細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)五-細(xì)胞膜的通透性實(shí)驗(yàn) 山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)五——細(xì)胞膜的通透性實(shí)驗(yàn)13生物基地201300140059劉洋2015-04-29同組者：呂贊實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。2.了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障，是一種半透膜，可選擇性地控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。將紅細(xì)胞放在低滲溶液中，水分子大量滲透到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，溶液由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱為溶血。由于溶質(zhì)滲透入細(xì)胞的速度不同，溶血時(shí)間也不同，因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需的時(shí)間長短可作為測量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜滲透性的實(shí)驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀察紅細(xì)胞的變化。溶血（Hemolysis）紅細(xì)胞破裂，血紅蛋白逸出稱紅細(xì)胞溶解，簡稱溶血?？捎啥喾N理化因素和毒素引起。在體外，如低滲溶液、機(jī)械性強(qiáng)力振蕩、突然低溫冷凍（-20℃～—25℃）或突然化凍、過酸或過堿，以及酒精、乙醚、皂堿、膽堿鹽等均可引起溶血。哺乳動(dòng)物血漿的等滲溶液為0.9%NaCl溶液，紅細(xì)胞在低于0.45%NaCl溶液中，因水滲入，紅細(xì)胞膨脹而破裂，血紅蛋白逸出。在體內(nèi)，溶血可為溶血性細(xì)菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗體反應(yīng)（如輸入配血不合的血液）、各種機(jī)械性損傷、紅細(xì)胞內(nèi)在（膜、酶）缺陷、某些藥物等引起。溶血性細(xì)菌，如某些溶血性鏈球菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌可導(dǎo)致敗血癥。瘧原蟲破壞紅細(xì)胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血漿或紅細(xì)胞的卵磷脂轉(zhuǎn)變?yōu)槿苎蚜字?，使紅細(xì)胞膜分解。實(shí)驗(yàn)用品1.材料雞血紅細(xì)胞2.試劑0.85%NaCl溶液、0.085%NaCl溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6%葡萄糖溶液、2%TritonX-1003.器材試管、試管架、滴管、顯微鏡、離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)步驟1.取雞血6ml，加0.85%NaCl溶液4ml，在1000r/min條件下離心5分鐘；（RBC壓積量不少于0.6mol）2.將上述離心后的紅細(xì)胞按沉淀量配成50%濃度；（總體積應(yīng)不少于1.2ml）3.每組取6支試管，分別加入如下溶液各3ml：（1）0.85%NaCl溶液（2）0.085%NaCl溶液（3）0.8mol/L（0.3mol/L等滲）甲醇溶液（4）0.8mol/L（0.3mol/L等滲）丙三醇溶液（5）6%（5%等滲）葡萄糖溶液（6）2%（1.5%等滲）TritonX-1004.向上述6支試管中分別加入50%紅細(xì)胞懸液1滴，輕搖混勻，觀察試管中是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生（觀察時(shí)間1小時(shí)），記錄溶血時(shí)間，并于顯微鏡下觀察各溶液的細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果0.85%NaCl溶液0.085%NaCl溶液0.8mol/L甲醇溶液2%TritonX-1000.8mol/L丙三醇溶液6%葡萄糖溶液0min10min20min30min40min50min60min編號(hào)溶液類型是否溶血溶血所需要的時(shí)間結(jié)果分析10.85%氯化鈉溶液不溶血/作比色用，顏色暗紅，渾濁，不透明20.0085%氯化鈉完全溶血3s溶液透明，顏色鮮紅，由于濃度較大，細(xì)胞完全溶血30.8mol/L甲醇完全溶血4s前期細(xì)胞部分溶血，然后細(xì)胞完全溶血40.8mol/L丙三醇部分溶血10min濃度較小細(xì)胞部分溶血56%葡萄糖溶液部分溶血/濃度較小細(xì)胞部分溶血66%TritonX-100完全溶血2s表面活性劑，結(jié)果不明顯，溶液渾濁，但顏色鮮紅結(jié)果討論1.由于細(xì)胞在等滲溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后也會(huì)發(fā)生溶血，因此本次的實(shí)驗(yàn)的時(shí)間為一小時(shí)，所以在1小