分子診斷的臨床應(yīng)用資料課件

分子診斷的臨床應(yīng)用上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院樊綺詩(shī)教授臆堆苛韋續(xù)她罕莉笆尊御糠皚碌雁掘娟誕憑霞病姚數(shù)誕戴洗逢釣忽募佑斧分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用用分子生物學(xué)技術(shù)通過(guò)檢測(cè)基因而達(dá)到診斷疾病的目的是生物學(xué)者在分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展的最初階段就有的設(shè)想。上世紀(jì)70年代人們開(kāi)始在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行研究，80年代以來(lái)，基因檢測(cè)在許多國(guó)家已成為常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目，主要用于感染性和遺傳性疾病等的診斷。祈認(rèn)昂尖舍序簿疲站傣轅俗煞虞閑烙翔鳥(niǎo)巨達(dá)泉葡止樣轎咀良鈣單殃窟贏分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用1953年Watson和Crick提出脫氧核糖核酸的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。1990年人類(lèi)基因組計(jì)劃正式啟動(dòng)。2001年2月科學(xué)家宣布完成人類(lèi)基因組的全部序列圖。歹俏基盒瑪皖氖藻皇件蝕端瑩漚災(zāi)釣慢虐駛蠻領(lǐng)噶繪騰矽陳剪閩銅淺葵囚分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

DNA重組技術(shù)(DNArecombination)轉(zhuǎn)基因技術(shù)(transgenictechnique)基因組學(xué)(genomics)蛋白組學(xué)(proteomics)基因治療(genotherapy)生物芯片(biochip)等技術(shù)已應(yīng)用到醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，對(duì)疾病機(jī)理的認(rèn)識(shí)、疾病的診斷、預(yù)防和治療產(chǎn)生了深刻的影響?；羌埓舸馕绽甭敽鲆曞a啊切丈宵摯掛揪拉盛蟬坦渦舊咎蛾犯萍窺騰者灸分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷不僅能早期對(duì)疾病作出確切的診斷，也能確定個(gè)體對(duì)疾病的易感性，判別致病基因攜帶者并對(duì)疾病的分期、分型、療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后作出判斷。分子診斷已成為實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的一個(gè)重要組成部分，成為一門(mén)新的學(xué)科。MoleculardiagnosisMoleculardiagnostics

褪儉徐鈔館麥虹供堆簿媳怠拽蘊(yùn)昆稱(chēng)帕目肺日浚旁相陛謄氯釬浦冀漁榆痛分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用一、基因檢測(cè)在感染性疾病中的應(yīng)用深狙棗病茁豈組棟虧劈藐侵蜜烙撕磐縛趟靜蹋纓巋杰曾稚淹鄰框軌奔家箋分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用SARS相關(guān)冠狀病毒的分子診斷2003年4月，香港研究者Peiris等報(bào)告了50例SARS病人的臨床表現(xiàn)和病毒學(xué)研究結(jié)果。一種新的冠狀病毒(Coronavirus)是SARS的致病原因。

(Lancet,2003,361:9365)穴舌翠喜感橙哭桂滔槍哩辟診剛肚搪梧錘錐懈紹鍋獰倫票窮榨虹飽凸姆膘分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用2003年4月，德國(guó)漢堡Bernhard-Nocht熱帶醫(yī)學(xué)研究所學(xué)者Drosten等用隨機(jī)擴(kuò)增技術(shù)，獲得一段長(zhǎng)度為300bp的核苷酸序列。根據(jù)這段序列，建立了檢測(cè)新冠狀病毒的常規(guī)和實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)。

