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第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀1第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀
一、概述generalization)電泳(electrophoresis)是指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電場(chǎng)中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象將多組分物質(zhì)分離、分析的技術(shù)叫做電泳技術(shù)(electrophoresistechnique)??梢詫?shí)現(xiàn)電泳分離技術(shù)的儀器稱之為電泳儀(electrophoresister)。
第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀一、概述ge2第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀
目前,電泳技術(shù)已廣泛用于蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、核苷酸、無(wú)機(jī)離子等成份的分離和鑒定,甚至還用于細(xì)胞與病毒的研究。臨床常用的電泳分析方法主要有醋酸纖維素薄膜電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳和毛細(xì)管電泳等。
第六章電泳技術(shù)和常用電泳儀目前,電泳3第一節(jié)電泳原理
一、電泳的基本原理物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相等,故不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下,某些物質(zhì)分子會(huì)成為帶電的離子(或粒子),不同的物質(zhì),由于其帶電性質(zhì)、顆粒形狀和大小不同,因而在一定的電場(chǎng)中它們的移動(dòng)方向和移動(dòng)速度也不同,因此可使它們分離。06-01電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象。第一節(jié)電泳原理一、電泳的基本原理06-04第一節(jié)電泳原理若將帶凈電荷Q的粒子放入電場(chǎng),則該粒子所受到的電荷引力為:F引=EQ(6-1)在溶液中,運(yùn)動(dòng)粒子與溶液之間存在阻力F阻F阻=6πrηV(6-2)當(dāng)F引=F阻時(shí)EQ=6πrηVV=EQ/6πrη(6-3)由上式可以看出,粒子的移動(dòng)速度(泳動(dòng)速度V)與電場(chǎng)強(qiáng)度(E)和粒子所帶電荷量(Q)成正比,而與粒子的半徑(r)及溶液的粘度(η)成反比。第一節(jié)電泳原理若將帶凈電荷Q的粒子放5第一節(jié)電泳原理
二、影響電泳的外界因素(一)電場(chǎng)強(qiáng)度
(二)溶液的pH值(三)溶液的離子強(qiáng)度(四)電滲作用(五)粒子的遷移率(六)吸附作用第一節(jié)電泳原理6第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法一、電泳技術(shù)的分類(一)根據(jù)工作原理的不同:可分為移界電泳、區(qū)帶電泳、等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。(二)根據(jù)有無(wú)固體支持物可分為:自由電泳和支持物電泳第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法一、電泳技術(shù)的分類7第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(三)根據(jù)支持載體的位置或形狀可分成:水平電泳、垂直電泳、板狀電泳、柱狀電泳、U型管電泳、倒V字形電泳、毛細(xì)管電泳等。(四)根據(jù)支持物的特點(diǎn)又可分為:①無(wú)阻滯支持物電泳。②高密度的凝膠電泳。(五)根據(jù)電源控制的不同,一般可分為以下3類:1.恒壓電泳;2.恒流電泳;3.恒功率電泳。第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(三)根據(jù)支持載體的位置或形狀8第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(六)根據(jù)自動(dòng)化程度的不同,可分為半自動(dòng)和全自動(dòng)型。(七)根據(jù)其功能的不同,可分為制備型、分析型、轉(zhuǎn)移型、濃縮型等。(八)根據(jù)用法的類型可分為:雙向電泳、交叉電泳、連續(xù)紙電泳、電泳-層析相結(jié)合技術(shù)等。(九)根據(jù)不同的使用目的可分為:核酸電泳、血清蛋白電泳、制備電泳、DNA測(cè)序電泳等。第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(六)根據(jù)自動(dòng)化程度的不同9第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法二、電泳方法簡(jiǎn)介
(一)紙電泳指用濾紙作為支持載體的電泳方法。是最早使用的區(qū)帶電泳。
06-02平臥式電泳槽裝置示意圖將濾紙條水平地架設(shè)在兩個(gè)裝有緩沖溶液的容器之間,樣品點(diǎn)于濾紙中央。當(dāng)濾紙條被緩沖液潤(rùn)濕后,再蓋上絕緣密封罩,即可由電泳電源輸入直流電壓(100V~1000V)進(jìn)行電泳。
第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法二、電泳方法簡(jiǎn)介10第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(二)醋酸纖維素薄膜電泳電泳時(shí)經(jīng)過(guò)膜的預(yù)處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。此電泳的特點(diǎn)是分離速度快、電泳時(shí)間短、樣品用量少。因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測(cè)。
06-03血清蛋白的電泳圖譜
第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(二)醋酸纖維素薄膜電泳011第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(三)凝膠電泳
由區(qū)帶電泳中派生出一種用凝膠物質(zhì)作支持物進(jìn)行電泳的方式,被稱為凝膠電泳。普通的凝膠電泳在板上進(jìn)行,以凝膠作為介質(zhì)。電泳中常用的凝膠為葡聚糖、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖。它具有機(jī)械強(qiáng)度好、彈性大、透明、化學(xué)穩(wěn)定性高、無(wú)電滲作用、設(shè)備簡(jiǎn)單、樣品量小
