尿素測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

尿素測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.檢驗(yàn)原理：（酶偶聯(lián)檢測法）尿素經(jīng)脲酶催化水解生成氨與二氧化碳，在谷氨酸脫氫酶催化下，氨與α-酮戊二酸、還原型輔酶Ⅰ（NADH）作用生成谷氨酸與氧化型輔酶Ⅰ（），還原型輔酶Ⅰ在340nm波長處有吸收峰，而氧化型輔酶Ⅰ幾乎無吸收峰，還原型輔酶Ⅰ在340nm吸光度的下降速率與樣品中尿素含量成正比。尿素+22+Α-酮戊二酸++NADH+L-谷氨酸++2.試劑主要組成成分組成成分濃度R1三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH6.15）150mmol/L二磷酸腺苷（ADP）0.6mmol/L脲酶8000U/L谷氨酸脫氫酶700U/LR2三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH6.15）150mmol/Lα-酮戊二酸15mmol/L還原型輔酶Ⅰ0.8mmol/LSTD尿素（水基質(zhì)）7.14mmol/L3.樣本要求：新鮮無溶血血清。在22～25℃保存8小時(shí)，2～8℃保48小時(shí)，-20℃保存7天，樣本不可反復(fù)凍融！樣本中抗壞血酸含量≤0.3g/L、膽紅素含量≤0.4g/L、血紅蛋白含量≤5.0g/L、脂血含量≤5.0g/L對檢測結(jié)果基本無影響。4.檢驗(yàn)方法；儀器法（詳見DF-603/DI-600標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）5.參考范圍：樣本參考范圍（mmol/L）血清2.9-8.26.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋：6.1樣本含量超出線性范圍時(shí)，建議用0.9%（W/V）的氯化鈉溶液稀釋樣本，最大稀釋不超過10倍。6.2.單位換算：mg/dl=mmol/L×6.027.檢驗(yàn)方法的局限性7.1結(jié)果的準(zhǔn)確性依賴于儀器的校正和測定溫度、時(shí)間的控制。7.2若試劑渾濁，或以水空白在340nm處吸光度小于1.000時(shí)不能使用。7.3檢驗(yàn)結(jié)果僅供參考，不作為臨床診斷的唯一依據(jù)。8.試劑性能指標(biāo)8.1試劑外觀：無色透明液體，無懸浮物及沉淀。8.2裝量：不低于標(biāo)識值。8.3試劑空白8.3.1試劑空白吸光度：在340nm處，光徑1cm時(shí)，空白吸光度A≥1.0008.3.2試劑空白吸光度變化率：在340nm處，光徑1cm時(shí)，△A/min≤0.004.8.4線性區(qū)間：試劑的線性區(qū)間為[0.9-35.7]mmol/L，在此線性區(qū)間內(nèi)：a）線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.9900；b)[0.9-4.0]mmol/L區(qū)間內(nèi)，線性絕對偏差不超過±0.4mmol/L；[4.0-35.7]umol/L區(qū)間內(nèi)，線性相對偏差不超過±10%。8.5準(zhǔn)確度：相對偏差應(yīng)不大于±15%。8.6分析靈敏度：在340nm處，光徑1cm時(shí)，測量1mmol/L的尿素時(shí)，吸光度變化△Ammol/L≥0.0018.7精密度8.7.1批內(nèi)精密度：CV≤5%8.7.2批間精密度：R≤10%8.8校準(zhǔn)品8.8.1外觀：無色透明液體。8.8.2凈含量：不少于標(biāo)識值8.8.3準(zhǔn)確度：標(biāo)準(zhǔn)生化分析儀和試劑后，測定校準(zhǔn)品，相對偏差應(yīng)不大于10%。8.8.4均一性：瓶間均一性：CV≤5%9.臨床意義：尿素測定是腎功能最廣泛應(yīng)用的試驗(yàn)，本試驗(yàn)常與肌酐同時(shí)測定，用于腎前性高尿素血癥（心臟代謝失常、脫水、蛋白分解代謝增加）、腎性高尿素血癥（腎小球性腎炎、慢性腎炎、多囊腎、腎硬變、腎小管壞死）和腎后性高尿素血癥（尿路梗阻）的鑒別診斷。尿素是蛋白質(zhì)