不同菌種類型栽培真姬菇試驗

不同菌種類型栽培真姬菇試驗

0真姬菇液體培養(yǎng)基生產(chǎn)技術(shù)的研究蘑菇hypsi季次細菌和松茸（peck）iigus，日本稱為真菌屬，屬于擔子菌亞門、層菌、傘菌、白蘑菇科和玉蘑菇科。真姬菇傳統(tǒng)的固體菌種栽培模式生產(chǎn)周期很長(約120～150d),生產(chǎn)成本高,勞動強度大,菌種易老化,商業(yè)品質(zhì)易受溫度等外界環(huán)境條件影響,使真姬菇的出菇品質(zhì)參差不齊,質(zhì)量、產(chǎn)量不容易控制,效益低,影響其工廠化生產(chǎn)。隨著國內(nèi)食用菌產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展,傳統(tǒng)的食用菌制種方式已遠遠不能適應(yīng)食用菌產(chǎn)業(yè)日益發(fā)展的需要。采用深層培養(yǎng)工藝制備食用菌液體菌種用于生產(chǎn)已成為研發(fā)熱點,國內(nèi)外紛紛開展了這一技術(shù)的研究和應(yīng)用探討。涌現(xiàn)出了許多液體發(fā)酵設(shè)備生產(chǎn)廠家及諸多在香菇、黑木耳、金針菇、平菇生產(chǎn)中采用液體菌種的報道,然而,對于真姬菇液體菌種工藝及應(yīng)用方面的報道卻很少。液體深層發(fā)酵技術(shù)能在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的菌絲體(菌種)并積累某些生理活性物質(zhì)。液體菌種接入固體培養(yǎng)料時,具有流動快、易分散、萌發(fā)快、發(fā)菌點多等特點,較好地解決了袋栽食用菌在接種過程中的易污染問題。同時減少了接種的勞動強度,生產(chǎn)周期短,菌齡整齊。本研究針對傳統(tǒng)的固體菌種栽培真姬菇存在的農(nóng)藝性狀參差不齊、周期長、效率低的問題,進行了真姬菇液體菌種和固體菌種應(yīng)用的對比實驗,分析其相關(guān)效益,以期為真姬菇的高效栽培提供實驗依據(jù)。1材料和方法1.1培養(yǎng)基配方的確定真姬菇(Hypsizigusmarmoreus)真9603菌株的二級搖瓶菌種,本實驗室保存。真姬菇真9603菌株深層發(fā)酵最適的培養(yǎng)基配方為:馬鈴薯20%、葡萄糖3%、酵母粉0.2%、KH2PO40.1%、MgSO4·7H2O0.1%。培養(yǎng)溫度20℃,發(fā)酵終點確定為培養(yǎng)后第7d。固體原種及栽培種培養(yǎng)基配方:棉籽殼35%;木屑35%;麩皮25%;玉米粉5%;含水量55%。1.2方法(1)液體培養(yǎng)基培養(yǎng)真姬菇液體菌種接種,采用無菌接種槍每次吸取10、15、20mL生長良好的液體菌種,按照中間穿刺接種的方式接種于制好的固體栽培袋中,每個處理重復5次,然后置于25℃恒溫箱中培養(yǎng),每天定時用直尺測定菌絲的增長長度。(2)真菌病與固體病的比較試驗品種的栽培液體菌種的制作方法按二級液體搖瓶培養(yǎng)基配方接種制作;固體菌種原種、栽培種的制作,按常規(guī)方法進行制作,作為液體菌種栽培的對照。菌種接入量的確定栽培袋的規(guī)格為33cm×17cm×0.045cm,每袋裝干料350g,常壓滅菌溫度達100℃后保持12～14h,冷卻后于接種箱內(nèi)無菌操作接種,每袋裝入的培養(yǎng)料量和菌種接入量一致。