各種試劑的位置，體積等確認無誤后方可進行測定。6.3項目基本參數(shù)：參見生化檢驗AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀項目測定參數(shù)。6.4儀器操作步驟：參見生化檢驗AU2700生化分析儀，羅氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀，東芝TBA-120生化分析儀操作規(guī)程。7質(zhì)量控制在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。8計算方法以Ca復(fù)合校準品校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以mmol/L報告。9參考值范圍血清/血漿：2.15-2.55mmol/L尿液：2.5-8.0mmol/24h（注：各實驗室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。我室參考值2.11-2.70mmol/L10臨床意義鈣測量用于診斷和治療副甲狀腺病，某些骨病，慢性腎病和手足抽搐（間歇性肌肉收縮或痙攣）等。盡管體內(nèi)超過99%的鈣存在于骨骼和牙齒，臨床上最關(guān)心血液里的鈣。骨骼作為一個儲存器，通過釋放鈣防止低血鈣和吸收鈣防止血清鈣水平過高，保持血清鈣的相對穩(wěn)定。飲食中鈣的含量增加，吸收鈣的百分比就減少，因此，吸收鈣的數(shù)量能夠保持相對穩(wěn)定。在高鈣飲食中鈣吸收的輕微增加被反映在增加的腎排泄中。鈣在許多細胞功能中起著重要作用，細胞內(nèi)如肌肉收縮和糖原代謝，細胞外如骨鈣化、凝血以及神經(jīng)沖動傳遞。血漿鈣有三種不同的形式：游離離子、和蛋白結(jié)合以及與陰離子（如磷酸根、檸檬酸根和碳酸氫根等）形成復(fù)合物。總鈣水平的降低與多種疾病有關(guān)，如骨病（尤其是骨質(zhì)疏松癥），腎?。ㄌ貏e是透析患者），腸道吸收不良以及甲狀腺功能減退?？傗}水平升高為甲狀旁腺機能亢進，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤及肉瘤樣惡性病變。在預(yù)防骨質(zhì)疏松進行鈣的補充時，鈣的檢測有助于臨床監(jiān)控。11操作性能11.1線性范圍：血清/血漿：0.05-5.00mmol/L(0.2-20mg/dL)；尿液：0.12-12mmol/L(0.48-48mg/dL)。11.2按照內(nèi)部協(xié)議使用人樣本和質(zhì)控品檢測其可重復(fù)性。血清/血漿：重復(fù)性（n=21），中間精密度（每批3管，每天1批，21天）；尿液：重復(fù)性（n=21），中間精密度（每批3管，每天1批，21天）；下面為得到的結(jié)果：血清/血漿重復(fù)性批間精密度均值mmol/L，mg/dL變異系數(shù)均值mmol/L，mg/dL變異系數(shù)PrecinormU2.28，9.170.72.27，9.121.6PrecipathU3.30，13.260.43.27，13.130.8人血清2.11，8.480.92.09，8.381.5尿液重復(fù)性批間精密度均值mmol/L，mg/dL變異系數(shù)均值mmol/L，mg/dL變異系數(shù)PrecinormU1.52，6.111.21.50，6.011.6PrecipathU2.68，10.770.92.67，10.731.1人血清3.56，14.280.83.48，13.961.2重復(fù)性=批內(nèi)精密度批間精密度=總精密度/批間精密度/天間精密度12超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為5.0mmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1：4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5。13病危報警值的處理當血清鈣測定值>3.4mmol/L或<1.6mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。14方法局限性14.1準則：回收率應(yīng)在初始值±10%以內(nèi)。14.2黃疸：I指數(shù)低于60（結(jié)合膽紅素和游離膽紅素濃度約為1026μmol/L（60mg/dL））沒有明顯干擾。14.3溶血：H指數(shù)低于1000（血紅蛋白濃度約為621μmol/L(1000mg/dL)）沒有明顯干擾。14.4脂血：L指數(shù)低于1000沒有明顯干擾。脂血混濁的濁度和甘油三酯間相關(guān)性很差。14.5其他：靜脈注射MRI（磁共振）檢查造影藥物，內(nèi)含絡(luò)合復(fù)合物，會影響鈣的測定。釓二胺（GdDTPA-BMA）用藥后，將會出現(xiàn)鈣的直線下降。請注意廠商關(guān)于對比條件的保持時間的說明。沒有發(fā)現(xiàn)使用普通劑量的治療藥物濃度存在干擾，但是含有鍶鹽的藥物可能會導(dǎo)致鈣的測量結(jié)果顯著上升。14.6血清及血漿應(yīng)盡快從血細胞中分離，因為長期與血塊接觸可能會導(dǎo)致鈣值降低。病人的血清加入EDTA（高鈣血癥的治療）后不宜分析，因為EDTA會與鈣螯合使之無法與鄰甲酚酞絡(luò)合酮反應(yīng)。儲存或冷凍后，鈣與纖維蛋白（例如肝素血漿）、血脂或變性蛋白會聯(lián)合沉淀14.7在極少數(shù)γ-球蛋白病，尤其是IgM型（Waldenstr?m’s巨球蛋白血癥）病例中，可產(chǎn)生不可信的結(jié)果。14.8尿液含有鍶鹽的藥物可能會導(dǎo)致鈣的測量結(jié)果顯著上升。15補救措施當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進