國家藥品標準主要檢測方法應用指導原則課件

2023/8/81國家藥品標準（化學藥品）

主要檢測方法應用指導原則浙江省食品藥品檢驗研究院2023/7/271國家藥品標準（化學藥品）

主要檢測方法應一、藥品質量標準一、藥品質量標準2023/8/83藥品質量標準的定義國家藥品標準是國家為保證藥品質量所制定的具有約束力的技術規(guī)范。它不僅屬于強制性標準，具有重要的法律地位，而且還起到指導藥品生產、控制藥品質量以保證用藥安全有效，以及作為藥品監(jiān)管的技術依據(jù)和促進對外貿易的重要手段。2023/7/273藥品質量標準的定義國家藥品標準是國家為保藥品質量標準分類※國家藥品標準：ChP，局頒標準

※臨床研究用藥質量標準（新藥研制單位制定，臨時性的標準，僅供研制單位和臨床試驗單位用）

※暫行或試行藥品標準

※企業(yè)標準（企業(yè)內控標準，由藥品生產企業(yè)自己制定，僅在本廠或本系統(tǒng)的管理上有約束力，屬非法定標準）

※國外藥典（USP,EP,BP,JP等）藥品質量標準分類2023/8/85國家藥品標準技術規(guī)范國家藥品標準工作手冊（2013年7月第四版）化學藥物質量標準建立的規(guī)范化過程技術指導原則（2005年3月）2023/7/275國家藥品標準技術規(guī)范國家藥品標準工作手冊2023/8/86基本原則一、堅持以維護人民健康、確保安全有效為最基本原則。二、堅持科學、實用、規(guī)范原則。“科學”系指藥品標準的建立應充分考慮藥品在來源、生產、流通（包括貯運)及使用等各個環(huán)節(jié)影響藥品質量的因素，進而有針對性地建立檢測項目和相應的檢測方法。2023/7/276基本原則一、堅持以維護人民健康、確保安全2023/8/87科學實用規(guī)范其科學性應體現(xiàn)在所檢測的結果與真實值接近的準確性、最大限度減少各種偏差的精密性以及準確檢測被測樣品的專屬性?！皩嵱谩笔侵肝覈鳛榘l(fā)展中國家，有些儀器、設備、技術尚不普及，在考慮國情及藥品生產、檢驗隊伍的實際情況、確保能準確控制質量的前提下，應倡導簡單實用的原則，即無必要制定操作繁瑣、費用高昂的監(jiān)測方法去控制那些用簡單方法即可實現(xiàn)的檢測項目?！耙?guī)范”是藥品標準必須堅持的一貫原則。2023/7/277科學實用規(guī)范其科學性應體現(xiàn)在所檢測2023/8/88三、堅持質量可控性原則藥品標準所載方法控制的質量，是指滿足GMP生產的要求，在正常組織生產的情況下對產品質量所進行的控制。藥品標準的制定，應對于在既定工藝下正常生產的藥品質量力爭實現(xiàn)有效的控制。建立準確、專屬的檢測方法，以確保公眾使用的是優(yōu)質的藥。2023/7/278三、堅持質量可控性原則藥品標準所載方法2023/8/89四、堅持標準先進性原則藥品標準所載檢測方法，應充分反映現(xiàn)階段國內和國際藥品質量控制的先進技術和方法，在科學合理的基礎上堅持就高不就低的標準先進性原則。

2023/7/279四、堅持標準先進性原則2023/8/810質量標準建立的規(guī)范化過程藥品的質量研究與質量標準的制訂是藥物研發(fā)的主要內容之一。在藥物的研發(fā)過程中需對其質量進行系統(tǒng)、深入的研究，制訂出科學、合理、可行的質量標準，并不斷地修訂和完善，以控制藥物的質量，保證其在有效期內安全有效。2023/7/2710質量標準建立的規(guī)范化過程藥品的質量研究制訂藥品質量標準的基礎☆文獻資料的查閱和整理☆有關研究資料的了解化學結構、晶型、異構體、雜質情況、合成工藝、制劑工藝、輔料等制訂藥品質量標準的基礎☆文獻資料的查閱和整理藥品質量標準制訂的要求

1、安全有效性毒性較大的雜質應嚴格控制，藥物的晶型及異構體應重點研究。2、先進性趕超世界先進水平，選擇“準確、靈敏、簡便、快速”的檢驗方法。經(jīng)過反復試驗,得到與真值相近的結果的方法，定入標準，在準確的前提下，盡可能選擇簡便易行的方法，盡量避免使用有毒試劑。

藥品質量標準制訂的要求1、安全有效性2023/8/8133、針對性加強對藥品內在質量的控制，有針對性的規(guī)定檢測項目，標準中限度的規(guī)定要密切結合實際。必須結合實驗研究和生產的實際，考慮生產的全過程、穩(wěn)定性等。4、規(guī)范性必須符合國家藥典或其他法定標準的有關規(guī)定(國內外標準)。2023/7/27133、針對性必須堅持質量第一，充分體現(xiàn)“安全有效、技術先進、經(jīng)濟合理、不斷完善”的原則。必須堅持質量第一，充分體現(xiàn)“安全有效、技術先進、經(jīng)濟合理、不藥品質量標準制訂工作的長期性1、質量標準將伴隨產品終生2、不斷發(fā)展和提高藥品質量標準制訂工作的長期性1、質量標準將伴隨產品終生2023/8/816質量標準主要檢測方法應用指導原則儀器分析方法應用指導原則容量分析方法在含量測定中的應用指導原則專項檢查法應用指導原則2023/7/2716質量標準主要檢測方法應用指導原則儀器分2023/8/817儀器分析方法應用指導原則

薄層色譜法本法可用于鑒別與雜質檢查。方法的建立應對實驗中采用的固定相、展開劑、展開條件、點樣量及顯色方法等進行研究，并應考察鋪板條件、溫度、濕度及飽和情況等因素和耐用性試驗。必要時予以規(guī)定，使檢驗方法規(guī)范化。固定相首選硅膠G、硅膠GF254、硅膠H或硅膠HF254。必要時可選用硅藻土G、氧化鋁或微晶纖維素等。為確保方法的準確性和重現(xiàn)性，應進行系統(tǒng)適用性試驗。2023/7/2717儀器分析方法應用指導原則

薄層色譜法本2023/8/818系統(tǒng)適用性試驗包括檢測靈敏度、比移值(Rf)與分離效能等指標。必要時，在質量標準中規(guī)定可行的系統(tǒng)適用性試驗要求。鑒別或雜質檢查時，按各品種項下要求對檢測方法進行系統(tǒng)適用性試驗，使斑點的檢測靈敏度、比移值(Rf)和分離效能符合規(guī)定。檢測靈敏度指雜質檢查時，供試品溶液中被測物質能被檢出的最低量。一般采用對照溶液稀釋若干倍的溶液作為靈敏度試驗用溶液，與供試品溶液和對照溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點樣、展開、檢視，前者應顯示清晰的斑點。2023/7/2718系統(tǒng)適用性試驗包括檢測靈敏度、比2023/8/819比移值(Rf)

系指從基線至展開斑點中心的距離與基線至展開劑前沿的距離的比值。用比移值對供試品溶液主斑點與對照品溶液主斑點進行比較；或用比移值來說明主斑點或雜質斑點的位置。分離效能

鑒別時，在對照品與結構相似藥物的對照品制成混合對照溶液的色譜圖中，應顯示兩個清晰分離的斑點。雜質檢查時，在雜質對照品用供試品自身稀釋對照溶液或同品種對照品溶液溶解制成混合對照溶液的色譜圖中，應顯示兩個清晰分離的斑點，或待測成分與相鄰的雜質斑點應清晰分離。檢視以檢測靈敏、顯示清晰斑點的方法為宜。2023/7/2719比移值(Rf)系指從基線至展開斑點2023/8/820應用鑒別

依據(jù)是比移值和斑點色調的一致性，也應關注斑點的大小及顏色深淺的可比性。采用與同濃度的對照品溶液同時展開的方法或采用供試品溶液與對照品溶液等體積混合，應顯示單一、緊密的斑點(尤其當制劑中輔料的含量較多時，應采用后者)；或選用與供試品化學藥物相似的藥物對照品與供試品溶液的主斑點比較，兩者的Rf應不同，或將上述兩種溶液等體積混合，應顯示兩個清晰分離的斑點。2023/7/2720應用鑒別依據(jù)是比移值和斑點色調的2023/8/821雜質的限度檢查