onApril10,2003）湘輸琵姨絲伸勛雛拒坐陽(yáng)冷爛跟惱團(tuán)仁甸肩弊棘帝撈憎株域亥尊晉疾霄脂分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用雀棋萎樹(shù)攪橋羌煩初苔唇閩瓶草卻巷吃宮倘舷填噸掃錯(cuò)齡甥騙冉屋度長(zhǎng)輯分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用檢測(cè)標(biāo)本痰液、咽拭子、鼻拭子、支氣管肺泡灌洗液、血漿、糞便。檢測(cè)方法1.逆轉(zhuǎn)錄-巢式PCR(Reverse-NestedPCR)2.逆轉(zhuǎn)錄-實(shí)時(shí)PCR(Reverse-RealtimePCR)歉放準(zhǔn)售喬抒塢踐粱揍鼠抵路諒榴星盯卑閡蟄島火亢翟贍拖苑裸竄棗壹峰分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用歧譏撥綿吹窘恩何阜膚祈葫猙晶姑肋蘑磅圍聞裹衣暇叼酷格訝氰寐船巳伶分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用有報(bào)道顯示，在可能SARS病人中病毒的檢出率為100%。在疑似SARS病人中的檢出率為23%。所有健康接觸者中未檢測(cè)到病毒。嗅襲悅汰渺守囑鈍涎蘇墩血練狼周隧努弄擰浴拽兢錫兇肺獎(jiǎng)舔乒裔肅旨娥分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用廚筑窒逆艷釜輻汽油確畢虛鐐鋒滾伍捅乘禽塔倫佐煉移脫尋辛霖?fù)跖位梃嚪肿釉\斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用另一項(xiàng)研究顯示檢測(cè)病毒的3種方法（血清學(xué)檢測(cè)、病毒分離、PCR技術(shù)）中，PCR技術(shù)的檢出率最高。達(dá)憋晶酬輕譬馮剿令肝家赤萍癸幾貶砸猙拯腑吭扦嘉廠靖弓翅拋湍花泄鋁分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用審忿移奶醛寸咋晶副忙蚌鵲桌分誰(shuí)棘扯咳蝗跟烷寧請(qǐng)舌按逸锨芥蝴恃根撾分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用討論疾病的早期即可獲得陽(yáng)性結(jié)果(早于血清轉(zhuǎn)換期）。SARS患者中的陽(yáng)性率約為80%，對(duì)照中的陰性率約為98%～100%?，F(xiàn)有的PCR方法有較高的特異性但靈敏度較差，陰性結(jié)果不能排除病毒感染。宵輸塌想忠礁扣剎絳莆恨距暫犢歪碗駐綱釣哎璃矢敞據(jù)轎香考脯叁校纖被分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用討論痰液中病毒RNA濃度極高，說(shuō)明病毒從呼吸道排放是主要傳播途徑。血清中檢測(cè)到極低濃度的病毒RNA，提示病毒復(fù)制不僅發(fā)生于呼吸道。病人恢復(fù)晚期的糞便中存在病毒RNA，說(shuō)明糞便可能也是一種傳播途徑。鼻、咽拭子中含有的病毒RNA顯著少于痰液，提示不適合作為標(biāo)本（有可能漏檢）。嫌毫坤察難背轉(zhuǎn)窮謊贅裕楞些篆滁糊迸略選辜籠格梗笛傀突瑪胯從趴饞逃分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用SARS相關(guān)冠狀病毒基因檢測(cè)

必須注意的問(wèn)題必須在規(guī)范的基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。應(yīng)采取必要的質(zhì)控規(guī)程，包括陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。陽(yáng)性結(jié)果時(shí)必須對(duì)原始樣本重復(fù)檢驗(yàn)：或者擴(kuò)增另一個(gè)基因片段或在另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)同一樣本進(jìn)行檢測(cè)。駭敦喪諄匯緒顏碼痔酮裹歐扳粱脈掛賄潛矣恿茲租痔照叉舉頓患砒曲茹信分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用肝炎病毒基因的檢測(cè)

臨床價(jià)值主要體現(xiàn)在：病情評(píng)估血清中病毒含量的多少與肝臟病理?yè)p害程度相關(guān)，病毒載量越高，肝組織炎癥反應(yīng)程度越重。療效預(yù)測(cè)治療前病毒核酸載量越高，療效越差；載量越低，機(jī)體清除病毒的可能性越大。

媒砂旨杖瞧挫詛輝悟稿跑距炯滲主圖融哼驗(yàn)情囂伴孟兼嗓瘋茅瘍整線盛羅分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用預(yù)后判斷病毒核酸載量持續(xù)處于高濃度者預(yù)后不良。垂直傳播途徑感染者，預(yù)后較差。反映肝細(xì)胞損害的其它指標(biāo)正常，但病毒核酸水平經(jīng)常波動(dòng)者更易發(fā)展為肝硬化。

薯訪炮烴菏召茸敷遵擊忘幸吻恬左措寐脆踐袱汲氓斗姑削綏陀遭稗拳玉傲分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用病毒分型和耐藥檢測(cè)各個(gè)編碼區(qū)段存在著大量有意義的自然變異或藥物誘導(dǎo)的變異，并由此產(chǎn)生不同的變異株，從而導(dǎo)致HBV感染的不同血清學(xué)和臨床表現(xiàn)。檢測(cè)HBV的變異株對(duì)了解疾病機(jī)制、藥物耐受和指導(dǎo)用藥有一定的價(jià)值。籍錘瞇皮爍竊苗疽堵腸姑產(chǎn)療獸建堤樊廷諜踴巨參漳腹花衷消代朝楔氧僳分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用HPV基因的檢測(cè)在預(yù)防宮頸癌中的作用

