病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件

病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒主要內(nèi)容腺相關(guān)病毒簡(jiǎn)介腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒載體的醫(yī)學(xué)應(yīng)用優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)和復(fù)習(xí)思考題第一節(jié)腺相關(guān)病毒簡(jiǎn)介生物學(xué)特性有機(jī)化學(xué)主要是介紹化學(xué)物質(zhì)及其性質(zhì)的科學(xué)，其理論性和實(shí)踐性都比較強(qiáng)，是一門(mén)基礎(chǔ)學(xué)科。在農(nóng)林院校的教學(xué)中，有機(jī)化學(xué)是一門(mén)公共基礎(chǔ)課，該課程的主要服務(wù)于農(nóng)林、畜牧、獸醫(yī)、獸藥、質(zhì)檢等相關(guān)專(zhuān)業(yè)的后續(xù)專(zhuān)業(yè)課程，為其提供扎實(shí)的理論基礎(chǔ)和較好的創(chuàng)新能力。在教學(xué)過(guò)程中我們積極探索符合現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)的有機(jī)化學(xué)課程體系的建設(shè)，經(jīng)過(guò)幾年的努力，初步確定了較為合理的有機(jī)化學(xué)課程體系，并取得了較好的教學(xué)效果，現(xiàn)將相關(guān)工作總結(jié)介紹如下文。1剖析傳統(tǒng)畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)有機(jī)化學(xué)教學(xué)模式提出新的建設(shè)目標(biāo)傳統(tǒng)畜牧獸醫(yī)《有機(jī)化學(xué)》課程教學(xué)主要注重講解基礎(chǔ)知識(shí)、強(qiáng)調(diào)基本理論的理解和應(yīng)用。盡管近年來(lái)，很多院校對(duì)該課程的教學(xué)內(nèi)容和方法進(jìn)行了各種改革嘗試，但仍然存在很多有待改善之處，我們結(jié)合本校的專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)對(duì)《有機(jī)化學(xué)》課程教學(xué)體系進(jìn)行了積極的思考和論證，希望通過(guò)論證討論，更好地構(gòu)建畜牧獸醫(yī)類(lèi)院校有關(guān)專(zhuān)業(yè)《有機(jī)化學(xué)》的課程體系。經(jīng)過(guò)討論認(rèn)為目前存在的問(wèn)題主要包括以下幾點(diǎn)：（1）知識(shí)內(nèi)容陳舊過(guò)時(shí)，缺乏近年代的新知識(shí)、新理論和新技術(shù)；缺乏與畜牧獸醫(yī)類(lèi)專(zhuān)業(yè)知識(shí)交叉滲透，因而缺乏特色。（2）化學(xué)教研室?guī)熧Y隊(duì)伍結(jié)構(gòu)不合理，新老教師之間形成斷層，銜接不好。（3）多數(shù)年輕教師過(guò)分依賴(lài)于多媒體，雖然節(jié)省了板書(shū)復(fù)雜有機(jī)化學(xué)結(jié)構(gòu)的時(shí)間，但是忽視了學(xué)生對(duì)講授內(nèi)容接受的效果。（4）教學(xué)方法單一，多數(shù)教師一言堂，學(xué)生的主體作用沒(méi)有得到發(fā)揮，課堂氣氛不活躍。（5）考核方法單一，考試內(nèi)容固定，通常以期末考試成績(jī)作為評(píng)價(jià)學(xué)生學(xué)習(xí)效果的唯一標(biāo)準(zhǔn)，不利于學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)以上分析，我們確定了課程體系建設(shè)的目標(biāo)與思路，審定課程的地位與作用，整合教學(xué)內(nèi)容，優(yōu)化教學(xué)體系，改進(jìn)教學(xué)方法和手段，加強(qiáng)教學(xué)管理和質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，強(qiáng)化集體備課（定期舉辦教學(xué)經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)），發(fā)揮團(tuán)隊(duì)精神，努力打造一支教學(xué)素質(zhì)高、業(yè)務(wù)水平高、愛(ài)崗敬業(yè)的教學(xué)研究型隊(duì)伍，以提高整體教學(xué)質(zhì)量。