(1~100μg)、分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。
06-04凝膠電泳圖第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(三)凝膠電泳012第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(四)等電聚焦電泳1.等電聚焦電泳過(guò)程
一種利用有pH值梯度的介質(zhì),分離等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)。
將等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)混合物加入有pH值梯度的凝膠介質(zhì)中,在電場(chǎng)內(nèi)經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后,各組分將分別聚焦在各自等電點(diǎn)相應(yīng)的pH值位置上,最后,樣品的各組分在各自的等電點(diǎn)聚焦成一條清晰而穩(wěn)定的窄帶。
06-05凈電荷與PH的關(guān)系曲線
第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(四)等電聚焦電泳將等13第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法2.等電聚焦電泳的特點(diǎn)①使用兩性載體電解質(zhì),在電極之間形成穩(wěn)定、連續(xù)、線性的pH梯度;②由于“聚焦效應(yīng)”,即使很小的樣品也能獲得清晰、鮮明的區(qū)帶界面;③電泳速度快;④分辨率高;⑤加入樣品的位置可任意選擇;⑥可用于測(cè)定蛋白質(zhì)類物質(zhì)的等電點(diǎn);⑦適用于中、大分子量(如蛋白質(zhì)、肽類、同工酶等)生物組分的分離分析。第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法2.等電聚焦電泳的特14第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(五)等速電泳采用兩種不同濃度的電解質(zhì)組成,一種為前導(dǎo)電解質(zhì),充滿整個(gè)毛細(xì)管柱;另一種為尾隨電解質(zhì),置于一端的電泳槽中。前導(dǎo)電解質(zhì)的遷移率高于任何樣品組分,后者則低于任何樣品組分,被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間,在強(qiáng)電場(chǎng)的作用下,各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中移動(dòng),實(shí)現(xiàn)分離。06-06
等速電泳示意圖
第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(五)等速電泳采用兩種不同15第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(六)雙向凝膠電泳(二維電泳)第一向采用等電聚焦根據(jù)復(fù)雜的蛋白質(zhì)成分中各個(gè)蛋白質(zhì)的PI的不同,將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離。第二向采用了十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)就是按蛋白質(zhì)分子量的大小使其在垂直方向進(jìn)行分離。其結(jié)果不再是條帶狀,而是呈現(xiàn)為斑點(diǎn)狀。第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(六)雙向凝膠電泳(二維電泳)16第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法膠性PH9中電加解入質(zhì)了溶雙液
PH3加上電場(chǎng)后建立穩(wěn)定PH梯度蛋白質(zhì)溶液加入,建立電場(chǎng)染色后,蛋白質(zhì)因PI值不同,沿PH梯度分離開第一向等電聚焦PI逐漸降低等電聚焦膠放在SDS-聚丙烯酰胺凝膠上
第二向SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分子量逐漸降低PI逐漸降低
06-07雙向凝膠電泳示意圖第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法膠性PH9加上電場(chǎng)17第二節(jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(七)免
(疫)(役)電泳
免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴(kuò)散兩種方法的結(jié)合。將抗原樣品在瓊脂平板上先進(jìn)行電泳,使其中的各種成分因電泳遷移率的不同而彼此分開,然后加入抗體做雙相免疫擴(kuò)散,把已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴(kuò)散而相遇,在二者比例適當(dāng)?shù)牡胤剑纬扇庋劭梢姷某恋砘?。第二?jié)常用電泳技術(shù)和電泳方法(七)免(疫)(役)電泳18第三節(jié)常用電泳設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)及技術(shù)指標(biāo)一、常用電泳設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)(一)電泳電源(二)電泳槽(三)附加裝置06-08平臥式電泳槽裝置示意圖第三節(jié)常用電泳設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)及技術(shù)指標(biāo)一、常用電泳設(shè)備19第三節(jié)常用電泳設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)及技術(shù)指標(biāo)二、電泳儀的主要技術(shù)指標(biāo)1.輸出電壓8.連續(xù)工作時(shí)間2.輸出電流9.保護(hù)措施3.輸出功率10.顯示方式4.電壓穩(wěn)定度11.定時(shí)方式5.電流穩(wěn)定度12.電源電壓6.功率穩(wěn)定度13.電源頻率7.輸出組數(shù)14.功耗
第三節(jié)常用電泳設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)及技術(shù)指標(biāo)二、電泳儀的主要20第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式一、毛細(xì)管電泳的相關(guān)概念1.電場(chǎng)強(qiáng)度(ElectricFieldStrength)2.電泳淌度(ElectrophoreticMobility)3.遷移時(shí)間(MigrationTime)4.電泳速度(ElectrophoreticVelocity)5.電滲流(ElectroosmoticFlow,EOF)6.焦耳熱(JouleHeating)