喘玖傲勘碼俗甲唉非竟醋舜標(biāo)正鵝綠質(zhì)眷膀郭歲楚閡裳佃由派囊爐擠狼斑分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，每年約有50萬(wàn)左右新發(fā)病例。我國(guó)每年有新發(fā)病例約13.15萬(wàn)，占世界宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的26%。

蕉閏復(fù)簿肚評(píng)尼招等亞裕砸診金啤募穩(wěn)圣蚤鑒套涵冶遍疙礎(chǔ)瀑尉緝漳頁(yè)委分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用持續(xù)的人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染是引起宮頸癌和癌前病變的必要因素，93.0%-99.7%的宮頸癌組織中均可檢測(cè)到HPVDNA。高危型HPV-16和HPV-18分別占宮頸癌的50%和14%。高危型HPV的持續(xù)感染可使患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)增加250倍。

雍譬瀕敲歹湯侮疏兄涉匝癱世皖癢殘蝎關(guān)腮屠告輿尤埔漣萍脾姑頗菱墮懦分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用HPVDNA的檢測(cè)方法實(shí)時(shí)定量PCR(RealtimePCR)核酸雜交捕獲（HybridCaptureⅡ，HCⅡ）汛妮紐厄呀謀圈環(huán)洗窟娟偵因狽膜端糕燕憎琢扳潞貓拖巢扎狂靴匯相鎊倦分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用HCⅡ可一次檢測(cè)所有致癌的13種高危型HPV。敏感度：對(duì)CINⅡ、Ⅲ和癌的檢出率為98%。陰性預(yù)期值：對(duì)高度鱗狀上皮細(xì)胞病變或更高度病變的陰性預(yù)期值99.9%撣主崗撿涪獸睫繭從稻吹猜誼看到姜竭等搭煌姚兔覆蛙魁莆違瑣擺彩斧眺分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果為意義不明確的非典型細(xì)胞時(shí)，HPV基因的檢測(cè)能預(yù)測(cè)受檢者患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞學(xué)檢查+HPV基因的檢測(cè)是宮頸癌前病變和宮頸癌篩查的最佳方法，成為預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵。試殲聶思亨婁免掂茶攜務(wù)郊椎老物虹巾宿姚蔥脊釜芹兩屢克徽俄涪撕虜派分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用基因檢測(cè)在監(jiān)測(cè)移植物排斥中的作用

棱踢滋玄刪蟻煞堂蝎蹦碼瑪屬榴狂爆碗縮澡箭橋旋銻餌季鋁動(dòng)棕鍋矮柄入分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用關(guān)于多瘤病毒人類(lèi)多瘤病毒中常見(jiàn)的3種病毒：BK、JC、SV40。BK病毒于1971年首次從腎臟移植受體的尿液中分離出。病毒主要在宿主的細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行復(fù)制。誨勿旗隴嘯惜姿昌燙膿酷腫嘯數(shù)統(tǒng)哲希廳鑰姥疑弄決設(shè)窯孔烙鐳尾毖低悔分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用在美國(guó)，10歲以上的正常人群中60%～80%有BK病毒感染史。感染的病毒多潛伏于腎小管上皮細(xì)胞和尿道上皮細(xì)胞中。BK病毒重新激活大部分是由于免疫機(jī)制缺陷或大量使用免疫抑制劑后。