2建立新形勢(shì)下與畜牧獸醫(yī)相關(guān)專(zhuān)業(yè)結(jié)合緊密的有機(jī)化學(xué)課程體系2.1精選教學(xué)內(nèi)容當(dāng)今社會(huì)有機(jī)化學(xué)相關(guān)技術(shù)迅猛發(fā)展，所包含和涉及的內(nèi)容急劇增加，而畜牧獸醫(yī)相關(guān)專(zhuān)業(yè)的有機(jī)化學(xué)課時(shí)卻相對(duì)較少，如何在有限的時(shí)間里傳授盡可能多的知識(shí)是當(dāng)下教學(xué)的關(guān)鍵所在。針對(duì)這一矛盾我們重新確定了《有機(jī)化學(xué)》課程在畜牧獸醫(yī)相關(guān)專(zhuān)業(yè)中的地位和作用，由資深教師和年輕骨干教師共同修訂教學(xué)大綱，精選教學(xué)內(nèi)容。對(duì)教學(xué)內(nèi)容作了如下改進(jìn)：（1）做好與中學(xué)化學(xué)知識(shí)的銜接。如有機(jī)化合物的命名與分類(lèi)以及同分異構(gòu)現(xiàn)象，在中學(xué)化學(xué)學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)上，注重傳授給學(xué)生規(guī)律的歸納和總結(jié)。（2）確保有機(jī)化學(xué)基本理論和基本反應(yīng)規(guī)律所占課時(shí)比例，例如，誘導(dǎo)效應(yīng)、共軛效應(yīng)、超共軛效應(yīng)等電子效應(yīng)以及自由基取代反應(yīng)、親電取代反應(yīng)、親核取代反應(yīng)、親電加成和親核加成反應(yīng)等反應(yīng)機(jī)理。引導(dǎo)學(xué)生運(yùn)用電子效應(yīng)和反應(yīng)機(jī)理來(lái)解釋預(yù)測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物，并分析反應(yīng)的活性和反應(yīng)的區(qū)域選擇性，引導(dǎo)學(xué)生利用理論知識(shí)指導(dǎo)學(xué)習(xí)。（3）加強(qiáng)對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的運(yùn)用和對(duì)經(jīng)典反應(yīng)的歸納和總結(jié)。有機(jī)化學(xué)知識(shí)和有機(jī)化合物的種類(lèi)一樣復(fù)雜繁多，但是其中蘊(yùn)藏在明顯的規(guī)律。通過(guò)總結(jié)和對(duì)比，使學(xué)生更好地理解和掌握化學(xué)反應(yīng)的本質(zhì)和規(guī)律。通過(guò)總結(jié)使得原本抽象難以理解的內(nèi)容簡(jiǎn)單化。比如：在講授含羰基化合物的還原時(shí)，對(duì)比克萊森還原法、黃鳴龍改良法、蘭尼鎳法、硼氫化鈉或四氫鋰鋁還原等5種方法進(jìn)行歸納和總結(jié)，有助于學(xué)生更好地掌握和利用這些反應(yīng)進(jìn)行合成路線(xiàn)的選擇。2.2結(jié)合畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)選取相關(guān)教學(xué)內(nèi)容畜牧獸醫(yī)的有機(jī)化學(xué)與獸醫(yī)、生命科學(xué)等學(xué)科相互交叉滲透，面對(duì)的是養(yǎng)殖、預(yù)防、水利等專(zhuān)業(yè)的學(xué)生，所以畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)有機(jī)化學(xué)應(yīng)該注重傳授與其知識(shí)相關(guān)的內(nèi)容，激發(fā)廣大學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，開(kāi)拓視野。