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生物安全柜的使用、選擇和檢測天津市衛(wèi)生防病中心蘇旭2005.6.8.生物安全柜的使用、選擇和檢測天津市衛(wèi)生防病中心.1生物安全柜的分級根據(jù)歐盟、美國已有的以及我國正在編制的生物安全柜標(biāo)準(zhǔn),按對人員、環(huán)境和受試樣本的保護(hù)程度進(jìn)行分級生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三級其分級的依據(jù)是生物安全柜的構(gòu)造,特別是氣流組織形式,而不是循環(huán)風(fēng)量的比例和排風(fēng)連接方式。.生物安全柜的分級根據(jù)歐盟、美國已有的以及我國正在編制的生物安2生物安全柜的種類.生物安全柜的種類.3Ⅰ級生物安全柜Ⅰ級安全柜是從其前面開口吸入空氣,經(jīng)排風(fēng)口把由高效過濾器處理過的空氣排走。Ⅰ級安全柜供給操作區(qū)的空氣來自室內(nèi),所以不能進(jìn)行需要無菌潔凈條件的操作。這種安全柜對于醫(yī)院等處作為一般檢查的生化和血清學(xué)檢驗(yàn)是合適的。同時(shí)它也可以存放能產(chǎn)生大量氣溶膠的設(shè)備(如離心機(jī)),但需要有針對性的適合的構(gòu)造。
.Ⅰ級生物安全柜Ⅰ級安全柜是從其前面開口吸入空氣,經(jīng)排風(fēng)口把由4Ⅰ級生物安全柜只提供對操作者的保護(hù)(不對產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù))生物安全水平1,2級氣流從操作員處流入柜體HEPA過濾的尾氣排放到環(huán)境中.Ⅰ級生物安全柜只提供對操作者的保護(hù)(不對產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù)).5Ⅱ級生物安全柜對操作員和產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù)生物安全水平1,2,3級氣流從操作人員處流入安全柜中HEPA過濾后的尾氣排放到環(huán)境中HEPA過濾后的向下層流可安裝尾氣排放系統(tǒng).Ⅱ級生物安全柜對操作員和產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù).6Ⅱ-A1型生物安全柜只采用1臺引風(fēng)機(jī),在風(fēng)機(jī)和2個(gè)過濾器之間的空氣是污染的,呈正壓。A1型生物安全柜運(yùn)行存在正壓污染區(qū),污染可能外泄。.Ⅱ-A1型生物安全柜只采用1臺引風(fēng)機(jī),在風(fēng)機(jī)和2個(gè)過濾器之間7Ⅱ-A2型生物安全柜Ⅱ級A2型生物安全柜利用70%的循環(huán)空氣,30%經(jīng)排風(fēng)過濾后的空氣排至室外(或室內(nèi))。和Ⅱ級A1型生物安全柜不同的是,Ⅱ級A2型生物安全柜的回風(fēng)道始終處于負(fù)壓狀態(tài),安全性高于Ⅱ級A1型生物安全柜。.Ⅱ-A2型生物安全柜Ⅱ級A2型生物安全柜利用70%的循環(huán)空氣8Ⅱ-A2型生物安全柜安全柜內(nèi)的空氣循環(huán)若無排氣管道,不可用于化學(xué)物及有毒氣體試驗(yàn).Ⅱ-A2型生物安全柜安全柜內(nèi)的空氣循環(huán).9Ⅱ-A2型生物安全柜.Ⅱ-A2型生物安全柜.10Ⅱ-B型生物安全柜分為B1型和B2型Ⅱ-B型生物安全柜可比Ⅱ-A型生物安全柜達(dá)到更高的安全度,是由于以下幾點(diǎn):1.前面開口平均風(fēng)速達(dá)到0.5m/s以上;2.沒有正壓污染區(qū);3.循環(huán)風(fēng)量減少到30%,甚至減少到零。由于在Ⅱ-B型生物安全柜內(nèi)可以處理更危險(xiǎn)的病原體和化學(xué)物質(zhì),所以排風(fēng)必須排至室外,排風(fēng)管道采用密閉式連接,并且是負(fù)壓管道。.Ⅱ-B型生物安全柜分為B1型和B2型.11Ⅱ級B型生物安全柜排風(fēng)量大,循環(huán)氣流少保險(xiǎn)設(shè)備系統(tǒng):防備尾氣排放失敗以動態(tài)平衡的專用排氣扇安裝和調(diào)試需和房間暖通系統(tǒng)緊密結(jié)合.Ⅱ級B型生物安全柜排風(fēng)量大,循環(huán)氣流少.12Ⅱ-B2型號生物安全柜的氣流.Ⅱ-B2型號生物安全柜的氣流.13Ⅲ級生物安全柜適用于于病毒、細(xì)菌、寄生蟲等病原和重組遺傳基因等高危險(xiǎn)度的實(shí)驗(yàn)操作。分為單體形式和系列形式(GBL)GBL的末端是雙門滅菌器.Ⅲ級生物安全柜適用于于病毒、細(xì)菌、寄生蟲等病原和重組遺傳基因14Ⅲ級生物安全柜生物安全水平1,2,3,4級對產(chǎn)品和操作員進(jìn)行保護(hù)氣體泄漏:泄漏率1x10-5cc/sec內(nèi)部操作->附加的手套機(jī)械互鎖式傳遞窗負(fù)壓>0.5“WC(120Pa)NSF49空氣是HEPA過濾的雙重尾氣HEPA串聯(lián)過濾器或單一尾氣HEPA過濾器和一個(gè)焚爐.Ⅲ級生物安全柜生物安全水平1,2,3,4級.15國際標(biāo)準(zhǔn)ANSI/NSF49:1992(NationalSanitationFoundationStandard.NO.49)美國國立衛(wèi)生基金會En12469:2000JisK3800:2000NF095:2002.