沙門氏菌檢測試劑盒說明書

沙門氏菌檢測試劑盒說明書概述REAGEN沙門氏菌酶聯(lián)免疫檢測試劑盒是用來檢測食品和飼料中沙門氏菌的含量。沙門氏菌是腸桿菌家族的一種革蘭氏陰性菌，作為一種食品傳播疾病的傳染源，在家禽、肉、雞蛋中可發(fā)現(xiàn)沙門氏菌。通常沙門氏菌可導(dǎo)致沙門氏菌病，檢測食品中沙門氏菌既費(fèi)力又費(fèi)時。REAGENM沙門氏菌酶聯(lián)免疫檢測試劑盒為國家管理部門、食品生產(chǎn)商、質(zhì)檢部門提供了方便有效的方法，檢測水平為105細(xì)胞/ml。試劑盒原理該試劑盒基于酶聯(lián)免疫檢測原理，沙門氏菌的單克隆抗體包被在微孔內(nèi)。分析過程中，如果樣品中有沙門氏菌存在，當(dāng)加入樣品時，即可與單抗結(jié)合，在孔中加入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液可以快速增菌。酶標(biāo)記的二抗與板孔中包被的一抗結(jié)合，加入底物后顏色的深淺與樣品中沙門氏菌的含量相關(guān)。試劑盒組成抗體包被的酶標(biāo)板(Salmonellaantibody-coatedPlate)(可拆式)12X8孔1X陰性對照(1XSalmonellaNegativeControl) 1X1ml1X陽性對照(1XSalmonellaPositiveControl) 1X1ml50XHRP-二抗(HRP-ConjugatedAntibody#2) 3X50ml二抗稀釋液(Antibody#2Diluent) 1X20ml20X濃縮洗液(Washsolution) 1X28mL終止液(StopBuffer) 1X20mLTMB底物(TMBSubstrate) 1X12mL本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8°C的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒，請將陰性對照、陽性對照、二抗保存于-20°C。4.檢測限：105細(xì)胞/ml交叉反應(yīng)：本試劑盒可檢測沙門氏菌A、B、C、D、E血清型。其他需要而本試劑盒未提的設(shè)備或材料u酶標(biāo)儀（450nm）u恒溫培養(yǎng)箱u漩渦振蕩器u移液器（10、20和100mL,1mL各一支）u多道移液槍：50-300ul（可選擇）mGN培養(yǎng)基：包含10ug/ml新生霉素的GN培養(yǎng)基，可從市場上購買或按以下配方自制：革蘭氏陰性培養(yǎng)基（GN培養(yǎng)基或HajnaGN培養(yǎng)基，pH7.0±0.2）TOC\o"1-5"\h\z胰蛋白(Tryptose) 20.0g葡萄糖(Dextrose) 1.0gD-甘露醇(D-Mannitol) 2.0g檸檬酸鈉(Sodiumcitrate) 5.0g脫氧膽酸鈉(Sodiumdesoxycholate) 0.5g磷酸氫二鉀(Dipotassiumphosphate) 4.0g磷酸二氫鉀(Monopotassiumphosphate) 1.5gNaCl(Sodiumchloride) 5.0g去離子水(Distilledwater) 1.0L將上述成分溶解在水中，121°C高溫滅菌15min，避免過度加熱。u高壓滅菌鍋u500ml培養(yǎng)瓶u增菌培養(yǎng)基u檢測培養(yǎng)基u去離子水注意事項實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得最佳實驗效果。u樣品中含有沙門氏菌，請小心使用。u進(jìn)行樣品準(zhǔn)備過程中，操作人員必須有好的微生物操作技能。u不要使用過期的試劑盒。u不同批次的試劑盒不要混用，確保二抗正確稀釋。u盡量保持室溫20-25r，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。U加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。U孵育時間的計算越規(guī)范越好