動物糞便檢查-糞便寄生蟲檢查

病毒、細(xì)菌及螺旋體檢查引起肝臟破裂，應(yīng)激治病性病毒，戊型肝炎病毒在糞便中的檢出率最高；沒有腹瀉癥狀的動物，糞便病毒量高；引起腹瀉的病毒性疾病，如豬流行性腹瀉，輪狀病毒感染，豬德爾塔冠狀病毒；引起腹瀉的大腸桿菌、梭菌性腸炎、沙門氏菌、胞內(nèi)勞森菌；螺旋體，腹瀉糞便樣品（直腸）。寄生蟲寄生部位體內(nèi)寄生蟲主要寄生在：口腔、食道、胃、小腸、大腸，還有其他的內(nèi)部器官。通過糞便排出，收集糞便，顯微鏡檢查。診斷是在糞便中發(fā)現(xiàn)寄生蟲生活周期的不同階段：卵，卵囊，幼蟲，節(jié)片（絳蟲），成蟲。獸醫(yī)人員根據(jù)這些診斷是否存在寄生蟲感染。常見寄生蟲檢查仔豬等孢子球蟲、隱孢子蟲、結(jié)腸小袋纖毛蟲、蛔蟲、食道口線蟲、肺線蟲、絳蟲、毛尾線蟲（鞭蟲）、棘頭蟲。利用漂浮法檢查。吸蟲類：姜片吸蟲、華支睪吸蟲、片形吸蟲、分體吸蟲、后睪吸蟲、橫川后殖吸蟲、胰闊盤吸蟲。（蟲卵較重，漂浮不起來）糞便沉淀原理糞便沉淀法濃縮寄生蟲卵，卵囊和其他的寄生蟲材料，讓這些材料沉淀到離心管的底部，通常用水。這個(gè)方法主要用于，不能在溶液中漂浮起來蟲卵，或者是蟲卵在漂浮液中容易變形。吸蟲蟲卵比較重，在漂浮方法中漂不起來。也有大于1.300比重的溶液，可以用來漂浮蟲卵，不過，由于鹽溶液濃度太高容易導(dǎo)致蟲卵形態(tài)改變。沉淀法檢查的不足缺點(diǎn)：大量的糞便碎片同寄生蟲材料混合在一起，增加顯微鏡檢查的難度。沉淀法沒有漂浮法靈敏，檢出率沒有漂浮法高。糞便沉淀檢查項(xiàng)目沉淀法一般用來分離不能用漂浮法漂浮起來的吸蟲卵。大多數(shù)寄生蟲蟲卵的比重在1.100～1.200g/mL，然而水的比重是1.000g/mL.所以沉淀法可以檢查所有的寄生蟲卵。棘頭蟲卵、線蟲蟲卵、絳蟲蟲卵、蛔蟲、球蟲等，在漂浮法中可以漂浮起來的蟲卵也可以用這種方法檢查。方法優(yōu)缺點(diǎn)簡單的沉淀法測試，是自來水和糞便混和，然后靜置一段時(shí)間后去除上清。反復(fù)幾次，清除部分不太容易沉淀下來的雜志。允許清除部分顆粒物質(zhì)，不像漂浮法，沉淀法對蟲卵濃縮能力有限。如果使用乙酸乙酯進(jìn)行離心沉淀，就可以去除糞便中的脂肪和粘液。不過乙酸乙酯有毒，同時(shí)容易燃燒，應(yīng)該貯存在防火柜中，使用時(shí)應(yīng)在通風(fēng)廚內(nèi)進(jìn)行。也可以使用Hemo-De進(jìn)行替代，這一試劑通常是安全的，在離心中可以完全替代乙酸乙酯，與之同樣有效。Flukefinder?是商業(yè)化的檢查試劑盒，可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行沉淀檢查。簡單的糞便沉淀測試（SIMPLESEDIMENTATIONTEST）