液體培養(yǎng)基發(fā)酵劑制備液體菌種的接種用無菌接種槍吸取液體真姬菇液體菌種直接注入料袋內(nèi),采用液體表面接種和液體中間穿刺接種兩種接種方式,液體表面接種將菌液分布在栽培袋內(nèi)培養(yǎng)基表面,液體中間穿刺接種在菌袋培養(yǎng)基正中央打孔到菌袋中間位置,用無菌接種槍吸取菌液直接注入料袋內(nèi)培養(yǎng)基中間部位,每袋接種15mL,在一般的培養(yǎng)房內(nèi)進行;以培養(yǎng)好的真姬菇液體菌種作為原種擴繁固體生產(chǎn)種,木屑固體菌種的接種是按照常規(guī)方法進行。每種處理接70個栽培袋,然后置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察并記錄全過程的發(fā)菌情況。觀察真姬菇液體種和固體種在菌絲生長速率、出菇情況、生物學效率、農(nóng)藝性狀差別、總的生產(chǎn)周期等方面的不同。不同坡蓋的細培養(yǎng)菌絲達到生理成熟期后,開袋上架,在袋口蓋上潮濕的細紗布,同時降溫至13℃～15℃,增加通風量,促使菇蕾形成。一般經(jīng)10～20d,料面上可以看見針頭狀的菇蕾。2結(jié)果與分析2.1接種量的確定由表1可見,當每個菌袋接種10mL液體菌種時,菌絲萌發(fā)時間較長,生長較慢,長勢也不太好,其菌絲滿袋時間分別比每袋接種l5mL和20mL液體菌種延長了9d和11d;而每袋接種15、20mL接種量時,真姬菇的菌絲生長旺盛,生長速度快,長勢良好,菌絲潔白,菌香濃郁,滿袋時間也短。15mL與20mL的接種量,菌絲生長速度差別并不明顯,兩者菌絲發(fā)滿袋時間僅僅相差2d,在實際的生產(chǎn)當中,考慮到增大接種量會增加生產(chǎn)成本,同時,隨著接種量的增加,菌袋含水量相對增大,會導致其污染的機率增加,這對后期出菇管理及產(chǎn)量都有一定的影響。所以15mL是最佳接種量。此結(jié)果表明:真姬菇液體菌種接到固體栽培袋中,接種量直接影響到菌絲的生長速度和生長質(zhì)量,隨著接種量的加大,液體菌種在栽培袋中表現(xiàn)出一定的群體生長優(yōu)勢,菌絲萌發(fā)快,同時直接增加菌絲體前端營養(yǎng)供應(yīng),因而提高抵抗雜菌的能力。由于液體菌種具有良好的分散性,可隨液體滲透到固體栽培袋中,所以發(fā)菌點多,從而大大節(jié)省了菌種的用量。2.2真菌病和液體病的栽培模式的比較試驗(1)不同液體菌種對真姬菇生長的影響由表2可見,液體菌種栽培模式下,采取穿刺接種方式接的真姬菇菌絲日均走速最快,達到了2.21mm,采取表面接種方式接的真姬菇菌絲日均走速為1.71mm,兩種液體菌種栽培模式均高于固體菌種栽培模式下的菌絲生長速度。從菌絲形態(tài)上看,采用液體菌種栽培的菌絲粗壯潔白有力,固體菌種栽培菌絲細長微黃;固體菌種栽培的滿袋時間比液體菌種穿刺接種方式栽培的晚36d。由此可見,真姬菇液體菌種表現(xiàn)出菌絲萌發(fā)快、生長旺盛,菌種培育時間短、活力強、分散性好等特點。(2)不同接種方式對真姬菇生長周期的影響由表3和圖1～3可見,液體菌種栽培模式下,采取穿刺接種方式真姬菇催蕾所需的時間最短,只需要14d,且菇蕾的分布均勻,從催蕾到子實體成熟需要27d;兩種液體菌種接種方式真姬菇催蕾時間和子實體成熟時間差異不大,表面接種方式形成菇蕾僅比穿刺接種的晚1d。