可采用雜質對照品法、供試品溶液的自身稀釋對照法或雜質對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用。供試品溶液除主斑點外的其他斑點應與相應的雜質對照品溶液或系列雜質對照品溶液的主斑點比較或與供試品溶液的自身稀釋對照溶液或系列自身稀釋對照溶液的主斑點比較，不得更深。應注意雜質斑點與自身對照斑點的顏色或熒光有可比性。2023/7/2721雜質的限度檢查可采用雜質對照品法、2023/8/822對于雜質斑點數(shù)較少的藥品，可控制雜質斑點數(shù)及雜質限度。對于雜質斑點數(shù)較多或確實不易控制雜質斑點數(shù)且難以判斷的藥品，可采用系列對照溶液點樣的方法，以控制各主要雜質限度及估計雜質總量。2023/7/2722對于雜質斑點數(shù)較少的藥品，可控制雜質斑薄層色譜例子其他氨基酸取本品0.10g,置10ml量瓶中，加濃氨溶液2ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取lml，置200ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取門冬氨酸對照品10mg與谷氨酸對照品10mg，置同一25ml量瓶中，加氨試液2ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性試驗溶液。照薄層色譜法（附錄VB)試驗,吸取上述三種溶液各5μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以冰醋酸-水-正丁醇（1:1:3)為展開劑，展開至少15cm，晾干，噴以0.2%茚三酮的正丁醇-2mol/L醋酸溶液（95:5)混合溶液，在105℃加熱約15分鐘至斑點出現(xiàn)，立即檢視。對照溶液應顯一個清晰的斑點，系統(tǒng)適用性試驗溶液應顯兩個清晰分離的斑點。供試品溶液如顯雜質斑點，其顏色與對照溶液的主斑點比較，不得更深（0.5%)。薄層色譜例子其他氨基酸取本品0.10g,置10m2023/8/824高效液相色譜法本法可用于鑒別、雜質檢查、溶出度、釋放度、含量均勻度及含量測定等。色譜條件

根據(jù)待測物質的性質、其存在的輔料等，選擇不同的色譜條件，實現(xiàn)定性與定量分析的目的。色譜條件主要包括：固定相的種類，流動相的組成，檢測器的種類與參數(shù)等。2023/7/2724高效液相色譜法本法可用于鑒別、雜質檢查2023/8/825固定相最常用的固定相為化學鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性固定相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用，辛烷基硅烷鍵合硅膠、氰基硅烷鍵合硅膠、氨基硅烷鍵合硅膠或苯基硅烷鍵合硅膠等也常有使用；正相色譜系統(tǒng)使用極性固定相，以硅膠最為常用。離子交換色譜常用離子交換鍵合硅膠作為固定相；分子排阻色譜常用凝膠或高分子多孔微球作為固定相；對映異構體分析常用手性鍵合硅膠作為固定相。注意建立色譜條件時，應對不同牌號的同類色譜柱進行考察，以確保系統(tǒng)具有較好的耐用性。2023/7/2725固定相最常用的固定相為化學鍵合硅膠。反2023/8/826流動相反相色譜的流動相首選甲醇一水系統(tǒng)(采用紫外末端波長檢測時，首選乙腈一水系統(tǒng))，如經(jīng)試用不適合時，再選用其他溶劑系統(tǒng)。采用梯度洗脫系統(tǒng)時，應注明洗脫程序，并在“色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗”項下規(guī)定待測物質的保留時間。2023/7/2726流動相反相色譜的流動相首選甲醇一水系統(tǒng)2023/8/827檢測器首選紫外檢測器。無紫外吸收的物質可選用示差折光檢測器或蒸發(fā)光散射檢測器。亦可根據(jù)待測物質的性質選用熒光檢測器或電化學檢測器等其他檢測器。2023/7/2727檢測器首選紫外檢測器。無紫外吸收的物質2023/8/828系統(tǒng)適用性試驗為確保建立的高效液相色譜系統(tǒng)具有專屬性、準確性與重現(xiàn)性，需進行系統(tǒng)適用性試驗，一般通過理論板數(shù)(n)、分離度(R)、重復性與拖尾因子(T)等四個指標進行評價。其中，應特別關注分離度，并在“色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗”項下對其作出具體規(guī)定。2023/7/2728系統(tǒng)適用性試驗為確保建立的高效液相色譜2023/8/829理論板數(shù)用于評價色譜柱的效能。當色譜柱長度一定時，塔板數(shù)（n）越大，柱效能越高。由于不同物質在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，采用理論板數(shù)作為衡量柱效能的指標時，應指明測定物質，一般為待測組分或內標物質的理論板數(shù)。2023/7/2729理論板數(shù)用于評價色譜柱的效能。當色譜柱2023/8/830分離度用于評價待測組分與相鄰共存物或難分離物質之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)專屬性的關鍵指標?？梢酝ㄟ^測定待測物質與已知雜質的分離度，也可以通過測定待測組分與某一添加的指標性成分(內標物質或其他難分離物質)的分離度，對建立的色譜系統(tǒng)進行評價與控制。除另有規(guī)定外，定量分析時，待測組分與相鄰共存物之間的分離度應大于1.5；或經(jīng)過驗證，待測組分與指標性成分之間的分離度應大于某一規(guī)定值。2023/7/2730分離度用于評價待測組分與相鄰共存物或難2023/8/831重復性用于評價連續(xù)進樣后，色譜系統(tǒng)響應值的重復性能。采用外標法時，通常取對照品溶液，連續(xù)進樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測量值的相對標準偏差應不大于2.0％；采用內標法時，通常配制相當于80％、100％和120％的對照品溶液，加入規(guī)定量的內標溶液，配成3種濃度，分別至少進樣2次，計算平均校正因子，其相對標準偏差應不大于2.0％。2023/7/2731重復性用于評價連續(xù)進樣后，色譜系統(tǒng)響應2023/8/832拖尾因子（T）用于評價色譜峰的對稱性。除另有規(guī)定外，采用峰高法定量時，T應在0.95～1.05之間。采用峰面積法定量時，T值偏離過大，也會影響小峰的檢測和定量的準確度，必要時，應在正文項下明確規(guī)定。2023/7/2732拖尾因子（T）用于評價色譜峰的對稱性。2023/8/833定量方法如滿足定量精密度的要求，可選用外標法；選用內標法時，內標物質應選擇易得并對測定方法無干擾的物質。采用蒸發(fā)光散射檢測器時，應采用雙對數(shù)標準曲線法。用于雜質檢查時，可用雜質對照品法，如難以獲得雜質對照品時，提倡采用加校正因子的自身對照法，也可采用不加校正因子的自身對照法，避免采用峰面積歸一化法。2023/7/2733定量方法如滿足定量精密度的要求，可選用2023/8/834應用鑒別主要以與對照品的保留時間是否一致作為鑒別依據(jù)。雜質檢查主要檢查原料藥和制劑中可能引入的雜質或降解產物。溶出度、釋放度和含量均勻度的測定主要用于因雜質或輔料干擾，常規(guī)方法難以分離或分離手段繁雜或其他方法的檢測靈敏度達不到要求的品種。2023/7/2734應用鑒別主要以與對照品的保留時間是2023/8/835應用原料藥的含量測定主要用于以下情況：①多組分原料藥的含量測定或組分測定；②純度不高且雜質存在干擾，常規(guī)方法難以分離或分離手段繁雜的原料藥的含量測定。制劑的含量測定主要用于以下情況：①所含雜質或輔料干擾含量測定、須先經(jīng)繁雜分離后才能測定的制劑；②復方制劑。貯藏期間可能分解的制劑的含量測定原料藥及制劑的穩(wěn)定性研究和考察2023/7/2735應用原料藥的含量測定主要用于以下情有關物質HPLC檢查法有關物質取本品，精密稱定，用溶劑〔甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液（1:1)混合液〕溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液作為供試品溶液；另取可可堿對照品、茶堿對照品、咖啡因對照品與己酮可可堿對照品，精密稱定，用上述溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含1μg的混合溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（附錄VD)試驗。用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相A為甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液(3:

7)，流動相B為甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液(7:3)；檢測波長為272nm，按下表進行梯度洗脫。取對照品溶液20μ1，注人液相色譜儀，調節(jié)檢測靈敏度，使己酮可可堿色譜峰的峰高約為滿量程的10%;各組分出峰順序依次為可可堿、茶堿、咖啡因與己酮可可堿。有關物質HPLC檢查法有關物質取本品，精密稱定，己酮可可堿的保留時間約為12分鐘，茶堿峰與咖啡因峰的分離度應大于4,咖啡因峰與己酮可可堿峰的分離度應大于10;理論板數(shù)按己酮可可堿峰計算不低于5000。再精密量取供試品溶液與對照品溶液各20ml,注人液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有與可可堿、茶堿或咖啡因保留時間一致的色譜峰，按外標法以峰面積計算，均不得過0.1%;其他單個雜質峰面積不得大于對照品溶液中己酮可可堿的峰面積(0.1%)

