諾華診斷核酸檢測(cè)系統(tǒng)介紹課件

諾華診斷核酸檢測(cè)系統(tǒng)介紹諾華診斷核酸檢測(cè)系統(tǒng)介紹諾華診斷公司介紹核酸檢測(cè)及檢測(cè)方法簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)原理介紹TMA檢測(cè)方法原理及過(guò)程簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)設(shè)備與試劑全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)TIGRIS?檢測(cè)試劑ULTRIO?TIGRIS?檢測(cè)流程操作者工作流程系統(tǒng)內(nèi)部檢測(cè)流程內(nèi)容諾華診斷公司介紹內(nèi)容諾華診斷（前chiron公司）專注諾華診斷是專門致力于預(yù)防輸血傳染性疾病的公司。從我們的產(chǎn)品設(shè)計(jì)，到客戶服務(wù)支持，100%專注于提高血液的安全水平，保障血液供應(yīng)安全。創(chuàng)新作為HCV病毒的發(fā)現(xiàn)者（1987年），諾華診斷一直注重提高創(chuàng)新研發(fā)能力，包括率先完成HIV病毒的基因組序列測(cè)定，HCV病毒的發(fā)現(xiàn)及病毒檢測(cè)方法的建立等。在核酸檢測(cè)（NAT）血液篩查領(lǐng)域，諾華診斷與合作伙伴共同開發(fā)了第一個(gè)獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)的可用于血液篩查的核酸檢測(cè)試劑HIV-1/HCV，第一個(gè)包含HBV檢測(cè)的多項(xiàng)聯(lián)檢試劑ULTRIO，第一臺(tái)全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng)TIGRIS等。成功全球血液核酸檢測(cè)領(lǐng)域的市場(chǎng)領(lǐng)導(dǎo)者美國(guó)市場(chǎng)占有率超過(guò)90%；亞太區(qū)10個(gè)進(jìn)行核酸檢測(cè)的國(guó)家和地區(qū)，有9個(gè)采用諾華產(chǎn)品。諾華診斷（前chiron公司）專注黃病毒家族成員之一；單股正鏈RNA病毒自1999年以來(lái)，美國(guó)每年夏天都會(huì)經(jīng)歷西尼羅病毒的爆發(fā)；已報(bào)告的人類感染病例20000，死亡至少785人。2002年8月28日-2003年3月1日，CDC接到61例可能是經(jīng)過(guò)輸血傳播WNV的報(bào)告。經(jīng)保留血樣的檢測(cè)結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，21例被確認(rèn)為經(jīng)輸血傳播的WNV感染（共涉及到14名供血者）2003年6月3日起，美國(guó)紅十字會(huì)所屬全部血液中心和美國(guó)其他采供血機(jī)構(gòu)啟動(dòng)血液（包括成分）的WNV檢測(cè)。至今尚沒(méi)有特異有效的血清學(xué)檢測(cè)方法。WNV病毒黃病毒家族成員之一；單股正鏈RNA病毒W(wǎng)NV病毒9個(gè)月后October200219June2003FDA要求開發(fā)用于西尼羅河病毒的核酸檢測(cè)血液篩查方法和補(bǔ)充性試驗(yàn)方法PROCLEIX?WNV檢測(cè)方法于2003年6月19日上市諾華

實(shí)現(xiàn)25對(duì)血液篩查領(lǐng)域的專注以及創(chuàng)新能力，保證了我們可以快速應(yīng)對(duì)可能出現(xiàn)的對(duì)血液安全構(gòu)成威脅的各種緊急疫情或病原體西尼羅河病毒諾華診斷（前chiron公司）9個(gè)月后October200219June2003FDA檢測(cè)平臺(tái)及檢測(cè)試劑+全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)TIGRIS?三項(xiàng)聯(lián)檢核酸檢測(cè)試劑ULTRIO?檢測(cè)平臺(tái)及檢測(cè)試劑+全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)TIGRIS?三項(xiàng)混樣設(shè)備--TECAN可支持4，8，16人份樣品的混樣處理混樣設(shè)備--TECAN可支持4，8，16人份樣品的混樣處理諾華診斷公司介紹核酸檢測(cè)及檢測(cè)方法簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)原理介紹TMA檢測(cè)方法原理及過(guò)程簡(jiǎn)介內(nèi)容諾華診斷公司介紹內(nèi)容DNA/RNA核苷酸A,G,C,T,orU堿基對(duì)

