臨床實驗室安全管理

臨床試驗室安全管理

提議參照書：人衛(wèi)版第1頁

臨床試驗室安全管理第一節(jié)概述第二節(jié)試驗室生物安全管理體系第三節(jié)試驗室生物安全風險評定第四節(jié)臨床試驗室生物安全防護第五節(jié)試驗用菌（毒）種及廢棄物處理第六節(jié)臨床試驗室其他安全2第2頁

臨床試驗室安全管理臨床試驗室是醫(yī)療機構病原體最集中區(qū)域也是科研工作特殊場所這些病原體對試驗室工作人員、周圍人員及環(huán)境具有一定潛在危害它甚至能夠造成疾病流行，危及廣大群眾健康和生命安全，妨礙社會經(jīng)濟發(fā)展及友好社會建設，使得試驗室生物安全管理成為臨床試驗室安全管理工作關鍵3第3頁第一節(jié)概述

一、試驗室生物安全有關概念

二、臨床試驗室主要危害源

三、有關法律法規(guī)和標準

四、試驗室常用安全標識4第4頁一、試驗室生物安全有關概念1.生物因子(biologicalagents)2.生物危害（biohazard）3.生物危險(biorisk)4.氣溶膠（aerosols）5.生物安全（biosafety）6.試驗室生物安全（laboratorybiosafety）5第5頁1．生物因子(biologicalagents)是也許引發(fā)感染、過敏或中毒所有微小生物體，包括基因修飾、細胞培養(yǎng)和寄生于人體一切微生物和其他有關生物活性物質2.

生物危害（biohazard）是由生物因子對環(huán)境及生物體健康所造成危害一、試驗室生物安全有關概念6第6頁3.

生物危險(biorisk)

是生物因子將要或也許形成危害，是傷害概率和嚴重性綜合，又叫風險。研究病原微生物是有一定風險，生物安全試驗室能夠減少這種風險4.

氣溶膠（aerosols）是指懸浮于氣體介質中粒子，一般直徑為0.001μm～100μm固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成相對穩(wěn)定分散體系一、試驗室生物安全有關概念7第7頁5.生物安全（biosafety）是指人們對于由動物、植物、微生物等生物體給人類健康和自然環(huán)境也許造成不安全防備6.實驗室生物安全（laboratorybiosafety）是指在實驗室從事病原微生物實驗活動中，采取措施避免病原微生物對工作人員和相關人員造成危害、對環(huán)境造成污染和對公眾造成傷害，保證明驗研究科學性并保護被實驗對象免受污染

返回節(jié)目錄一、試驗室生物安全有關概念8第8頁二、臨床試驗室主要危害源（一）生物危害源（二）化學危害源（三）物理危害源9第9頁（一）生物危害源生物危害源主要由病原微生物引發(fā)包括細菌、病毒、真菌及寄生蟲等試驗室有關感染原因：被銳器刺傷吸入氣溶膠被動物咬傷或抓傷感染性材料處理不當

10第10頁（二）化學危害源化學危害源主要指在臨床試驗室操作過程中所使用危險性化學品引發(fā)危害。包括：易燃性化學品、易爆性化學品、腐蝕性化學品、強酸性化學品、有毒性化學品、有害性化學品入侵方式：通過吸入、接觸、食入、針刺及破損皮膚等方式侵入11第11頁（三）物理危害源臨床試驗室中物理危害源主要放射性核素輻射、紫外線和激光光源照射、電磁場、噪音等危害1．放射性核素使用理由、程度和地點進行評定

2.

紫外線和激光光源提供個人防護裝備

3.電主要危害是引發(fā)火災

4.噪音采取工程控制措施

返回節(jié)目錄12第12頁三、有關法律法規(guī)和標準（一）國際有關法律法規(guī)（二）我國生物安全法律、法規(guī)和標準13第13頁（一）國際有關法律法規(guī)20世紀50～60年代歐美國家開始關注試驗室生物安全問題世界衛(wèi)生組織在1983年出版了《試驗室生物安全手冊》（第一版）WHO于1993年組織編寫了該手冊第二版。2023年WHO正式公布了《試驗室生物安全手冊》（第三版）14第14頁（二）我國有關生物安全法律法規(guī)和標準1.我國有關生物安全法律法規(guī)（1）《中華人民共和國傳染病防治法》（2）《病原微生物試驗室生物安全管理條例》（3）《醫(yī)療廢物管理條例》15第15頁2．我國有關試驗室生物安全標準和規(guī)范（1）中華人民共和國國標：《試驗室生物安全通用要求》（GB19489-2023）、《醫(yī)學試驗室安全要求》（GB19781-2023/ISO15190）、《生物安全試驗室建設技術規(guī)范》（GB50346-2023）（2）中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準：《微生物和生物醫(yī)學試驗室生物安全通用準則》、《人間傳染病原微生物名目》、《可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理要求》（3）國家環(huán)境保護總局：《病原微生物試驗室生物安全環(huán)境管理措施》（第32號）

返回節(jié)目錄16第16頁四、試驗室安全標識（一）生物危害標識（二）感染性物品標識（三）電離輻射標識（四）危險化學品警示標識

17第17頁授權人員方可進入生物安全水平：------------責任人：-------------緊急聯(lián)系電話：-----------白天電話：------------家庭電話：-----------必須得到上述責任人授權方可進入生物危害警告標識第18頁感染性物品標識第19頁當心電離輻射標識第20頁爆炸品標識第21頁易燃氣體、不燃氣體第22頁易燃液體標識第23頁氧化劑標識