欲實(shí)現(xiàn)與畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)知識(shí)的交叉，要求教師掌握大量的相關(guān)知識(shí)，因此，要求每一名教師至少要學(xué)習(xí)幾門(mén)畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)的其他專(zhuān)業(yè)課程，如此不僅增長(zhǎng)了知識(shí)，而且拉近了有機(jī)化學(xué)與畜牧獸醫(yī)學(xué)科的距離，許多教師參與到畜牧獸醫(yī)相關(guān)的科研項(xiàng)目中，實(shí)現(xiàn)了以教學(xué)助科研、以科研促教學(xué)的良好局面。通過(guò)有機(jī)化學(xué)課程向?qū)W生介紹獸藥制備方面的知識(shí)，一方面可使他們了解獸藥合成的思路；另一方面也為他們學(xué)習(xí)后續(xù)專(zhuān)業(yè)知識(shí)和從事獸醫(yī)獸藥創(chuàng)新活動(dòng)奠定了良好的基礎(chǔ)。3積極進(jìn)行新的教學(xué)方法和手段的嘗試與改革3.1認(rèn)真對(duì)待每一堂課，精心設(shè)計(jì)教學(xué)過(guò)程在課堂教學(xué)中，每一節(jié)課都是教師的一件藝術(shù)品，只有精心設(shè)計(jì)、安排、組織每一個(gè)細(xì)節(jié)，才能將課本知識(shí)生動(dòng)形象地展示給學(xué)生，才能讓學(xué)生在一種輕松愉悅的氛圍中學(xué)到知識(shí)，而且運(yùn)用這種學(xué)習(xí)方法學(xué)到的知識(shí)記憶牢固，不容易遺忘。另外，教師還不要忘記課堂教學(xué)的主體是學(xué)生，只有這樣才能使得學(xué)生的主觀(guān)能動(dòng)性得以充分發(fā)揮，作為課堂教學(xué)主導(dǎo)的教師積極引導(dǎo)，讓學(xué)生相互討論，形成觀(guān)點(diǎn)，并鼓勵(lì)學(xué)生走上講臺(tái)陳述自己的觀(guān)點(diǎn)，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，鍛煉學(xué)生的心理素質(zhì)，使學(xué)習(xí)效果得到很大的提高。3.2適當(dāng)運(yùn)用當(dāng)代科技手段，使其服務(wù)于課程教學(xué)眾所周知，有機(jī)化學(xué)知識(shí)理論性強(qiáng)而且抽象，難以理解。因此，在教學(xué)中如果借助適當(dāng)?shù)拿襟w或動(dòng)畫(huà)，使難以理解的內(nèi)容直觀(guān)化、形象化，將會(huì)減少學(xué)生對(duì)抽象教學(xué)內(nèi)容的畏懼感，有助于學(xué)生以積極的心態(tài)主動(dòng)學(xué)習(xí)。多媒體課件的制作要盡量包含圖片、聲音、動(dòng)畫(huà)等多種形式，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的多種感官器官接受信息，務(wù)必避免僅僅用文字表達(dá)枯燥生澀的理論知識(shí)。3.3教師定期開(kāi)展專(zhuān)題學(xué)術(shù)報(bào)告，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣有機(jī)化學(xué)學(xué)科各位教師大部分是青年教師都具有博士，畢業(yè)于著名高校和科研院所，有著不同的學(xué)科背景。利用這一優(yōu)勢(shì)資源安排各位教師將自己的科研方向與有機(jī)化學(xué)知識(shí)緊密聯(lián)系起來(lái)，強(qiáng)調(diào)有機(jī)化學(xué)知識(shí)在科學(xué)研究中的重要作用，以專(zhuān)題報(bào)告?zhèn)魇诮o學(xué)生，如此不僅使教師提高了業(yè)務(wù)水平，而且使學(xué)生了解到了有機(jī)化學(xué)的前沿知識(shí)，認(rèn)識(shí)到了有機(jī)化學(xué)在今后學(xué)習(xí)科研中的重要性，極大地激發(fā)了學(xué)習(xí)興趣。3.4積極引導(dǎo)學(xué)生參與科研活動(dòng)，促使學(xué)生學(xué)以致用有機(jī)化學(xué)知識(shí)與畜牧獸醫(yī)、獸藥等學(xué)科緊密相聯(lián)，應(yīng)用性極強(qiáng)，所以任課教師在教學(xué)過(guò)程中會(huì)適時(shí)相關(guān)專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)家的研究方向及成果與有機(jī)化學(xué)知識(shí)之間的關(guān)系，鼓勵(lì)有興趣的同學(xué)自主的選擇課題、查閱文獻(xiàn)，申報(bào)大學(xué)生創(chuàng)新研究訓(xùn)練項(xiàng)目，如此不僅為畢業(yè)實(shí)習(xí)設(shè)計(jì)打下良好的基礎(chǔ)，也培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新能力。