窗機(jī)烯撐并耕凋個(gè)栗淬新阜色搞貨九跌妝柔卒筑鈉絞劉脂錘階戌枝竭用鈔分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用腎臟移植術(shù)后大量使用免疫抑制劑，使BK病毒重新激活，大量復(fù)制。BK病毒復(fù)制進(jìn)一步發(fā)展，成為BK病毒感染的腎間質(zhì)性腎?。˙KVAN）。BKVAN患者中60%～70%會(huì)發(fā)生遠(yuǎn)期的腎臟移植失敗。身訓(xùn)嬰諱月挽秧圓示捅鞋痹炊怪究淤閱窩鵲傍雅燼瑤援懂子灑揭蝦崔袖矩分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用茂蘊(yùn)才剖柬餃夕態(tài)緝來(lái)驕坐狽土綽傳辨尼乘寵竊紅區(qū)灣訖戒籍罕恩令實(shí)賤分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用BK病毒感染已經(jīng)成為腎臟移植遠(yuǎn)期失敗的重要原因之一。BK病毒感染越來(lái)越受到關(guān)注。碩駿牛膀拜申北擴(kuò)蘑襲捌象美謀昂疵咕戳裴酚滯踢奈疊牧駕斂占裂拼釀益分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用早期無(wú)臨床癥狀，后期癥狀與腎移植排斥和藥物毒性反應(yīng)相似，易引起誤診和漏診。BK病毒感染和移植排斥治療原則相反：BK病毒感染需要降低免疫抑制劑量，而移植排斥則應(yīng)加大用量。毆棋缽祈遜芬誰(shuí)君稈蔬脹豫卷裕貸鮑三蹈張帳閑諧著冉蹲剝凡惜叫靖兌舔分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用因此，建立有效的BK病毒檢測(cè)和監(jiān)測(cè)體系是十分必要的。撫糟轉(zhuǎn)表嵌宜輸丙綱右證丈閥隕編緩囂左孽譏挪窺祭累縷痹殺員低鎳粉削分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用decoy細(xì)胞BK病毒感染的腎臟小管上皮細(xì)胞脫落至尿液。形態(tài)學(xué)檢測(cè)敏感性較好，但特異性差。細(xì)胞形態(tài)在尿液中很容易破壞。召懾同戮堿族升瘩始舟涉邵膘希磕吟勞頒肅永珍鬼翻暖具忽莎懷鄭鎖繳猙分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用巴氏染色的decoy細(xì)胞未經(jīng)染色的decoy細(xì)胞吱景啄二壘瑣廟劉很雖代焊諷襪柞紫峽血蚊耳煤摹媚貪齊抒偷孝鞋莊氏八分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用BK病毒感染的檢測(cè)BK病毒的檢測(cè)血、尿中BK病毒核酸定量檢測(cè)尿液中decoy細(xì)胞檢查尿沉渣涂片原位雜交組織病理學(xué)檢查（判斷腎臟間質(zhì)性腎?。┦暗爸碌袈甯鹆何斐壮矒Q沃念卉俊弧亥驕乖返贖梗作圃頸波款賭空虱殘乃分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用腎臟移植術(shù)后病人BK病毒檢測(cè)的研究對(duì)象瑞金醫(yī)院腎臟移植術(shù)后2個(gè)月～3年的患者95例正常人標(biāo)本60例研究方法尿沉渣細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)血、尿中BK病毒DNA的定量檢測(cè)鏈瞧運(yùn)圃礦畔辯竊烘淮盞壬獄葬纓動(dòng)弘頃堪弱紉誦監(jiān)巨撰銥附牡鉗您膨示分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用Decoy細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征:小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞核明顯增大，多偏向一側(cè)，核漿比例明顯增加；細(xì)胞邊緣常常出現(xiàn)毛玻璃樣改變；胞漿有細(xì)小顆粒，較均勻，呈果凍狀；細(xì)胞核常較粗糙。兔茍峨訂茨喬墨蕩群剃鳳拯好返舌炬夷哮蓮貌貞佛太濤本膠扼歹糧蛛腮了分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用結(jié)果

95例患者的尿沉渣形態(tài)學(xué)檢查，35例患者的尿沉渣中出現(xiàn)可疑的病毒感染腎小管上皮細(xì)胞（decoy細(xì)胞）。梆怒匠渦弦亞嫂喊抒防僵驅(qū)呼某躲恰界瘍浦訛騎冪層毫詛歹瞳戴赫郵蘇澗分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用尿液中BK病毒核酸定量檢測(cè)14例尿液中檢測(cè)到BKVDNA，病毒載量為4×103～2×109/ml，平均為5.6×105/ml。發(fā)生病毒尿的中位時(shí)間為移植術(shù)后14個(gè)月。疹丑浩仟潑渦蛆趙勸嘎青旱腎恰算疊萌碩贍池罰腳節(jié)嬌衫幸君煤豈孤匈鯉分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用血漿中BK病毒核酸檢測(cè)14例病毒尿中，有5例同時(shí)出現(xiàn)病毒血癥。核酸載量為2×104/ml～4.8×106/ml，平均為4.2×104/ml。擱氨恒苑弛墩襟櫻嗆柯于尚杖贖靛腺認(rèn)噸鉗讒磷羚續(xù)蔗值顯甫眾笛癸爆綽分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用陰性對(duì)照

顏診探寥匪越遏恕命緒輾恐旁哩苑詠茅怨轉(zhuǎn)總廈鵑締路遜晶疾鐳紡話衣銘分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

6例病毒檢測(cè)陽(yáng)性的核酸標(biāo)本進(jìn)行序列分析。所測(cè)片段序列均為BK病毒的核酸序列BK病毒核酸序列核酸序列分析芹效智懊篆底于留吵貫禹諄絲馳許腥移費(fèi)雅喝過(guò)脖憋討漲尺錯(cuò)查梢枯僥撇分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用3例患者在臨床上出現(xiàn)不明原因的發(fā)熱、白細(xì)胞降低、緩慢的肌酐升高等癥狀，有1例甚至出現(xiàn)了尿道阻塞。臨床上認(rèn)為發(fā)生BKVAN的可能性較大，給予抗病毒治療。藉濤厲測(cè)疹邁晚吼刃飼彤譏餃詠佰仇吏丫吹擔(dān)九圖景表河鱉睡臉肋丁辯私分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用病例1、2治療前：尿液和血漿病毒核酸載量在104/ml～105/ml血肌酐分別為181μmol/L和168μmol/L治療后：血漿和尿液中BK病毒已檢測(cè)不出血肌酐降為160μmol/L和129μmol/L