;雜質總量不得過0.5%。時間（分鐘）流動相A(0/0)流動相B(%)0861468614131090301090388614438614己酮可可堿的保留時間約為12分鐘，茶堿峰與咖啡因峰的2023/8/838氣相色譜法本法可用于鑒別、揮發(fā)性有機雜質和殘留溶劑檢查及含量測定等。色譜條件根據(jù)待測物質的沸點與極性等性質，選擇不同的色譜條件，實現(xiàn)定性與定量分析的目的。氣相色譜通常可分為填充柱色譜與毛細管柱色譜，色譜條件主要包括：填料或固定相的種類、載氣、進樣方式、溫度、檢測器的種類與參數(shù)等。2023/7/2738氣相色譜法本法可用于鑒別、揮發(fā)性有機雜2023/8/839填料或固定相的種類填料填充柱色譜的填料可分為吸附劑類、高分子多孔小球和涂布固定液的硅藻土擔體。吸附劑類主要用于氣體分析；二乙烯苯一乙基乙烯苯交聯(lián)共聚時與不同極性官能團形成不同極性的高分子多孔小球，可用于有機溶劑殘留量檢查及多元醇、脂肪酸、腈類與胺類等藥物的測定；不同濃度與極性的固定液涂布于經(jīng)酸洗或硅烷化的白色擔體，常用作不同性質藥物分析時的填料。（填充柱已將淘汰）2023/7/2739填料或固定相的種類填料填充柱色譜的填料2023/8/840固定相毛細管柱色譜的固定相按極性分類。非極性固定相有100％二甲基聚硅氧烷，弱極性固定相有5％苯基一95％二甲基聚硅氧烷等，中等極性固定相有6％氰丙基苯基一94％二甲基聚硅氧烷等。極性固定相有聚乙二醇(PEG一20M)。用于藥物分析時，通常按照“相似相溶”的原理，根據(jù)組分的極性選擇適當極性的固定相。2023/7/2740固定相毛細管柱色譜的固定相按極性分類。2023/8/841載氣常用的載氣有氦氣、氮氣與氫氣，可根據(jù)供試品的性質和檢測器的種類選擇，除另有規(guī)定外，常用載氣為氮氣。建立系統(tǒng)時，應注意調節(jié)載氣的流速，使柱效達到最佳。2023/7/2741載氣常用的載氣有氦氣、氮氣與氫氣，可根2023/8/842進樣方式一般可采用溶液直接進樣或頂空進樣。溶液直接進樣，采用微量注射器、微量進樣閥或有分流裝置的氣化室進樣，體積一般為數(shù)微升，采用毛細管柱時，一般應采用分流進樣方式。頂空進樣適用于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測定，尤其適用于殘留溶劑測定。2023/7/2742進樣方式一般可采用溶液直接進樣或頂空進2023/8/843檢測器檢測器火焰離子化檢測器(FID)最為常用。測定含有電負性物質的組分時，可采用電子捕獲檢測器(ECD)。測定含硫、磷化合物時，火焰光度檢測器(FPD)選擇性較高。亦可根據(jù)測定需要選擇熱導檢測器(TCD)、氮磷檢測器(NPD)、質譜檢測器(MSD)等。2023/7/2743檢測器檢測器火焰離子化檢測器(FID)2023/8/844系統(tǒng)適用性試驗同“高效液相色譜法”的規(guī)定。定量方法一般采用內標法。當采用自動進樣器時，在保證進樣重復性良好的前提下，可采用外標法。當采用頂空進樣技術時，可采用標準溶液加入法以消除基質效應的影響，當標準溶液加入法與其他定量方法結果不一致時，應以標準加入法結果為準。2023/7/2744系統(tǒng)適用性試驗同“高效液相色譜法2023/8/845溫度溫度是氣相色譜分析的重要操作參數(shù)，它直接影響到色譜柱的選擇性、分離效能以及檢測器的靈敏度與穩(wěn)定性。建立色譜系統(tǒng)時，應控制進樣口溫度、柱溫和檢測器溫度。

a．進樣口溫度設定的溫度應能使樣品瞬間氣化而不分解，一般比柱溫高10～50℃即可。

b．柱溫設定柱溫的原則是在保證組分充分分離的前提下，盡量縮短分析時間。對于沸點范圍較寬的混合物，可采用程序升溫法，使沸點不同的組分在各自最佳柱溫下流出，從而改善分離效果，縮短分析時間。2023/7/2745溫度溫度是氣相色譜分析的重要操作參2023/8/846溫度檢測器溫度

對于恒溫操作，一般選擇與柱溫相同或略高于柱溫；對于程序升溫操作，一般選擇程序設定的最高溫度。除火焰離子化檢測器外，大多檢測器都對溫度的變化敏感，因此必須精密控制溫度。2023/7/2746溫度檢測器溫度對于恒溫操作，一2023/8/847應用鑒別主要以與對照品的保留時間是否一致作為鑒別依據(jù)。檢查主要檢查原料藥和制劑中的揮發(fā)性雜質、可能殘留的有機溶劑及制劑中的甲醇量或乙醇量。含量測定主要用于具有一定揮發(fā)性的原料藥及其制劑，亦可采用簡單易行的柱前衍生化法測定不揮發(fā)性藥物的含量。2023/7/2747應用鑒別主要以與對照品的保留時間殘留溶劑甲醇、丙酮與乙酸乙酯取本品約0.1g，精密稱定，置頂空瓶中，精密加入二甲基甲酰胺5ml使溶解，密封，作為供試品溶液；另分別取甲醇、丙酮與乙酸乙酯適量，精密稱定，用二甲基甲酰胺定量稀釋制成每1ml中各約含50μg的溶液，精密量取5ml,置頂空瓶中，密封，作為對照品溶液。照殘留溶劑測定法（附錄WP第二法）試驗。以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷（或極性相近）為固定液；起始溫度為50℃，維持3分鐘，以每分鐘40℃的速率升溫至160℃,維持3分鐘；進樣口溫度為200℃;檢測器溫度為250℃;頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時間為30分鐘。取對照品溶液頂空進樣，各成分峰之間的分離度均應符合要求。再取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，均應符合規(guī)定。殘留溶劑甲醇、丙酮與乙酸乙酯取本品約0.1g，精2023/8/849分子排阻色譜法本法可用于分子量測定、生物大分子聚合物分子量分布的測定及高分子雜質的測定。本法是根據(jù)待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜技術。其原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經(jīng)修飾凝膠如葡聚糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠等為填充劑。2023/7/2749分子排阻色譜法本法可用于分子量測定、生2023/8/850分子排阻色譜法填充劑表面分布著不同尺寸的孔徑，藥物分子進入色譜柱后，它們中的不同組分按其分子大小進入相應的孔徑內，大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內部，在色譜過程中不被保留，最早被流動相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保留時間較短；小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孑L徑，在色譜柱中滯留時間較長，表現(xiàn)為保留時間較長；其余分子則按分子大小依次被洗脫。本法分常壓、中壓和高壓。本法的系統(tǒng)適用性試驗一般情況下同高效液相色譜法。2023/7/2750分子排阻色譜法填充劑表面分布著不同尺寸2023/8/851應用分子量及分子量分布測定生物大分子聚合物如多糖等，具有分子大小不均一的特點，因此測定生物大分子聚合物的分子量及分子量分布是控制此類原料質量的重要指標。本法主要用于多糖類藥物。應根據(jù)供試品分子量大小選用孔徑相適應的凝膠作為色譜柱的填充劑。流動相通常為水溶液或緩沖液，溶液的pH值一般在2～8的范圍。2023/7/2751應用分子量及分子量分布測定生物大分子聚2023/8/852流速一般為每分鐘0.5～1.0ml。測定多糖的重均分子量時，可用示差折光檢測器，柱溫保持恒定。本方法系統(tǒng)適用性試驗用葡萄糖和藍色葡聚糖2000的溶液分別測得保留時間tT和t0