4編寫(xiě)與新課程體系相匹配的教材有機(jī)化學(xué)學(xué)科知識(shí)內(nèi)容和范圍迅速發(fā)展，為了適應(yīng)畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)，所選擇的教材內(nèi)容應(yīng)該側(cè)重培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)的分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力和創(chuàng)新意識(shí)，突出畜牧獸醫(yī)、獸藥等專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)，采用新的教學(xué)體系和新的教學(xué)內(nèi)容組織方法，拓寬知識(shí)面，突出有機(jī)化學(xué)學(xué)科研究的新進(jìn)展和突破。根據(jù)這一宗旨，我們對(duì)教材內(nèi)容做幾方面修訂：（1）以培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力為首要目標(biāo)，充實(shí)有機(jī)化學(xué)發(fā)展前沿知識(shí)。（2）建立以性質(zhì)和反應(yīng)機(jī)理為主線(xiàn)的有機(jī)化學(xué)理論體系，增強(qiáng)有機(jī)化學(xué)課程的系統(tǒng)性。（3）增加了紫外光譜、紅外光譜、核磁共振譜和質(zhì)譜等波譜鑒別知識(shí)，為畜牧獸醫(yī)、獸藥等專(zhuān)業(yè)學(xué)生奠定了良好的科研基礎(chǔ)。（4）學(xué)生實(shí)驗(yàn)內(nèi)容選擇有適量針對(duì)性強(qiáng)、富有思考性的問(wèn)題，有助于學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的復(fù)習(xí)和鞏固。5建立相適應(yīng)的學(xué)生成績(jī)?cè)u(píng)價(jià)體系學(xué)生成績(jī)?cè)u(píng)價(jià)是教學(xué)環(huán)節(jié)必不可少的重要一環(huán)。評(píng)價(jià)體系是否科學(xué)是課程教學(xué)成敗的關(guān)鍵所在。若要科學(xué)客觀(guān)地考核學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握、運(yùn)用和綜合素質(zhì)，就需要建立科學(xué)合理的考試評(píng)價(jià)體系。我們結(jié)合素質(zhì)教育的大方針和專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)，對(duì)考試方式進(jìn)行了改革嘗試并取得了一定的效果。例如，考試評(píng)價(jià)穿插在整個(gè)教學(xué)過(guò)程、實(shí)施考教分離；在命題方面，采用試題庫(kù)抽題組成考試試卷的方式；在改卷方面采用集體流水閱卷；確保了考試的客觀(guān)性、準(zhǔn)確性和公正性，不僅可以反映學(xué)生學(xué)習(xí)的真實(shí)情況，也可以反映各位任課教師的教學(xué)質(zhì)量情況。6結(jié)語(yǔ)總之，在畜牧獸醫(yī)有機(jī)化學(xué)課程建設(shè)中，通過(guò)分析相關(guān)課程體系和教學(xué)方法手段等環(huán)節(jié)，有針對(duì)性地進(jìn)行了改革和嘗試，建立了符合畜牧獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)的教學(xué)體系，調(diào)研改革了授課教材、教學(xué)方法、教學(xué)手段和考核評(píng)價(jià)體系，培養(yǎng)了青年教師的知識(shí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)、提高了他們的業(yè)務(wù)水平，最終提高教學(xué)質(zhì)量。一、書(shū)面表達(dá)并不神秘學(xué)習(xí)知識(shí)的目的是應(yīng)用。書(shū)面表達(dá)并不神秘，它是要求學(xué)生們根據(jù)所給的情景和要求寫(xiě)一篇書(shū)面表達(dá)材料。