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(一)還原反應(yīng)1、鹽酸-鎂粉(或鋅粉)反應(yīng):多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯橙紅~紫紅色,少數(shù)顯紫~藍(lán)色,B環(huán)有-OH或OCH3取代時(shí),顏色隨之加深。查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色。異黃酮類一般不顯色?;ㄉ丶安糠植槎?、橙酮等在單純濃鹽酸酸性條件下顏色也會(huì)發(fā)生變化,故須先做空白對(duì)照。2、四氫硼鈉(鉀)反應(yīng):NaBH4是對(duì)二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑。與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅~紫色。其它黃酮類化合物均不顯色。(二)金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)
1、三氧化鋁反應(yīng):此反應(yīng)可在濾紙、薄層上或試管中進(jìn)行。將樣品的乙醇溶液和1%三氯化鋁溶液反應(yīng),生成的鉻合物多呈黃色,置紫外燈下顯鮮黃色熒光,但4′━羥基黃酮醇或7,4′━二羥基黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。2、鋯鹽—枸櫞酸反應(yīng):多用2%二氯氧化鋯(ZrOCl2)甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或5-OH存在時(shí),均可反應(yīng)生成黃色的鋯絡(luò)合物。3、氨性氯化鍶反應(yīng)(SrCl2):在氨性甲醇溶液中,可與分子中具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物生成綠色~棕色乃至黑色沉淀。4、三氯化鐵反應(yīng):多數(shù)黃酮類化合物因分子中含有游離酚羥基,與三氯化鐵水溶液或醇溶液可產(chǎn)生陽性反應(yīng),呈現(xiàn)顏色;當(dāng)含有氫鍵締合的酚羥基時(shí),顏色更明顯。(三)硼酸顯色反應(yīng)在無機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下,5-羥基黃酮及2’-羥基查耳酮可與硼酸反應(yīng),呈亮黃色。在草酸存在下,顯黃色并帶綠色熒光。在枸櫞酸丙酮存在條件下,只顯黃色而無熒光。(四)堿性試劑顯色反應(yīng)在日光及紫外光下,通過紙斑反應(yīng),觀察樣品用氨蒸氣和其他堿性試劑處理后的顏色變化的情況。二氫黃酮類可轉(zhuǎn)變?yōu)椴槎惢衔铮@橙~黃色。黃酮醇類在堿液中先呈黃色,通入空氣后變?yōu)樽厣?。?dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3,4’-二羥基取代時(shí),在堿液中很快氧化,最后生成棕綠色沉淀。(五)與五氯化銻反應(yīng)五氯化銻(SdCl5):查耳酮特征性顯色反應(yīng)(紅或紫紅色沉淀)
黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。(六)Gibbs反應(yīng)檢查5-OH對(duì)位未被取代的黃酮。將樣品溶于吡啶中,加入Gibbs試劑顯藍(lán)或藍(lán)綠色。Gibbs試劑:甲液:0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亞胺的乙醇溶液。乙
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