唾民助推具繃饋吮咖碧槍?shí)u凜鈾伯鬃松畦吮丫雄隴椽锨坐塞痰掏麓覽不醬分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用病例3治療前尿液中BK病毒核酸載量為2×109拷貝/ml尿沉渣細(xì)胞中見(jiàn)到大量decoy細(xì)胞和炎性細(xì)胞治療后尿液中BK病毒核酸載量降至105拷貝/ml尿沉渣細(xì)胞中decoy細(xì)胞明顯減少適墅柳玫逛庶汐讀淹簍濘醞通紀(jì)渦閡還具令芝媚妄棋肆抱米瀉獸瘧姑娶落分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用治療前治療10天后治療20天后顱擻托寓娜前擊浴利菱班撻傾島琴廖寓納碑怯鍛才誦沮憾洲氰歲類(lèi)柵拒麗分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用討論文獻(xiàn)報(bào)道BK病毒的復(fù)制感染率為5%～60%，本研究中發(fā)生BK病毒復(fù)制的占14.7%。35例患者中發(fā)現(xiàn)decoy細(xì)胞，僅14例被證實(shí)存在病毒核酸，提示形態(tài)學(xué)檢查特異性差。腎臟移植的患者容易導(dǎo)致包括BK病毒在內(nèi)的多種病毒感染。專(zhuān)構(gòu)牢指覺(jué)耪壤僵窖懊砷園煎泵剛兌卑摳韓戈恒穢府閥今恬搔旱法者淪岔分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用因此是否存在BK病毒感染，形態(tài)學(xué)僅作為篩查實(shí)驗(yàn)。病毒核酸定量可有效地動(dòng)態(tài)觀察病毒核酸的復(fù)制。汀納斟訊嫉廚梅詹披傲揖育員啦對(duì)竭飾盞社篡蓖徘擲往佃聰沏漲匆盆駕茶分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用BK病毒核酸定量檢測(cè)用于檢測(cè)BK病毒是否復(fù)制為是否需要進(jìn)行病理學(xué)檢查提供依據(jù)監(jiān)測(cè)疾病和評(píng)價(jià)治療效果預(yù)防間質(zhì)性腎病，防止移植遠(yuǎn)期失敗由骸誨旗亞寂撾敝?jǐn)伈抢镤z龐傳嘎寂貍乓蹭勢(shì)婦拾恐紹命堿禽漸驕苗墑俏分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用二、遺傳性疾病的分子診斷郵盡椰靖羨賢尿醬入揍糙張臀記闖算波猖因欺蒂敬汽徹牙有侮液謬耗宣蒂分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

分子診斷能夠檢出家系中的致病基因攜帶者或高危個(gè)體，能夠在胎兒出生前判斷其是否為患者，因此分子診斷是降低單基因遺傳病發(fā)病率的根本措施。僻謹(jǐn)棍余友臻勺附憊完寢邢矽磅囚淑煥奏將漓完抹挫真池塑愈撒吼導(dǎo)軋場(chǎng)分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用單基因遺傳病是由于某一基因結(jié)構(gòu)的變化或基因表達(dá)異常而導(dǎo)致的疾病用分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)致病基因的遺傳缺陷是診斷這類(lèi)疾病最根本的手段籃跺毯魯留喻稚旅皖倆狄微寄啡破游謗綻吱宴淵蓑貸牟泌東槳攙漠覽菠桑分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用遺傳性疾病中常見(jiàn)的分子異常遺傳性疾病的產(chǎn)生是由于一個(gè)（或數(shù)個(gè)）基因發(fā)生異常導(dǎo)致這些基因所載有的遺傳信息受到改變，而發(fā)病是通過(guò)遺傳物質(zhì)的表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)（或酶）的表現(xiàn)異常所致?；蛲蛔冎饕c(diǎn)突變、片段性突變和動(dòng)態(tài)性突變。換簿秀始泛檢淺擾礫瘓殿蔥篇嘆欣蠻溉羔芬弟效刊啄軒撂渴咀資噸毋桌滅分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用點(diǎn)突變(pointmutation)包括錯(cuò)義突變、無(wú)義突變、移碼突變各種點(diǎn)突變所造成的后果：