它不是純粹的“作文”，并不要求考生立意選材、謀篇布局，而是將所給情景以恰當(dāng)?shù)男问接糜⒄Z(yǔ)表達(dá)出來(lái)。第一、抓學(xué)生寫(xiě)字的基本功訓(xùn)練學(xué)生的字體好壞直接影響學(xué)生非智力因素的得分。教師評(píng)卷時(shí)常常感到學(xué)生的字跡太不規(guī)范。如寫(xiě)“a”時(shí)開(kāi)口，寫(xiě)“d”時(shí)分家變成了“cl”，這都使批卷人非常傷神，學(xué)生容易丟感情分。為使學(xué)生們寫(xiě)得規(guī)范，強(qiáng)迫他們抄練個(gè)別字母的單寫(xiě)和連寫(xiě)。如a、d、g、m、等。再如要求學(xué)生在改正錯(cuò)詞時(shí)不要亂涂或畫(huà)圈，而要一筆劃去，還要告訴學(xué)生正確使用標(biāo)點(diǎn)。第二、抓學(xué)生的聽(tīng)寫(xiě)能力訓(xùn)練書(shū)面表達(dá)只有25分鐘的限定時(shí)間，因而要求學(xué)生對(duì)所學(xué)單詞和句型反應(yīng)迅速，而聽(tīng)寫(xiě)是聽(tīng)和寫(xiě)兩種訓(xùn)練的結(jié)合。聽(tīng)、說(shuō)、讀、寫(xiě)幾個(gè)方面的訓(xùn)練是相輔相成，互相促進(jìn)的。特別是在高三階段。它是一項(xiàng)貫穿于英語(yǔ)復(fù)習(xí)教學(xué)全過(guò)程的一項(xiàng)必要訓(xùn)練，是開(kāi)發(fā)學(xué)生智力，促使學(xué)生語(yǔ)言能力全面發(fā)展，提高寫(xiě)作能力的一個(gè)重要途徑。二、以積累詞匯和把握英語(yǔ)句法為基礎(chǔ)，提高學(xué)生的書(shū)面表達(dá)能力。通過(guò)翻譯，描述事物和發(fā)表議論，啟發(fā)誘導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行寫(xiě)作訓(xùn)練。教師對(duì)學(xué)生的寫(xiě)作訓(xùn)練要及時(shí)批改。指出或糾正錯(cuò)字和病句，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和分析，不斷地?cái)U(kuò)大學(xué)生的詞匯量，同時(shí)使學(xué)生掌握正確的英文句法。為更高層次的寫(xiě)作訓(xùn)練打好基礎(chǔ)。三、分文體對(duì)寫(xiě)作進(jìn)行專(zhuān)題訓(xùn)練，培養(yǎng)學(xué)生對(duì)各種文體的語(yǔ)感。1寫(xiě)記敘文時(shí)要有時(shí)間、地點(diǎn)、人物、事件、原因和結(jié)果六要素。寫(xiě)作的時(shí)候要明白清楚地寫(xiě)出來(lái)。寫(xiě)人物時(shí)，要注意介紹人物的身世、經(jīng)歷和事跡等。敘事時(shí)要描寫(xiě)事情發(fā)生的經(jīng)過(guò)與發(fā)展的結(jié)果等。2寫(xiě)議論文時(shí)要求考生就某一方面的問(wèn)題通過(guò)擺事實(shí)、講道理的方式來(lái)闡述自己的看法。議論文應(yīng)由論點(diǎn)、論據(jù)、論證三部分構(gòu)成。3高考英語(yǔ)應(yīng)用文主要以寫(xiě)信為主。寫(xiě)英文書(shū)信要注意它們的書(shū)寫(xiě)格式。在寫(xiě)作中，首先，要根據(jù)試題里的“提示”確定一個(gè)寫(xiě)作中心，再根據(jù)這個(gè)中心，列出寫(xiě)作提綱，同時(shí)要盡量使用自己熟悉的詞匯與句型。擴(kuò)展的內(nèi)容一定要緊扣主題。千萬(wàn)不要寫(xiě)那些與主題無(wú)關(guān)的內(nèi)容。四、進(jìn)行詳細(xì)的寫(xiě)作步驟的訓(xùn)練，逐步提高學(xué)生的寫(xiě)作能力。在教學(xué)中圍繞以下四個(gè)步驟進(jìn)行寫(xiě)作的訓(xùn)練：(一)認(rèn)真審題立意，確定寫(xiě)作中心，找出根據(jù)這個(gè)中心能夠擴(kuò)展的材料有哪些，也就是備寫(xiě)階段。(二)圍繞中心，列出寫(xiě)作提綱。提綱一定要包含所提供的情景、要點(diǎn)，同時(shí)盡量使用自己熟悉的詞匯與句型。(三)根據(jù)字?jǐn)?shù)要求，擴(kuò)展成篇。要特別注意以下幾點(diǎn)。僅供參考：1在整篇文章中。努力避免只用一、兩個(gè)句式，要靈活運(yùn)用各種句式。