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動物細(xì)胞工程第2節(jié)主要內(nèi)容動物細(xì)胞培養(yǎng)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物“(悟空)拔一把毫毛,丟在口中嚼碎,望空噴去,叫一聲‘變!’,即變作三二百個小猴,周圍攢簇(cù)?!边@是《西游記》中的一段描述,展示了中華先賢的想象力。毫毛來自體細(xì)胞,我們能用體細(xì)胞“變”出一群猴嗎?動物體細(xì)胞核移植技術(shù)一1.概念:2.原理:3.生殖方式:將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。動物細(xì)胞核的全能性無性生殖減數(shù)分裂中期卵母細(xì)胞中的“核”其實是紡錘體—染色體復(fù)合物?!叭ズ恕笔侨コ搹?fù)合物。一4.類型:①胚胎細(xì)胞核移植:胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對容易。②體細(xì)胞核移植:動物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難。因此,動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。5.非人靈長類動物體細(xì)胞核移植的困難原因:動物體細(xì)胞核移植技術(shù)①供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài),這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低。②對非人靈長類動物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善。一6.過程:動物體細(xì)胞核移植技術(shù)采集牛卵巢中的卵母細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到MⅡ期從供體高產(chǎn)奶牛取體細(xì)胞
通過顯微操作去核取體細(xì)胞培養(yǎng)將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞1.選擇卵母細(xì)胞作為核移植受體細(xì)胞的原因:①卵母細(xì)胞體積大,易操作。②含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。將供體細(xì)胞整個注入去核卵母細(xì)胞中的原因:保證供核不被破壞,操作也更方便。通過電融合法使兩細(xì)胞融合,供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞,形成重構(gòu)胚。用物理或化學(xué)方法(電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑)激活重構(gòu)胚,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。早期胚胎將胚胎移入(代孕)母牛體內(nèi)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛(性別核供體相同)重構(gòu)胚:是指人工重新構(gòu)建的胚胎,具有發(fā)育成完整個體的能力。該過程中涉及到的技術(shù):
。動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植一動物體細(xì)胞核移植技術(shù)思考?討論
有關(guān)體細(xì)胞核移植的問題1.在將體細(xì)胞的核移植到卵母細(xì)胞之前,為什么必須先對卵母細(xì)胞進(jìn)行去核操作?為了使核移植的胚胎或動物的核遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價值的動物提供的體細(xì)胞。2.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動物,是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?不是對核供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制。①克隆動物絕大部分DNA來自供體動物的細(xì)胞核,但線粒體中的DNA(細(xì)胞質(zhì)中的DNA)同時來自供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞。②性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果,克隆動物所處的環(huán)境與核供體細(xì)胞生活的環(huán)境不會完全相同。③克隆動物在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生可遺傳變異(包括:
)?;蛲蛔?、染色體變異二體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題1.應(yīng)用前景:(1)畜牧生產(chǎn):加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。(2)醫(yī)藥衛(wèi)生:①通過建立轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞系,再利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動物可以作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白。②在治療人類疾病時,轉(zhuǎn)基因克隆動物的細(xì)胞、組織或器官可以作為異種移植的供體。③以患者作為供體培育的人核移植胚胎干細(xì)胞,經(jīng)過誘導(dǎo)分化能形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官,將它們移植給患者時可以避免免疫排斥反應(yīng)。二體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題1.應(yīng)用前景:(3)在科研領(lǐng)域:①研究克隆動物可以使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程。②克隆一批遺傳背景相同的動物,可以通過它們之間的對比來分析致病基因。③克隆特定疾病模型的動物,還能為研究該疾病的致病機制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。(4)在保護(hù)瀕危物種方面:該技術(shù)有望增加瀕危物種的存活數(shù)量。二體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題2.存在的問題:(1)該技術(shù)的成功率非常低,各個技術(shù)環(huán)節(jié)有待進(jìn)一步改進(jìn)。(2)相對于技術(shù)研究,核移植的理論研究較為滯后,需要與發(fā)育生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子遺傳學(xué)等學(xué)科更深層次的理論研究相結(jié)合。(3)絕大多數(shù)克隆動物存在健康問題,表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過大、異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷和免疫失調(diào)等。課堂鞏固1.假設(shè)世界上最后一頭野驢剛死亡,以下使它"復(fù)生"的方案中可行的是()A.將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中,培育出新個體B.將野驢的體細(xì)胞取出,利用組織培養(yǎng)培育出新個體C.將野驢的體細(xì)胞兩兩融合,再經(jīng)組織培養(yǎng)培育出新個體D.將野驢的體細(xì)胞核移植到家驢的去核卵母細(xì)胞中,經(jīng)孕育培育出新個體D課堂鞏固2.2017年,某國批準(zhǔn)了首例使用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”的申請。其培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析下列敘述
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