第24頁腐蝕品標識

第25頁

返回章目錄警示標識

第26頁第二節(jié)試驗室生物安全管理體系

一、生物安全管理組織體系

二、生物安全管理體系文獻

三、生物安全管理規(guī)章制度

四、生物安全管理規(guī)范

五、統(tǒng)計與資料管理27第27頁一、生物安全管理組織體系（一）國家病原微生物試驗室生物安全專家委員會（二）地域病原微生物試驗室生物安全專家委員會（三）醫(yī)療機構生物安全管理委員會（四）試驗室主任與安全管理員28第28頁一、生物安全管理組織體系試驗室安全責任人工作(1)生物安全、生物安全保障以及技術規(guī)章方面咨詢工作。(2)對技術措施、程序和方案、生物因子、材料和設備定期進行內部安全檢查(3)統(tǒng)計違反生物安全方案或程序情況,與有關人員討論并提出改善措施(4)進行生物安全繼續(xù)教育和合適生物安全培訓(5)對于所有包括潛在泄漏或意外事故調查,并將調查成果以及處理意見及時向試驗室主任和生物安全委員會報告29第29頁一、生物安全管理組織體系(6)在出現(xiàn)包括感染性物質溢出或其他事故時,要確保清除污染(7)確保醫(yī)療廢棄物正確管理(8)根據(jù)國家要求,制定病原微生物運入/運出程序(9)對包括感染性物質試驗計劃、方案以及操作程序,要在詳細操作實行此前進行生物安全審查。(10)負責試驗室應急預案演練與實行等

返回節(jié)目錄30第30頁二、生物安全管理體系文獻體系文獻編制一般都采取四層“金字塔”建構第一層《生物安全管理手冊》，主要論述生物安全標準、方針、意圖和指令等第二層是《程序文獻》，是將生物安全管理指令、意圖轉化為行動途徑和有關聯(lián)行動第三層是《作業(yè)指導書(SOP)》，是用來指導有關活動試驗操作技術細節(jié)性文獻第四層是《統(tǒng)計》，是用來說明安全關聯(lián)活動體現(xiàn)方式，它可追溯性提供成果證據(jù)31第31頁二、生物安全管理體系文獻1．生物安全管理手冊關鍵是生物安全方針、目標、標準、組織機構及各組成要素描述手冊中“方針目標”應口號式生物安全方針概述生物安全目標，明確試驗室對生物安全管理承諾32第32頁二、生物安全管理體系文獻2．生物安全管理程序文獻是對生物安全活動進行全面籌劃和管理，是對各項生物安全管理活動辦法所作要求，不包括純技術性細節(jié)。程序文獻一般包括；文獻標題、目標、適用范圍、職責、工作流程、統(tǒng)計表格目錄、支持性文獻等。

返回節(jié)目錄33第33頁三、生物安全管理規(guī)章制度1．建立安全管理制度基本標準

制定生物安全管理制度必須根據(jù)有關法律法規(guī)、標準，并結合本試驗室情況還應考慮其科學性、合理性和可操作性控制源頭、切斷途徑、避免危害34第34頁三、生物安全管理規(guī)章制度2．基本規(guī)章制度①試驗室安全管理制度②生物安全防護制度③內務清潔制度④試驗室消毒滅菌制度⑤安全培訓制度⑥微生物試驗室菌(毒)種管理制度⑦傳染病病原體報告制度。⑧防火、防電、防意外事故管理制度⑨尖銳器具安全使用制度⑩試驗室醫(yī)療廢棄物處理制度

返回節(jié)目錄35第35頁四、生物安全管理規(guī)范組成臨床試驗室生物安全三要素：工作人員、硬件和軟件人是關鍵要素，又是最珍貴要素試驗室或者試驗室設置單位應當每年定期對工作人員進行培訓，確保其掌握試驗室技術規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考評36第36頁四、生物安全管理規(guī)范《病原微生物試驗室生物安全管理條例》要求：試驗室應當每年定期對工作人員進行培訓，確保其掌握試驗室技術規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考評工作人員經(jīng)考評合格，方可上崗對試驗室有關人員，包括試驗室操作人員、保潔人員等也要進行崗前培訓和考評，持證上崗同步要進行周期性(一般每年一次)生物安全知識繼續(xù)教育，并記入個人技術檔案。

返回節(jié)目錄37第37頁五、統(tǒng)計與資料管理將所取得成果或所完成活動以統(tǒng)計方式形成文獻，它可追溯性提供證據(jù)試驗室活動體現(xiàn)方式之一統(tǒng)計還可為糾正措施、預防措施驗證提供證據(jù)試驗室采取糾正措施、預防措施過程與效果能夠通過相正確統(tǒng)計給予驗證

返回章目錄38第38頁第三節(jié)試驗室生物安全風險評定

一、生物因子風險程度分級

二、病原微生物危害程度分類

三、試驗室生物安全防護分級

四、風險評定39第39頁一、生物因子風險程度分級Ⅰ級風險:

低個體危害，低群體危害。不會造成健康工作者和動物致病細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。

