實驗動物醫(yī)學(xué)課件

實驗動物醫(yī)學(xué)導(dǎo)言

一、引言實驗動物醫(yī)學(xué)（LaboratoryAnimalMedicine）J.G.?？怂笲.J.科恩F.M.洛疾病診斷、治療和預(yù)防減輕科研用動物疼痛鑒定影響動物研究的因素二、動物實驗的起源與發(fā)展Aristotle(BC384-BC322)Harvey（1578-1657）Pastuer（1827-1895）300BC:“vivisection”1500-1700:physiologystudiesusingliveanimals1879:D.E.Salmon,firstvet(Salmonella)1915:S.D.Brimhall,V.M.D.employedatMayoClinic1949:AALASformed1957:ACLAMformed三、實驗動物醫(yī)學(xué)的教育與培訓(xùn)ContinuingEducationSeminars/conferences:local/nationalComparativemedicinebulletinboardJournalsAdvisoryBoards/PanelsSpecialProjectsClinicalormanagerialresearchOccupationalhealthEnvironmentalenrichmentTrainingOnthejobTrainingprogramsApprox35ACLAMapproved2-4yearsDegree/non-degreePHSorotherfundingClinical,ResearchtrainingBoardEligibility+/-Trainingprogram,publication,application四、相關(guān)法律法規(guī)對實驗動物醫(yī)學(xué)的影響1966年，美國（LaboratoryAnimalWelfareAct.）Mice:TransgenicsRatsRabbitsHamsters,guineapigs,otherrodentsDogs,cats,ferretsPigs,sheep,cattle(calves)Fish(zebrafish)Amphibians(Xenopus)Non-humanprimates第一章影響動物實驗的因素

內(nèi)源性因素外源性因素第一節(jié)內(nèi)源性因素種屬：反應(yīng)性質(zhì)的不同品系：反應(yīng)強度的不同年齡和體重：性別:♀，♂生理狀態(tài)：懷孕、哺乳、體溫健康狀況第二節(jié)外源性因素管理因素動物實驗技術(shù)因素動物選擇（種屬及數(shù)量）：重要條件實驗季節(jié)晝夜變化（體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝率、內(nèi)分泌麻醉深度：（深、淺）手術(shù)技巧減少刺激減少受傷減少出血***解決辦法（如何避免）？實驗藥物（途徑、制劑、濃度、給藥量）

其他因素人員素質(zhì)：職業(yè)道德和技能質(zhì)量監(jiān)督實驗設(shè)計實驗記錄環(huán)境控制實驗儀器R=(A+B+C)×D±E

式中：

R實驗動物的總反應(yīng)

A實驗動物種的共同反應(yīng)

B動物品種及品系特有反應(yīng)

C動物個體反應(yīng)（個體差異）

★D環(huán)境的影響（包括實驗處理）

E實驗誤差遺傳因素第二章小鼠常見疾病

第一節(jié)小鼠肝炎病毒感染（MouseHepatitisVirusInfections，MHV）（一）病原

冠狀病毒，有囊膜、RNA病毒。

25種毒株（腸道；呼吸道）

對乙醚敏感，對熱的敏感性不同。

低毒力/熱穩(wěn)定毒株是感染實驗鼠群最嚴重的毒株。

可感染多種組織或細胞。（二）流行病學(xué)1.傳染源2.傳播途徑

糞-口，直接接觸，氣溶膠，垂直傳播；移植瘤或細胞培養(yǎng)物3.易感動物

小鼠。棉鼠、大鼠、倉鼠（腦內(nèi)）。乳鼠易感MHV。KM42%

裸鼠34.7%BALB/c31.4%C57BL/620%NIH14.3%SSB11.6%C57BL，DBA，Nu/Nu感染易產(chǎn)生臨床癥狀。（三）臨床表現(xiàn)肝炎、腦炎、腸炎（四）病理變化肝臟表面常見有淡黃色或白色灶性壞死；感染早期有包涵體和壞死灶。腦部：脫髓鞘腦炎。腸道:常見腸絨毛壞死及多核巨細胞。腸上皮細胞合胞體肝臟壞死肝細胞合胞體（五）診斷

組織學(xué)PCR診斷血清學(xué)（六）防控MHV難以清除。如何防控？引種前檢查。加強飼養(yǎng)管理和環(huán)境消毒。剖腹產(chǎn)結(jié)合屏障系統(tǒng)。嚴格監(jiān)測可能隱匿病毒的生物材料。（七）對實驗研究的干擾免疫健全鼠激活T細胞和巨噬細胞，引發(fā)腦炎PersistantMHV（mousehepatitisvirus）infectionreducestheincidenceofdiabetesmellitusinthenon-obesediabeticmice，SWilberzetal.,1991.減少非糖尿病小鼠產(chǎn)生I型糖尿病的幾率

胸腺萎縮CATHERINEetal.,ThymusInvolutionInducedbyMouseHepatitisVirusA59inBALB/cMice，J.Virol,1995肝細胞吞飲功能丟失/下降。肝臟酶活性改變。誘生肝臟促凝血物質(zhì)及甲胎蛋白。其他病原的易感性、抵抗力及致病性改變。免疫不健全鼠多器官壞死（肝、肺、脾、腸、腦、淋巴結(jié)和骨髓）；血清酶活、膽紅素濃度改變；巨噬細胞的吞噬活性提高；加劇異種腫瘤移植排斥；肝腸、淋巴、神經(jīng)和呼吸系統(tǒng)受影響。第二節(jié)仙臺病毒感染