2使用不同長(zhǎng)度的句子，通過(guò)分句和合句，增強(qiáng)句子地連貫性和表現(xiàn)力。3改變句子的開(kāi)頭方式，不要一味以主、謂、賓、狀的次序，可以把狀語(yǔ)置于句首，或用分詞等。4學(xué)會(huì)使用關(guān)聯(lián)詞。如：①遞進(jìn)關(guān)系：furthermore；moreover；further；Inthisway；still；notonly…butalso…；not…but…；inaddition(t0)，etc。②轉(zhuǎn)折關(guān)系：but；evenso；however；though；eventhough，etc。③歸納總結(jié)類(lèi)：inotherwords；onthewhole；insum；therefore；hence；inshort；tosumup；inconclusion；insummary，etc。④強(qiáng)調(diào)關(guān)系：infact；especially；particularly；moreover；naturally；whatismoreimportant；inreality；indeed；inparticular，ate。⑤對(duì)照(不同點(diǎn))：yet；stiH；forallofthat；rather；neither…nor；although；though；but；however，ere。⑥并列關(guān)系：and；also；aswellas；either…，or…；both…and…，etc。(四)利用最后的時(shí)間做“機(jī)械性”寫(xiě)作練習(xí)，強(qiáng)化記憶。五、引導(dǎo)學(xué)生把握作文的各段的要領(lǐng)寫(xiě)出結(jié)構(gòu)完整、主題鮮明的英文作品。中學(xué)英語(yǔ)寫(xiě)作一般分三段，即引導(dǎo)段、支撐段、結(jié)束段。引導(dǎo)段的主題句不能只陳述事實(shí)，而是說(shuō)明自己的觀(guān)點(diǎn)；支撐段是圍繞引導(dǎo)段中的觀(guān)點(diǎn)進(jìn)行闡述；同時(shí)分清主次；結(jié)束段簡(jiǎn)要重述觀(guān)點(diǎn)，即是篇尾點(diǎn)睛。病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒1主要內(nèi)容腺相關(guān)病毒簡(jiǎn)介腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理腺相關(guān)病毒載體的醫(yī)學(xué)應(yīng)用優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)和復(fù)習(xí)思考題主要內(nèi)容2第一節(jié)腺相關(guān)病毒簡(jiǎn)介生物學(xué)特性第一節(jié)腺相關(guān)病毒簡(jiǎn)介3第一部分生物學(xué)特性血清型病毒結(jié)構(gòu)病毒復(fù)制對(duì)理化因素的抵抗力第一部分生物學(xué)特性4血清型AAⅣ是從腺病毒的污染物(1965年)、人群或非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物等的組織中分離鑒定到的共鑒定了11個(gè)AAV血清型以及108個(gè)A變株(variants)●通過(guò)簽名PCR(signaturePCR)技術(shù),利用高度保守序列擴(kuò)增Cap基因的一小段可變區(qū)的NA序列,以篩檢是否是新的AAV分離株,然后利用PCR技術(shù)獲得新的AAV分離株的Cap或(和)Rep基因的全長(zhǎng)序列。在人類(lèi)、非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物、馬、豬、牛、綿羊、山羊和蛇等的不同組織器官,發(fā)現(xiàn)了大量的具有多樣性的AAv的基因組。但新分離的病毒株,尚未進(jìn)行血清學(xué)分型,通稱(chēng)為變株?！馎AV不同血清型和變株的基因組結(jié)構(gòu)相對(duì)較為保守,與AV-2型較為類(lèi)似,不同血清型的衣殼蛋白結(jié)構(gòu)中表位的差異。