Ⅱ級風險：中等個體危害，有限群體危害。能引發(fā)人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引發(fā)嚴重危害病原體。試驗室感染不造成嚴重疾病，具有有效治療和預防措施，并且傳輸風險有限。40第40頁一、生物因子風險程度分級Ⅲ級風險：高個體危害，低群體危害。能引發(fā)人類或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但一般不能因偶爾接觸而在個體間傳輸，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療病原體。Ⅳ級風險：高個體危害，高群體危害。能引發(fā)人類或動物非常嚴重疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶爾接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物間傳輸病原體。

返回節(jié)目錄41第41頁二、病原微生物危害程度分類我國在《病原微生物試驗生物安全管理條例》中，按危害程度將病原微生物分為四類。一類：能夠引發(fā)人類或者動物非常嚴重疾病微生物，以及我國尚未發(fā)覺或者已經(jīng)宣布消滅和微生物。二類：能夠引發(fā)人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳輸微生物。42第42頁二、病原微生物危害程度分類三類：能夠引發(fā)人類或動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不組成嚴重危害，傳輸風險有限，試驗室感染后很少引發(fā)嚴重疾病，并且具有有效治療和預防措施微生物。四類：一般情況下不會引發(fā)人類或者動物疾病微生物。

返回節(jié)目錄43第43頁三、試驗室生物安全防護分級1．一級生物安全防護試驗室（BSL-l）2．二級生物安全防護試驗室（BSL-2）3．三級生物安全防護試驗室（BSL-3）4．四級生物安全防護試驗室（BSL-4）44第44頁與風險等級相對應生物安全水平、操作和設備選擇危害等級生物安全水平試驗室類型試驗室操作安全設施ⅠBSL-1

基礎教學、研究GMT

不需要；開放試驗室

ⅡBSL-2

初級衛(wèi)生服務、診斷

GMT、防護服、開放試驗室，需要BSC

微生物危害標識用于也許生成氣溶膠

ⅢBSL-3

特殊診斷、研究在BSL-2上增加特BSC和（或）其他所有殊防護服、進入制試驗室工作所需基本度、定向氣流設備

ⅣBSL-4

危險病原體研究在BSL-3上增加氣鎖Ⅱ級或Ⅲ級BSC并穿入口、出口淋浴、污著正壓服、雙開門高染物特殊處理壓滅菌器，通過濾空

氣

第45頁病原微生物危害等級劃分與生物安全試驗室分級

返回節(jié)目錄第46頁四、風險評定（一）風險評定含義（二）風險評定范圍（三）風險評定時間（四）評定人員（五）制定評定報告（六）評定措施47第47頁（一）風險評定含義風險評定（riskassessment）是評定風險大小以及確定風險是否可接收全過程風險控制（riskcontrol）為減少風險而采取綜合措施風險評定是試驗室生物安全關鍵工作48第48頁（二）風險評定范圍（1）生物安全風險評定包括病原微生物危害評定、試驗室試驗活動風險評定、設施設備安全風險評定、人員健康監(jiān)測等多方面內容。（2）風險評定內容最少包括生物因子已知或未知生物學特性生物因子種類、起源、傳染性、傳輸途徑、易感性、潛伏期、劑量-效應關系、致病性、變異性、在環(huán)境中穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境交互作用、有關試驗數(shù)據(jù)、流行病學資料、人員安全情況評定、預防和治療方案等49第49頁（三）風險評定時間風險評定始于試驗室設計建造之前實行于試驗活動之中定期階段性再評定因工作條件、人員變動適時重新評定確保風險評定報告及時性確保有關管理規(guī)程、標準操作程序可行性50第50頁（四）評定人員試驗室生物安全工作包括病原微生物、建筑設計工程、防護材料空氣動力等不一樣專業(yè)領域是管理與研究并重綜合性工作需要對該領域及試驗研究有經(jīng)驗、有資歷專業(yè)人員進行評定工作51第51頁（五）制定評定報告多種原因風險發(fā)生概率程度、針對這些風險采取風險控制措施以及風險發(fā)生后補救辦法風險評定報告應得到有關生物安全主管部門審批程序審批是對評定成果論證52第52頁（六）評定措施詳細評定措施應按照國標《試驗室生物安全通用要求》（GB19489-2023）嚴格實行

返回章目錄53第53頁第四節(jié)臨床試驗室生物安全防護一、試驗室生物安全防護類型二、試驗室主要安全設備三、個人安全防護用具四、臨床試驗室技術規(guī)范五、臨床試驗室消毒與滅菌六、臨床試驗室應急事故處理

54第54頁一、試驗室生物安全防護類型1.一級防護(primarybarrier)

主要采取規(guī)范試驗技術和合適安全設備保護試驗室工作人員和室內環(huán)境安全免受感染性物質污染包括安全設備和個體防護裝備55第55頁一、試驗室生物安全防護類型2.二級防護(secondarybarrier)

二級防護包括試驗室設施設計和嚴格規(guī)范操作流程以保護試驗室外環(huán)境不受感染性物質污染生物安全防護三個要素試驗室操作及技術、安全設備和試驗室設施設

