血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.實(shí)驗(yàn)原理：（雙縮脲法）本試劑采用雙縮脲反應(yīng)，即在堿性溶液中，蛋白質(zhì)分子中的肽鍵與兩價(jià)銅離子反應(yīng)生成藍(lán)紫色絡(luò)合物，其中每個(gè)銅離子與五至六個(gè)肽鍵絡(luò)合。雙縮脲反應(yīng)被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)，具有簡便、快速可靠的特點(diǎn)。在試劑中加入碘化物有助于防止堿性銅絡(luò)合物的自動(dòng)還原，反應(yīng)形成的藍(lán)紫色物質(zhì)與樣本中總蛋白濃度成正比，通過測定520-560nm處吸光度值的變化，即可計(jì)算出樣本中總蛋白的濃度。+蛋白質(zhì)Cu蛋白質(zhì)復(fù)合物2.試劑主要組成成分組成成分濃度R硫酸銅12mmol/L酒石酸鉀鈉64mmol/L碘化鉀6mmol/L氫氧化鈉200mmol/LSTD牛人血白蛋白70g/L3.樣本要求：新鮮無溶血血清，勿使用肝素抗凝血漿。22～25℃保存8小時(shí)，2～8℃保48小時(shí)，-20℃保存7天，樣本不可反復(fù)凍融！4.檢驗(yàn)方法：儀器法（詳見DF-603/DI-600標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）5.參考范圍：樣本參考范圍（g/l）血清成年人走動(dòng)后64-83成年人靜臥時(shí)60-786.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋6.1線性范圍：在給定的樣本/試劑比例和條件下測定時(shí)，本試劑線性范圍可達(dá)100g/L。樣本含量超出線性范圍時(shí)，建議用0.9%（W/V）的氯化鈉溶液稀釋樣本。最大稀釋5倍。6.2單位換算：g/dL=g/L×0.17檢驗(yàn)結(jié)果的局限性7.1結(jié)果的準(zhǔn)確性依賴于儀器的校正和測定溫度、時(shí)間的控制。7.2若試劑渾濁或以水空白在540nm處吸光度大于0.200時(shí)不能使用。8.產(chǎn)品性能指標(biāo)8.1試劑外觀：藍(lán)色透明液體，無懸浮物及沉淀物。8.2裝量：不低于標(biāo)識值8.3空白吸光度：在540nm處，光徑1cm時(shí)，空白吸光度A≤0.200。8.4分析靈敏度：在540nm處，光徑1cm時(shí)，測量70g/L的總蛋白，吸光度差△A≥0.1508.5線性區(qū)間：試劑的線性區(qū)間為[30.0-100.0]g/L，在此線性區(qū)間內(nèi)：a）線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.995；b）線性相對偏差不超過±6.0%。8.6精密度8.6.1重復(fù)性：重復(fù)測試（70.0±10.0）g/L的樣本，所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)≤2.0%8.6.2批間差：重復(fù)測試（70.0±10.0）g/L的樣本，所得結(jié)果批間相對極差（R）應(yīng)≤5.0%8.7準(zhǔn)確性：相對偏差應(yīng)不大于±5.0%。8.8穩(wěn)定性：（2-8）℃下，原包裝存放的試劑有效期為18個(gè)月.取到期后一個(gè)月的試劑進(jìn)行測試，應(yīng)滿足1-6.1、7的要求。8.9校準(zhǔn)品8.9.1外觀：無色透明液體。8.9.2凈含量：不少于標(biāo)識值8.9.3準(zhǔn)確度：標(biāo)準(zhǔn)生化分析儀和試劑后，測定校準(zhǔn)品，相對偏差應(yīng)不大于±10%。8.9.4均一性：瓶間均一性：CV≤5%8.9.5穩(wěn)定性：（2-8）℃下，原包裝存放的試劑有效期為12個(gè)月.取到期后1個(gè)月的試劑進(jìn)行測試，應(yīng)滿足8.9.1-8.9.4的要求。9.臨床意義：血漿蛋白主要在肝臟、漿細(xì)胞、淋巴結(jié)、脾臟和骨髓中合成。在疾病過程中，總蛋白濃度和各蛋白組分的百分率均能顯著偏離正常值。由失血、炎性腹瀉、腎病綜合征、中度燒傷、鹽滯留綜合癥和加西卡病（急性蛋白缺乏）均能引起低蛋白血癥。在嚴(yán)重脫水和疾病如多發(fā)性骨髓瘤會發(fā)生高蛋白血癥。由于一種血漿蛋白組分百分率的改變能引起血漿蛋白相對百分率的改變。此類病例中總蛋白的量常無變化。A/G比例常被用作白蛋白和球蛋白組分分配的指標(biāo)。在肝硬化、腎小球性腎炎、腎病綜合征、急性肝炎、紅