鈣離子試劑盒測定說明書

<BioVision>CalciumColorimetricAssayKit鈣比色生物試劑盒(Catalog#K380-250;250assays;Storekitat4°C)1.鈣相關(guān)介紹Calciumisessentialforalllivingorganisms,whereCa2+sequestrationandreleaseintoandoutofthecytoplasmfunctionsasasignalformanycellularprocesses.99%ofcalciumisfoundinbonesandteethwiththeremaining1%foundinthebloodandsofttissue.Serumcalciumlevelsaretightlycontrolled(8.4-11.4mg/dL)andanyvariationoutsidethisrangecanhaveseriouseffects.Calciumplaysaroleinmediatingtheconstrictionandrelaxationofbloodvessels,nerveimpulsetransmission,musclecontraction,andhormonesecretion.Calciumionchannelscontrolthemigrationofcalciumionsacrosscellmembranes,permittingtheactivationandinhibitionofawidevarietyofenzymes.Causesoflowcalciumlevelsincludechronickidneyfailure,vitaminDdeficiency,andlowbloodmagnesiumlevelsthatcanoccurinseverealcoholism.BioVision’sColorimetricCalciumAssayKitutilizesthechromogeniccomplex(入=575nm)formedbetweencalciumionsand0-cresolphthaleintoprovideasimpleassayinthephysiologicallyimportantrangeofcalciumconcentration0.4-100mg/dL(0.1-25mM).2.試劑盒組成組成250規(guī)格Cap顏色PartNumber鈣測定緩沖液15mlNMK380-250-1顯色試劑25mlNMK380-250-2鈣標(biāo)準(zhǔn)液(500mM)100ul黃色K380-250-33.試劑制備和儲存條件4°C下避光保存，保質(zhì)期一年。鈣測定緩沖液和顯色試劑自己配置，保存在4°C的條件下，升溫至室溫時(shí)使用。4.鈣含量監(jiān)測方案標(biāo)準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)備，稀釋到鈣標(biāo)準(zhǔn)液至5mM(20mg/dL),方法：將濃度500mM的鈣標(biāo)準(zhǔn)液10(微升)"，加到990"的重水(dH2O)中，混合均勻。分別加0,2,4,6,8,10"的標(biāo)準(zhǔn)液到試劑盒各管中使其各管中含有0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0鈣離子。每管加入重水到50"體積。樣品準(zhǔn)備，血清或者尿液樣品可以直接應(yīng)用到這個(gè)試劑盒中，將10"樣品加入到含有96孔板的管槽中，對于其他液體樣品，加入2—50"樣到單獨(dú)/個(gè)別的管槽中，加重水至50"體積。樣品的測定無需先前的處理。一些MRI造影劑在測試中可能會造成瞬變干擾。附加，分別滴加90"顯色試劑到含有鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品(或者controls變量)的管槽中，混合均勻。分別滴加60"的該測定緩沖液到各個(gè)管槽中，混合均勻。

D.在室溫避光的條件下使其反應(yīng)5—10分鐘。D.E.控制光照在575nm，發(fā)色團(tuán)不穩(wěn)定，時(shí)間超過了會慢慢淡化，所以要在30分鐘內(nèi)讀取標(biāo)準(zhǔn)液和樣品所得參數(shù)。計(jì)算，通過減去所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的讀數(shù)中零含量的鈣控制的派生值來矯正背景(注意：背景讀數(shù)可能是顯著的，而且必須從這些樣品讀數(shù)中減去)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線Mg/wellvs.O.D.575nm讀數(shù)，將樣品讀數(shù)應(yīng)用到標(biāo)準(zhǔn)曲線中以得到管槽中樣品的鈣含量(Sa)，測試樣品中鈣離子濃度C=Sa/Sv(ug/ulormg/ml注：Sa為標(biāo)準(zhǔn)曲線中樣品的鈣含量，單位ug。Sv為加入樣品管槽中樣品的體積，單位ul。Ca的相對分子質(zhì)量40.078。樣品中鈣濃度可以表達(dá)為mg/ml,mg/dLormM(mmol/liter)。1mg/ml=100mg/dL;1mM=4mg/dL.y=0.8847x+0.0098coco1.21.51.2CalciumAmount^jg/inrell]Figi.這是標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制96孔板簡介96孔細(xì)胞培養(yǎng)板、皿系列產(chǎn)品選用進(jìn)口光學(xué)透明純聚苯乙稀制造。采用特殊工藝而成，使細(xì)胞達(dá)到最佳吸附狀態(tài)，所有產(chǎn)品均以伽瑪射線滅菌處理。應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)系列能促進(jìn)原生代細(xì)胞：如神經(jīng)細(xì)胞