C-G

A-T(DNAonly)A-U(RNAonly)核酸檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)

定義DNA/RNA核酸檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)

定義寡核苷酸:OligonucleotideTarget核酸檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)

定義探針:TargetOligonucleotide寡核苷酸:OligonucleotideTarget核酸檢測(cè)

靶標(biāo)捕獲擴(kuò)增

檢測(cè)檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)介 靶標(biāo)捕獲檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)介檢測(cè)過(guò)程檢測(cè)過(guò)程諾華診斷公司介紹核酸檢測(cè)及檢測(cè)方法簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)原理介紹TMA檢測(cè)方法原理及過(guò)程簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)設(shè)備與試劑全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)TIGRIS?檢測(cè)試劑ULTRIO?內(nèi)容諾華診斷公司介紹內(nèi)容檢測(cè)平臺(tái)TIGRIS?檢測(cè)平臺(tái)TIGRIS?PROCLEIX?

TIGRIS?System—PROCLEIX?TIGRIS?系統(tǒng)是第一個(gè)，也是唯一一個(gè)真正實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)核酸檢測(cè)的系統(tǒng)，可以完成：樣品吸取核酸靶標(biāo)捕獲擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)果報(bào)告產(chǎn)物滅活—樣品處理開始后，每個(gè)小時(shí)僅需要一分鐘人工操作，添加耗材，最大地提高了工作效率—軟件管理所有的系統(tǒng)操作，減少人為的操作和可能帶來(lái)的誤差—全自動(dòng)化將操作者從簡(jiǎn)單重復(fù)性操作中解放出來(lái)，而把精力放在對(duì)結(jié)果的分析上PROCLEIX?TIGRIS?System—PROCL—一體化系統(tǒng)設(shè)計(jì)，輕松滿足實(shí)驗(yàn)室空間要求—封閉的系統(tǒng)環(huán)境，保證樣品與結(jié)果的完整性—盡可能少的操作者與樣品的接觸，保護(hù)操作者安全—確保儀器性能及檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化PROCLEIX?

TIGRIS?System—一體化系統(tǒng)設(shè)計(jì)，輕松滿足實(shí)驗(yàn)室空間要求PROCLEIX?—內(nèi)置條碼掃描，對(duì)樣品及試劑進(jìn)行全程跟蹤—自動(dòng)液面探測(cè)及加樣體積校正功能，確保樣品及試劑的精確添加—精密的機(jī)械系統(tǒng)，保證系統(tǒng)及結(jié)果的一致性和可靠性—軟件自動(dòng)進(jìn)行系統(tǒng)維護(hù)保養(yǎng)等操作PROCLEIX?

TIGRIS?System—內(nèi)置條碼掃描，對(duì)樣品及試劑進(jìn)行全程跟蹤PROCLEIX?—可以同時(shí)處理單人份檢測(cè)樣品和小混樣樣品—同時(shí)使用多種條碼格式（Code128,Codabar,Code39,Interleaved2of5）—減少對(duì)反應(yīng)管死體積的要求—兼容所有的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)尺寸的反應(yīng)管（12×75mm—16×100mm）PROCLEIX?

TIGRIS?System—可以同時(shí)處理單人份檢測(cè)樣品和小混樣樣品PROCLEIX?—初篩和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)可在同一平臺(tái)上同時(shí)進(jìn)行—不間斷裝載樣品和消耗品，靈活處理檢測(cè)任務(wù)—檢測(cè)通量：1000個(gè)單人份檢測(cè)/14小時(shí)。PROCLEIX?