返回節(jié)目錄56第56頁二、試驗室主要安全設備（一）生物安全柜（二）超凈工作臺（三）通風柜（四）洗眼器（五）緊急噴淋裝置（六）消毒設施及用具57第57頁生物安全柜（biosafetycabinet，BSCs）是處理危險性微生物時所用箱型空氣凈化安全裝置。是在操作具有感染性試驗材料時，為保護操作者本人、試驗室內外環(huán)境以及試驗材料，使其避免在操作過程中也許產(chǎn)生感染性氣溶膠和濺出物而設計一種試驗室安全防護設備。（一）生物安全柜58第58頁（一）生物安全柜1.種類介紹2.生物安全柜使用要求3.生物安全柜操作規(guī)范4.生物安全柜檢測要求59第59頁1.種類介紹Ⅰ級生物安全柜Ⅱ級生物安全柜：Ⅱ級A1型、Ⅱ級A2型、

Ⅱ級B1型、Ⅱ級B2型Ⅲ級生物安全柜60第60頁生物安全柜(負壓柜)Ⅰ級：設計簡單，目前仍廣泛使用。保護操作者和環(huán)境，不保護操作對象。Ⅱ級：保護操作者和操作對象。操作危險度2級和3級微生物。穿正壓防護服可處理危險度4級微生物。Ⅲ級：對操作者防護最佳。操作危險度4級微生物。適用于三級和四級生物安全水平試驗室。第61頁Ⅰ級生物安全柜原理A：前開口B：窗口C：排風HEPA過濾器D：壓力排風系統(tǒng)不能對試驗樣品進行保護安全柜內空氣能夠通過HEPA過濾器按下列方式排出：（a）排到試驗室中，然后再通過試驗室排風系統(tǒng)排到建筑物外面（b）通過建筑物排風系統(tǒng)排到建筑物外面（c）直接排到建筑物外面第62頁Ⅱ級生物安全柜Ⅱ級生物安全柜有不一樣類型：A型（30%排出）：A1、A2型B型又分為：B1（70%接管道外排）

B2（100%接管道外排）不一樣于Ⅰ級生物安全柜之處為：只讓經(jīng)HEPA過濾（無菌）空氣流過工作臺面第63頁Ⅱ級A1

型生物安全柜原理圖A：前開口B：窗口C：排風HEPA過濾器D：背面壓力排風系統(tǒng)E：供風HEPA過濾器F：風機第64頁Ⅱ級B1

型生物安全柜原理圖A：前開口B：窗口C：排風HEPA過濾器D：供風HEPA過濾器E：負壓壓力排風系統(tǒng)F：風機G：送風HEPA過濾器安全柜需要有與建筑物排風系統(tǒng)相連接排風接口第65頁Ⅲ級生物安全柜所有接口都是密封有一種專門外置排風系統(tǒng)控制氣流安全柜內部始終處于負壓狀態(tài)（約124.5Pa）只有通過連接在安全柜上橡膠手套，手才能伸入安全柜第66頁Ⅲ級生物安全柜A：用于連接等臂長手套艙孔B：窗口C：兩個排風HEPA過濾器D：送風HEPA過濾器E：雙開門高壓滅菌器或傳遞箱F：化學浸泡槽安全柜需要有與獨立建筑物排風系統(tǒng)相連接排風接口第67頁根據(jù)保護類型需要選擇合適生物安全柜第68頁

擺放位置、操作、物品擺放、操作和維修紫外線燈、明火、溢出、清潔和消毒、清除污染、個體防護裝備、警報器、檢測2.生物安全柜使用要求69第69頁3.

生物安全柜操作規(guī)范1.人員要培訓2.必須運行正常3.使用時不能打開玻璃觀測擋板4.放置盡也許少器材或標本5.不能使用本生燈6.在安全柜中后部操作、不要使用其他物品阻擋空氣格柵、盡也許減少手臂伸進伸出、盡也許減少操作者身后人員流動、不進行文字工作7.工作開始前和結束后，風機應最少運行5分鐘70第70頁4.生物安全柜檢測要求（1）人員、產(chǎn)品及交叉污染保護試驗（2）柜體泄漏試驗（3）HEPA過濾器泄漏試驗（4）下降氣流流速測試（5）流入氣流流速測試（6）氣流煙霧模式測試（7）噪聲（8）照度（9）振動71第71頁（二）超凈工作臺超凈工作臺氣流是由外部經(jīng)HEPA過濾后進入操作區(qū)，通過操作區(qū)后由超凈工作臺前、側開口區(qū)流向操作者一側而進入試驗室。超凈工作臺只能保護試驗材料，不能保護操作人員及環(huán)境。超凈工作臺只適用于無毒、無味、無刺激性揮發(fā)氣體以及無感染性試驗材料操作。72第72頁超凈工作臺第73頁（三）通風柜通風柜是能夠有效遏制毒性、刺激性或者易燃材料安全設備在試驗操作時往往會產(chǎn)生多種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質，為了保護使用者安全，避免試驗中污染物質向試驗室擴散，在污染源附近要使用排風設備尤其是當試驗過程中出現(xiàn)操作失誤，蒸汽和灰塵從使用器皿中大量泄出時，通風柜可起到后備安全保障作用74第74頁通風柜第75頁（四）洗眼器洗眼器是安全和勞動保護必備設備，是接觸酸、堿、有機物等有毒、腐蝕性物質場所必備應急、保護設施洗眼器類型很多，如復合式洗眼器、立式洗眼器、壁掛式洗眼器、便攜式洗眼器、臺式洗眼器每七天應測試洗眼器與水供應連接裝置以確保其功能正常并沖掉積水76第76頁洗眼器第77頁（五）緊急噴淋裝置一般安裝在使用苛性堿和腐蝕性化學品附近地方定期測試噴淋裝置以確保其功能正常，其次數(shù)依試驗室復雜程度和規(guī)模而定盡也許提供舒適水溫；地面排水一般設在緊急噴淋裝置附近78第78頁緊急噴淋裝置第79頁（六）消毒設施及用具臨床試驗室生物安全防護常采取消毒三種方式化學消毒高壓滅菌焚燒可在詳細工作中應根據(jù)實際情況來選擇不一樣消毒方式