（sendaivirusinfection）一、概況小鼠仙臺病毒感染是小鼠最難控制的疾病之一。臨床表現(xiàn)兩種病型急性型：斷乳小鼠，產(chǎn)生呼吸道癥狀隱性感染：干擾實驗仙臺病毒感染十分普遍二、病原仙臺病毒---副粘病毒科，單股負鏈RNA病毒，有囊膜;6種結(jié)構(gòu)蛋白---NP，P，L，F(xiàn)，HN，M；血凝性---可凝集多種動物紅細胞；繁殖---在雞胚和多種哺乳類動物細胞系中繁殖較快，感染細胞出現(xiàn)合胞體。理化特性---對乙醚及熱敏感，pH3.0條件下極易滅活；血清型---只有1個血清型核衣殼囊膜三、流行病學(xué)自然條件下感染小鼠、大鼠、倉鼠不同品系小鼠易感性不同易感---129/J，DBA/2抵抗---C57BL/6，SJL/J傳播方式---直接接觸和空氣傳播35-49日齡小鼠最易感四、臨床癥狀自然感染---呈地方流行性。持續(xù)感染---斷乳至42日齡小鼠。急性型---弓背、呼吸困難、眼角有分泌物，發(fā)育不良，妊娠期延長，乳鼠死亡率增高。五、病理變化上皮細胞肥大、壞死增生、鱗狀化生、合胞體氣管炎肺部潮紅（ICAM-I）差異性六、診斷病毒分離細胞接種---BHK-21，Vero細胞雞胚接種---羊膜腔，絨毛尿囊膜血清學(xué)檢查鑒別診斷七、預(yù)防控制無SeV鼠群---建立封閉群，新引入動物須嚴格檢驗。有SeV鼠群---（1）剖腹產(chǎn)或引種重建（2）清除所有新生乳鼠、斷乳小鼠和妊娠鼠，僅保留成年鼠。八、對實驗研究的干擾（1）干擾免疫系統(tǒng)（2）致腫瘤細胞凋亡，干擾移植瘤建立(YasufumiKaneda.BMBreports,2011)妊娠4-5天感染---胚胎吸收11-12天感染---妊娠期延長對著床前受精卵及早期胚胎有親嗜性--胚胎死亡（3）影響胚胎發(fā)育，對鼠類生殖繁育造成影響八、應(yīng)用潛能（一）藥物遞送載體Zhang,Q*.,Xu,X.,Yuan,Y.,etal.IPS-1playsadualfunctiontodirectlyinduceapoptosisinmurinemelanomacellsbyinactivatedSendaivirus.Int.J.Cancer,2014，134:

224–234ZHANGQ*,YUANWF,ZHAIGQ,etal.InactivatedSendaivirussuppressesmurinemelanomagrowthbyinducinghostimmuneresponsesanddown-regulatingβ-cateninexpression.BiomedicalandEnvironmentalSciences,2012,25(5):509-516.ZhangQ*,WangZ,YuanY,etal.ImmunoadjuvanteffectsofhemagglutinatingvirusofJapanenvelope(HVJ-E)ontheinactivatedH9subtypeavianinfluenzavirusvaccine.Vet.

Immunol.

Immunopathol,2011,141(1):116-123.DaiZ,ZhangQ,WangZ,etal.HemagglutinatingVirusofJapanEnvelope(HVJ-E)CanEnhancetheImmuneResponsesofSwineImmunizedWithKilledPRRSVVaccine.BBRC.415(1):1-5,2011.GaoHui,XuXiaoShuang,ChenZeDong,ZhangQuan.InactivatedSendaiVirusInducesApoptosisinMurineMelanomaCellsbyIGF-1RDown-regulation.2013,26(12):998-1002（二）治療腫瘤1、仙臺病毒誘生IFN-β干擾SCID小鼠黑色素瘤模型建立的分子機制．2014-2016，國家自然科學(xué)青年基金（31302042）．2、HVJ-E包裹CpG新型免疫佐劑的研制與應(yīng)用．2010.1-2011.12.江蘇省獸用生物制藥高技術(shù)研究重點實驗室（KF0901）．3、HVJ致小鼠黑色素瘤細胞凋亡的分子機制．2014.7-2015.6．江蘇省自然科學(xué)基金（BK20130445）．4、滅活仙臺病毒激活DC細胞的分子機制，揚州大學(xué)創(chuàng)新培育基金，2012-2013.人（兒童）副流感病毒疫苗?；谙膳_病毒的重組病毒疫苗。（三）疫苗開發(fā)第三節(jié)鼠痘病毒感染

（mousepoxvirusinfection）臨床表現(xiàn)以四肢、尾、和頭部腫脹、潰爛、壞死甚至腳趾脫落為特征，故又稱脫腳病。一、概況痘病毒科，正痘病毒屬,DNA病毒。Hampstead(低毒力)；Moscow（高毒力）。在雞胚絨毛尿囊膜上生長良好。二、病原三、流行病學(xué)傳染途徑：直接接觸（皮膚傷口）易感性(“NO”)C3H、BALB/c、DBA/2品系易感；C57BL/6和C57BL/10有較強抵抗力；癥狀：腳部腫脹，痘痕，精神沉郁，突然死亡四、病理學(xué)皮膚→局部皮膚、淋巴結(jié)→肝、脾→肢體末端感染持續(xù)數(shù)月，排毒約3周清除僅依賴于CD8+T細胞五、診斷

1.臨床癥狀2.病理檢查3.病毒分離4.動物接種5.血清學(xué)檢查6.鑒別診斷六、預(yù)防和控制IFN-r受體類似物七、對實驗的干擾IL-18結(jié)合蛋白類似物毒株毒力因子×IFN-r，NK信號通路第四節(jié)小鼠肝螺桿菌感染一、發(fā)現(xiàn)1994，fox2008，高正琴二、病原H.Hepaticus呈螺桿狀G-，微需氧，厭氧營養(yǎng)要求苛刻三、流行病學(xué)感染大鼠、小鼠、倉鼠等嚙齒動物

