尿液檢驗標準化質控進展

尿液檢驗標準化質控進展第1頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月第一章

干化學檢測尿液

有形成分質控

第2頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月檢測化學項目多、速度快；檢測是紅細胞、中性粒細胞的化學成分；質控物為化學物質，不是真實形態(tài)學成分；現(xiàn)狀第3頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月干化學的問題特異性不夠好；干擾物質的影響不能質控；許多有形成分不能檢測；本底干擾檢測結果：本底+尿液顏色干擾；尿液漏滴造成漏檢；干化學方法自身不能證實檢測的真實性；不符合ISO15189；只能是過篩檢測；問題第4頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月例：干化學對白細胞檢測的局限性檢測粒細胞的酯酶淋巴細胞不能檢測干擾物質：慶大、先鋒、甲醛、膽紅質等第5頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月對策鏡檢證實和檢測不能檢測的有形成分；使用特異性檢測方法檢測化學成分；改進方法，減少本底干擾和漏檢；第6頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月第二章

有形成分檢測儀器的質控

第7頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月有形成分檢測儀器技術不同質控不同流式：質控物為特制顆粒物；機器視覺技術：紅細胞沒有質控物的儀器現(xiàn)狀第8頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月

第一節(jié)

流式技術儀器

第9頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月質控依據(jù)是血液分析質控物為特制顆粒，不是尿液有形成分，為替代品，與實際檢測無系統(tǒng)屬性；干擾物影響無法質控和檢測；檢測錯誤時檢測者無法獲悉；分類計數(shù)無意義；實際意義是質控計數(shù)準確性；質控依據(jù)和問題流式第10頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月特制顆粒質控物，實際檢測無系統(tǒng)屬性流式第11頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月無法質控干擾錯誤結晶、酵母菌誤識別為紅細胞流式標記物紅細胞儀器不能審核真菌結晶第12頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月檢測錯誤時儀器無法知道流式第13頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)勢和不足優(yōu)勢：

1、流式+圖像：實現(xiàn)儀器檢測驗證功能；

2、圖像更直觀、可信；不足1、因為拍不到清晰圖片，所有圖像按相似性處理獲得，由儀器內圖庫提供單一成分的圖片；2、拍不到清晰圖片，識別極易出錯，驗證功能打折扣；3、驗證錯誤導致提供圖片錯誤，結果不正確；結論仍然不能代替鏡檢數(shù)字圖像流式第14頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)第15頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月Number4GP16-A3

24?ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Allrightsreserved.

10.1.2UrineParticleAnalyzers64-68Automatedurineanalyzersusevarioustechnologiestoclassifyandenumerateparticlesinurine.Dependingontheinstrument,thetechnologiesincorporatedcanincludeimpedance,

digitalimagingflowcytometry,

flowcytometry,

lightscatter,dyes,fluorescence,orsomecombinationthereof.Particleswithlikecharacteristicsarethengroupedandclassified.TheelementsthataretypicallyidentifiedincludeRBC,WBC,epithelialcells(squamousandnonsquamous),casts(benignandpathologic),bacteria,sperm,mucus,crystals,andsmallroundcells.Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,arethenreviewedmicroscopicallybyatechnologist.Negativesamplesmayobviatetheneedformanualmicroscopy.第16頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月國際標準（GP16-A32009年）給出的解決對策1、數(shù)字圖像流式細胞儀、流式細胞儀等標本不論是實驗室認為或儀器檢測異常時（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必須用人工鏡檢方法重新檢測確認。2、陰性結果可以免除鏡檢確認。第17頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月國際標準的參考文獻64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2007;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2003;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2001;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2007;45:1251-1256.第18頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月

第二節(jié)

機器視覺技術儀器

第19頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月質控依據(jù)機器視覺方法學：顯微鏡鏡檢與人工顯微鏡鏡檢區(qū)別：操作自動化前期儀器能智能識別計數(shù)尿液有形成分國際標準：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)第20頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月ISLH主要內容1、不離心尿液直接檢測，計數(shù)池體積達到6.4ul2、低倍鏡