返回節(jié)目錄80第80頁三、個人安全防護用具

1.試驗服2.護目鏡3.面罩4.手套5.鞋81第81頁安全防護用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險一種屏障應根據(jù)所進行工作性質來選擇防護用具常用安全防護用具有試驗服、護目鏡、面罩、手套和鞋等三、個人安全防護用具

82第82頁試驗服面罩第83頁護目鏡鞋套第84頁手套第85頁試驗服

隔離衣

連體防護

86第86頁靴套使用辦法示意圖鞋套使用辦法示意圖87第87頁乳膠手套

聚脂手套

聚氯乙烯手套

88第88頁眼睛防護裝備

a.安全鏡

大多數(shù)情況,佩戴側面帶有護罩安全眼鏡能夠保護工作人員避免受到大部分試驗室操作所帶來損害89第89頁

b.安全護目鏡

只有在進行有也許發(fā)生化學和生物污染物質濺出試驗時，必須佩戴護目鏡

第90頁——防護面罩（對整個臉部進行防護）

——一次性面罩

第91頁

一次性防護面具

一次性防護面具

第92頁

正壓防護服

使用中全罩式防護面具第93頁

正壓面罩（頭盔正壓式呼吸防護系統(tǒng)）

返回節(jié)目錄第94頁四、臨床試驗室技術規(guī)范（一）一級生物安全防護試驗室（BSL-1）（二）二級生物安全防護試驗室（BSL-2）（三）三級生物安全防護試驗室（BSL-3）（四）四級生物安全防護試驗室（BSL-4）95第95頁（一）一級生物安全防護試驗室（BSL-1）適用于已知不會造成健康工作者和動物致病生物因子（細菌、真菌、病毒和寄生蟲等）操作對試驗室工作人員和環(huán)境潛在危害性最小96第96頁（一）一級生物安全防護試驗室1．標準微生物操作規(guī)程①限制或嚴禁非本試驗室人員進入②工作人員處理完后，脫下手套、離開試驗室之前要洗手③不許在工作區(qū)內飲食、喝水、抽煙、化裝、處理隱形眼鏡，食物要放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱內④嚴禁使用口吸移液，應使用移液器吸取液體⑤制定銳利器具安全操作規(guī)程97第97頁（一）一級生物安全防護試驗室1．標準微生物操作規(guī)程⑥操作盡也許細心，以減少飛濺物或氣溶膠產(chǎn)生⑦每天最少消毒一次工作臺面，活性物質濺出時應及時消毒⑧所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出試驗室前，應使用可行辦法進行消毒滅活⑨制定有效防鼠防蟲措施⑩當存在傳染源時，應在試驗室入口處貼上生物危險標志，注明致病因子名稱、研究室責任人姓名及電話號碼98第98頁（一）一級生物安全防護試驗室2．試驗室生物安全設備和防護要求

①操作生物安全一級生物因子，一般無須生物安全柜等特殊防護裝置和設備②穿戴工作服,避免本身衣服被污染或弄臟③若手部皮膚有破損或皮疹應戴上手套④操作中應戴保護眼罩99第99頁（一）一級生物安全防護試驗室3．試驗室設施要求