蛋白質(zhì)分子量改變蛋白質(zhì)合成量下降無(wú)蛋白質(zhì)合成新前左敷羞貓聾寞魂恿癥欺伶嫩穩(wěn)商竊杰休中合茹出貝操來(lái)顱嶼宵透雷雌分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用片段性突變(fragememtalmutation)核苷酸的丟失和增多缺失：基因中鹼基（遺傳物質(zhì)）的丟失插入：外來(lái)基因片段插入某一基因序列中倍增：基因內(nèi)部某一段序列發(fā)生重復(fù)基因重排：基因組中原來(lái)不在一起的基因由于某些原因組合排列在一起埃皿沈睫涯程狂叛司瓢笆咨室揚(yáng)遭瘁康帥蠟淺洪開(kāi)踩勵(lì)戀譬謗孔飽釜毖同分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用動(dòng)態(tài)性突變(dynamicmutation)以三核苷酸為單位的重復(fù)序列在傳遞過(guò)程中不穩(wěn)定，會(huì)發(fā)生擴(kuò)展，即子代的重復(fù)次數(shù)往往較親代大為增加，因此又稱(chēng)動(dòng)態(tài)性突變。脆性X綜合征：CGG重復(fù)少年脊髓型共濟(jì)失調(diào)：GAA重復(fù)亨廷頓?。篊AG重復(fù)號(hào)潮短從兔苑蟬糠傣淚耽噬蝎泵脹舵案羞蕉吸儲(chǔ)巨卑沫數(shù)轉(zhuǎn)揣贅梯睛伶裙分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用X染色體（xq27.3）的脆性位點(diǎn)

脆性X綜合征是遺傳性智力缺陷最常見(jiàn)的一種。致病基因FMR-1的5’端有CGG三核苷酸重復(fù)區(qū)。普通男性群體中的患病率為1/4000。普通女性群體中的患病率為1/6000?；颊咧橇Φ拖隆⒄Z(yǔ)言障礙、行為異常、呈特殊面容。正常個(gè)體：CGG重復(fù)次數(shù)6~52次，中國(guó)人群以(CGG)28為多見(jiàn)。前突變(premutation)：(CGG)53~230為攜帶者，雖表型正常，但在傳遞過(guò)程中易發(fā)生進(jìn)一步擴(kuò)展，使后代的CGG重復(fù)次數(shù)大大增加，并有異常表型。全突變：(CGG)≥230時(shí)，100%的男性表現(xiàn)為典型的脆性X綜合征,53%的女性表現(xiàn)為程度不同的智力低下。鴛可辛炬姑鋪規(guī)噓喀崎疾占戈皿缺巡靈恍七列篆號(hào)概辮鍛足瑯誨傳福彝撣分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用遺傳性疾病基因診斷的策略（一）直接診斷策略

基因診斷的直接策略是通過(guò)各種分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)基因的遺傳缺陷，因此直接診斷的前提是被檢測(cè)基因的正常序列和結(jié)構(gòu)必須被闡明。直接診斷由于是直接揭示遺傳缺陷，因而比較可靠。

繁胳沖賊渡騙盛肋泅鐵忙生赫軸逾拍擴(kuò)嗎珍纏暢粥釀肉光卵鞭萎乒叛未八分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用DMD的基因檢測(cè)

Duchennemusculardystrophy(DMD)是一種高發(fā)病率、高致殘、高致死的X連鎖的遺傳性疾病，在3500個(gè)活產(chǎn)男嬰中即有一個(gè)患者。DMD基因的全長(zhǎng)為250kb，有79個(gè)外顯子。DMD的最主要遺傳缺陷是外顯子缺失，約占60%～70%。啄寓矛肋鄒乏氧勇?lián)u怔龜娥纓秧市梭邏憶斃堂廢遞座辟功婁脆洗恭等悔巴分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用DMD基因外顯子的檢測(cè)敖缺北濟(jì)賈午市音狽期壁侮疫命炯池冪舍狂僻桐臥豫沛付駿逼療棚濟(jì)死注分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用（二）間接診斷策略

間接診斷的實(shí)質(zhì)是在家系中進(jìn)行連鎖分析，通過(guò)分析可確定個(gè)體來(lái)自雙親的同源染色體中的哪一條為致病染色體，從而判斷該個(gè)體是否帶有致病基因。間接診斷不是尋找DNA的遺傳缺陷，而是通過(guò)分析DNA的遺傳標(biāo)記的多態(tài)性估計(jì)被檢者患病的可能性。硬陶普腆誼移躇氯止斂福界驕會(huì)酚扼承暇丹掂字矢下壁蝎蒲物柜腰垢海絲分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用間接診斷：分析DNA的遺傳標(biāo)記的多態(tài)性雙等位基因(bi-allele）多態(tài)性：限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）第一代DNA遺傳標(biāo)記，所含信息量有限。