，要求供試品和對照品溶液峰的保留時間tR均應在tT和t0

之間。同時應規(guī)定按葡萄糖色譜峰計算的理論板數(shù)。2023/7/2752流速一般為每分鐘0.5～1.0ml2023/8/853測定時可根據(jù)供試品的重均分子量，選擇4～5個已知分子量并與供試品同質的對照品。以對照品重均分子量的對數(shù)值與相應的保留時間，用GPC軟件計算回歸方程，并計算出供試品的重均分子量及分子量分布。2023/7/2753測定時可根據(jù)供試品的重均分子量，選擇42023/8/854高分子量蛋白質限度檢查指多肽或蛋白質類在生產和貯存過程中生成的高分子聚合物或在生產過程中未能除盡的高分子物質。此類物質可能在臨床導致過敏性反應。因此供注射用的多肽、蛋白質類供試品均需檢查高分子物質。最常用的柱填充劑為親水性硅膠。應根據(jù)供試品分子量大小選用孔徑相適應的硅膠作為色譜柱的填充劑。除應注明粒徑外，必要時應注明色譜柱的柱長、內徑、分離分子量的范圍或色譜柱型號。2023/7/2754高分子量蛋白質限度檢查指多肽或蛋白質類2023/8/855根據(jù)供試品疏水性的不同，調節(jié)流動相中水相的比例，有機溶劑加入量一般不超過30％。流速一般為每分鐘0.5～0.8ml。檢測器選用UV檢測器，波長一般為276nm或214nm。2023/7/2755根據(jù)供試品疏水性的不同，調節(jié)流動相中水2023/8/856計算百分含量a．供試品為單一組分時，供試品色譜圖中保留時間小于主成分峰的其他峰均視為高分子蛋白，用歸一法計算出百分含量。b．供試品為多組分時，可選用一已知分子量多肽(或蛋白)作為“標記物”，亦可選用已知分子量的系列標準蛋白，作標準曲線，由標準曲線得到截留分子量的保留時間。供試品色譜圖中凡保留時間小于“標記物”或小于截留分子量的色譜峰均視為高分子蛋白，用歸一法計算出百分含量。2023/7/2756計算百分含量a．供試品為單一組分時，供2023/8/857內酰胺類抗生素高分子聚合物測定法本法用于β－內酰胺類抗生素原料藥及其制劑在生產或貯存過程中產生的高分子聚合物及在生產過程中未除盡的可能引起過敏反應的高分子物質的檢查?？股厮幬锔叻肿泳酆衔锵祵λ幤分蟹肿恿看笥谒幬锉旧淼碾s質的總稱。B一內酰胺類抗生素藥高分子聚合物的分子量一般在1000～5000，個別可達10000。2023/7/2757內酰胺類抗生素高分子聚合物測定法本法用2023/8/858本方法系統(tǒng)適用性試驗應注重高分子雜質峰與單體峰的分離度，并應考察對照測定系統(tǒng)與供試品測定系統(tǒng)中藍色葡聚糖2000溶液峰的保留時間(Kav=0)比值、理論板數(shù)與拖尾因子。根據(jù)β－內酰胺類抗生素高分子雜質的分子量特點，采用凝膠色譜分離。凝膠色譜填料首選為葡聚糖凝膠G一10(sephadexG10)，也可用葡聚糖交聯(lián)糖瓊脂凝膠(superdexpeptide)等。2023/7/2758本方法系統(tǒng)適用性試驗應注重高分子雜質峰2023/8/859

a．SephadexG10其排阻分子量為700，因此除部分低聚物外，β-內酰胺類抗生素高分子雜質在色譜過程中均不保留，即所有高分子雜質表現(xiàn)為單一色譜峰，其Kav=0。b．藍色葡聚糖2000在色譜過程中不保留，所以可用藍色葡聚糖2000的保留時間來表示高分子雜質的保留特性。2023/7/2759a．SephadexG10其排阻分2023/8/860流動相選擇及對色譜行為的影響a．高分子雜質測定用流動相一般選用磷酸鹽緩沖液，也可根據(jù)藥品性質選擇不同鹽的緩沖液。

b．緩沖液的離子強度對溶質的保留行為與響應值有影響。

c．緩沖液的種類、pH以及洗脫速度對溶質的色譜行為均有影響。2023/7/2760流動相選擇及對色譜行為的影響2023/8/861檢測器選用UV檢測器，波長一般為254nm或280nm。系統(tǒng)適用性試驗中應進行以下試驗。

a．分離度

照分子排阻色譜法項下規(guī)定分離度計算公式為：

分離度（R）＝高聚物的峰高/單體與高聚物峰間的谷高（>2.0）分離度試驗用溶液配制時，可加入一定量的藍色葡聚糖2000，使聚合物的峰面積達到該品種限度規(guī)定的1～2倍。b．以藍色葡聚糖2000的保留時間表示高分子雜質的保留特征，并規(guī)定對照溶液色譜峰及高分子雜質色譜峰與藍色葡聚糖2000色譜峰的保留時間的比值，一般為0.93～1.07。C.對照溶液進樣的重復性，連續(xù)進樣5針，峰面積相對標準偏差(RSD)應不大于5.0％。2023/7/2761檢測器選用UV檢測器，波長一般為22023/8/862用自身對照外標法計算高分子雜質限度。

