無菌操作技術 課件

4.1無菌操作技術

無菌操作技術在微防止各類微生物污染及其干擾的一系列操作方法和有關措施。想一想：無菌？無菌操作技術：指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物污染及其干擾的一系列操作方法和有關措施。無菌操作目的：保證待檢物品不被環(huán)境中微生物污染；防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員。1.防污染措施主要污染途徑物品：高壓濕熱滅菌工作人員：無菌工作服、鞋、帽、口罩環(huán)境操作2工作人員衣、帽、口罩常清洗，涼干后高溫高壓消毒工作衣使用前后掛于緩沖間，并紫外線照射滅無菌操作前要洗手，用肥皂水或0.1%新潔爾滅清洗，再用75%的酒精擦洗或噴灑。經(jīng)常洗頭，洗澡，剪指甲，保持個人清潔衛(wèi)生2.無菌環(huán)境的要求與保持無菌環(huán)境無菌室超凈工作臺（1）無菌室

無菌室的結構：密封、避光，設百葉通氣窗，側面底部設進氣孔，應有緩沖間(外間)、操作間安裝拉門無菌室內的設備

緩沖間、操作間安裝日光燈和紫外燈，紫外燈距地高度2.0-2.2m;緩沖間內放置工作服、鞋、帽、口罩，消毒用藥物；超凈工作臺，內備接種用常用器具;酒精燈、接種環(huán)、打火機或火柴、記號筆、鑷子、酒精棉球瓶。無菌室的消毒和防污染

無菌室內空氣測試應基本達到無菌。使用前后紫外線照射均照射30min。每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時）。每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。無菌室空氣污染情況的檢驗使用前或操作后檢查，應無雜菌；若雜菌多為霉菌時，應通風干燥；雜菌多為細菌時，乳酸熏蒸效果較好。無菌室操作規(guī)則

操作前打開緩沖間和操作間的紫外燈30min;器材和用品一次性全部放入無菌室，避免在操作過程中進出無菌室或傳遞物品.進入緩沖間，換好工作服、鞋、帽、口罩，手消毒無菌操作操作后收拾臺面，紫外燈照射。（2）超凈工作臺原理：超凈工作臺的潔凈環(huán)境是在特定的空間內，潔凈空氣(進濾空氣)按設定的方向流動而形成的。以氣流方向來分，現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式，由內向外式以及側向式。超凈工作臺是為實驗室工作提供無菌操作環(huán)境的設施，以保護實驗免受外部環(huán)境的影響，同時為外部環(huán)境提供某些程度的保護以防污染并保護操作者。超凈臺的使用與維護風速保持在0.32-0.48米/秒使用前打開紫外燈照射30-60min開啟超凈工作臺工作電源，關閉紫外燈，并用75%的酒精或0.5%過氧乙酸噴灑擦拭消毒工作臺面。使用中，有機玻璃罩受到污染，嚴禁用酒精棉球擦拭，請用含水棉布檫拭；請保持超凈臺整潔、干燥，不要堆積雜物；使用完畢，關閉酒精燈；使用完畢后，用消毒液擦拭工作臺面，關閉工作電源，重新開啟紫外燈照射15min.定期做無菌試驗，以測定凈化臺是否符合無菌要求。3.無菌操作要求在操作中不應有大幅度或快速的動作；使用玻璃器皿應輕取輕放。在火焰旁邊操作；接種用具在使用前、后都必須灼燒滅菌；在接種培養(yǎng)物時，協(xié)