易感性,♂＞♀糞-口途徑BALB/c、SCID等品系的小鼠易感

四、臨床癥狀五、病理變化A：對照，B、C：肝細胞脂肪變性，D：肝細胞壞死，中性粒細胞浸潤；E：淤血；F：肝組織中壞死灶周圍炎性細胞崩解碎片。A：對照組胃，未見病變；B：胃粘膜上皮壞死脫落。伴有淋巴細胞浸潤A：對照組盲腸，未見病變；B：盲腸固有層大量淋巴細胞浸潤。六、診斷PCR（糞便，組織）七、對研究的干擾影響腫瘤學(xué)研究血清酶活改變（谷草）改變DC細胞表型及免疫學(xué)研究加劇細胞分化及凋亡（♂）第五節(jié)仔鼠流行性腹瀉一、病原輪狀病毒A型。主要發(fā)生于第1胎的哺乳小鼠，特別是14日齡以內(nèi)的小鼠。EPIZOOTICDIARRHEAOFINFANTMICE(EDIM)二、流行病學(xué)糞-口，直接接觸，氣溶膠。10-14日齡的小鼠最為易感。C3H，易感C57BL，不易感三、臨床癥狀腹瀉、脫水、生長發(fā)育不良、腹部膨大。胃中充滿乳汁，后期阻塞肛門。四、病理A：空泡B：核不明顯，粉紅色蛋白體五、診斷及防控病史、組化，PCR及ELISA對發(fā)病鼠群，應(yīng)徹底淘汰全部小鼠及其親代母鼠，在徹底消毒的基礎(chǔ)上，重新引種，建立新種群。六、對研究的干擾對其他病原更易感；腸生理改變（氧化應(yīng)激和抗氧化應(yīng)激）；減少腸道對氨基酸的吸收，干擾營養(yǎng)學(xué)研究。第六節(jié)、淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒Lymphocyticchoriomeningitisvirus(LCMV)一、流行病學(xué)

1.自然感染LCMV的小鼠不常見。2.傳播途徑

在接受腫瘤移植時，可經(jīng)粘膜和破損皮膚而感染，并經(jīng)尿液、唾液、奶汁甚至懷孕傳播。子宮和卵巢傳播僅發(fā)生于小鼠。3.易感動物

小鼠、倉鼠。人對LCMV易感。取決因素宿主因素（品系、年齡）病毒毒株接種途徑接種劑量典型癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性耐受感染---經(jīng)子宮和新生鼠感染。主要表現(xiàn)為生長遲緩，免疫復(fù)合型腎球腎炎，伴隨毛亂、消瘦、弓背、蛋白尿和腹水。二、臨床癥狀三、病理（A）持續(xù)性耐受感染，CD8+T細胞耗竭，病毒血癥，終身排毒，T細胞活性消失。免疫耐受崩潰，導(dǎo)致慢性疾病，形成淋巴細胞浸潤和血管炎。血管炎慢性腎小球腎?。˙）非耐受性感染，新生兒后期急性感染，產(chǎn)生病毒血癥，但不排毒，感染鼠死亡或清除病毒（無癥狀）。（C）成年鼠感染，引發(fā)壞死性肝炎，普遍性淋巴細胞耗竭。淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎只見于腦內(nèi)接種鼠。四、診斷血清學(xué)方法PCR診斷（腎臟、脾臟）五、防控a.清除感染鼠群。b.移植瘤實驗前，檢測移植瘤細胞。六、對實驗研究的干擾在小鼠胰島β細胞內(nèi)長期存在，產(chǎn)生類似于2型糖尿病的代謝和病理變化。改變神經(jīng)突觸可塑性，影響其認知水平。中止乙肝病毒感染；引起肝炎。導(dǎo)致骨髓發(fā)育不良、溶血性貧血并影響行為學(xué)。改變免疫應(yīng)答活性，影響細胞因子表達。抑制多瘤病毒致瘤，延緩?fù)N異體皮膚及腫瘤移植物的排斥反應(yīng)。對其他病原、內(nèi)毒素、輻照更易感，改變自然發(fā)生糖尿病的時間進程。第七節(jié)、小鼠呼腸孤病毒3型感染一、概況小鼠感染Reo-3以油性被毛效應(yīng)和脂肪性下痢為臨床特征。病理變化主要表現(xiàn)肝炎、腦炎和胰腺炎。Reovirus-3(REO-3)二、病原屬呼腸孤病毒科，呼腸病毒屬，dsRNA。哺乳動物Reo有3個血清型，Reo-1、2、3。對乙醚、氯仿等抵抗力強。三、流行病學(xué)Reo-3宿主范圍廣。急性病例主要見于新生/斷乳小鼠，慢性病例則見于28日齡以上小鼠。NIH小鼠易感。消化道和呼吸道水平傳播。蚊子傳播Reo-3可能是其呈全球性感染的原因。四、臨床癥狀第一胎小鼠感染：表現(xiàn)脂肪性下痢、黃疸、消瘦、脫毛、結(jié)膜炎、油樣毛皮、運動失調(diào)。五、病理變化膀胱增大、磨損肝壞死黃色腎臟六、預(yù)防控制屏障系統(tǒng)有助于預(yù)防感染蔓延。剖腹產(chǎn)是凈化鼠群Reo-3感染的重要措施。Reo-3可經(jīng)蚊子傳播，要嚴格采取隔離措施，保持房舍清潔衛(wèi)生。防止人傳染Reo-3給小鼠。七、對實驗的干擾Reo-3自然感染可使腹水移植瘤消退。Reo-3實驗感染，可降低肺部對葡萄球菌的清除。抑制細胞DNA合成，誘發(fā)細胞凋亡，抑制肺癌形成。引起肺嗜中性粒細胞聚集，提高趨化因子mRNA表達水平，引發(fā)急性心肌炎。與化學(xué)治療劑協(xié)同排除腫瘤，提高腫瘤特異性免疫力。胰淀粉酶、脂肪酶活性降低，胰蛋白酶活性升高，破壞胰島β細胞。第八節(jié)小鼠巨細胞病毒感染

MouseCytomegalovirus（MCMV）一、概況MCMV可引起持續(xù)性感染。大鼠、小鼠、豚鼠和倉鼠均可感染?？梢鹋咛ジ腥?。二、流行病學(xué)與唾液、淚液、尿液直接接觸，垂直傳播。BALB/c，A/J易感；C57BL10和CBA不易感。新生鼠及免疫缺陷鼠易感。三、臨床癥狀自然感染多無癥狀。人工感染只出現(xiàn)一過性呆滯、弓背、被毛逆立等癥狀。成年小鼠急性感染出現(xiàn)血小板減少癥。四、診斷血清學(xué)檢查PCR病理學(xué)六、對實驗的干擾改變許多生理功能（Ab，IFN，MHCI/II，NK）。神經(jīng)元遷移降低，加劇同種異系皮膚移植排斥。促進造血新生細胞凋亡，形成骨髓抑制性。BALB/c小鼠血小板減少，加速心血管系統(tǒng)石灰化，形成抗心血管系統(tǒng)自身抗體。對其他病原更加易感（如靜止期弓形蟲成活動期）。改變膽固醇形成與人動脈易損斑塊形成一致。具有超抗原特性。。封閉乙肝病毒復(fù)制，提高IFN-γ,IL-1α，IL-6，10，12的產(chǎn)生。第二章倉鼠疾病