a．β-內酰胺類抗生素高分子雜質具有高度不均一性和不確定性，高分子雜質本身不穩(wěn)定，對照品不易制得，經(jīng)試驗表明，在特定條件下(一般在以流動相為水的條件下)，B一內酰胺抗生素由于分子間的氫鍵、靜電、疏水相互作用等可形成表觀分子量較大的締合物，在SephadexG10凝膠色譜系統(tǒng)中的色譜行為與高分子雜質相同，都在Kav=0處表現(xiàn)為單一色譜峰，利用該特點，制定自身對照外標法。2023/7/2762用自身對照外標法計算高分子雜質限度。2023/8/863b．個別品種由于本身結構的影響在特定的條件下僅有少部分分子間發(fā)生締合或締合物本身又不穩(wěn)定時，應根據(jù)藥物本身分子結構特征改用其他可形成締合物結構類似品種替代，并用校正因子計算結果。c．規(guī)定供試品溶液進樣量與高分子雜質峰面積間的相關性要求，相關系數(shù)(r)應不小于0.99。2023/7/2763b．個別品種由于本身結構的影響在特定的2023/8/864紫外一可見分光光度法本法主要用于制劑的含量測定、含量均勻度和溶出度檢查，也可用于鑒別或部分藥品雜質檢查。用于制劑的含量測定、含量均勻度或溶出度檢查時，可采用對照品法或吸收系數(shù)法，但新建立的對照品或吸收系數(shù)必須經(jīng)過充分驗證。吸收系數(shù)若已為藥典(包括中國藥典、美國藥典、歐洲藥典、英國藥典、日本藥局方、國際藥典)收載，則可直接引用。2023/7/2764紫外一可見分光光度法本法主要用于制劑的2023/8/865紫外一可見分光光度法計算分光光度法應慎用，作為法定方法原則上不宜采用。含量測定不得采用此法。用于鑒別時，可規(guī)定除末端吸收以外的最大吸收波長，也可規(guī)定最小吸收波長或肩峰、不同波長處的吸光度比值。吸光度比值或雜質最大吸收波長處的吸光度限值也可用于藥品的純度檢查。采用本法應盡可能少使用有機溶劑，尤其應避免使用有毒溶劑；本法用于同一個品種不同項目測定時，應盡可能采用相同的溶劑。2023/7/2765紫外一可見分光光度法計算分光光度法應慎2023/8/866為提高本法的準確度，應避免溶劑、輔料或雜質的干擾。溶劑的選用應注意其純度和使用的截止波長。儀器的狹縫寬度，如另有規(guī)定外系指2nm，但若所測吸收譜帶的半高寬小于20nm，則應適當減小狹縫寬度。當溶液的pH值對吸光度有影響(當制劑的輔料對pH值有影響)時，應將供試品溶液和對照品溶液的pH值調成一致。用于測定的吸收譜帶的吸收強度應足夠大，其吸收系數(shù)E1％1cm，通常應大于100，吸光度數(shù)值以在0.3～0.7為宜。2023/7/2766為提高本法的準確度，應避免溶劑、輔料或2023/8/867紫外一可見分光光度法采用比色法測定時，應注意影響顯色條件的各種因素，并注意操作過程的一致性，當吸光度與濃度的關系偏離線性時應采用標準曲線法。2023/7/2767紫外一可見分光光度法采用比色法測定時，2023/8/868紅外分光光度法本法主要用于原料藥鑒別，也可用于異構體或不同晶型的限度檢查和制劑鑒別。除特殊品種外，凡組分單一、化學結構式明確的有機原料藥，原則上均應采用本法作鑒別。2023/7/2768紅外分光光度法本法主要用于原料藥鑒別，2023/8/869紅外分光光度法對于具有同質多晶現(xiàn)象的原料，應選用穩(wěn)定晶型或市場主流晶型的圖譜，如已規(guī)定藥用晶型，則應選用有效晶型的圖譜。如未規(guī)定藥用晶型，而市場上又有幾種晶型同時在使用，則應規(guī)定轉晶條件和重結晶溶劑，使轉變成穩(wěn)定晶型或主流晶型后，再依法測定。2023/7/2769紅外分光光度法對于具有同質多晶現(xiàn)象的原紅外分光光度法可用于藥品混晶中不同晶型的限度檢查，有時也可用于異構體限度的檢查和控制。用于制劑鑒別時，必須規(guī)定供試品的預處理方法，以避免或減少輔料的干擾。如不能完全消除輔料的干擾，可在指紋區(qū)適當選擇待測成分的3～5個不受輔料干擾的特征譜帶，規(guī)定其波數(shù)作為鑒別的依據(jù)。2023/8/870紅外分光光度法可用于藥品混晶中不同晶型的限度檢查，有時也可用紅外分光光度法除另有規(guī)定外，通常采用溴化鉀壓片法，如供試品為鹽酸鹽且制樣時又易發(fā)生離子交換現(xiàn)象，則應采用氯化鉀壓片法。如制樣(研磨和壓片)時易發(fā)生晶型變化，則應采用石蠟糊法或其他適宜制樣法。藥品存在多晶現(xiàn)象，而轉晶結果又不易重現(xiàn)的品種，可采用對照品平行轉晶比對法，或溶液光譜對比法。2023/8/871紅外分光光度法除另有規(guī)定外，通常采用溴化鉀壓片法，如供試品為紅外分光光度法陰離子具有強吸收的鹽類藥品(例如磷酸鹽)，可采用其游離堿作紅外鑒別，但應明確規(guī)定供試品的預處理方法。多組分藥品，當各組分的相對含量不固定時，不宜采用標準光譜比對法。必要時經(jīng)考核，也可采用特征譜帶比較法，即選擇有效成分的若干個特征譜帶，規(guī)定其波數(shù)作為鑒別的依據(jù)。2023/8/872紅外分光光度法陰離子具有強吸收的鹽類藥品(例如磷酸鹽)，可采原子吸收分光光度法本法用于樣品中所含的金屬元素或某些非金屬元素的含量測定和限度檢查。測定前必須采用適當方法將供試品破壞，并在原子化器中將待測元素轉化為基態(tài)原子。根據(jù)待測元素原子化的難易程度，可選擇適當?shù)脑踊骷跋鄳脑踊瘲l件。2023/8/873原子吸收分光光度法本法用于樣品中所含的金屬元素或某些非金屬元原子吸收分光光度法通常采用火焰型原子化器；但若待測元素所需的原子化溫度較高或在火焰中易形成難離解的氧化物，則宜采用石墨爐法；易于生成揮發(fā)性氫化物的元素As、Pb、Cd、Ge、Sn、Sb、Bi、Se、Te、Zn等宜采用氫化物原子化器，對易揮發(fā)性的Hg可采用冷蒸氣法。2023/8/874原子吸收分光光度法通常采用火焰型原子化器；但若待測元素所需的參照儀器推薦的工作條件和待測元素的性質，正確設置儀器的工作參數(shù)和檢測條件，例如空心陰極燈的工作電流、光譜帶寬、火焰原子化器的火焰類型、燃氣和助燃氣的比例，石墨爐的升溫程序等，為減少干擾，有時還需添加機體改進劑，所用各試驗條件均應根據(jù)實際情況正確選定。2023/8/875參照儀器推薦的工作條件和待測元素的性質，正確設置儀器的工作參根據(jù)儀器靈敏度和待測元素的性質，適當選擇供試品溶液的濃度，以保證良好的線性關系。含量測定通常采用標準曲線法，當標準曲線線性良好并通過原點時，也可采用標準加入法。用于雜質檢查時，應注意供試品溶液和對照品溶液的讀數(shù)是否均在線性范圍內。2023/8/876根據(jù)儀器靈敏度和待測元素的性質，適當選擇供試品溶液的濃度，以熒光分析法熒光分析法具有靈敏度高、選擇性強、試樣量少等優(yōu)點，因此本法適用于低濃度的具熒光性藥物及經(jīng)處理后產生熒光的藥物的定性定量。2023/8/877熒光分析法熒光分析法具有靈敏度高、選擇性強、試樣量少等優(yōu)點，熒光分析法根據(jù)待測成分的熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜，正確選擇激發(fā)波長和發(fā)射波長，兩者的波長差以大于30nm為宜。如熒光發(fā)射光譜顯示有幾個強度適宜的譜帶可供選擇時，為減少光分解和背景干擾，以選擇波長較長的譜帶為好。2023/8/878熒光分析法根據(jù)待測成分的熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜，正確選擇熒光分析法易發(fā)生光分解的熒光物質，在可能情況下應盡量采用較小的入射狹縫，并適當縮短激發(fā)光照射溶液的時間，必要時可選擇一種與待測成分具有類似熒光特性且對光穩(wěn)定的化合物配制對照溶液，用以校正儀器的靈敏度。2023/8/879熒光分析法易發(fā)生光分解的熒光物質，在可能情況下應盡量采用較小熒光分析法適當選擇溶液的濃度，以保證熒光強度對濃度呈線性關系，此時可用單點比較法計算含量。但若明顯偏離線性時，應采用標準曲線法。2023/8/880熒光分析法適當選擇溶液的濃度，以保證熒光強度對濃度呈線性關系火焰光度法僅適用于某些堿金屬或堿土金屬元素(如Na、K、ca等)的含量測定。通常采用煤氣或液化石油氣作燃氣，空氣作助燃氣。根據(jù)所用儀器的靈敏度及其線性范圍，適當調整溶液的濃度，以確保信號強度與被測元素的濃度呈線性關系。2023/8/881火焰光度法僅適用于某些堿金屬或堿土金屬元素(如Na、K、ca容量分析方法在含量測定中的應用指導原則容量分析方法具有準確、精密等優(yōu)點，因此在原料藥的含量測定中仍廣泛采用。所選用的容量分析方法一般應測定藥物中對生理作用有效的部分。對于純度較高且穩(wěn)定的原料藥，其含量測定首選容量分析方法。為彌補容量分析方法專屬性的不足，應增加有關的檢查項目。2023/8/882容量分析方法在含量測定中的應用指導原則容量分析方法具有準確、容量分析方法在含量測定中的應用指導原則供試品的取用量應滿足滴定精度的要求，一般消耗滴定液約20ml，非水滴定法約8ml。滴定終點的判斷要明確，如選用指示劑法，終點的顏色應按電位滴定曲線確定。為了排除因加入其他試劑而混入雜質對測定結果的影響，可采用空白試驗校正。2023/8/883容量分析方法在含量測定中的應用指導原則供試品的取用量應滿足滴容量分析方法在含量測定中的應用指導原則用高氯酸滴定法測定有機堿的氫鹵酸鹽的含量，避免使用醋酸汞。每1ml滴定液相當于待測物質的換算因子，采用四位有效數(shù)字。2023/8/884容量分析方法在含量測定中的應用指導原則用高氯酸滴定法測定有機專項檢查法應用指導原則殘留溶劑測定法