①試驗室應當有控制進入門②試驗室應配備洗手池，并接近出口處③試驗室地面應易于清洗、防滑、不宜鋪設地毯④試驗臺面應防水、耐熱、耐酸堿、耐有機溶劑及其他用于消毒藥品⑤試驗室器材設施之間應固定，并保持一定間距便于清掃⑥假如試驗室有窗戶應安裝紗窗100第100頁（二）二級生物安全防護試驗室二級生物安全防護試驗室（BSL-2）接觸致病生物因子試驗室工作人員要通過特殊培訓在資深工作人員指導下工作101第101頁（二）二級生物安全防護試驗室1．標準微生物操作規(guī)程同BSL-1，特殊安全操作規(guī)程1）在開展傳染病原體操作時，試驗室責任人應嚴禁或限制其他人員進入2）只有那些明確病原體潛在危險性并符合特殊要求（如通過免疫接種）人員才能進入試驗室3）試驗室入口處貼上生物危害標志，在試驗室內必須佩戴個人防護設施4）試驗室人員接收合適與試驗有關免疫接種或檢測（如乙型肝炎病毒疫苗或卡介苗皮試）5）必要時對試驗室或其他高危人員進行基準血清樣本搜集并保存6）標準操作規(guī)程或生物安全手冊中應包括生物安全程序102第102頁（二）二級生物安全防護試驗室1．標準微生物操作規(guī)程7）工作人員要每年要接收1次最新知識培訓。8）對于污染銳利器具，要嚴格遵守以下規(guī)定：①針、注射器及其他銳器應限制在實驗室內使用；可用其他器具替代操作②注射和吸取感染性物質時要用一次性注射器；用過針頭不得彎曲、剪斷、折斷、直接置于堅壁容器中③適當初使用帶針頭套注射器、無針頭注射器和其他安全裝置④嚴禁直接用手處理破碎玻璃器具，必須用其他工具（如刷子、簸箕、夾子或鑷子等）處理，盛裝污染針頭、銳器、破碎玻璃容器在丟棄前需進行消毒處理103第103頁（二）二級生物安全防護試驗室1．標準微生物操作規(guī)程9）試驗室設備和工作臺面在進行完感染性物質操作后進行常規(guī)消毒，污染設備必須根據(jù)對應要求進行消毒10）培養(yǎng)物、組織、體液樣本或具潛在感染性廢物必須放在密閉、防漏容器內，避免發(fā)生泄漏）發(fā)生溢出事故造成感染性物質擴散時，應立即報告試驗室責任人，要進行合適醫(yī)學評定、監(jiān)測以及妥善處理，并保存書面統(tǒng)計12）與試驗無關動物不允許進入試驗室104第104頁（二）二級生物安全防護試驗室2．試驗室生物安全設備和防護要求二級生物安全柜或個人防護裝備或物理防護①也許產(chǎn)生感染性氣溶膠或飛濺物試驗過程,②處理高濃度或大體積感染性生物，密封轉頭或離心管,能夠在開放試驗室離心③生物安全柜外操作感染性微生物時,要佩戴面目防護裝置④要穿著專用工作服等防護服,在離開時必須脫下⑤當手也許接觸到有潛在感染性物質、污染表面或設備時,必須戴手套。處理后手套不能再進行沖洗、使用或接觸“潔凈”表面(鍵盤、電話等),脫下手套后立即洗手（105第105頁（二）二級生物安全防護試驗室3．試驗室設施要求①試驗室門應帶鎖②應配備多種消毒設施，如高壓滅菌裝置、化學消毒裝置等③新建試驗室選址應遠離公共場所④生物安全柜要放在遠離門、開放窗戶、走動比較頻繁試驗室區(qū)域以及其他具有潛在破壞性設備處,以維持生物安全柜氣流參數(shù)106第106頁（三）三級生物安全防護試驗室（BSL-3）

1．操作規(guī)程①標準微生物安全操作規(guī)程同BSL-2②特殊安全操作規(guī)程，在BSL-2特殊安全操作規(guī)程基礎上，對試驗室設備和工作臺面消毒、銳器處理、生物安全柜應用、廢棄物處理等有某些特殊要求107第107頁（三）三級生物安全防護試驗室2．試驗室生物安全設備和防護要求①進入試驗室時應穿防護服，操作完成必須脫下工作服②包括感染性材料操作均應在Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜中進行，當不得不在生物安全柜外進行時，必須采取合適個體綜合防護裝置和物理防擴散設備③在進行感染性試驗操作時，必須使用面部防護設備和呼吸保護裝置④在試驗室中必須配備有效消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，可配備應急藥品108第108頁（三）三級生物安全防護試驗室3．試驗室設施要求①在BSL-2試驗室設施基礎上②試驗室應單獨隔離區(qū)域，嚴禁隨便進入，通過兩道自動門③洗手池為手免接觸式或腳踏式或肘動式或全自動式，下水必須通過消毒處理④應設置緩沖區(qū)，緩沖區(qū)面積不宜超出試驗室面積1/8⑤試驗室應密閉，所有門窗需關閉和密封，無縫隙、表面應光滑防水、耐腐蝕⑥在試驗室內應備有對試驗廢棄物進行消毒處理措施⑦應安裝管道式廢氣排放系統(tǒng)提議在試驗室入口處設置可視監(jiān)測系統(tǒng)109第109頁（四）四級生物安全防護試驗室（BSL-4）

在BSL-3技術規(guī)范基礎上更為嚴格試驗人員和試驗材料進出試驗室有特殊要求試驗室入口應安裝上鎖安全門所有進入試驗室人員都要署名登記日期和時間試驗人員入室前應更換衣服，只能經(jīng)淋浴間和更衣室進出試驗室，每次離開試驗室前都應進行消毒性淋浴試驗材料和用具應通過雙層門高壓滅菌倉、熏蒸消毒倉或氣體閘門送入，所有操作必須Ⅲ級生物安全柜中進行任何未經(jīng)高壓或熏蒸消毒物質不得轉移出試驗室

返回節(jié)目錄110第110頁五、臨床試驗室消毒與滅菌（一）常用消毒滅菌辦法（二）化學消毒（三）臨床試驗室消毒措施（四）焚燒111第111頁（一）常用消毒滅菌辦法1．物理消毒滅菌辦法用物理原因殺菌或清除病原微生物及其他有害微生物，稱為物理消毒滅菌法。（1）熱力滅菌法（heatsterilization）