一、病原第一節(jié)泰澤氏菌病

毛發(fā)樣芽孢桿菌絲狀G-形成孢子內(nèi)壁二、流行病學(xué)倉鼠、小鼠和豚鼠。糞---口途徑傳播，持續(xù)數(shù)月。可經(jīng)胎盤傳播嗎？YES：miceandguineapigsNo：hamsters三、臨床癥狀取決于易感性，應(yīng)激可加重；突然死亡，潮濕，黃色瀉糞；肝臟有壞死，腸道鼓氣膨脹。四、對實驗研究的干擾改變殺鼠靈和甲氧芐氨嘧啶的藥動學(xué)；提高肝臟乙醛酸轉(zhuǎn)氨酶活性，血清IL-6，IL-12水平；倉鼠自然感染，心血管、肝腸循環(huán)、甚至淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出現(xiàn)改變；對藥理學(xué)產(chǎn)生影響；產(chǎn)生毒素，影響更加復(fù)雜。五、診斷防控診斷染色；雞胚接種，血清學(xué)分析，PCR注意泰澤氏菌不能在人工培養(yǎng)基上生長防控細菌，抗生素？？NO嚴格的衛(wèi)生管理減少應(yīng)激清除感染鼠第二節(jié)、細胞內(nèi)羅松菌

一、病原增生性回腸炎（lawsoniaintracellularis）的病原。History應(yīng)激？彎曲桿菌？大腸桿菌？G-，彎曲，胞內(nèi)寄生菌感染多種動物（人除外）不同宿主間病原差異極小活細胞生長二、流行病學(xué)羅松菌感染導(dǎo)致高致病率和死亡率。糞---口途徑。胎盤傳播尚未深入研究。三、臨床癥狀廣泛分布，回腸增生。水樣腹瀉、厭食、發(fā)育不良、瘦弱、脫水、昏睡及被毛粗亂。四、病理變化粘膜過度肥大---腸隱窩及絨毛細胞增生、融合和壞死、出血、膿腫。漿膜結(jié)節(jié)、腹膜纖維性滲出。五、對實驗研究的干擾羅松菌侵襲胃腸，進入宿主細胞刺激腸上皮細胞壞死?；啬c的功能?營養(yǎng)學(xué)研究---影響營養(yǎng)吸收，生長不良。對機體免疫功能產(chǎn)生影響。六、診斷防控PCR（腸道）染色診斷防控?zé)o有效抗生素高衛(wèi)生標(biāo)準較少應(yīng)激過濾系統(tǒng)Note：有些情況下，個體會自動清除病原，但依賴于此不科學(xué)。第三節(jié)、葡萄球菌感染一、病原二、流行病學(xué)

哺乳動物隱性感染普遍，機會感染。G+，凝固酵素陽性，溶血素三、臨床癥狀皮膚膿腫，少部分內(nèi)臟器官膿腫倉鼠---皮膚破損（手術(shù)、咬傷、籠具損傷）四、病理學(xué)頭部損傷常見。抵抗葡萄球菌依賴于中性粒細胞釋放殺微生物制劑。巨噬細胞、抗體、細胞免疫等也起清除作用。肺巨噬細胞清除葡萄球菌的動力學(xué)不一致，倉鼠肺巨噬細胞需調(diào)理化，殺滅效率低于人和兔。黏液素加重葡萄球菌性肺炎。五、對實驗的干擾釋放腸毒素---超抗原。促進利什曼原蟲感染早期形成病灶與類黃酮避孕藥（炔雌烯醇）一起改變實驗?zāi)[瘤的生長動力學(xué)。非MHC限制無嚴格抗原特異性極低抗原可刺激大量T細胞六、診斷防控細菌培養(yǎng)診斷防控抗生素消除癥狀，不能清除病原高衛(wèi)生標(biāo)準減少應(yīng)激和皮膚損傷個人衛(wèi)生第四節(jié)、蠕形螨一、病原

D.criceti

D.aurati

二、流行病學(xué)敘利亞倉鼠---混合感染金黃色地鼠蠕形螨有致病性---脂肪腺，毛囊直接接觸，母親至幼仔雄性比雌性易侵入三、臨床癥狀中等癢、脫毛、碎甲四、病理學(xué)表皮發(fā)生改變；腎淀粉樣病變；螨作為其他病原（皮膚真菌）的載體五、對實驗的干擾生物素缺乏，可降低得病率；螨蟲和糖尿病改變T淋巴細胞分化。表皮淋巴循環(huán)系統(tǒng)腎臟系統(tǒng)壽命研究營養(yǎng)參數(shù)研究六、診斷防控檢查病灶周圍毛發(fā)，鏡檢。診斷防控除螨劑，保持籠具清潔。防止交叉感染。10%NaOH第五節(jié)、蟯蟲一、病原鼠管狀線蟲---最常見二、流行病學(xué)與其在自然宿主中一樣。三、臨床癥狀極少出現(xiàn)。四、病理學(xué)漿細胞固有膜增厚。第四章、豚鼠疾病

Guineapigdiseases第一節(jié)、支氣管博代氏菌一、病原G-，β溶血不形成芽孢棒狀、桿狀呼吸道定居二、流行病學(xué)直接接觸呼吸道氣溶膠污染物幼年發(fā)病率高三、臨床癥狀隱性感染---20%，許多豚鼠可自發(fā)清除。飲食更換、VC缺乏、溫度變化、擁擠是誘因。急性潛伏期5-7天，隨后發(fā)病死亡。肺炎、厭食、消瘦、被毛粗亂、體重減輕，偶見流產(chǎn)死產(chǎn)。四、病理學(xué)上呼吸道及中耳鼓泡室出現(xiàn)黏膿性或卡他性滲出物，腹腔前部固化，胸膜炎?；撔灾夤芊窝?，失去正常細胞結(jié)構(gòu)，大量纖維性滲出物。五、對實驗的干擾產(chǎn)生壞死毒素,激活肝星狀細胞形成張力纖維絲。影響外周血管。對組胺反應(yīng)性增高，增加血管滲透性。調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)；誘導(dǎo)細胞凋亡；抑制NF-kB的激活。對心血管、淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮、神經(jīng)、生殖、呼吸和泌尿系統(tǒng)均有直接的影響。六、診斷防控臨床癥狀，細菌培養(yǎng)。ELISA，PCR診斷防控剔除患鼠或緊急治療。飼養(yǎng)管理MacConKey’sagar上呼吸道中耳鞭毛蛋白序列為引物第三節(jié)、肺炎鏈球菌一、病原