1、混和100mL的水與大約10g的糞便，加入一小滴洗潔精（或肥皂水）攪拌混勻，并用濾器（3-4層紗布）過濾。2、過濾液倒入透明離心管中，放桌面上靜置。30min-1h，看到有明顯上清，然后棄上清液于廢液缸中（回收處理）。加入更多自來水混勻，重復(fù)沉淀程序。3、重復(fù)兩次后，棄上清。攪拌剩下的混合液，放一滴到顯微鏡的載玻片上，顯微鏡檢查。4、如果有需要，加一滴0.1%的甲基藍(lán)溶液，甲基藍(lán)會把背景染成藍(lán)色，吸蟲蟲卵不會著色，呈現(xiàn)黃褐色，便于觀察。蓋上蓋玻片，利用10×物鏡進(jìn)行掃描。如果使用少量的糞便和水混和，可以放在測試管內(nèi)進(jìn)行，然后每次靜置3-5分鐘，倒掉上清?？梢灶~外的添加一滴洗碗的肥皂到測試水里幫助蟲卵從周圍的碎片中分離出來。離心沉淀檢查法（CENTRIFUGALSEDIMENTATIONTEST）

混和1g的糞便與10mL10%的福爾馬林溶液或者水，倒混合液于15mL的離心管中，到一半或者3/4的容積。添加乙酸乙酯或者Hemo-De，直到滿管。有機(jī)溶劑可能會溶解塑料，推薦使用玻璃離心管和聚丙烯離心管。蓋上蓋子搖晃大約50次，500×g離心（同漂浮離心法的轉(zhuǎn)速，2500）3–5分鐘。從離心機(jī)中取出試管，分為三層，（1）上層包括乙酸乙酯、脂肪和碎片；（2）中層為福爾馬林或者水，還有顆粒物質(zhì)；（3）最底層是沉淀。傾倒上層，僅留下管底的沉淀。用一點(diǎn)水重懸沉淀，然后放1滴或者2滴沉淀到載波片上，蓋上蓋玻片，利用10×物鏡進(jìn)行檢查實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1、掌握糞便沉淀法檢查的應(yīng)用范圍；2、掌握沉淀法的操作流程；3、掌握沉淀法中試劑的處理及試劑的危害。設(shè)備及耗材

糞便、燒杯、一次性杯子、水（乙酸乙酯）、金屬過濾器、離心管、蓋玻片、載玻片、離心機(jī)、廢液或者試劑回收缸、小竹板、膠頭滴管。操作1、收集30日齡豬/雞糞便、羊糞。2、取大約10g左右的糞便于一次性的塑料杯中，加入大約100ml的水，添加1滴洗潔精，到測試糞水混合液，幫助蟲卵從周圍的碎片中分離出來。4、用小竹板將水和糞便充分?jǐn)噭?，然后將混合液倒入濾茶器內(nèi)進(jìn)行過濾。6、混勻后靜置10-60min然后倒上清液于廢液缸中（后進(jìn)行醫(yī)廢處理）。7、向沉淀中加入更多的水，攪拌混勻，重復(fù)沉淀程序。8、準(zhǔn)備一干凈的載玻片，在載玻片的磨砂端寫上樣品信息。9、攪拌剩下的混合液，放一滴到顯微鏡的載玻片上。如果有需要加一滴0.1%的甲基藍(lán)溶液，甲基藍(lán)會把背景染成藍(lán)色，吸蟲蟲卵不會著色，呈現(xiàn)黃褐色。10、蓋上蓋玻片，利用10×物鏡進(jìn)行掃描。雞糞便中的球蟲蟲卵吸蟲并殖吸蟲蟲卵重翼吸蟲蟲卵羊毛圓線蟲蟲卵刺球絳蟲：有蓋絳蟲蛔蟲犬蛔蟲獅弓蛔線蟲，橢圓形外形，光滑的雞蛋一樣的外殼，透明的玻璃一樣的卵心。貓球蟲糞便直接壓片法貓球蟲溝口線蟲溝口線蟲：光滑的橢圓形雞蛋樣的外殼的八細(xì)胞桑葚胚。沉淀法可能能夠檢測到該蟲卵.鞭蟲鞭蟲及蟲卵Trichurisvulpisandtheeggs鞭蟲：主要寄生大腸和盲腸，主要是吸血。主要臨床癥狀，蟲體量大時(shí)，引起腹瀉，體重減輕，體弱。治療用苯硫噠唑。寄生蟲有哪些分類？動物體內(nèi)寄生蟲主要有哪些？人畜共患的寄生蟲有哪些?腸道糞便中能夠檢測到哪些寄生蟲？糞便中能夠檢測到哪些寄生蟲卵？注意操作中注意事項(xiàng)；時(shí)刻警惕人畜共患病，做個(gè)自身防護(hù)糞便檢查糞便直接涂片（Examinationofdirectsmear)糞便濃縮法檢查（Concentrationmethodsforfecalexamination)特殊染色法進(jìn)行球蟲檢查（Specialstainingforcoccidianparasites)糞便直接涂片