藥品中的殘留溶劑系指在原料藥、輔料以及制劑生產中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機揮發(fā)性化合物。當藥品中所含的殘留溶劑水平高于安全值時，會對人體或環(huán)境產生危害，因此在藥品質量標準中應予以控制。2023/8/885專項檢查法應用指導原則殘留溶劑測定法2023/7/2785殘留溶劑測定法ICH(人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調會)將藥品生產和純化過程中常用的69種有機溶劑按照其對人體和環(huán)境的危害程度分成4類，并分別推薦了相應的限度值。通常藥品有機溶劑的殘留量應符合ICH的規(guī)定。2023/8/886殘留溶劑測定法ICH(人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調會)將藥殘留溶劑測定法對藥品生產中使用的其他溶劑，應根據(jù)其毒性大小及其殘留量和生產工藝等特點，結合臨床用藥劑量，確定是否需要控制及設定相應的限度。2023/8/887殘留溶劑測定法對藥品生產中使用的其他溶劑，應根據(jù)其毒性大小及殘留溶劑測定法目前常用的殘留溶劑檢測方法是頂空毛細管氣相色譜法。對沸點較高不易采用頂空法進樣的有機溶劑如DMF(二甲基甲酰胺)等的測定，也可使用普通的填充柱，采用溶液直接進樣法測定。對不宜采用氣相色譜法測定的某些含氮堿性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等，可采用其他方法如高效毛細管電泳法或離子色譜法等進行測定。2023/8/888殘留溶劑測定法目前常用的殘留溶劑檢測方法是頂空毛細管氣相色譜殘留溶劑測定法毛細管氣相色譜柱的固定相通常有：100％二甲基聚硅氧烷(如SPB-1)、5％二苯基一95％二甲基聚硅氧烷(如HP-5)、35％二苯基-65％二甲基聚硅氧烷(如HP-35)、6％氰基丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷(如DB-624)、50％氰基丙基苯基-50％二甲基聚硅氧烷(如HP-50)和100％聚乙二醇(如DB-WAX、FFAP)等，其極性依次增加。應根據(jù)檢測對象的特性選擇適宜的色譜柱。2023/8/889殘留溶劑測定法毛細管氣相色譜柱的固定相通常有：100％二甲基殘留溶劑測定法選擇配制供試品溶液和對照品溶液所用的溶劑時，應考慮供試品在所選溶劑中的溶解性能。一般應將供試品完全溶解。采用頂空進樣時，常用的溶劑有水(為增加溶解度，必要時也可采用無揮發(fā)性的酸、堿溶液作溶劑，但應證明其不干擾測定)、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜等；2023/8/890殘留溶劑測定法選擇配制供試品溶液和對照品溶液所用的溶劑時，殘留溶劑測定法采用直接進樣時，還可采用其他適宜的有機溶劑(非控制對象)為溶劑，但為防止待測溶劑可能因成鹽、水解而降低揮發(fā)性或腐蝕儀器，應避免使用酸、堿溶液作溶劑。2023/8/891殘留溶劑測定法采用直接進樣時，還可采用其他適宜的有機溶劑(非殘留溶劑測定法對照品溶液的配制必須采用稱重一稀釋法，而不能用微量注射器吸取若干微升溶劑后直接配制對照品溶液。采用頂空進樣法測定時，應根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點選擇頂空溫度。2023/8/892殘留溶劑測定法對照品溶液的配制必須采用稱重一稀釋法，而不能用殘留溶劑測定法對沸點較高的殘留溶劑，通常選擇較高的頂空溫度；但此時應兼顧供試品的熱穩(wěn)定性，力求避免供試品在頂空氣一液平衡過程中產生揮發(fā)性熱分解產物干擾測定。對以水為溶劑的供試品，頂空溫度一般應小于90℃。頂空平衡時間一般不少于30分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠的時間達到平衡。對照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。2023/8/893殘留溶劑測定法對沸點較高的殘留溶劑，通常選擇較高的頂空溫度；殘留溶劑測定法氣相色譜的普通不銹鋼管路、進樣器的襯管等對有機胺等含氮堿性化合物具有較強的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低。當采用氣相色譜法測定此類化合物時，應采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料管路，同時采用脫活處理過的襯管。2023/8/894殘留溶劑測定法氣相色譜的普通不銹鋼管路、進樣器的襯管等對有機殘留溶劑測定法殘留溶劑測定通常采用火焰離子化檢測器(FID)，對含鹵素等強電負性元素的有機溶劑如三氯甲烷等，采用電子捕獲檢測器(ECD)易得到高的靈敏度。2023/8/895殘留溶劑測定法殘留溶劑測定通常采用火焰離子化檢測器(FID)殘留溶劑測定法殘留溶劑測定通常屬于微量或痕量分析，在質量標準中殘留溶劑測定一般為限度試驗。方法確定后應按中國藥典的相關規(guī)定進行方法學驗證，以排除殘留溶劑測定中常見的共出峰干擾(未知有機揮發(fā)性化合物與待測物的色譜峰重疊)、熱降解干擾(供試品熱裂解產生待測物。2023/8/896殘留溶劑測定法殘留溶劑測定通常屬于微量或痕量分析，在質量標準殘留溶劑測定法如含甲氧基的化合物熱裂解可產生甲醇)、基質效應(供試品溶液與對照品溶液組成差異對頂空氣-液平衡的影響)等對測定的影響，并確定方法的線性范圍、檢測限、重現(xiàn)性等特性。2023/8/897殘留溶劑測定法如含甲氧基的化合物熱裂解可產生甲醇)、基質效應殘留溶劑測定法氣相色譜法對殘留溶劑有三種定量方法：內標法、外標法、標準加入法。通常采用內標法進行定量，當存在基質效應時，以采用標準加入法為宜。2023/8/898殘留溶劑測定法氣相色譜法對殘留溶劑有三種定量方法：內標法、外溶液顏色檢查法因純度或穩(wěn)定性變化而導致其溶液顏色變化的原料藥和非口服制劑，均應設置溶液顏色檢查項。檢查的方法有目視比色法、紫外一可見分光光度法和色差計法。2023/8/899溶液顏色檢查法因純度或穩(wěn)定性變化而導致其溶液顏色變化的原料藥溶液顏色檢查法大多數(shù)藥品都可首選第一法，即：首先將供試品參考制劑規(guī)格用量配制成一定濃度的溶液與規(guī)定的標準比色液進行目視比較，如能明確辨別二者深淺時即得。如遇供試品溶液與規(guī)定的標準比色液顏色深淺非常接近或色調不盡一致，使目視辨別困難時，則借助色差計進行判斷。2023/8/8100溶液顏色檢查法大多數(shù)藥品都可首選第一法，即：首先將供試品參考溶液顏色檢查法溶液色調不穩(wěn)定，可有兩種或兩種以上色調變化的品種，質量標準中也應規(guī)定出相應的兩種或兩種以上色調的標準比色液與之進行比較。當藥品溶液的色調超出《中國藥典》附錄規(guī)定的色調范圍時，可另外制訂對照液的配制方法，但應盡量使用《中國藥典》附錄所用的三原色標準溶液來配制。2023/8/8101溶液顏色檢查法溶液色調不穩(wěn)定，可有兩種或兩種以上色調變化的品溶液顏色檢查法當藥品溶液的顏色與可見光區(qū)特定波長處的吸光帶對應時，也可選用紫外-可見分光光度法，通過測定相應波長處的吸光度來檢查藥品溶液的顏色。溶液呈現(xiàn)的色調經(jīng)常處在兩種標準比色液之間，使目視難于判定的品種，應選用色差計測定其溶液的顏色。限度規(guī)定為兩種色調相應色號標準比色液與水的色差值的平均值。2023/8/8102溶液顏色檢查法當藥品溶液的顏色與可見光區(qū)特定波長處的吸光帶對溶液顏色檢查法制備供試品溶液的溶劑首選水。當由于溶解度或穩(wěn)定性等原因使得水作為溶劑不適用時，原料藥可改用其他溶劑，制劑可改用該藥品在臨床使用時的溶解溶劑。對于溶液顏色穩(wěn)定性差、對溫度或時間敏感的品種應在經(jīng)過考察后，在標準中標明適宜的測定溫度和時間范圍。2023/8/8103溶液顏色檢查法制備供試品溶液的溶劑首選水。當由于溶解度或穩(wěn)定澄清度檢查法本法是利用原料藥與雜質在特定溶劑中的溶解性能上的差異，對藥品質量進行控制的檢查方法。檢查的方法采用目視法，目視法照度為1000Lx，儀器裝置同可見異物檢查法第一法中的傘棚燈裝置。除另有規(guī)定外，一般應在室溫下進行。2023/8/8104澄清度檢查法本法是利用原料藥與雜質在特定溶劑中的溶解性能上的目視法的濁度標準液通常采用硫酸肼與烏洛托品按照規(guī)定方法制成的溶液。對于某些帶乳色供試液的檢查，不能采用上述濁度標準液的，可采用標準氯化鈉溶液與硝酸銀試液產生的渾濁度比較或者與特定的渾濁對照液進行比較。供試品溶液和濁度標準液均應置于專用比濁玻璃管中進行比較。比較應在濁度標準液制備5分鐘后進行；除另有規(guī)定外，供試品溶液配制后，應立即檢視。2023/8/8105目視法的濁度標準液通常采用硫酸肼與烏洛托品按照規(guī)定方法制成的澄清度檢查法溶劑一般為水，也可用甲醇、乙醇等有機溶劑，或酸性溶液、堿性溶液。其小標題分別為“溶液澄清度”、“甲醇溶液的澄清度”、“乙醇溶液的澄清度”、“酸性溶液的澄清度”和“堿性溶液的澄清度”等。制劑可用水或臨床專用溶劑。原料藥配制檢查澄清度用的溶液時，可參考制劑規(guī)格用量的濃度。2023/8/8106澄清度檢查法溶劑一般為水，也可用甲醇、乙醇等有機溶劑，或酸性澄清度檢查法當供試品溶液澄清度相同于所用溶劑，或不濃于0.5號濁度標準液時，供試品溶液可視為澄清。注射用無菌粉末應結合臨床用藥和制劑規(guī)格制定澄清度檢查用溶液，原則上供試液濃度應嚴于臨床使用濃度。2023/8/8107澄清度檢查法當供試品溶液澄清度相同于所用溶劑，或不濃于0.5不溶性微粒檢查法本法系在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈用溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液中不溶性微粒的大小及數(shù)量。檢查方法為光阻法與顯微計數(shù)法。一般先用光阻法，當光阻法測定不符合規(guī)定或供試品不適用光阻法測定時，應采用顯微計數(shù)法，并以其測定結果作為最終判定依據(jù)。2023/8/8108不溶性微粒檢查法本法系在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈不溶性微粒檢查法采用光阻法測定時，一般采用靜置脫氣法，而且翻轉時必須緩緩進行。標示裝量為25ml或大于25ml的注射液，每次取樣體積應為5ml。標示裝量少于25ml的注射液，有兩種取樣方式可供選擇：①合并不少于3個容器的內容物，使總體積不少于20ml，然后每次取樣5ml測定；2023/8/8109不溶性微粒檢查法采用光阻法測定時，一般采用靜置脫氣法，而且翻不溶性微粒檢查法②取供試品不少于3個容器，根據(jù)每個容器的標示體積適當設定取樣體積(以不吸人氣泡為限)，依法測定，如取樣體積小于標示體積的95％時，測定結果須折算到標示體積。2023/8/8110不溶性微粒檢查法②取供試品不少于3個容器，根據(jù)每個容器的標示注射用無菌粉末，根據(jù)臨床使用情況，制成一定濃度的供試品溶液，參照上述注射液的取樣方式測定。即溶液體積大于5ml時，應取5ml測定，若溶液體積小于5ml，則應根據(jù)實際體積，適當設置取樣體積。濃溶液如因黏度太大而不便直接測定時，可適當稀釋后測定。應考慮供試品濃度對測定結果的影響。2023/8/8111注射用無菌粉末，根據(jù)臨床使用情況，制成一定濃度的供試品溶液，滲透壓摩爾濃度測定法溶劑通過半透膜，由低濃度溶液向高濃度溶液擴散的現(xiàn)象稱為滲透，阻止?jié)B透所需施加的壓力，稱為滲透壓。注射劑(主要是靜脈輸液)、眼用液體制劑(主要是滴眼液、眼內注射液、洗眼液)等制劑，應進行滲透壓檢查。2023/8/8112滲透壓摩爾濃度測定法溶劑通過半透膜，由低濃度溶液向高濃度溶液測定滲透壓，通常以每千克溶劑中溶質的毫滲透壓摩爾濃度(mosmol／kg)表示；也有以毫滲透壓摩爾濃度比表示，即供試品與0.9％(g／ml)氯化鈉溶液的毫滲透壓摩爾濃度的比率。滲透壓摩爾濃度測定的操作方法，可照《中國藥典》二部附錄中滲透壓摩爾濃度測定法及《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》中“滲透壓摩爾濃度測定法”。2023/8/8113測定滲透壓，通常以每千克溶劑中溶質的毫滲透壓摩爾濃度(mos靜脈輸液及眼用液體制劑，一般應調節(jié)等滲，其毫滲透壓摩爾濃度一般應為260～320mOsmoL／kg，或滲透壓比一股應為0.9～1.1。主要用作血容量擴充劑和高滲利尿脫水劑的靜脈輸液為高滲透壓輸液，應在標簽及使用說明書上注明溶液的毫滲透壓孽爾濃度及使用方法。2023/8/8114靜脈輸液及眼用液體制劑，一般應調節(jié)等滲，其毫滲透壓摩爾濃度一可見異物檢查法供注射用無菌原料藥、注射劑、滴眼劑應設置可見異物檢查項，用以檢查在規(guī)定條件下目視可以觀測到的不溶性物質(其粒徑或長度通常大于50μm)?？梢姰愇餀z查的方法主要有燈檢法和光散射法。2023/8/8115可見異物檢查法供注射用無菌原料藥、注射劑、滴眼劑應設置可見異可見異物檢查法燈檢法可用于大多數(shù)樣品，但用深色透明容器包裝或供試品溶液色澤較深(例如超過相應色調標準比色液7號)的樣品應選用光散射法。根據(jù)儀器檢測的原理，溶液渾濁的樣品及混懸型注射劑、滴眼劑不能采用光散射法檢查可見異物。2023/8/8116可見異物檢查法燈檢法可用于大多數(shù)樣品，但用深色透明容器包裝或可見異物檢查法供注射用無菌原料藥應在品種各論中注明取樣量，一般為各品種制劑項下的最大規(guī)格量，如規(guī)格量過大，取樣量可酌減，但限度也應隨之調整，以適應其制劑的需要。注射用無菌粉末及無菌原料藥制備供試品溶液所選用的溶劑應與臨床使用時的溶劑相一致。為方便實驗，水溶性藥物一般使用不溶性微粒檢查用水即可。如由于溶解度或穩(wěn)定性等原因需采用其他溶劑，則應在品種各論中明確規(guī)定。2023/8/8117可見異物檢查法供注射用無菌原料藥應在品種各論中注明取樣量，一溶解樣品的溶劑量首先要確保樣品溶解完全。除配帶專用溶劑的固體制劑外，如10ml以下的溶劑量就能確保樣品溶解完全，則質量標準中可不標注溶劑量；如需10ml以上才能確保樣品溶解完全，則需在質量標準中明確規(guī)定溶劑的最小體積。某些在臨床使用前需經(jīng)適當處理(如微溫使溶、強力振搖若干分鐘等)的樣品，也可經(jīng)同樣處理后再進行可見異物檢查，但處理方法應在質量標準中明確規(guī)定。2023/8/8118溶解樣品的溶劑量首先要確保樣品溶解完全。除配帶專用溶劑的固體崩解時限檢查法用于檢查固體制劑在規(guī)定條件下的崩解情況。介質通常為水，薄膜衣片可改在鹽酸溶液(9→1000)中進行。主要用于水易溶性藥物的制劑(如片劑、膠囊劑、丸劑等)。崩解時限檢查一般不加擋板。漂浮的膠囊劑可加擋板或采用溶出度或釋放度測定法測定。腸溶制劑應采用釋放度測定法測定。凡檢查溶出度或釋放度的制劑，一般不再進行崩解時限檢查。2023/8/8119崩解時限檢查法用于檢查固體制劑在規(guī)定條件下的崩解情況。介質通融變時限檢查法用于檢查栓劑、陰道片等固體制劑在規(guī)定條件下的融化、軟化或溶散情況。介質為水。融變時限主要用于栓劑，包括水溶性或脂溶性基質的不同給藥途徑的品種。溶散時限用于陰道片劑。