G+，雙球菌，可形成短鏈狀，有莢膜Sero-19最易感α-溶血鏈球菌抗原構(gòu)造模式圖核蛋白Ag莢膜蛋白質(zhì)Ag多糖Ag肽聚糖二、流行病學(xué)氣溶膠，感染自人類。呼吸道繁殖，與SeV混合感染，加重病情。在小鼠和大鼠也可發(fā)生感染。三、臨床癥狀表現(xiàn)無精神、衰弱、脫水、神經(jīng)癥狀、不同程度死亡；懷孕、年幼或受應(yīng)激豚鼠更加易感。四、病理學(xué)纖維素性化膿或膿腫形成。肺炎球菌溶血素對耳蝸形成超微損傷。心包膿腫肺炎腹膜炎胸膜炎中耳炎肺勻漿S.pneumoniaeβ-腎上腺素能受體數(shù)量慢支主要依賴于體液免疫While,inotherhosts,C-reactiveprotein,TNF-α,pulmonarysurfactantalsoappeartoplayroles.IL-10attenuatestheresponsewithinthelungs,hamperingeffectiveclearanceoftheinfectionandshorteningsurvival.五、對科學(xué)研究的干擾可改變許多生理功能。中耳局部脂質(zhì)過氧化，對耳蝸產(chǎn)生損傷。對心血管、肝腸、神經(jīng)和呼吸系統(tǒng)產(chǎn)生損傷。六、診斷控制膿性滲出物涂片—革蘭氏染色；鼻拭子---分離培養(yǎng)；ELISA，PCR指紋分析；中耳炎用X光照射；抗生素治療最好清除所有感染動物。耐藥嚴重青霉素結(jié)合蛋白2a第三節(jié)、隱孢子蟲一、病原二、流行病學(xué)潛伏期4天，糞口途徑感染條件致病感染數(shù)量逐漸增加三、臨床表現(xiàn)幼年豚鼠易發(fā)??；大腸桿菌感染能加重本?。慌R床表現(xiàn)腹瀉—體重減輕—衰弱—死亡。四、病理學(xué)水壺狀腹部，腸道充盈液體。腸隱窩上皮細胞增生，黏膜固有層水腫。絨毛端壞死，脫落，空、回、盲腸病變更嚴重。營養(yǎng)吸收不良。前列腺素分泌減少，引起腸道損傷。p.i.3w，產(chǎn)生細胞免疫。五、對科研的干擾加重其他病原感染的病情。抑制對疫苗及綿羊紅細胞的抗體應(yīng)答。體外---引起上皮細胞凋亡，體內(nèi)---永久生長受阻。激活腸磷酸酶。自然感染對肝腸、淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮和腸神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生改變。六、診斷控制腸道刮片觀察寄生蟲HE染色PCR診斷重新建群第四節(jié)、豚鼠艾美爾球蟲一、病原寄生于豚鼠的唯一球蟲。二、流行病學(xué)易在幼鼠中流行；糞口傳播；高死亡率；潛伏期11-12天；體外形成孢子，具有感染力。三、臨床表現(xiàn)幼鼠多見（Vc缺乏鼠，或運輸刺激）春季多發(fā)腹瀉、脫水、厭食、弓背、體重減輕和死亡四、病理學(xué)結(jié)腸水腫、黏膜充血、點狀出血，形成結(jié)節(jié)。結(jié)腸惡臭，充盈水樣液體。上皮細胞充血、脫落。引起細胞免疫應(yīng)答。五、對實驗的干擾影響盲腸細菌和淋巴細胞群。改變葡萄糖吸收。加大應(yīng)激反應(yīng)。對肝腸等多個系統(tǒng)產(chǎn)生影響。六、診斷防控糞便查卵加強衛(wèi)生措施重新引種第四節(jié)、維生素C缺乏一、病因?qū)W豚鼠缺乏（少）微粒體酶L-葡糖內(nèi)酯氧化酶。防止葡萄糖轉(zhuǎn)化為抗壞血酸下降膠原合成受損VC結(jié)構(gòu)皮膚易損傷，牙齒易松動，毛細血管破裂，創(chuàng)傷不易愈合，關(guān)節(jié)腫大跛行。

二、臨床癥狀第四章、兔的傳染性疾病一、病原嵌杯病毒科，單鏈RNA病毒；成熟粒子呈球形顆粒，無囊膜第一節(jié)兔病毒性出血癥（兔瘟）二、流行病學(xué)青年、成年兔發(fā)病和死亡率最高。所有毒株所造成的流行特征，臨床癥狀，病灶基本相似。水平傳播（氣溶膠、直接接觸、污染物、尸體）。節(jié)肢動物（蒼蠅、蚊子、跳蚤）可傳播。三、臨床癥狀抽搐、四肢劃動肛門周圍膠凍狀分泌物最急性型：突然死亡。