①濕熱滅菌法：濕熱滅菌法是最常用滅菌法其殺菌機制：在濕熱條件下蛋白質吸取水分容易變性或凝固，水分子穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能，蒸汽有潛熱存在。因此該法滅菌效率比干熱滅菌法高。主要包括：高壓蒸氣滅菌法、間歇蒸氣滅菌法、流通蒸氣消毒法、煮沸法、巴氏消毒法112第112頁（一）常用消毒滅菌辦法1．物理消毒滅菌辦法

②干熱滅菌法：其機制是高溫能使菌體蛋白分子變性及細胞質濃縮，使新陳代謝受到障礙而死亡；可殺死一切微生物，包括芽胞菌，還能夠破壞熱原質（2）輻射殺菌法（radiationsterilization）：通過紫外線照射和γ射線高能量電子束，使菌體蛋白發(fā)生光解、變性、核酸酶被破壞。主要辦法有：紫外線法、電離輻射法、微波法113第113頁（一）常用消毒滅菌辦法（3）超聲波殺菌法（ultrasonic）：超聲波滅菌機制是利用其通過水時產(chǎn)生空（腔）化作用，從而造成細菌崩破與裂解，革蘭陰性菌對其尤為敏感常與其他辦法適用，起到增效作用。（4）過濾除菌法（filtration）：采取濾器通過物理阻留辦法將液體或空氣中細菌除去辦法，以達成無菌目標主要用于不耐高溫滅菌血清、毒素、抗生素、藥液和空氣除菌，不能清除病毒、支原體和L型細菌114第114頁（一）常用消毒滅菌辦法（二）化學消毒化學消毒是指用化學藥品作用于微生物和病原體，使其蛋白質變性，失去正常功能而死亡具有殺菌作用化學藥品稱為化學消毒劑，具有抑制微生物生長繁殖藥品稱為防腐劑主要辦法有：浸泡法、擦拭法、熏蒸法、噴霧法，環(huán)氧乙烷氣體密閉消毒法適用于不耐高溫物品，如銳利器械（如刀、剪刀、縫針等）、內鏡、塑料導管、光學儀器及皮膚、黏膜，病人分泌物、排泄物、試驗室空氣等均可采取此法115第115頁（二）化學消毒

多種消毒劑可按照其作用效力分為三類：①高效消毒劑：甲醛、戊二醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、有機汞化合物等，能夠殺滅包括細菌繁殖體、芽孢、真菌、病毒在內一切微生物，可用作滅菌劑②中效消毒劑：有乙醇、酚類、碘、含氯消毒劑等，可殺滅細菌芽孢以外其他多種微生物③低效消毒劑：包括新潔爾滅、洗必泰等，不能殺滅細菌芽孢、結核桿菌和親水類病毒，可殺滅結核桿菌以外其他細菌繁殖體、真菌和親脂類病毒116第116頁(三)臨床試驗室消毒措施臨床試驗室分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)目前試驗室一般使用含氯消毒劑進行消毒1．清潔區(qū)辦公室、盥洗室、休息室、培養(yǎng)基室等每天開窗通風換氣，擦拭桌面、地面。每七天用消毒液500mg/L有效氯擦拭。2．半污染區(qū)包括緩沖間、更衣室及衛(wèi)生通道等區(qū)域，也許存在致病菌污染①空氣消毒常采取紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒②門窗、桌面等物體表面用500mg/L有效氯擦拭消毒③工作用鞋用500mg/L有效氯擦拭，工作衣、隔離衣一般由醫(yī)院洗衣房統(tǒng)一消毒處理117第117頁(三)臨床試驗室消毒措施3．污染區(qū)包括試驗室樣本搜集區(qū)、處理區(qū)、培養(yǎng)區(qū)、判定藥敏區(qū)和廢棄物處理區(qū)域等。（1）空氣消毒用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒。（2）手消毒常用250mg/L有效氯或專用洗手液消毒（3）門窗、桌面、珍貴儀器設備等物體表面消毒需用500mg/L有效氯擦拭（4）被樣品污染表面消毒用1000mg/L有效氯消毒30min～60min被病毒和結核桿菌污染表面消毒要用2023mg/L有效氯消毒30min118第118頁（四）焚燒在臨床試驗室生物安全防護工作中，焚燒步驟是醫(yī)療廢棄物消毒終末步驟在處理那些通過或事先未經(jīng)清除污染動物尸體以及解剖組織或其他試驗室廢棄物時，焚燒是一種有效辦法但要在指定地點，應符合有關要求一般交由廢棄物處理部門完成