2023/8/8120融變時限檢查法用于檢查栓劑、陰道片等固體制劑在規(guī)定條件下的融溶出度檢查法用于檢查藥物活性成分從片劑、膠囊劑或顆粒劑等制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度。對于難溶性藥物，崩解時限檢查并不能完全正確地反映主藥的溶出速率和溶出程度，因此需要進行溶出度測定。2023/8/8121溶出度檢查法用于檢查藥物活性成分從片劑、膠囊劑或顆粒劑等制劑溶出度檢查法除主藥本身的溶解性能外，制劑的處方和生產工藝也對主藥的溶出或釋放有影響，從而影響其制劑的生物利用度，因此在藥物制劑研制階段，即應進行溶出曲線或釋放曲線與生物利用度的相關性研究。2023/8/8122溶出度檢查法除主藥本身的溶解性能外，制劑的處方和生產工藝也對溶出度檢查法研制仿制藥時應取該仿制藥與原研藥在多種溶出條件下進行溶出曲線或釋放曲線對比試驗，相同條件下的對比試驗曲線應基本一致。制劑溶出曲線的累積溶出量一般應大于標示量的90％。2023/8/8123溶出度檢查法研制仿制藥時應取該仿制藥與原研藥在多種溶出條件下溶出度檢查法藥物活性成分在水中微溶至不溶的口服制劑應進行溶出度檢查。因處方與生產工藝不同容易造成臨床療效差異的制劑、藥物活性成分的治療量與中毒量相接近或不宜釋放過快的口服制劑(包括易溶性藥物)，應設置多個檢查時間點及相應的溶出量。2023/8/8124溶出度檢查法藥物活性成分在水中微溶至不溶的口服制劑應進行溶出溶出度檢查法溶出度測定法主要有第一法(轉籃法)、第二法(槳法)和第三法(小杯法)。對于不同藥物不同處方的口服制劑，在制訂溶出度檢查的方法時，應根據(jù)具體情況進行選擇，目的是建立一種科學的溶出度評價方法，既保證溶出結果的準確、可靠，又對質量不同的制劑具有良好的區(qū)分能力，溶出度測定法的選擇一般可參照下列原則。2023/8/8125溶出度檢查法溶出度測定法主要有第一法(轉籃法)、第二法(槳法溶出度檢查法對于非崩解型藥物，宜采用轉籃法。對于崩解型藥物，在進行轉籃法的整個試驗過程中，確保轉籃網(wǎng)孔的通透性尤為重要，對于處方中主藥或輔料(如膠性物質)影響轉籃通透性的固體制劑，一般應采用槳法。制劑中含有難以溶解、擴散的成分，一般應采用槳法。2023/8/8126溶出度檢查法對于非崩解型藥物，宜采用轉籃法。2023/7/2溶出度檢查法對飄浮于液面的制劑，一般應選用轉籃法。如輔料堵塞網(wǎng)孔則選用槳法，將供試品放人沉降籃中，并在正文中加以規(guī)定。采用小杯法時不能使用沉降籃。小杯法主要用于在轉籃法和槳法條件下，溶出液的濃度過稀，即使采用較靈敏的方法仍難以進行定量測定的品種。2023/8/8127溶出度檢查法對飄浮于液面的制劑，一般應選用轉籃法。如輔料堵塞溶出度檢查法在質量研究的基礎上，應盡量選擇低轉速，轉籃法推薦100轉/分，最低不低于50轉/分；槳法推薦50轉/分，最高不超過75轉/分；小杯法推薦35轉/分，最高不超過50轉/分。2023/8/8128溶出度檢查法在質量研究的基礎上，應盡量選擇低轉速，轉籃法推薦溶出度檢查法應根據(jù)制劑的特性選用水、0.01～0.1moL/L鹽酸溶液或適宜的緩沖液(pH值一般不超過7.6)作溶出介質。溶出介質應臨用新制并經(jīng)脫氣處理。對于極難溶出的制劑可加適量表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉(0.5％以下)；如確需使用有機溶劑，可加適量，如異丙醇、乙醇等(通常濃度在5％以下)，但應有依據(jù)，并盡量選用低濃度。2023/8/8129溶出度檢查法應根據(jù)制劑的特性選用水、0.01～0.1moL/溶出度檢查法溶出介質的體積一般應符合漏槽條件。漏槽條件是指藥物在溶出(釋放)介質中的濃度遠小于其飽和濃度，一般溶出(釋放)介質的體積為藥物飽和溶液所需介質體積的3～10倍。一般情況下針對溶出度測定法第一法和第二法選擇溶出介質的體積為500m1、1000ml和900ml。2023/8/8130溶出度檢查法溶出介質的體積一般應符合漏槽條件。漏槽條件是指藥溶出度檢查法應注意膠囊殼對測定產生的干擾，應取同批的不少于6粒的空膠囊(或盡可能完全除盡內容物的空膠囊)，置同一溶出杯內，用溶出度測定試驗條件下的溶出介質溶解空膠囊殼，并按溶出度測定試驗同樣的分析方法測定每個空膠囊的空白值，作必要的校正。如校正值大于標示量的25％，試驗無效；如校正值不大于標示量的2％，可忽略不計。2023/8/8131溶出度檢查法應注意膠囊殼對測定產生的干擾，應取同批的不少于6溶出度檢查法擬用加酶法測定溶出度時，首先應有符合溶出度測定要求的試劑酶，對試劑酶應有活力和純度要求，其空白校正值應控制在一定范圍內。2023/8/8132溶出度檢查法擬用加酶法測定溶出度時，首先應有符合溶出度測定要溶出量的測定采用自身對照法的僅限于沒有化學對照品的多組分藥品，在制定方法時，應對對照溶液的制備方法進行驗證，以保證其有效成分盡可能完全溶解，在質量標準中應詳細列出使有效成分完全溶解的處理方法，限度一般規(guī)定為75％以上。溶出度測定時，除另有規(guī)定外，每個溶出杯中只允許投入供試品1片(粒、袋)，不得多投。2023/8/8133溶出量的測定采用自身對照法的僅限于沒有化學對照品的多組分藥品溶出度取樣時間及限度的確定，應考慮臨床用藥需求以及制劑特點，考察溶出曲線。一般取樣時間為45分鐘，限度(Q)為標示量的70％。復方制劑的溶出度測定應重點針對藥物活性成分在水中微溶至不溶的口服制劑或因處方與工藝差異不同容易造成臨床療效差異的制劑中的藥物活性成分進行。2023/8/8134溶出度取樣時間及限度的確定，應考慮臨床用藥需求以及制劑特點，釋放度測定法用于檢查藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等在規(guī)定條件下釋放的速率和程度。釋放度取樣時間及限度的確定，應考慮臨床用藥需求以及制劑特點，考察釋放曲線。除另有規(guī)定外，緩釋、控釋、腸溶制劑的體外藥物釋放度試驗可采用溶出度測定儀進行。2023/8/8135釋放度測定法用于檢查藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮緩釋、控釋、腸溶制劑試驗時的模擬體溫應控制在37℃±0．5℃，但透皮貼劑的模擬表皮溫度應控制在32℃±0．5℃。緩釋制劑或控釋制劑按《中國藥典》釋放度測定法第一法檢查。腸溶制劑按《中國藥典》釋放度測定法第二法檢查。透皮貼劑按《中國藥典》釋放度測定法第三法檢查。2023/8/8136緩釋、控釋、腸溶制劑試驗時的模擬體溫應控制在37℃±0．5

