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大學生創(chuàng)新訓練項目結(jié)題報告項目名稱:當歸多糖對胃癌細胞增殖遷移侵襲的影響項目編號: 項目負責人:曲格希專業(yè)班級:麻醉1902班所屬學院:麻醉學系執(zhí)行年限:2021-2022電話: E-maiI: 填表日期:2022.04.28長治醫(yī)學院基本情況項目名稱當歸多糖對胃癌細胞增殖遷移侵襲凋亡的影響成果形式學術(shù)論文立項時間2021年7月10完成時間2022年5月1日鑒定時間2022年5月20日項目主要研究人員序號姓名學號專業(yè)班級所在學院項目分工1曲格希麻醉1902班麻醉學系查文獻、做實驗2許晨亮麻醉1902班麻醉學系查文獻3董昊麻醉1902班麻醉學系查文獻4常勝奧麻醉1902班麻醉學系查文獻5李燦麻醉1902班麻醉學系查文獻二、研究過程簡介內(nèi)容提示:研究過程中財務(wù)執(zhí)行情況;團隊成員分工和合作情況;研究報告、研究日記的完整性;項目研究的目的、意義;研究成果的主要內(nèi)容、重要觀點或?qū)Σ呓ㄗh;創(chuàng)新特色、實踐意義和社會影響;發(fā)表論文及獲得專利情況等。(限定在1500字左右,附件另附)L研究過程中財務(wù)執(zhí)行情況:購買試劑(DMEM高糖培養(yǎng)基、青霉素-鏈霉素溶液、胎牛血清(BI公司)、胰蛋白酶(Gibco公司);CCK-8試劑(absin公司);細胞裂解液(吉凱生物)、BCA蛋白定量試劑盒、上樣緩沖液(北京賽文公司);cleavedCaspase3>cleavedPARP>ATM>p-ATM>p53、p-p53、B-tubulin、GoatAnti-Rabittt&MouselgG-HRP抗體(Abmart公司);AL104電子分析天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);二氧化碳培養(yǎng)箱(Thermo公司);酶標儀(Thermo公司);ECLIPSETi-5型熒光倒置顯微鏡(德國萊卡公司);BDAccuriC6流式細胞儀(美國BD公司);Tanon-5500型化學發(fā)光凝膠成像儀器(中國天能科技有限公司);PowerPacTMBasic型電泳儀(美國Bio-Rad公司)。).團隊成員分工和合作情況:團隊成員分工明確,擬定實驗步驟與方案、查找資料文獻、細胞實驗、作圖寫文章都井井有條,大家互相幫助,共同推進實驗進展.研究報告、研究日記完整.項目研究的目的、意義:目的為研究中藥ICA對胃癌細胞增殖遷移侵襲凋亡的影響。本研究發(fā)現(xiàn),本研究為ICA治療胃癌提供了一定理論基礎(chǔ)。研究成果的主要內(nèi)容:ICA對胃癌細胞具有增殖抑制作用且誘導凋亡。此外,ICA可引起細胞DNA損傷,激活ATM-p53-caspase3信號通路。因此提示ICA可能通過調(diào)控ATM-p53-caspase3信號通路,誘導p53介導的細胞凋亡,抑制胃癌細胞增殖。.重要觀點或?qū)Σ呓ㄗh:經(jīng)過研究,明確ICA對胃癌細胞功能的影響,抑制增殖遷移侵襲,促進凋亡。6,創(chuàng)新特色、實踐意義和社會影響:淫羊蕾素對胃癌的抗腫瘤作用的研究尚未闡明,之前未有文獻研究,ICA是已上市的新藥,對于多種腫瘤有抑制作用,增加對ICA的研究,有利于臨床更多更好的運用,對后續(xù)疾病的治療有更好的作用。7.發(fā)表論文及獲得專利情況:擬發(fā)表論文一篇,題為淫羊蕾素通過ATM/p5VCaspase3信號通路抑制胃癌細胞增殖遷移侵襲并誘導其凋亡三、研究總結(jié)報告內(nèi)容提示:預定計劃執(zhí)行情況,項目研究和實踐情況,研究工作中取得的主要成績和收獲,研究工作有哪些不足,有哪些問題尚需深入研究,研究工作中的困難、問題和建議。(限定在1000字左右,附件另附)L預定計劃執(zhí)行情況:項目從立項前,查閱大量文獻,前期已培養(yǎng)胃癌細胞株SGG7901、AGS,掌握細胞增殖cck8實驗、平板克隆及細胞遷移等技術(shù)方法。培養(yǎng)細胞SGC-7901和AGS細胞株。復蘇SGC-7901和AGS,為貼壁細胞,置于細胞培養(yǎng)瓶中,加入細胞培養(yǎng)液DMEM完全培養(yǎng)液,置于37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。1~2天,更換一次培養(yǎng)液。細胞融合度約90%時用胰蛋白酶消化傳代以用于后續(xù)實驗,取對數(shù)生長期的細胞用于實驗。THP;細胞為懸浮細胞,置于細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。THP-1誘導取對數(shù)期生長的THP-1細胞,2X105/孔接種于六孔板上,10ug/L佛波酯(PMA)孵育48h,添加10ug/LM-CSF(巨噬細胞集落刺激因子)繼續(xù)孵育24h,誘導THP;分化為TAM,吸取上清液進離心管,2000rpm離心20min,置于-20℃保存,原六孔板加入1640完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。后將APS更換為ICA進行重復實驗,進行細胞增殖活性檢測實驗、平板克隆實驗、Transwell實驗檢測不同濃度當歸多糖對細胞增殖、遷移、侵襲的影響。Westemblot檢測凋亡相關(guān)蛋白表達水平變化,統(tǒng)計分析處理,尋找ICA誘導胃癌細胞凋亡的信號通路項目研究和實踐情況:在使用PMA、M-CSF誘導THP-1做cck8實驗時,發(fā)現(xiàn)增殖抑制趨勢不明顯,與預期情況不符,后改用ICA重新進行實驗。研究工作中取得的主要成績和收獲:進行功能實驗,明確ICA對胃癌細胞增殖遷移侵襲有抑制作用,對凋亡有促進作用,查找到的信號通路為ATM/p3/caspase3o從中學習到了許多細胞實驗必備的實驗方法,在查找文獻過程中學習思路,學習科研的常用套路。研究工作有哪些不足:在前期查找資料過程中思路不夠活泛,才導致了需要中途改換藥品的狀況,需要在之后的實驗過程中加以改進,多閱讀文獻,多向他人學習,多交流思路。有哪些問題尚需深入研究:缺少體外實驗組,缺少更加跳躍的創(chuàng)新點研究工作中的困難、問題和建議:在APS藥物的實驗結(jié)果出現(xiàn)不理想情況時,實驗進入了停滯期,曾經(jīng)想過放棄的情況,在老師和同組同學的幫助下,重新進入新一輪的實驗,我從中也明白了科研的道路不會一帆風順,要強大自己的內(nèi)心,勇于克服困難,迎接挑戰(zhàn),遇到事情不放棄,要多角度看待問題。四、經(jīng)費使用情況經(jīng)費合計合00元,其中,學校配套資助60助元,學院(所)配套資助0元,其他經(jīng)費(一一)元。經(jīng)費支出情況:研發(fā)和技術(shù)服務(wù)引
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