急性型：體溫升高至41℃以上，食欲廢絕，飲欲增加。死前突然興奮，尖叫幾聲便倒地死亡。

慢性型：精神不振，不吃食，喜涼水，消瘦。病程2天以上，成為帶毒者。四、病理學(xué)病毒在肝、小腸、脾臟復(fù)制，多器官系統(tǒng)衰竭和病變。典型特征是急性肝壞死。血栓、出血。膀胱積液肺臟出血肝、腎、脾重大氣管至肺臟充血、潮紅大量出血取代原有脾臟結(jié)構(gòu)腎小管內(nèi)可見玻璃樣圓柱五、對研究的干擾淋巴細胞減少，血小板減少。血管內(nèi)皮單核細胞凋亡。對肝腸循環(huán)、骨骼肌、造血、呼吸和繁殖系統(tǒng)產(chǎn)生影響。六、診斷防控血清學(xué)診斷（ELISA、免疫印跡、HI）診斷防控滅活苗。PCR診斷（肝臟）隔離和撲殺。雙股RNA病毒呼腸孤病毒3型第二節(jié)兔輪狀病毒感染一、病原二、流行病學(xué)野兔和實驗兔。病毒傳染性強，主要通過糞口途徑傳播。斷奶兔易發(fā)。感染多呈亞臨床。三、臨床癥狀與宿主年齡、暴露史和其他微生物感染有關(guān)。主要是斷乳仔兔。嚴重腹瀉、厭食、脫水和高死亡率。四、病理學(xué)病毒在小腸成熟腸上皮細胞中復(fù)制。結(jié)腸明顯充血、腫大和壞死。小腸充血伴隨黏膜出血，盲腸充滿液體。腸長絨毛變短和融合，上皮細胞功能減弱。與大腸桿菌共感染，斷乳仔兔腹瀉非常嚴重。五、對研究的干擾損害腸刷狀邊緣，黏膜細胞損害，離子交換功能喪失。感染具有自限性，主要依賴體液免疫。對肝腸系統(tǒng)和營養(yǎng)學(xué)研究產(chǎn)生干擾。六、診斷防控臨床癥狀、病理變化、糞中檢出病毒診斷防控隔離。病毒分離，抗體檢測疫苗。電鏡第三節(jié)兔梭菌性下痢一、病原梭狀芽孢桿菌---G+內(nèi)孢子兔腸毒血癥的病原諸多病原血清型兔---A型二、流行病學(xué)常與其他細菌/病毒混合感染。通過糞口途徑感染。斷乳仔兔尤其易感。運輸、抗生素治療、飲食更換（高能、低纖維）刺激發(fā)病。破壞正常菌群三、臨床癥狀典型特征---水樣腹瀉，伴隨厭食和死亡。亞臨床沒有征兆。慢性出現(xiàn)厭食和體重減輕。四、病理學(xué)盲腸漿膜表面淤血塊。盲腸充滿液體和氣體。黏膜有壞死灶和炎癥，形成磨損和潰瘍。產(chǎn)生毒素。五、對科研的干擾3-8周齡兔感染，揮發(fā)性脂肪酸產(chǎn)量下降。對肝腸循環(huán)產(chǎn)生干擾。造成人、財和物力的浪費。六、診斷防控診斷（Yonushonisandcoworkers）防控減少應(yīng)激疫苗？？？玻片上鑒定出G+卷曲菌；盲腸大體或病理病變明顯；厭氧條件下分離和鑒定；證實由病菌引發(fā)的盲腸、結(jié)腸毒素第四節(jié)土拉桿菌一、病原土拉桿菌，G-引起敗血癥宿主廣致病性極強抵抗力較強（水、土壤、濕草）感染兔等多種動物二、流行病學(xué)野兔感染常見，實驗兔較少、傳播途徑多樣氣溶膠食物、水蒼蠅、蚊子其他三、臨床癥狀四、病理學(xué)點狀凝固壞死，肝、脾、骨髓充血。支氣管肺炎，肝、脾、淋巴結(jié)出現(xiàn)膿腫肉芽腫病變。內(nèi)毒素造成損傷。強毒株對腹腔巨噬細胞有致死性。細胞免疫。五、對科學(xué)實驗的干擾血清痕量金屬元素、中性脂肪、堿性磷酸酶等活性改變。呈現(xiàn)顯著早期白血病癥狀。合成急性球蛋白。改變血酮---脂解。抑制腫瘤生長，減少3,4苯并芘引起的基因組失常，提高輻射抵抗力。六、診斷防控診斷（病理學(xué)、免疫組化和病原分離）防控徹底清除感染兔。血清學(xué)診斷意義不大第五節(jié)肝性球蟲一、病原

---兔斯氏艾美耳球蟲。二、流行病學(xué)1～3月齡兔易感且病情嚴重，死亡率高；成年兔？？？食入孢子化卵囊（飼料、飲水；飼養(yǎng)員、工具、蒼蠅）。發(fā)病多在春暖多雨期。三、臨床癥狀輕度感染---多不呈臨床癥狀嚴重感染---四個階段球蟲分裂生殖導(dǎo)致肝損傷；膽汁郁積；代謝功能紊亂；抑制免疫反應(yīng)；最終形成厭食、黃疸、腹瀉或便秘，體重減輕。四、病理學(xué)肝、膽囊、管擴張，肝臟布滿黃色結(jié)節(jié)。膽管增生、纖維化、淋巴細胞浸潤，肝臟萎縮性壞死。輕微感染激發(fā)體液免疫和細胞免疫的產(chǎn)生。免疫抑制是最終致病效應(yīng)。五、對科學(xué)研究的干擾提高血清β/γ球蛋白，β脂蛋白，琥珀酸脫氫酶，山梨醇脫氫酶，血紅素，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平。降低血清α脂蛋白、葡萄糖、肝堿性磷酸酶活性。白蛋白/球蛋白比例下降。感染后，藥動學(xué)、肝生物轉(zhuǎn)化功能，膽管和泌尿系統(tǒng)分泌磺溴酞鈉受到影響。代償性酸中毒。用于模仿膽管硬化形成的肝病模型。六、診斷防控診斷（組化學(xué)、檢查膽汁）防控衛(wèi)生是關(guān)鍵。Note：與腸道球蟲區(qū)別。第六節(jié)粘液瘤病毒感染一、病原雙股DNA病毒，痘病毒科。二、流行病學(xué)野兔廣泛存在，實驗兔相對較少?？山柚?jié)肢動物（蚊、蚤）傳播。三、臨床癥狀取決于毒株（致瘤性；強、弱毒）和宿主。新西蘭大白兔極其易感。急性病例呈現(xiàn)耳聾，42℃，眼瞼水腫，2天死亡。5～7天眼瞼水腫、下垂，肛門、生殖器及口、鼻周圍發(fā)炎、水腫。獅子頭形狀，耳朵劇烈腫脹而下垂。后期皮膚出血，鼻炎和肺炎。后期良性經(jīng)過，只在體表發(fā)生分散孤立的粘液瘤結(jié)節(jié)，萎縮破潰。四、病理學(xué)皮膚、心臟、胃腸漿膜水腫、出血。肺、肝、脾、腎、淋巴結(jié)和睪丸萎縮。病毒在皮膚DC和T淋巴細胞中繁殖。五、對科學(xué)研究的干擾免疫抑制。產(chǎn)生一系列蛋白：絲氨酸蛋白酶抑制因子，改善慢性炎癥。IL-1β抑制因子---酶的轉(zhuǎn)化。M11L（受體樣表面蛋白）---調(diào)節(jié)凋亡。MT1（趨化因子結(jié)合蛋白）---阻抑急性感染期單核細胞聚集。MT2---CD4+淋巴細胞凋亡抑制劑。MT4（感染淋巴細胞的毒力因子）被保留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。MT7，改變淋巴細胞遷移，抑制IFN-γ活性，與趨化因子家族肝磷脂結(jié)合區(qū)結(jié)合，減少血管內(nèi)膜增生。下調(diào)MHCI和CD4+分子介導(dǎo)的病毒抗原提呈，進一步證明了免疫抑制功能。病毒間存在相互作用。對心血管、表皮、繁殖、呼吸和泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生影響。六、診斷防控（臨床和病理變化，強毒株）（ELISA，IFA，CF，弱毒株）防控淘汰，引種診斷第五章犬的疾病一、病原犬腺病毒（無囊膜、雙股DNA病毒）；CAV-1、CAV-2第一節(jié)犬傳染性肝炎二、流行病學(xué)CAV-1和CAV-2都具有極強的傳染性。CAV-1---尿液和其他體液。CAV-2---呼吸道分泌物。三、臨床癥狀CAV-1