（Examinationofdirectsmear)

糞便直接涂片鏡檢能夠快速的檢測到有沒有寄生蟲，也能用來檢查糞便中是否有運(yùn)動的原蟲。優(yōu)勢：準(zhǔn)備時(shí)間短，需要的設(shè)備少；缺點(diǎn)：由于用到的糞便量比較少，因此檢出率低；大量糞便中的外來碎片影響檢查結(jié)果。糞便直接涂片法需要樣品比較少，可以直接用棉簽采樣，或者進(jìn)行直腸檢查時(shí)帶出的糞便就可以做糞便涂片檢查，直腸測量體溫的時(shí)候也可以利用帶出來的糞便做直接涂片檢查。引自書籍利用直腸灌洗法收集到的樣品，可以利用直接檢查法進(jìn)行檢查；分為濕檢查法和干檢查法；濕檢查法，可以直接滴一滴，然后蓋上蓋玻片進(jìn)行檢查，如果活的的寄生蟲，可以觀察到寄生蟲的運(yùn)動；干檢查法，可以直接推片，干燥后，可以進(jìn)行染色，顯微鏡檢查，可以觀察滴蟲的形態(tài)。胎三毛賈第蟲糞便濃縮法檢查

（Concentrationmethodsforfecalexamination)

采用濃縮技術(shù)，用到的糞便量比較大，即使糞便中寄生蟲比較少，濃縮后也容易檢測到。1、漂浮發(fā)（Flotation）2、沉淀法（Sedimentation）無論是什么樣的漂浮檢查程序，原則都是一樣的?；旌掀∪芤汉图S便后，小密度的物質(zhì)漂浮到上面?？梢杂袃煞N方法，一種是讓混合物在面桌面上靜置一段時(shí)間；另一種是通過離心進(jìn)行漂浮，這樣更加快速和有效。也可以使用快速的商業(yè)化漂浮試劑盒法進(jìn)行樣品的收集和執(zhí)行測試。試劑盒檢查可能沒有那么敏感，需要的糞便量比較少，還不能進(jìn)行離心。離心漂浮法在診斷少量寄生蟲感染比較敏感，也比較重要，例如，犬貓鞭毛蟲感染和賈第蟲感染。在使用33%硫酸鋅進(jìn)行漂浮，或者糖溶液進(jìn)行漂浮的時(shí)候，需要利用離心漂浮，因?yàn)樘堑酿ざ缺容^高，阻礙漂浮程序，蟲卵比硫酸鋅的比重稍微低一點(diǎn)，不容漂浮起來。獸醫(yī)練習(xí)人員，一般不適用離心漂浮程序，主要依賴傳統(tǒng)的桌面靜止程序，降低了檢查的靈敏度。一、漂浮法（Flotation）漂浮法收集蟲卵及卵囊原理：糞便漂浮法收集蟲卵及卵囊原理是，寄生蟲和食物碎片相對于等體積的水有特殊的比重，大多數(shù)寄生蟲蟲卵的比重在1.100～1.200g/mL，然而水的比重是1.000g/mL.如果使用漂浮法收集蟲卵，使用鹽溶液和糖溶液的比重大概在1.200～1.250g/mL（寄生蟲蟲卵或者卵囊比重在1.100～1.200g/mL）,在這個(gè)范圍內(nèi)比較重的糞便碎片沉到容器底部，然而寄生蟲卵就漂浮到溶液的表面。飽和食鹽水漂浮法：飽和食鹽水是比較好的漂浮溶液。優(yōu)勢，便宜，方便，可行性比較強(qiáng)。缺點(diǎn)，飽和食鹽水在實(shí)驗(yàn)室能夠形成結(jié)晶，一部分蟲卵的性狀能夠被改變。飽和鹽水溶液（最大比重是1.200g/mL）也不是很好的漂浮溶液，有些蟲卵可能浸沒在漂浮溶液中，浮不起來。操作方法：把3-5g（一茶勺）糞便放入紙杯或者塑料杯中。