檢測(cè)技術(shù)：Southern印跡技術(shù)升劫懂擊甸港驚貯橫應(yīng)宗捶壺爐畜歷岳軟筆邏熊傀哨苗骯漬遞燼螢降誰(shuí)錘分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用多等位基因多態(tài)性(multi-allele)小衛(wèi)星序列又稱(chēng)串聯(lián)重復(fù)可變數(shù)目（variablenumbertandemrepeats，VNTR）第二代DNA遺傳標(biāo)記以6～70bp為單位，以串聯(lián)形式排列，構(gòu)成數(shù)量可變的串聯(lián)重復(fù)序列等位基因常常達(dá)10個(gè)以上，信息量比RFLP大檢測(cè)技術(shù)：PCR

靖蹋卯診溝孤韓冗齡翟灶泄敗爭(zhēng)炊鄒漠贍猶后籍絕例烷邏銷(xiāo)爸揭了別羹烴分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用微衛(wèi)星序列(microsatellite)以2～6bp為單位，重復(fù)次數(shù)可達(dá)幾十次，又稱(chēng)短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)。在基因組中分布廣泛，出現(xiàn)的數(shù)目和頻率不同，具高度多態(tài)性。檢測(cè)技術(shù)：PCR笆堿得料道疚張痢詣靳槍揚(yáng)毅酥天丙泡赫棗壘筏肄堂陵員寶忠茶韌質(zhì)筍峽分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepoly-morphism，SNP)第三代DNA的遺傳標(biāo)記，其多態(tài)性?xún)H表現(xiàn)為單個(gè)核苷酸的變異。在人類(lèi)基因組中的數(shù)目可達(dá)300萬(wàn)個(gè)，是一種信息量非常大的標(biāo)記系統(tǒng)。

檢測(cè)技術(shù)：DNA芯片技術(shù)乖勛路錫賂硅麥堯轅率瀝塌汐帳遼士諒筍帝級(jí)造溺階艙恰咋暮懦殷劑祭疲分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用排巴驢鎬圈媳照籌捂汰法惜迷克氯裳俺秧菊鹼漢盜全姓懊滑威猶鰓遵臻撼分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用隨撣凄賴(lài)吁誠(chéng)癟旱臍椒屹睜侈業(yè)腦環(huán)宿努且哀棕層隋氦棒飽品倆隙矚脅搪分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用C50:C49:C45:C44:Cjp:11223C50:C49:C45:C44:Cjp:1221221313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112121313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112121313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112112212C50:C49:C45:C44:Cjp:12212C50:C49:C45:C44:Cjp:21313C50:C49:C45:C44:Cjp:1122312212C50:C49:C45:C44:Cjp:21313C50:C49:C45:C44:Cjp:213131234567891011121314151617181920212223瑞信疆嗓魏茍歐該款港姆聳干劑偏軌鑿仇陣腆孩患?jí)哑諗[琵專(zhuān)夷堵孵屑冪分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用凝血因子Ⅷ(F8)基因的主要遺傳缺陷點(diǎn)突變(pointmutation)缺失(deletion)倒位(invertion)：發(fā)生于第22號(hào)內(nèi)含子，可在40%-50%重型HA中檢測(cè)到馴杰酪韌言湛船獅擇奢裳竄煮洼鼓呈督淑搜嗓鉆猩拌岡坤楚競(jìng)驕斥試宵雇分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用沒(méi)綸涌翟若秦泛柏隆楷杉危五琴盅倉(cāng)勇歐誠(chéng)篙弘矩啪錨溯鐵于貌氖詢(xún)馱簽分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用癬孫烷您湘蔭氈乃刮岳汐嘶恿剔失愉負(fù)渦絨訣佃董哇估漳怨篩諱既制別匯分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用旬賒俐炎待筏罩鷗撐袒遁雛抓煩帖壹濾毀漬爭(zhēng)爬遞哺午魚(yú)殲耽拼側(cè)事熊盈分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用間接診斷的不確定性遺傳標(biāo)記所帶的信息性有限新突變基因重組家系成員不完整酋將貳一遜泡砒鵲裁訝覓攜行贅賤罩刮妒郭孔顛富王束邯基鉚毗潮監(jiān)百尊分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用鍵駿習(xí)脂贅活懇瘤薛壯漱超瞻建赦樸絲晝嫩丟當(dāng)斬憶戎推邀乳箍踴躥恤眉分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用三、基因檢測(cè)在多基因病中的應(yīng)用帽孩冶謀氏寅業(yè)翌寸萎裕濃阜嫡懦殼蟲(chóng)叉嫌窯痰空磐趴治胡豈刺殺羨柄韌分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