釋放度檢查用釋放介質的選擇，原則上與溶出度相同，但可根據(jù)藥物的溶解特性、處方要求、吸收部位等作相應調整，釋放介質的體積應符合漏槽條件。2023/8/8137釋放度檢查用釋放介質的選擇，原則上與溶出度相同，但可根據(jù)藥體外釋放速率試驗應能反映出受試制劑釋藥速率的變化特征，且能滿足統(tǒng)計學處理的需要，釋藥全過程的時間應不低于給藥的間隔時間，且累積釋放百分率要求達到90％以上。除另有規(guī)定外，通常將釋藥全過程的數(shù)據(jù)作累積釋放百分率一時間的釋藥曲線圖，制訂出合理的釋放度檢查方法和限度。2023/8/8138體外釋放速率試驗應能反映出受試制劑釋藥速率的變化特征，且能滿緩釋制劑從釋藥曲線圖中至少選出3個取樣時間點，同時應根據(jù)給藥時間間隔不同，適當增加取樣點。一般第一取樣時間點為開始0.5～2小時，用于考察藥物是否有突釋，中間取樣時間點，用于確定釋藥特性，最后的取樣時間點，用于考察釋藥是否基本完全?？蒯屩苿┲辽龠x出5個時間點，應較全面地考察體外藥物恒速或幾乎恒速釋放情況。

2023/8/8139緩釋制劑從釋藥曲線圖中至少選出3個取樣時間點，同時應根據(jù)給藥如有生物利用度的實驗數(shù)據(jù)或文獻資料數(shù)據(jù)，應根據(jù)這些數(shù)據(jù)設計釋放度檢查方法及取樣時間。多于一個藥物活性成分的產品，對需緩釋的藥物活性成分應按以上要求進行釋放度測定；對非緩釋的藥物活性成分一般應按“溶出度檢查法”要求進行必要的測定。2023/8/8140如有生物利用度的實驗數(shù)據(jù)或文獻資料數(shù)據(jù)，應根據(jù)這些數(shù)據(jù)設計釋內容物非均一溶液的軟膠囊單劑量包裝口服混懸液、透皮貼劑、吸入劑和栓劑；所含主藥的治療量與毒副反應量接近或工藝中難以混勻的制劑；復方制劑符合上述條件的組分。凡檢查含量均勻度的制劑，一般不再進行重(裝)量差異的檢查；復方制劑除對符合條件的組分進行含量均勻度檢查外，一般還應對其他組分進行重(裝)量差異的檢查。2023/8/8141內容物非均一溶液的軟膠囊單劑量包裝口服混懸液、透皮貼劑、吸入含量均勻度檢查法用于檢查小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每個制劑劑量單位含量符合標示量的程度。除另有規(guī)定外，符合下列條件之一的品種應檢查含量均勻度?？诜腆w制劑或注射用無菌粉末，每個制劑劑量單位的標示量不大于25mg或主藥含量不大于劑量單位重量25％的品種；2023/8/8142含量均勻度檢查法用于檢查小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑含量均勻度檢查法含量均勻度的限度應符合各品種項下的規(guī)定?？诜腆w制劑限度一般應為±15％；單劑量包裝的口服混懸劑、內充混懸物的軟膠囊劑、膠囊型或泡囊型粉霧劑，單劑量包裝的眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑，其限度均應為±20％；貼劑、栓劑的限度一般應為±25％。2023/8/8143含量均勻度檢查法含量均勻度的限度應符合各品種項下的規(guī)定?？诜烤鶆蚨葯z查所用的測定方法應盡可能與含量測定方法相同。如不一致時，應采用經(jīng)方法學驗證符合含量測定要求的方法或與含量測定方法進行統(tǒng)計學分析比較的測定方法，若與含量測定方法有系統(tǒng)誤差時應進行必要的校正；如仍無合適方法應按《中國藥典》附錄方法