兩種接種方式下的液體菌種栽培模式形成菇蕾和子實體成熟的時間均比固體菌種栽培模式下所需的時間短。此外,固體菌種栽培模式下真姬菇菇蕾的分布不太均勻。從整個生產(chǎn)周期來看,采用液體菌種栽培的真姬菇生產(chǎn)周期明顯短于固體栽培模式,其中:采用穿刺接種真姬菇生產(chǎn)周期最短,只需要78d,采用表面接種真姬菇則次之,分別比固體栽培模式下的真姬菇生產(chǎn)周期縮短了38d和23d。進一步說明了真姬菇液體菌種具有菌絲萌發(fā)快、生長旺盛,菌種培育時間短、活力強、分散性好,菌齡一致的特點。(3)不同菌種栽培對栽培效率及產(chǎn)量的影響由表4可見,真姬菇液體菌種以穿刺接種方式和表面接種方式進行栽培的生物學效率分別為64.8%和63.4%,而以固體菌種方式進行栽培的生物學效率僅為51.0%;液體菌種栽培總產(chǎn)量明顯高于固體菌種栽培,且液體菌種以穿刺接種方式進行栽培的真姬菇產(chǎn)量最高,平均袋產(chǎn)量達到324g。表明在栽培環(huán)境和培養(yǎng)材料相同的條件下,液體菌種栽培真姬菇不僅具有可行性而且出菇產(chǎn)量明顯高于常規(guī)的固體菌種栽培。2.3不同栽培模式真姬菇經(jīng)濟性狀差異由表5可見,在兩種栽培模式下,3種不同接種方式真姬菇菇蓋直徑、厚度、菇柄長度、菇柄直徑的差異不明顯,說明同一個真姬菇菌株在相同栽培環(huán)境和栽培材料的條件下,菌株本身的性質(zhì)并沒有發(fā)生根本變化,所以菌種的形態(tài)不同對真姬菇經(jīng)濟性狀的影響不大。在液體栽培模式下的真姬菇菌柄長度比在固體栽培模式下顯得長一些,而且液體菌種栽培的真姬菇菌蓋開傘時間比較慢,這也有利于減緩菌株的老化過程,對實際生產(chǎn)來說是有利的。此外液體菌種栽培的真姬菇出菇的性狀比較一致,菌齡整齊;而固體栽培模式下的真姬菇出蕾不均勻,菌齡差異較大,有一部分菇的菌蓋開傘太快,出菇品質(zhì)參差不齊。說明了真姬菇液體菌種在工廠化栽培過程當中表現(xiàn)出一定的優(yōu)越性。以上結(jié)果表明:液體菌種栽培真姬菇簡化了接種的復雜性,減少了雜菌感染,縮短了生產(chǎn)周期,降低了生產(chǎn)成本,提高了生物學效率,從而有效地提高了經(jīng)濟效應(yīng)和社會效益,與很多相關(guān)報道的液體菌種的優(yōu)勢一致。3不同液體菌種對真姬菇生長的影響液體菌種接種量的多少直接影響生產(chǎn)成本和菌絲培養(yǎng)時間,同時對后期出菇也會產(chǎn)生影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):每袋按15mL的接種量,菌絲生長旺盛,生長速度快,長勢良好,菌絲潔白,菌香濃郁。另外,在對液體菌種栽培和固體菌種栽培菌絲生長速度進行比較時,以中間穿刺方式接種的液體菌種栽培模式下真姬菇菌絲日均走速為2.21mm,明顯地高于固體菌種栽培。通過對接種量研究,說明液體菌種具有菌絲萌發(fā)快、生長旺盛培育時間短、活力強、分散性好,菌齡一致等優(yōu)點。在栽培環(huán)境和培養(yǎng)材料相同的條件下,菌絲吃料速度明顯高于常規(guī)固體菌種栽培,液體菌種穿刺接種的生物學效率可以達到64.8%,液體菌種表面接種的生物學效率可以達到63.4%,固體菌種菌絲的生物學效率僅為51.0%。真姬菇在液體菌種栽培模式下出菇比固體栽培模式下更整齊,而其他的性狀