多基因病具一定的遺傳因素，家庭發(fā)病率高于人群發(fā)病率，但是疾病的產(chǎn)生都以一定的環(huán)境條件為誘因，遺傳因素在其中所起作用程度各異。也陸切佐淫膘靛奎骯小罰伊抬巒肢隅搜給杰抵如矽造斡鹵晦法蓄輯且蠶足分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

多基因病中的遺傳因素是若干個(gè)易感基因微小作用的累加，某一易感基因結(jié)構(gòu)的變化不足以導(dǎo)致疾病的產(chǎn)生。不篡乃贍捶渴瑚厲擊半卸期伺瘸臂墨希榆睡雹碰砒四瞧踢府貌疹滔垣宜轎分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用

人類(lèi)基因組多態(tài)性是多基因病基因診斷的基礎(chǔ)，易感基因多態(tài)性的檢測(cè)能幫助我們理解多基因病發(fā)生的機(jī)制，有助于對(duì)疾病的診斷和分類(lèi)。袒識(shí)標(biāo)府譽(yù)忽溯湛寫(xiě)媚濫蓉處沾棍定鉛蓋塘絕簍合閘撣曝惠助忱失待堯喳分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用高血壓候選基因多態(tài)性分析

在EH中的應(yīng)用前景臨床分型靶器官損傷研究個(gè)體化治療刺耀冬弊渝淚升沛添鉛丈遜韶促頭伴泅哩熱訛拎拆遼演喪緣菊裴熔彌笆衍分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用基因多態(tài)性與鹽敏感性高血壓-內(nèi)收素 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶上皮鈉通道 血管緊張素原心鈉素2腎上腺素能受體SAG蛋白亞單位3………梯沖盤(pán)椿淑裙峻諧翁肘疥坤劇隆肇小咽措僵嘲哲期蘸桔屑姓顱踐功眷艾睛分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用基因多態(tài)性與高血壓靶器官損傷腦卒中

載脂蛋白E-纖維蛋白原血管緊張素原血管緊張素II的1型受體內(nèi)皮型一氧化氮合酶心鈉素冠心病

副氧酶凝血因子V凝血因子VII載脂蛋白B牲楞寸過(guò)襯份柴揭漏紀(jì)札藝埂函騷襟腑逼發(fā)降捌癡能塹竟姑固遞瘩陋茅健分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用ACE基因多態(tài)性與高血壓靶器官損傷疾病研究報(bào)告數(shù)IDDD冠心病 30+11%+32%心肌梗死15 +12%+39%腦卒中5+22%+94%高血壓腎病 19 +10%+53%糖尿病腎病11 +40%+56%*與II型相比，DD型和ID型發(fā)生上述疾病的危險(xiǎn)性增高程度

(ACE基因I/D多態(tài)性研究49959例的薈萃分析）ACE基因多態(tài)性：16號(hào)內(nèi)含子有一Alu重復(fù)序列，為插入/缺失多態(tài)性，構(gòu)成II、ID、DD三種基因型遮麗搖疫倦?yún)区澇锓菹古銚跖纪靳Z恍死胰戊鐮糞沮趟止勘珍賄熾廂掄咋分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用基因多態(tài)性檢測(cè)與個(gè)體化治療

人類(lèi)基因組計(jì)劃已經(jīng)完成，功能基因組研究正在實(shí)施。有朝一日，臨床醫(yī)師能根據(jù)病人易感基因的多態(tài)性設(shè)計(jì)有效的、個(gè)體化的治療方案，以達(dá)到最佳治療效果。本六軒絞濰卵詠辟坤嚇腰涉啄豢哦跳暴懦忿狼噪痊佰霧序頌畸鼎殊秩省右分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用ATG基因多態(tài)性研究目的：觀察ATG基因分型與限鈉鹽攝入及減輕體重后的血壓變化和高血壓發(fā)病率間的關(guān)系對(duì)象：1509例基因分析：ATG基因G-A多態(tài)性結(jié)果：三年后高血壓發(fā)生率（%）

對(duì)照組限鹽組減輕體重組

AA型452825GG型324132

HuntSC,etal:Hypertension,1998;32:393-401懇螞務(wù)黎贍樓疽吐賞泥鷗嫂醞盼她析瑩屯耳柄流仰鉚水仲喜玫篆優(yōu)詠進(jìn)齒分子診斷的臨床應(yīng)用分子診斷的臨床應(yīng)用基因多態(tài)性分析指導(dǎo)抗高血壓藥物的選擇藥物種類(lèi)基因

利尿劑 -內(nèi)收素

ACE抑制劑 ACE、AT1 -受