國際標(biāo)準(zhǔn)ANSI/NSF49:1992.16生物安全柜的使用應(yīng)參考國家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn),理解生物安全柜的使用方法和局限性。并發(fā)給工作人員書面的操作步驟、安全或操作手冊。應(yīng)明確注明當(dāng)出現(xiàn)溢出、破損或不良操作時(shí),安全柜就不再能保護(hù)操作者。生物安全柜必須運(yùn)行正常時(shí)才能使用。生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。.生物安全柜的使用應(yīng)參考國家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn),理解生物安全柜的使17生物安全柜的使用安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或樣品,不能阻礙后部的氣流循環(huán)。樣品在放人安全柜內(nèi)的工作區(qū)前需要清除表面污染。安全柜內(nèi)使用酒精燈,應(yīng)考慮燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器,但最好使用一次性無菌接種環(huán)。.生物安全柜的使用安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或樣品,不能阻礙后部18生物安全柜的使用所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行,并能夠通過觀察擋板看到。盡量減少操作者身后的人員流動。應(yīng)避免在近進(jìn)氣口附近進(jìn)行操作.生物安全柜的使用所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行,并能夠通19生物安全柜的使用操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。實(shí)驗(yàn)記錄、移液管以及其他物品不能夠阻礙前面的空氣格柵,因?yàn)檫@將干擾氣體流動,引起物品的潛在污染和操作者的暴露。.生物安全柜的使用操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。.20生物安全柜的使用當(dāng)警告系統(tǒng)被啟動時(shí),請不要使用安全柜使用后,用潔凈劑把安全柜擦干凈工作開始前和結(jié)束后,安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5分鐘。.生物安全柜的使用當(dāng)警告系統(tǒng)被啟動時(shí),請不要使用安全柜.21常見操作錯誤錯誤地把垂直超凈臺當(dāng)作二級生物安全柜無法辨認(rèn)出他們需要的生物安全柜型號二級B2型號生物安全柜不一定比二級A2型號生物安全柜“安全”(A2型號生物安全柜在有需要時(shí)也可排氣)不適當(dāng)?shù)陌惭b及使用地點(diǎn)不正確的使用/維護(hù)安全柜.常見操作錯誤錯誤地把垂直超凈臺當(dāng)作二級生物安全柜.22使用者普遍的錯誤:實(shí)例以物件遮擋氣孔.使用者普遍的錯誤:實(shí)例以物件遮擋氣孔.23
排氣過濾器地點(diǎn):對不平衡的氣流特別敏感天花板和安全柜的頂部(至少)需要40cm
的空隙障礙氣流生物安全柜返回空氣鐵架入氣孔工作者往來路線.排氣過濾器地點(diǎn):對不平衡的氣流特別敏感障礙氣流生物安全24安全柜的選擇和安裝工作的需求具體型號的選擇(型號一致性,參數(shù)的單位換算)生物安全柜采用的規(guī)范和環(huán)境的配合(柜排風(fēng)量、房間換氣次數(shù)、房間容積、冷熱損耗、高效過濾膜的阻力)售后服務(wù)(過濾器的更換、定期專業(yè)檢測).安全柜的選擇和安裝工作的需求.25
安全柜的選擇和安裝最佳安全柜擺設(shè)地點(diǎn)取決于安全柜所受到的外在氣流干擾減到最?。罕苊飧吡髁客ǖ馈_h(yuǎn)離分散器,空調(diào)排氣口,排氣扇。限制安全柜的數(shù)量。.
安全柜的選擇和安裝.26現(xiàn)場檢測主要項(xiàng)目1.
氣密度2.
高效過濾器泄露3.
垂直平行流風(fēng)速4.
開口部位平均面速5.
氣流方向.現(xiàn)場檢測主要項(xiàng)目1.
氣密度.27現(xiàn)場檢測主要項(xiàng)目6.
振動7.
接地電阻8.
噪聲9.
照度10.紫外線強(qiáng)度(操作面上為40μw/cm2以上)11.
微生物12.
排水容量13.
風(fēng)機(jī)性能.現(xiàn)場檢測主要項(xiàng)目6.
振動.28現(xiàn)場檢測的時(shí)間安裝之后和使用之前;移動之后(包括在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)移動)定期檢查,最少一年1次或2次;更換高效過濾器之后;.現(xiàn)場檢測的時(shí)間安裝之后和使用之前;.29現(xiàn)場檢測的時(shí)間在以下時(shí)間需對使用中的安全柜作現(xiàn)場檢查。用高濃度的病原體實(shí)驗(yàn)完畢,這些實(shí)驗(yàn)材料被大量散落時(shí);中途變更實(shí)驗(yàn)時(shí);實(shí)驗(yàn)中斷后又長時(shí)
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