全身性或呼吸道癥狀---取決于感染途徑。最早期出現(xiàn)短期高熱。全身癥狀包括畏光、血性腹瀉、厭食、消瘦、口渴及皮膚瘀斑。腹部因肝炎和肝腫大而柔軟。在劍狀軟骨處最為明顯，隨后在頭頸皮下出現(xiàn)水腫。一周后，癥狀消失，其后出現(xiàn)“藍眼”患犬出現(xiàn)癥狀后數(shù)小時死亡。胚胎死亡，或幼仔出生后數(shù)小時死亡。有時也會出現(xiàn)咳嗽。阿富汗犬極其易感。CAV-2咳嗽眼鼻異常發(fā)熱亦可見腹瀉四、病理學(xué)感染后，CAV-1在扁桃體復(fù)制，隨后分布到各器官（肝）。首選目標(biāo)是肝細胞和血管上皮細胞。多組織器官出現(xiàn)細胞病變傾向。病理變化包括扁桃體炎、白細胞減少癥、腦炎、腸炎、眼色素層炎、全身性充血和出血、脾臟和膀胱擴張。有害病變?yōu)楦窝住⒛I炎（IV型）、虹膜睫狀體炎。凝血因子和血小板減少,出血和凝血不良。肝和上皮細胞出現(xiàn)考德里A型包涵體。抗體應(yīng)答的后遺癥是腎小球免疫復(fù)合物沉積。壞死性支氣管炎，支氣管上皮細胞增生。CAV-2感染不會產(chǎn)生明顯的病毒血癥。CAV-2的病變主要在上呼吸道（咽炎、扁桃體炎、氣管支氣管炎）?？稍谀c道復(fù)制，在呼吸道中持續(xù)存在1個月以上。五、對科學(xué)研究的干擾CAV-1引發(fā)免疫抑制（白血球、血小板減少、凝集異常、肝臟酶活提高）。心血管、表皮、肝腸、神經(jīng)、繁殖等受到了嚴重影響。CAV-2改變肺的結(jié)構(gòu)，提高組胺活性。六、診斷防控根據(jù)臨床癥狀，病毒分離、血清滴度、PCR防控CAV-1可經(jīng)尿排毒1年以上。CAV-1，CAV-2有交叉保護性，常用CAV-2免疫。第二節(jié)犬瘟熱一、病原有囊膜、單股負鏈RNA病毒，副粘病毒，麻疹病毒屬。二、流行病學(xué)野生動物常見。吸入或直接與眼鼻分泌物、尿、糞接觸?？山?jīng)胎盤傳播。冬、春季發(fā)病較高。食肉動物易感。三、臨床癥狀雙相熱，眼鼻分泌物。脫水、嘔吐、呼吸道癥狀、腹瀉。產(chǎn)仔數(shù)減少、牙齒變色、皮疹、足墊。痙攣、神經(jīng)癥狀。四、臨床癥狀CDV在支氣管淋巴結(jié)和扁桃體的T淋巴細胞和巨噬細胞中復(fù)制。隨后出現(xiàn)病毒血癥，病毒擴散到全身。繼發(fā)感染常出現(xiàn)（胃腸）。支氣管肺炎、腦炎、牙齒發(fā)育不良、心肌炎、副甲狀腺惡化、關(guān)節(jié)炎、胸膜炎、視神經(jīng)炎、結(jié)膜炎、胃腸炎、角質(zhì)化。造成脫髓鞘炎。子宮內(nèi)感染，造成胚胎死亡，或終身免疫抑制。五、對科學(xué)研究的干擾淋巴結(jié)壞死，免疫抑制。白血球和血小板減少，誘發(fā)細胞因子產(chǎn)生。MHCII表達升高。胸腺增生，貧血。副甲狀腺損害，低血鈣。低丙種球蛋白血(癥)，對其他病原易感性增加。誘導(dǎo)細胞凋亡，空泡樣惡化，壞死，形成合胞體。六、診斷防控臨床癥狀。實驗室診斷（病原分離、RT-PCR）防控免疫。消毒。第三節(jié)犬細小病毒一、病原DNA病毒；與K病毒和微小病毒相似；CPV2，2a，2b，2c二、流行病學(xué)病毒可隨糞便、尿液、嘔吐物及唾液排出體外，污染食物、飲水、墊料及周圍環(huán)境。消化道是主要的傳播途徑。斷奶前后幼犬易感性最高，以窩發(fā)為特征。3～4周齡呈急性致死性心肌炎，8～10周齡的犬以出血性腸炎為主。羅特韋爾犬和德國短尾獵犬最為易感。三、臨床癥狀出血性腸炎型和急性心肌炎型。出血性腸炎型多見于青年犬。呈番茄汁樣糞便，腥臭。病犬脫水、消瘦。四、病理學(xué)病毒在胸腺、扁桃體、腸系膜淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和其他器官復(fù)制。1周內(nèi)，感染整個腸粘膜。病毒在細胞S期復(fù)制。糞便中3-12天可檢測病毒（4-7天為高峰）。腸道變薄、出血，腸淋巴結(jié)透明出血。心肌出現(xiàn)白色條紋，伴有肺水腫。病犬常因水、電解質(zhì)平衡失調(diào)和酸中毒，于腹瀉后2～3d死亡。白細胞總數(shù)明顯減少。病犬空腸、回腸粘膜壞死、脫落，絨毛萎縮，腸腔擴張。內(nèi)容物水樣，混有血液和粘液。腸上皮細胞內(nèi)有核內(nèi)包涵體。五、對科學(xué)研究的干擾誘生白血病和細胞因子，抑制腫瘤生長。加速細胞凋亡，對其他病原更易感。肝腸、心血管、呼吸系統(tǒng)等都會受到影響。營養(yǎng)學(xué)研究受到嚴重影響。六、診斷防控根據(jù)臨床癥狀。實驗室診斷（病原分離、PCR）防控免疫。消毒。第四節(jié)狂犬病由狂犬病毒引起的人和所有溫血動物共患的一種急性直接接觸性傳染病。臨床表現(xiàn)極度興奮、狂燥、流涎和意識喪失，終因局部或全身麻痹而死。典型的病理變化為非化膿性腦炎，在神經(jīng)細胞漿內(nèi)可見內(nèi)基氏小體（NegriBodies）。建國以來全國狂犬病報告發(fā)病情況一、病原彈狀病毒科狂犬病毒屬未分段的單股負鏈RNA包膜病毒子彈頭形狀:180nm