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式一、毛細(xì)管電泳的相21第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式二、毛細(xì)管電泳的基本工作原理溶液中的帶電粒子以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,沿毛細(xì)管通道,以不同速度向與其所帶電荷相反的電極方向遷移,并依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離。第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式二、毛細(xì)22第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式06-09毛細(xì)管電泳儀裝置示意圖
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式06-023第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式三、毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)1.高靈敏度2.高速度3.高分辨率4.樣品少5.自動(dòng)化程度高6.應(yīng)用范圍廣
06-10
英特雷勃——全自動(dòng)電泳儀第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式三、毛細(xì)管電泳的特24第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式四、毛細(xì)管電泳的分離模式(一)毛細(xì)管區(qū)帶電泳
它是通過(guò)在充滿電解質(zhì)溶液的毛細(xì)管中,不同質(zhì)荷比大小的組分在電場(chǎng)的作用下,依遷移速度的不同而進(jìn)行分離的。根據(jù)組分的遷移時(shí)間進(jìn)行定性,根據(jù)電泳峰的峰面積或峰高進(jìn)行定量分析。
06-11毛細(xì)血管區(qū)帶電泳原理圖
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式四、毛細(xì)管電泳的分25第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(二)毛細(xì)管凝膠電泳將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物進(jìn)行的電泳。凝膠具有多孔性,起類似分子篩的作用,能根據(jù)待測(cè)組分的質(zhì)荷比和分子體積的不同而進(jìn)行分離。適用于分離、測(cè)定肽類、蛋白質(zhì)、DNA類物質(zhì)的分離。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(二)毛細(xì)管凝膠電26第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(三)毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜(MECC)使MECC系統(tǒng)中存在兩個(gè)相:流動(dòng)的水相和起到固定相作用的膠束相。在含有膠束的流動(dòng)相中,溶質(zhì)在“水相”和“膠束相”(準(zhǔn)固定相)之間進(jìn)行分配,即使是中性溶質(zhì),因其本身疏水性不同,在二者之間的分配也會(huì)有差異,疏水性強(qiáng)的溶質(zhì)在“膠束相”中停留時(shí)間長(zhǎng),遷移速度就慢。反之,親水性強(qiáng)的溶質(zhì)遷移速度就快,最終中性溶質(zhì)將依其疏水性不同而得以分離。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(三)毛細(xì)管膠束電27第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式06-12毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜原理圖第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式06-12毛細(xì)管膠28第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(四)毛細(xì)管等電聚焦電泳不同等電點(diǎn)的分子分別聚集在不同的位置上,不作遷移而彼此分離,這就是等電聚焦分離過(guò)程。毛細(xì)管的等電聚焦是在毛細(xì)管內(nèi)實(shí)現(xiàn)的等電聚焦過(guò)程,具有極高的分辨率,通??梢苑蛛x等電點(diǎn)差異小于0.01pH單位的兩種蛋白質(zhì),例如肽類、蛋白質(zhì)的分離。第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(四)毛細(xì)管等電聚29第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(五)毛細(xì)管等速電泳毛細(xì)管內(nèi)首先導(dǎo)入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導(dǎo)電解質(zhì),然后進(jìn)樣,隨后再導(dǎo)入比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質(zhì),在強(qiáng)電場(chǎng)的作用下,各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中發(fā)生分離。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(五)毛細(xì)管等速電30第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(六)毛細(xì)管電色譜它包含了電泳和色譜兩種機(jī)制,是在毛細(xì)管中填充或在毛細(xì)管壁上鍵合(或涂壁)固定相,從而構(gòu)成毛細(xì)管色譜柱,依靠電滲流推動(dòng)流動(dòng)相,攜帶樣品遷移,根據(jù)樣品分子的質(zhì)荷比、分子尺寸及分配系數(shù)的差別而分離。
06-13
CEC-加壓毛細(xì)管電色譜儀第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(六)毛細(xì)管電31第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式五、毛細(xì)管電泳儀的基本結(jié)構(gòu)毛細(xì)管電泳儀的結(jié)構(gòu)并不復(fù)雜,主要有高壓源、毛細(xì)管柱、檢測(cè)器,以及兩個(gè)供毛細(xì)管兩端插入而又可和電源相連的緩沖液槽。
(一)毛細(xì)管柱(二)檢測(cè)器(三)毛細(xì)管電泳法的進(jìn)樣技術(shù)
06-14毛細(xì)管電泳儀第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式五、毛細(xì)管電泳儀的32第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式