TIGRIS?System—初篩和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)可在同一平臺(tái)上同時(shí)進(jìn)行PROCLEIX?TAssayReagents(ARs)靶標(biāo)捕獲試劑(TCR)內(nèi)標(biāo)試劑擴(kuò)增試劑酶試劑檢測(cè)探針試劑鑒別探針試劑選擇試劑AssayFluids檢測(cè)用液體洗液油滅活緩沖液自檢測(cè)液1自檢測(cè)液2系統(tǒng)液防腐劑一次性耗材MTUs(多聯(lián)反應(yīng)管)DiTis(一次性移液器吸頭，1000ml)其他實(shí)驗(yàn)室消耗品廢物垃圾袋（套）標(biāo)準(zhǔn)品&質(zhì)控品檢測(cè)試劑和耗材AssayReagents(ARs)AssayFlui檢測(cè)試劑ULTRIO?第一個(gè)三合一的多重檢測(cè)血液篩查試劑基于獨(dú)特的TMA技術(shù)，在一個(gè)試管中同時(shí)檢測(cè)HIV-1,HBV,HCV所有反應(yīng)步驟在同一管中進(jìn)行，無(wú)需樣品轉(zhuǎn)移和傳遞內(nèi)標(biāo)分子監(jiān)控整個(gè)反應(yīng)過(guò)程，確保結(jié)果可靠初篩和鑒別試驗(yàn)在同一平臺(tái)上同時(shí)進(jìn)行可以進(jìn)行最大16人份混合樣品的檢測(cè)檢測(cè)的病毒包括所有亞型：HIV-1GroupM,SubtypesA,B,C,D,E,F,GHIV-1GroupsNandOHCVGenotypes1,2,3,4,5,6HBVGenotypesA,B,C,D,E,F,G檢測(cè)試劑ULTRIO?第一個(gè)三合一的多重檢測(cè)血液篩查試劑必須同批號(hào)使用紀(jì)錄為成套試劑，并使用AssayReagents靶標(biāo)捕獲試劑TCR擴(kuò)增試劑（A）酶試劑（E）檢測(cè)探針試劑（P）選擇試劑（S）AssayReagents必須同批號(hào)使用AssayReagentsAssayRe靶標(biāo)捕獲試劑

(wTCR)去污劑病毒裂解捕獲寡核苷酸與靶標(biāo)核酸分子結(jié)合磁珠顆粒固相磁力分離內(nèi)標(biāo)全程監(jiān)控系統(tǒng)檢測(cè)性能靶標(biāo)捕獲試劑(wTCR)去污劑引物核苷酸A,G,C,T,U輔酶因子擴(kuò)增試劑(A)引物擴(kuò)增試劑(A)逆轉(zhuǎn)錄酶（RT）以單鏈RNA或DNA為模板，合成互補(bǔ)DNARNAseH活性RNA聚合酶（RP）以雙鏈DNA為模板，轉(zhuǎn)錄合成單鏈RNA分子酶試劑(E)逆轉(zhuǎn)錄酶（RT）酶試劑(E)標(biāo)記有AcridiniumEster(AE)分子的寡核苷酸不同的探針，序列分別與 內(nèi)標(biāo) 病毒擴(kuò)增子互補(bǔ)檢測(cè)探針試劑(P)標(biāo)記有AcridiniumEster(AE)分子的寡核苷降解游離探針?lè)肿由蠘?biāo)記的AE分子選擇試劑(S)選擇試劑(S)AssayFluids檢測(cè)用液體通用試劑洗液滅活液緩沖液油系統(tǒng)液防腐劑自檢測(cè)液1自檢測(cè)液2AssayFluidsAssayFluids檢測(cè)用液體洗液自檢測(cè)液1自檢測(cè)液ULTRIO?初篩和鑒別試劑

分析靈敏度

病毒類型檢測(cè)試劑95%LimitofDetectionHIV-1Ultrio?28.79c/mL(25.85–32.68)HIV-1dHIV-132.15c/mL(28.74–36.70)HCVUltrio?3.01IU/mL(2.71–3.42)HCVdHCV3.17IU/mL(2.85–3.59)HBVUltrio?10.44IU/mL(9.20-12.16)HBVdHBV8.52IU/mL(7.56-9.84)初篩和鑒別試驗(yàn)在同一平臺(tái)進(jìn)行，并且兩種方法靈敏度相當(dāng)，可以保證準(zhǔn)確快速完成病毒種類的鑒別試驗(yàn)。ULTRIO?初篩和鑒別試劑