75nm對神經(jīng)組織有親嗜性，在易感動物及人的大腦海馬溝回的錐體細胞增殖，在胞漿內(nèi)形成嗜酸性包涵體—內(nèi)基小體（Negribody），有診斷價值RNA基因組編碼5種蛋白:N,NS,M,G和L蛋白有一層磷脂層包被，包膜上鑲嵌有10-nm長的糖蛋白形成釘狀突起。對脂溶劑、乙醇、甲醛、碘制劑以及季胺類化合物、酸（pH4以下），堿（pH10以上）敏感，容易被殺滅；對紫外線和熱敏感，病毒懸液經(jīng)56℃30～60分鐘或100℃2分鐘即失去活力，易被巴氏消毒法消毒；不易被酚或來蘇爾溶液殺滅；對干燥、反復(fù)凍融有一定抵抗力。二、流行病學(xué)區(qū)域 主要宿主

亞洲 狗，狼，貓，貓鼬，非洲 狗，豺，貓鼬，狐貍拉丁美洲 狗，蝙蝠北美洲 臭鼬，浣熊，狐貍，蝙蝠加勒比海地區(qū) 貓鼬西歐 狐貍，蝙蝠東歐 狐貍，狗幾乎所有的溫血動物都可以感染狂犬病。亞洲和非洲：狗是主要的傳染源，貓也可以傳染狂犬病。歐美發(fā)達國家野生動物是主要的傳染源。動物狂犬病

1-

野生動物

2-家畜動物

人類狂犬病野生食肉動物翼手目動物

狐貍臭鼬獾狼吸血蝙蝠食果類C.S.食蟲類

家畜型食肉動物家畜型

食草動物狗貓

奇蹄動物牛綿羊

山羊人類

人類

三、臨床癥狀潛伏期：1-3月（1w-數(shù)年）前驅(qū)期：發(fā)熱、不安、乏力、流淚、流涎、傷口“蟻走感”興奮期（3-5天）：興奮性增高，狂躁不安，吞咽及飲水時，喉肌痙攣，又稱恐水病。麻痹期：麻痹、昏迷、呼吸循環(huán)衰竭死亡（100%）。首先在傷口局部肌肉細胞內(nèi)增殖沿感覺神經(jīng)神經(jīng)軸索上行中樞神經(jīng)系統(tǒng)增殖并引起損傷沿傳出神經(jīng)擴散至唾液腺及其它組織四、病理學(xué)五、對科學(xué)研究的干擾人畜共患病。神經(jīng)系統(tǒng)。六、診斷防控防控免疫。撲殺。腦組織標(biāo)本抗狂犬病毒熒光抗體染色陽性Negri小體分離到病毒第六章實驗用猴常見疾病第一節(jié)B病毒感染一、病原---DNA病毒，獼猴皰疹病毒1型，屬皰疹病毒科，α皰疹病毒亞科，單純皰疹病毒屬。---α、β和γ型。二、流行病學(xué)獼猴皰疹病毒1型可感染紅面猴、臺灣猴、食蟹猴、恒河猴、冠毛獼猴。新生猴感染率低，性成熟后大幅提高。體液傳播（血液、唾液、精液）。口腔和生殖腺分泌物排毒。三、臨床癥狀口腔、生殖腔出現(xiàn)膿皰、潰瘍;肌痛、發(fā)熱、頭痛；迅速發(fā)展的上行性麻痹；感覺異常，復(fù)視、運動失調(diào)、潴尿、抽搐、吞咽困難，直至死亡。四、病理學(xué)上皮細胞凝固壞死，出現(xiàn)嗜酸性包涵體。肝、脾、肺、腦、子宮、腎上腺和淋巴結(jié)彌漫性出血壞死?？贵w產(chǎn)生后可消除臨床癥狀，但攜帶病毒。五、對實驗的干擾限制了獼猴的應(yīng)用，并對人類產(chǎn)生潛在威脅。感染B病毒后，不能應(yīng)用于表皮、內(nèi)分泌、腸肝循環(huán)、神經(jīng)、繁殖和呼吸系統(tǒng)研究。