返回節(jié)目錄119第119頁六、臨床試驗室應急事故處理（一）刺傷、切割傷或擦傷（二）潛在感染性物質食入（三）潛在危險性氣溶膠釋放（柜外）（四）容器破碎及感染性物質溢出（五）未裝可封閉離心桶離心機內盛有潛在感染性物質離心管發(fā)生破裂（六）在可封閉離心桶內離心管發(fā)生破裂（七）火災和自然災害（八）緊急救援、聯(lián)系對象（九）急救裝備120第120頁（一）刺傷、切割傷或擦傷1．受傷人員應當脫下防護服，清洗雙手和受傷部位．使用合適皮膚消毒劑，必要時進行醫(yī)學處理2．要統(tǒng)計受傷原因和有關微生物，并應保存完整合適醫(yī)療統(tǒng)計121第121頁（二）潛在感染性物質食入應脫下受害人防護服，并進行醫(yī)學處理要報告食入材料判定和事故發(fā)生細節(jié)并保存完整合適醫(yī)療統(tǒng)計122第122頁（三）潛在危險性氣溶膠釋放1．所有人員必須立即撤離有關區(qū)域，任何暴露人員都應接收醫(yī)學咨詢2．應當立即通知試驗室責任人和生物安全員3．為了使氣溶膠排出和使較大粒子沉降，在一定期間內（例如1h內）嚴禁人員入內。假如試驗室沒有中央通風系統(tǒng)，則應推遲進入試驗室（例如24h）4．應張貼“嚴禁進入”標志，過了對應時間后，在生物安全員指導下來清除污染5．應穿戴合適防護服和呼吸保護裝備123第123頁（四）容器破碎及感染性物質溢出1．應當立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質污染或受感染物質溢灑破碎物品。在上面倒上消毒劑，并使其作用適當初間。2．然后將布、紙巾以及破碎物品清理；玻璃碎片應用鑷子清理。3．用消毒劑擦拭污染區(qū)域。假如用簸箕清理破碎物，應當對其進行高壓滅菌或放在有效消毒液內浸泡。用于清理布、紙巾和抹布等應當放在盛放污染性廢棄物容器內。4．所有這些操作過程中都應戴手套。假如實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應將這信息復制，并將原件置于盛放污染性廢棄物容器內。124第124頁（五）未裝封閉離心桶感染性物質離心管破裂1．假如機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應關閉機器電源，讓機器密閉30min使氣溶膠沉積。2．假如機器停頓后發(fā)覺破裂，應立即將蓋子蓋上，并密閉30min。3．發(fā)生上述兩種情況時都應通知生物安全員。隨后所有操作都應戴結實手套（如厚橡膠手套），必要時可在外面戴合適一次性手套。125第125頁4．當清理玻璃碎片時應當使用鑷子，或用鑷子夾著棉花來進行。所有破碎離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉子都應放在無腐蝕性、已知對有關微生物具有殺滅活性消毒劑內。未破損帶蓋離心管應放在另一種有消毒劑容器中，然后回收。5．離心機內腔應用合適濃度同種消毒劑擦拭，并再次擦拭，然后用水沖洗并干燥。6．清理時所使用所有材料都應按感染性廢棄物處理。（五）未裝封閉離心桶感染性物質離心管破裂126第126頁（六）在可封閉離心桶內破裂1．所有密封離心桶都應在生物安全柜內裝卸。2．假如懷疑在安全杯內發(fā)生破損，應當松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。安全杯也能夠采取化學消毒辦法處理。127第127頁（七）火災和自然災害應事先通知消防人員和其他服務人員房間有潛在感染性物質。要參觀試驗室，讓他們熟悉試驗室布局和設備。發(fā)生自然災害時，應就試驗室建筑內和（或）附近建筑物潛在危險向本地或國家緊急救濟人員提出警告只有在受過訓練試驗室工作人員陪同下，他們才能進入這些地域感染性物質應搜集在防漏盒子內或結實一次性袋子中。由生物安全人員根據(jù)本地要求決定繼續(xù)利用或是最后丟棄128第128頁（八）緊急救援、聯(lián)系對象應在試驗室內顯著位置張貼下列電話號碼及地址：試驗室、研究所所長、試驗室責任人生物安全員、消防隊醫(yī)院／急救機構／醫(yī)務人員水、氣和電維修部門工程技術人員、警察。129第129頁（九）急救裝備1．急救箱，包括常用和特殊解毒劑。2．合適滅火器和滅火毯。3．有效防護化學物質和顆粒濾毒罐全面罩式防毒面具。4．全套防護服。5．房間消毒設備，如噴霧器和甲醛熏蒸器等。6．工具，如錘子、斧子、扳手、螺絲刀、梯子和繩子。7．擔架。8．劃分危險區(qū)域界限器材和警告標示。

返回章目錄130第130頁第五節(jié)試驗用菌種及廢棄物處理

一、菌（毒）種保藏與管理

二、臨床試驗室廢棄物處理131第131頁一、菌（毒）種保藏與管理（1）生物安全管理部門要建立菌（毒）種管理監(jiān)督程序。（2）菌毒種儲藏環(huán)境是要合乎規(guī)范并具有對應等級菌毒種保藏基本設備和生物安全保障設施。（3）菌（毒）種儲藏設施要求雙人雙鎖。（4）保藏菌種，要有詳細背景和有關資料。（5）菌（毒）種分離是要有標準操作細則，并有對應原始統(tǒng)計。（6）進行II級生物危害微生物試驗原始統(tǒng)計自菌種啟動（分離）到菌種保藏或銷毀，可溯源。132第132頁（7）試驗統(tǒng)計要有試驗人、復核人、試驗日期，試驗室責任人要對統(tǒng)計內容核查。（8）銷毀統(tǒng)計要有包括銷毀方式、銷毀物品明細、滅菌溫度與時間。（9）要有菌毒種滅活辦法驗證程序，驗證原始統(tǒng)計。（10）要有用于菌毒種或培養(yǎng)物銷毀高壓鍋檢測報告。（11）試驗室廢棄物要使用專用包裝物、容器，要有顯著警示標識和警示說明。（12）具有處理菌毒種或培養(yǎng)物泄漏所需消毒制劑