分析靈敏度病毒類型檢測(cè)試諾華診斷公司介紹核酸檢測(cè)及檢測(cè)方法簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)原理介紹TMA檢測(cè)方法原理及過(guò)程簡(jiǎn)介核酸檢測(cè)設(shè)備與試劑全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)TIGRIS?檢測(cè)試劑ULTRIO?TIGRIS?檢測(cè)流程操作者工作流程系統(tǒng)內(nèi)部檢測(cè)流程內(nèi)容諾華診斷公司介紹內(nèi)容檢測(cè)方案的選擇方案1–單人份檢測(cè)提供最高的檢測(cè)靈敏度（1，2，3，4）。高效的檢測(cè)流程，與血清學(xué)同步進(jìn)行，不影響血液的發(fā)放。方案2–混樣檢測(cè)（可進(jìn)行4，8，16人份混合）

節(jié)約檢測(cè)成本。1.ReddyR.Presentation.Aug/Sep2009

2.Castroetal.,2006,VoxSanguinis,91(Suppl.3),p77,P-11

3.Brojeretal.,2006,Hepatology,44:1666-1674

4.Zanettietal.,2006,JClinVirol,36Suppl.1,S51-55檢測(cè)方案的選擇方案1–單人份檢測(cè)1.檢測(cè)方案的選擇混樣規(guī)模與靈敏度及窗口期縮短時(shí)間的關(guān)系病毒HIV-1HCVHBV復(fù)制周期（天）0.850.452.56檢測(cè)方案的選擇混樣規(guī)模與靈敏度及窗口期縮短時(shí)間的關(guān)系病毒HI新加坡：?jiǎn)稳朔輽z測(cè)“FailureofroutineHIV-1testsinacaseinvolvingtransmissionwithpreseroconversionbloodcomponentsduringtheinfectiouswindowperiod”:Lingetal.,JAMA,vol.284July20001997年，發(fā)生一起HIV輸血傳播，一名獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血液感染了兩名受血者（血小板，紅細(xì)胞）。測(cè)序結(jié)果證實(shí)輸血傳播。獻(xiàn)血者抗體，抗原檢測(cè)均為陰性。定量檢測(cè)結(jié)果病毒水平5-39copies/ml。NAT檢測(cè)結(jié)果表明，該樣品可以被單人份檢測(cè)辦法檢出，而被混樣檢測(cè)漏掉。2000年，新加坡開始實(shí)行核酸檢測(cè)，并且為單人份檢測(cè)。新加坡：?jiǎn)稳朔輽z測(cè)“FailureofroutineH南非（SANBS）：2005.10-2007.9，1,460,000份樣品單人份檢測(cè)ReddyR.Presentation.Aug/Sep2009南非（SANBS）：2005.10-2007.9，1,460HBVJ.P.Allain.ISBTNagoya2009HBVJ.P.Allain.ISBTNagoya20多中心合作項(xiàng)目（COE）2009.4.16-2009.11.17，有四個(gè)血液中心參與，共檢測(cè)樣品40107份。全部進(jìn)行單人份檢測(cè)HBVNAT檢出率1:1294（31/40107）其中，6例窗口期樣品，病毒載量為13，25.6及<12IU/mL（4例）。隱匿性乙肝（OBI）25例。全部病毒載量<12IU/mL或不可測(cè)。多中心合作項(xiàng)目（COE）2009.4.16-2009.11.混樣設(shè)備--TECAN混樣設(shè)備--TECAN混樣方式—P16256樣品管16個(gè)混樣管混樣方式—P16256樣品管混樣方式—P8384樣品管48個(gè)混樣管混樣方式—P8384樣品管混樣方式—P4320樣品管80個(gè)混樣管混樣方式—P4320樣品管ARbaySamplebayFluiddrawerWastedrawerPROCLEIX?

TIGRIS?SystemARbaySamplebayFluiddrawerWa

操作者流程儀器工作流程PROCLEIX?

