離體蛙心灌流及某些離子

離體蛙心灌流及某些離子第1頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月主要內(nèi)容相關理論知識實驗部分實驗目的實驗對象實驗儀器與藥品實驗步驟結(jié)果分析與討論第2頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月相關理論知識

正常的蛙心能按靜脈竇的節(jié)律性自動產(chǎn)生興奮，心臟的自動節(jié)律性活動，需要有一個合適的理化環(huán)境。

蟾蜍心臟離體后，用任氏液灌流，在一定時間內(nèi)仍能保持節(jié)律性興奮和收縮活動。由于心臟的正?；顒舆€有賴于內(nèi)環(huán)境因素的相對穩(wěn)定，改變灌流液的成分可引起心臟活動的改變。第3頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月相關理論知識心肌細胞的生理特性表現(xiàn)為：自動節(jié)律性、興奮性、傳導性和收縮性。心肌細胞外離子濃度的變化和因體內(nèi)生物活性物質(zhì)（如激素）引起的細胞膜離子通透性的改變，對心肌細胞的生物電活動和生理特性必然會產(chǎn)生明顯的影響。第4頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月影響心肌細胞電生理特性的原因1.心肌的自動節(jié)律性（1）最大復極電位與閾電位的差距（2）4期自動除極速度2.心肌的興奮性

（1）靜息電位水平：依賴于細胞外K+濃度

（2）Na+通道的性狀相關理論知識第5頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月3.心肌的傳導性主要取決于動作電位0期除極速度和幅度4.心肌的收縮性依賴于細胞外鈣離子濃度相關理論知識影響心肌細胞電生理特性的原因第6頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月相關理論知識離子對心臟活動的影響鉀離子

K+參與心肌細胞的復極化和自律細胞的4期自動去極化過程，其改變不僅取決于細胞內(nèi)外K+濃度梯度，還與細胞膜對K+通透性有關，因此其影響是多方面的第7頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月相關理論知識離子對心臟活動的影響鈣離子

Ca2+對Na+內(nèi)流存在競爭抑制作用，稱膜屏障作用，對靜息電位無影響。[Ca2+]o↑，可使心肌細胞的興奮性降低，傳導減慢，收縮力增強。第8頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月相關理論知識迷走神經(jīng)和乙酰膽堿迷走神經(jīng)興奮時，節(jié)后纖維釋放Ach,激動心肌細胞膜上M型膽堿受體，產(chǎn)生負性變力、負性傳導、負性變時等效應。心交感神經(jīng)與去甲腎上腺素心交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放的遞質(zhì)是去甲腎上腺素，激動心肌細胞膜上的?受體，產(chǎn)生正性變力、正性傳導、正性變時等效應。第9頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗目的1.本實驗的目的是學習離體蛙心的灌流方法。2.用離體蛙心灌流的方法觀察：①

K+、Ca2+②

酸、堿度③

腎上腺素（E）乙酰膽堿（Ach）對心臟活動的影響第10頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗對象

蟾蜍第11頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗儀器設備RM6240生物采集系統(tǒng)張力換能器蛙類手術(shù)器械蛙心插管試管夾縫合線蛙心夾鐵支架滴管實驗藥品任氏液l％KCl3％CaC12l：10,000El：10,000ACh3％乳酸2.5％NaHCO3第12頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗步驟一、離體蟾蜍心臟標本制備

1.破壞腦和脊髓

2.暴露心臟第13頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月一、離體蟾蜍心臟標本制備

1.觀察心臟的解剖結(jié)構(gòu)實驗步驟（腹面）

（背面）第14頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗步驟

一、離體蟾蜍心臟標本制備1.蛙心插管1.1

在主A干下穿一線打一松結(jié)；在左主A下再穿一線結(jié)扎。第15頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗步驟

一、離體蟾蜍心臟標本制備1.蛙心插管1.2

在主動脈根部剪一斜口，將插管插入動脈圓錐，在心室收縮時將插管插入心室，結(jié)扎固定。第16頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1.用試管夾將蛙心管固定在鐵支架上2.把張力換能器固定鐵支架支臺上，在心室舒張期將與換能器相連的蛙心夾夾在心尖上。實驗步驟二、連接儀器和裝置第17頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項1.蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時，必須用任氏液沖洗3次。2.每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立即將插管內(nèi)液體吸出。3.隨時滴加任氏液于心臟表面使之保持濕潤。4.換能器頭端應向下傾斜以免液體進人換能器。5.各種試劑的滴管不要混淆,以免影響實驗結(jié)果。第18頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月觀察項目

一、描記正常心搏曲線

曲線幅度——收縮的程度曲線疏密——心率曲線基線——舒張的程度第19頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月二、觀察離子、藥物和酸堿的影響

1)更換任氏液為3%氯化鈣溶液1～2滴，記錄心率和收縮幅度，沖洗（下同）

2)滴加1～2滴1%氯化鉀溶液

3)滴加1～2滴1：10000去甲腎上腺素溶液

4)滴加1～2滴1：10000腎上腺素溶液

5)滴加1～2滴1：10000乙酰膽堿溶液

6)滴加1～2滴2.5%碳酸氫鈉溶液

7)滴加1～2滴3%乳酸溶液觀察項目第20頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗結(jié)果實驗項目收縮強度心率處理前處理后處理前處理后任氏液2%CaCl21%KCl1：10000E1：10000Ach2.5%NaHCO33%乳酸第21頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果分析與討論1.任氏液：正常對照2.3%CaCl2灌流：[Ca2+]o↑Ca2+內(nèi)流↑[Ca2+]i↑興奮-收縮耦聯(lián)↑收縮力↑第22頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果分析與討論3.1%KCl灌流：[K+]o↑AP平臺期縮短Ca2+內(nèi)流↓興奮-收縮耦聯(lián)↓收縮力↓第23頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果分析與討論4.1:10000E灌流4期If、ICaT通道↑4期自動去極速度↑自律性↑心率↑與心肌β1受體結(jié)合Ca2+內(nèi)流↑肌漿網(wǎng)釋放Ca2+↑興奮-收縮耦聯(lián)↑收縮力↑cAMP第24頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果分析與討論5.1:10000Ach灌流與心肌M受體結(jié)合K+外流↑,Ca2+內(nèi)流↓E-C耦聯(lián)↓收縮力↓最大復極電位↑4期K+外流↑

自律性↓心率↓[Ca2+]i↓第25頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月碳酸氫鈉乳酸結(jié)果分析與討論6.2.5％NaHCO3灌流中和H+，Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合，心肌收縮力恢復。7.3%乳酸