貓的糞便和小反芻動物的糞便比較硬，很難破碎，可以粉碎或者用水侵泡進(jìn)行軟化，如果糞便中含有大量的脂肪或者粘液，可以用水進(jìn)行清洗。清洗后可以改變糞便的正常外觀。1、離心漂浮法盡量攪拌混勻糞便和漂浮液，通過雙層紗布過濾，濾茶器進(jìn)行過濾。傾倒混合液到15mL的離心管中，倒入離心管中液面形成一個(gè)弧度，蓋上蓋玻片，然后放入離心機(jī)上進(jìn)行離心。離心轉(zhuǎn)速一般為：500g~650g(2500轉(zhuǎn)），進(jìn)行血清分離的轉(zhuǎn)速就可以了。離心機(jī)停下的過程中不可以使用剎車。剎車引起的震動可能讓寄生蟲離開表層。取下蓋玻片，放到載玻片上進(jìn)行顯微鏡檢查。2、桌面靜置漂浮法1、當(dāng)不能進(jìn)行離心漂浮法的時(shí)候，硝酸鈉和飽食鹽水，可以用作桌面靜止漂浮測試，這種方法可能靈敏度會降低。2、這種技術(shù)不推薦使用飽和硫酸鋅和糖漂浮測試。3、把3-5g（一茶勺）糞便與漂浮液混合放入紙杯或者塑料杯中。攪拌混液，利用濾茶器進(jìn)行過濾。將過濾混和液倒入漂浮管中，直到形成弧度，放上蓋玻片。然后靜止10min,取下蓋玻片，放到載玻片上進(jìn)行顯微鏡檢查。可以漂浮的時(shí)間更長一些，10-40min.育肥豬，消化功能紊亂，消瘦，結(jié)膜蒼白，生長緩慢，病程持續(xù)時(shí)間較長。105、若該病由吸蟲引起，適宜的糞便檢查方法是（）2017A、直接涂片法B、蟲卵漂浮法C、蟲卵沉淀法D、幼蟲分離法E、幼蟲培養(yǎng)法育肥豬，消化功能紊亂，消瘦，結(jié)膜蒼白，生長緩慢，病程持續(xù)時(shí)間較長。106、若該病由球蟲引起，適宜的糞便檢查方法是（）2017A、肉眼觀察B、卵囊漂浮法C、幼蟲培養(yǎng)法D、幼蟲分離法E、毛蚴孵化法對拉稀癥狀的糞便檢查最主要檢查：細(xì)菌、病毒、寄生蟲、螺旋體（痢疾螺旋體同通過糞便可以檢查以上病原引起的拉稀。糞便濃縮法主要檢查是否是寄生蟲引起的腹瀉。除吸蟲蟲卵，其他的大部分寄生蟲卵都可以檢查。滴蟲需要直接檢查寄生蟲。豬場寄生蟲病的特點(diǎn)（引自會議報(bào)告）規(guī)模化豬場常見寄生有豬蛔蟲的危害（引自會議報(bào)告）豬蛔蟲（引自會議報(bào)告）鞭蟲的危害引自會議報(bào)告豬鞭蟲（毛首線蟲）（引自會議報(bào)告）豬結(jié)腸小袋纖毛蟲（引自會議報(bào)告）豬等孢球蟲（引自會議報(bào)告）食道口線蟲對豬的危害（引自會議報(bào)告）食道口線蟲（引自會議報(bào)告）毛圓線蟲種類（Trichostrongylespecies）：仰口線蟲（Bunostomum）,夏柏特線蟲（Chabertia）,古柏線蟲（Cooperia）,血矛線蟲（Haemonchus）,結(jié)節(jié)線蟲（Oesophagostomum，食道口線蟲）,胃線蟲（Ostertagia）,毛圓線蟲（Trichostrongylus）(圖4.37)1、以上都是毛圓線蟲2、宿主：牛、綿羊、山羊3、成蟲，主要寄生在皺胃（真胃，第四胃）小腸、大腸。4、食入卵傳播5、全世界范圍內(nèi)都有圖引自書籍圖引自書籍貝氏莫尼茨絳蟲

Monieziabenedini（圖4.38）

1、反芻動物絳蟲2