5080%抗體在人群中檢測(cè)出血清型5轉(zhuǎn)導(dǎo)不同組織器官的AAV最優(yōu)血清型組織最優(yōu)血清型肝臟AAV-8AAV-9骨骼肌AAV-1AAV-7AAV-6,AAV-8AAV中樞神經(jīng)系統(tǒng)AAV-5,AAV-1AAV-4肺臟心臟AAV-8腎臟AAV-2胰腺AAV-8眼睛(光受體細(xì)胞)AAV-5,AA-4不同血清型在吸附細(xì)胞表面能力、病毒受體、胞內(nèi)交通和抗原性等方面具有明顯的區(qū)別,以及針對(duì)不同組織和細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率不一致,體現(xiàn)出不同的組織極性(tissuetropisms)轉(zhuǎn)導(dǎo)不同組織器官的AAV最優(yōu)血清型6病毒結(jié)構(gòu)220-30mm,基因組為線(xiàn)性的DNA分子的單鏈DNA分子等效率包裝因組包括兩個(gè)ORF,三個(gè)啟動(dòng)子(啟動(dòng)子以在基因組中處的作圖位置標(biāo)別為p5、p19和p40啟動(dòng)夏序列(invertedterminalrepeat,ITR)VP-l(87kd病毒結(jié)構(gòu)7euy、形成了字形的發(fā)夾結(jié)構(gòu):剩余的20個(gè)核苷酸,保持●1R是在A(yíng)V生物學(xué)中重要的順式(cis)作用活性元在病毒復(fù)制中具有重要作用容許條件下,ITR在毒復(fù)制的負(fù)調(diào)控中起關(guān)鍵作午條件下,作為病recce基因組復(fù)制的起點(diǎn)和引●rR對(duì)病毒基因組的包裝、轉(zhuǎn)錄、以及位點(diǎn)特異性的合,均是必需的RBEAVS1euy、形成了字8左端的0RF(Rep基因)編碼四個(gè)Rep蛋白,即Rep78,Rep68,Rep52和Rep40,均具有螺旋酶和ATP酶活性。較大的Rep蛋白如Rep78和由P5啟動(dòng)子指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄,分別由未剪輯和剪輯的轉(zhuǎn)錄物產(chǎn)生,具有鏈和位點(diǎn)特異的核酸內(nèi)切酶活性(切割點(diǎn)在以及位點(diǎn)特異的DNA結(jié)合活性(結(jié)合于RBE)。因此它們是重要的調(diào)節(jié)蛋白,以反式(trar制周期的所有階段,如DNA復(fù)制、位點(diǎn)特異性整合、整合病毒基因組的拯救,調(diào)節(jié)病毒和細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)的分別由未剪輯和剪輯的轉(zhuǎn)錄物產(chǎn)生,參與單鏈DNA的聚集并包裝入病毒體的衣殼44263.9kbRep683kbV左端的0RF(Rep基因)9右端的ORF(Cap基因)●由P40啟動(dòng)子指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生兩可編碼三個(gè)病毒衣殼蛋白,即VP1,VP2和VP些衣殼蛋白的0RF,但轉(zhuǎn)錄起始位置不一致般而言P2和VP3的分上會(huì)影響病毒的感染性,尤其是VP1含量低的情況下。缺乏ⅥP1的病毒體沒(méi)有感染性polyA4.2kbRep783.9kbReD683.6kbRep522.6kb?23kbVP2.3kbVP3右端的ORF(Cap基因)10病毒復(fù)制與細(xì)胞表面受內(nèi)吞(endo在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)殼并釋放啟動(dòng)雙鏈D·整合到細(xì)胞染色體或以附病毒復(fù)制11病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件12病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件13病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件14病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件15病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件16病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件17病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件18病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)病毒課件19病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)原理-腺相關(guān)