觀察計數(shù)大型有形成分（上皮細胞、管型）；高倍鏡

觀察計數(shù)小型有形成分（細胞、真菌、結晶等）3、結果以“個/ul”報告。4、統(tǒng)計學精度

低倍：（管型和上皮）至少計數(shù)50個

CV<14%；

高倍：（紅、白細胞等）至少計數(shù)200個，

CV<7%；第21頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月一、標準鏡檢參考方法的檢測特點不離心尿液直接鏡檢改變離心尿液沉渣鏡檢檢測體積：最大體積6.4ul(不是1ul)

目的：提高靈敏度，確保檢測準確性

原因：不離心尿液直接鏡檢極易漏檢報告：個/ul第22頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月機器視覺技術采取的方法檢測：不離心尿液直接檢測檢測體積：大于6.4ul（通過低倍鏡大面積掃描定位。高倍鏡跟蹤識別而實現(xiàn)）實現(xiàn)：低濃度不漏檢靈敏度達到：1個細胞/ul檢測報告：個/ul第23頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月必須有兩個鏡頭：高倍鏡和低倍鏡兩個鏡頭觀察的內容不同（大小不同）兩個鏡頭觀察的范圍不同（體積范圍不同）兩個鏡頭觀察的細節(jié)不同（分辨率不同）二、標準鏡檢參考方法的基本要求：第24頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月采用兩個鏡頭：高倍鏡和低倍鏡檢測方式完全按照顯微鏡鏡檢方法機器視覺技術采取的方法第25頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器工作流程

完全參照人工鏡檢標準參考方法進樣充池低倍過篩（視野數(shù)可設置）低倍定位分類計數(shù)（管型、上皮）高倍識別分類計數(shù)報告清洗陰性陽性人工輔判第26頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月統(tǒng)計學精度低倍：（管型和上皮）至少計數(shù)50個CV<14%；高倍：（紅、白細胞等）至少計數(shù)200個，

CV<7%；這是在有形成分濃度不低時候的理想統(tǒng)計學精度三、標準鏡檢參考方法的理想精密度第27頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月通過低倍鏡：大面積掃描定位。高倍鏡：跟蹤識別而實現(xiàn)

上海檢驗中心檢測認證：CV為4%臨界濃度：分布不均勻，檢測體積過大；機器視覺技術采取的方法第28頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月機器視覺目前質控的不足：質控物只有單一紅細胞；其他有形成分暫時沒有質控商品，期待；所有的有形成分智能分類計數(shù)水平有提升空間，在此期間人工審核不能少；標準圖庫建立和指導意義大，需要增加和加強；實際意義：質控計數(shù)準確性；分類計數(shù)在人工審核后才具有意義；第29頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)

數(shù)字圖像自動化儀器

如何達到人工鏡檢標準

第30頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月自動化數(shù)字圖像儀器=人工鏡檢條件是否符合ISLH（2003年）的國際標準條件；是否是使用的具有高、低倍鏡的顯微鏡;拍攝圖像是否是真實顯微鏡下的實景？圖像經過處理否？檢測靈敏度能否達到:3-10個細胞/ul;結果有人工審核；審核人員專業(yè)知識、經驗、能力、責任心；第31頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器技術原因：主要是檢測靈敏度達不到要求，不能質控；識別能力不理想，無法質控；單鏡頭的局限性，雖有圖像，小的看不清，全局面不夠；檢測體積達不到國際標準要求，精確度較差；問題無質控品的儀器第32頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)

如何能是尿液檢測標準和正確

第33頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月如何能是尿液檢測標準和正確按國際標準文件

ISLH（2003）和GP16-A3執(zhí)行，不折扣；尿液檢驗必須包括：理想、化學和鏡檢；任何儀器檢測結果必須與人工鏡檢相符合；總原則第34頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2023年2月非形態(tài)學自動化儀器檢測的陽性結果必須鏡檢復檢（按GP16-A3）；非形態(tài)學自動化儀器干擾成分必須鏡檢區(qū)分；自動化儀器靈敏度必須達到：

3-10個細胞/ul干化學和流式結合再次過篩不科學；如何能是尿液檢測標準和正確流式第35頁，課件共38頁，創(chuàng)作于2