TIGRIS?System

核酸檢測(cè)工作流程

操作者流程PROCLEIX?TIGRIS?System

1:準(zhǔn)備試劑PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程0:實(shí)驗(yàn)室消毒

1:準(zhǔn)備試劑PROCLEIX?TIGRIS?Syst準(zhǔn)備試劑試劑運(yùn)輸溫度開瓶后儲(chǔ)存溫度是否需要RPI處理?TCR2-8度2-8度(aswTCR)yes內(nèi)標(biāo)干冰冷凍N/Ano擴(kuò)增試劑酶試劑檢測(cè)探針鑒別探針干冰冷凍2-8度yes選擇試劑常溫常溫onlyforSelectionRecovery準(zhǔn)備試劑試劑運(yùn)輸溫度開瓶后儲(chǔ)存溫度是否需要RPI處理?TCR—試劑準(zhǔn)備孵育器（RPI）

自動(dòng)化，標(biāo)準(zhǔn)化試劑準(zhǔn)備，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠PROCLEIX?

TIGRIS?System

File1–冷凍試劑(1h45m)File2–冷藏試劑(1h)File3–過(guò)夜準(zhǔn)備(8-16h)File4–選擇試劑的恢復(fù)(1h)—試劑準(zhǔn)備孵育器（RPI）PROCLEIX?TIGRIS?

2:裝載耗材（MTU,DiTi）PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程

2:裝載耗材（MTU,DiTi）PROCLEIX?TI

3:下層液體管理PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程

3:下層液體管理PROCLEIX?TIGRIS?Sy替換液體，掃描條碼，清空垃圾袋SystemFluidWashBWashAAutoDetect2OilBarCodeScannerTipletWasteDeactivationFluidABABABAutoDetect1替換液體，掃描條碼，清空垃圾袋SystemFluidWasLiquidWaste

1LiquidWaste

2MTUWaste清空垃圾LiquidWaste1LiquidWaste2MT系統(tǒng)排空（Prime）所有的液體管道全部需要排空排空需要約20分鐘系統(tǒng)排空（Prime）所有的液體管道全部需要排空排空需要約2

4:日保養(yǎng)PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程記錄實(shí)驗(yàn)室條件檢查系統(tǒng)托盤，外表面，真空壓力清洗DiTiCone和試劑加樣器管道

4:日保養(yǎng)PROCLEIX?TIGRIS?Syste

5:創(chuàng)建工作列表PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程

5:創(chuàng)建工作列表PROCLEIX?TIGRIS?Sy

6:裝載試劑PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程酶試劑選擇試劑檢測(cè)探針試劑擴(kuò)增試劑

6:裝載試劑PROCLEIX?TIGRIS?SystARbaywTCRPROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程ARbaywTCRPROCLEIX?TIGRIS?Sy

7:裝載樣品PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程每個(gè)樣品架可以擺放20個(gè)樣品管系統(tǒng)樣品盤可以同時(shí)擺放9個(gè)樣品架

7:裝載樣品PROCLEIX?TIGRIS?Syst

8:開始檢測(cè)PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程

8:開始檢測(cè)PROCLEIX?TIGRIS?Syst操作者確認(rèn)樣品開始加樣后，即可以離開TIGRIS會(huì)提醒操作者結(jié)果輸出的時(shí)間及需要用戶返回的時(shí)間:LoadMTUsLoadRacksLoadDiTisPROCLEIX?

TIGRIS?System

儀器工作流程操作者確認(rèn)樣品開始加樣后，即可以離開PROCLEIX?TI

樣品、試劑準(zhǔn)備，儀器調(diào)試保養(yǎng)1hrs一個(gè)熟練的操作者可以同時(shí)操作多達(dá)三臺(tái)系統(tǒng)

樣品處理開始后，每個(gè)小時(shí)僅需要一分鐘人工操作，添加MTU系統(tǒng)連續(xù)上樣，可以靈活添加新的樣品系統(tǒng)預(yù)先通報(bào)操作者何時(shí)添加新的耗材及樣品PROCLEIX?

TIGRIS?System

操作者流程

樣品、試劑準(zhǔn)備，儀器調(diào)試保養(yǎng)1hrsPROCLEIX?Logonadm