六、常用各種電泳儀簡(jiǎn)介(一)穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是中壓電泳儀。其輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍為0V~600V、輸出電流為0mA~100mA。該機(jī)工作穩(wěn)定性好、調(diào)節(jié)范圍寬,并設(shè)有完善的短路保護(hù)電路和過(guò)流保護(hù)電路,是目前國(guó)內(nèi)中、低壓電泳實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最廣泛的電泳儀之一。
06-15穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式六、常用各種電33第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(二)全自動(dòng)醋纖膜電泳儀全自動(dòng)醋纖膜電泳儀為全自動(dòng)電泳儀,有可見光單系統(tǒng),使用醋酸纖維薄膜電泳片,優(yōu)點(diǎn)為自動(dòng)化程度高。只需將樣品、試劑、電泳片放好,人員可離機(jī)完成實(shí)驗(yàn)并得到結(jié)果。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(二)全自動(dòng)醋纖膜34第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(三)全自動(dòng)熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀全自動(dòng)熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀為全自動(dòng)電泳儀,具有熒光/可見光雙系統(tǒng),在使用熒光試劑項(xiàng)目如CK、LD同工酶時(shí)為全自動(dòng)。只需將樣品、試劑、瓊脂糖凝膠電泳膠片放好后,操作人員可離機(jī)完成實(shí)驗(yàn)并得到結(jié)果。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(三)全自動(dòng)熒光/35第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(四)全自動(dòng)瓊脂糖電泳儀全自動(dòng)電泳儀,有可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點(diǎn)為靈敏度高,可適用于低濃度蛋白檢驗(yàn)。該儀器自動(dòng)化程度較差,當(dāng)電泳結(jié)束和染色脫色完成后,工作人員必須將電泳片由機(jī)器中取出。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(四)全自動(dòng)瓊脂糖36第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(五)雙向電泳及雙向電泳-液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用雙向電泳是將樣品進(jìn)行電泳后,在它的直角方向再進(jìn)行一次電泳。雙向電泳第一向?yàn)榈入娋劢?,第二向?yàn)樘荻萐DS電泳。樣品經(jīng)過(guò)電荷與質(zhì)量?jī)纱畏蛛x后可得到分子的等電點(diǎn)、分子量等信息。這是目前所有電泳技術(shù)中分辨率最高,信息量最多的技術(shù),已成為分析復(fù)雜蛋白混合物的基本工具。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(五)雙向電泳及雙37第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(六)高效毛細(xì)管電泳及高效毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用高效毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為推動(dòng)力,依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。高效毛細(xì)管電泳是一種迅速發(fā)展的分離技術(shù),儀器簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分析速度快、分離效率高、操作模式多、開發(fā)分析方法容易、實(shí)驗(yàn)成本低、消耗少、應(yīng)用范圍極廣。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(六)高效毛細(xì)管電38第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(七)毛細(xì)管電泳芯片利用毛細(xì)管電泳芯片可以進(jìn)行DNA長(zhǎng)度分析、序列分析和基因分型等研究。是利用芯片分離熒光標(biāo)記的寡核苷酸,整個(gè)分離過(guò)程在45s之內(nèi),而芯片的長(zhǎng)度僅為3.8cm。因?yàn)槠淇沙休d高電壓(2300V/cm)并具有較小的樣品體積,故有利于得到較好的分離效果。
第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(七)毛細(xì)管電泳芯39第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(八)DNA測(cè)序系統(tǒng)
該系統(tǒng)利用凝膠毛細(xì)管的原理,將多道毛細(xì)管陣列設(shè)計(jì),用四種不同的熒光染色標(biāo)記4種核苷酸,在模板上合成DNA單鏈,然后在DNA外切酶的作用下進(jìn)行堿基的連續(xù)水解和釋放,用激光識(shí)別和記錄釋放的堿基。
06-16
DNA測(cè)序系統(tǒng)第四節(jié)毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式(八)DNA測(cè)序系40第五節(jié)電泳儀的臨床應(yīng)用一、血清蛋白電泳
新鮮血清經(jīng)醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,通??梢?條帶,即清蛋白、1、2、和球蛋白。許多疾病總血清蛋白濃度和各蛋白組分的比例有所改變,通過(guò)血清蛋白電泳圖譜能幫助我們對(duì)某些疾病進(jìn)行診斷及鑒別診斷。
06-17血清蛋白電泳圖譜第五節(jié)電泳儀的臨床應(yīng)用一、血清蛋白電泳0641第五節(jié)電泳儀的臨床應(yīng)用二、尿蛋白電泳臨床進(jìn)行尿蛋白電泳的主要目的是:①確定尿蛋白的來(lái)源;②了解腎臟病變的嚴(yán)重程度(選擇性蛋白尿與非選擇性蛋白尿),從而有助于診斷和預(yù)后的判斷。當(dāng)不能進(jìn)行腎活檢時(shí),尿蛋白電泳結(jié)果能很好地協(xié)助臨床判
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