冠心病中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究進(jìn)展

冠心病中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究進(jìn)展

冠狀動(dòng)脈硬化是一種常見的臨床疾病。近年來，中醫(yī)在高血壓領(lǐng)域的動(dòng)態(tài)模式建設(shè)和病理控制機(jī)制的研究方面取得了一些成果?，F(xiàn)概述于下。1冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的動(dòng)物模型為1.1冠心病心陽虛證大鼠模型建立張明雪等予大鼠高脂飼料(2%膽固醇,10%豬油,0.2%甲基硫氧嘧啶,余為基礎(chǔ)飼料),連續(xù)6周,并每日冷藏于-2℃~-4℃冰柜中2h,連續(xù)6周,接著皮下多點(diǎn)注射腦垂體后葉素(pit)10U/kg,建立冠心病心陽虛證大鼠模型。結(jié)果造模各組大鼠血脂增高,光鏡下可見主動(dòng)脈壁有附壁血栓等。該模型采用的造模方法一是給予高脂飲食,使痰濁內(nèi)生;二是皮下注射pit使冠狀動(dòng)脈痙攣、缺血,導(dǎo)致血運(yùn)不暢,瘀血內(nèi)生,同時(shí),pit注射后大鼠表現(xiàn)的寒顫與寒邪傷陽證候類似;三是每日入冰柜冷藏2h,意在模擬寒邪內(nèi)侵,痹阻氣血而致瘀滯內(nèi)生,從而近似于冠心病陽虛為本、痰瘀為標(biāo)的病機(jī)特點(diǎn)。1.2模型的制備章忱等采用給大鼠喂飼高脂飲食(4%膽固酵、10%豬油、0.4%丙基硫氧嘧啶、85.6%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)3周,然后用20%烏拉坦(1.2g/kg體重)腹腔注射麻醉動(dòng)物,仰臥固定。分離左頸外靜脈,并注入垂體后葉素制備了胸痹痰濁凝滯證模型。采用以垂體后葉素合高分子右旋糖酐,造成胸痹心血瘀阻證模型。1.3造模前后耳緣靜脈放血張頁等給新西蘭大耳白兔高脂飼料60g(含1g膽固醇,15g蛋黃粉,5g豬油)加普飼喂養(yǎng),并于造模第2周開始,每周2次耳緣靜脈放血15mL/只,至8周結(jié)束。認(rèn)為給予兔高脂飼料喂養(yǎng),以造成食餌性動(dòng)脈粥樣硬化,同時(shí)根據(jù)中醫(yī)“氣血相依”、“氣為血帥”、“血為氣母”理論,于造模第2周放血,以達(dá)到放血耗氣目的,復(fù)制出理論上基本定性定位的氣虛痰濁冠心病模型。1.4灌服血府逐瘀湯合瓜白夏湯對(duì)大鼠心肌指標(biāo)的影響朱麗紅等以高脂飼料(按膽固醇∶豬油∶丙硫氧嘧啶∶基礎(chǔ)飼料=4∶10∶0.2∶86的比例配制)和脂肪乳液(豬油20g溶化后,加膽固醇10g,膽酸鈉2g,甲基硫氧嘧啶1g攪勻,加入20mL吐溫-80,蒸餾水加至100mL充分混勻)10mL·kg-1·d-1,喂飼大鼠,連續(xù)7周,并于第35天施冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)。觀察造模前、后大鼠的心電圖改變,檢測血脂、心肌酶及血液流變學(xué)指標(biāo),動(dòng)物處死后取心臟,稱質(zhì)量計(jì)算心臟指數(shù)。結(jié)發(fā)現(xiàn)模型組心電圖顯示心肌嚴(yán)重缺血,膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶、全血比黏度、紅細(xì)胞壓積及心臟指數(shù)均比正常組升高(P<0.001),而灌服血府逐瘀湯合瓜蔞薤白半夏湯的治療組對(duì)上述指標(biāo)均有改善作用。提示采用高脂飲食加冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)方法復(fù)制的動(dòng)物模型為冠心病痰瘀互結(jié)證動(dòng)物模型。2ami對(duì)大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響在冠心病及其中醫(yī)各證型實(shí)驗(yàn)研究中,心肌酶、血液流變學(xué)、血脂、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)、前列環(huán)素(PGI2)血漿6-酮-前列腺素(6-keto-PGFlα)、血栓素2(TXB2)、微循環(huán)、MDA、腫瘤壞死因子(TNF)、循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)等指標(biāo)應(yīng)用較多。多數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AMI組TNF含量、血漿MDA、全血中CEC、心肌酶水平和血液流變學(xué)指標(biāo)升高,血液黏滯度加大,均顯著高于空白對(duì)照組。血脂水平升高,NO降低、ET水平升高,血漿6-keto-PGFlα水平降低、TXB2水平升高、微循環(huán)障礙。中醫(yī)藥對(duì)上述指標(biāo)有調(diào)整作用。2.1血壓及心功能指標(biāo)檢測朱琳等采用大劑量異丙腎上腺素(ISOP,50mg/kg)皮下注射造成急性心肌缺血模型,并用欣怡膠囊預(yù)防。在ISOP造模前、造模后5min、30min、60min時(shí),分別測定實(shí)驗(yàn)各組心率(HR)、平均動(dòng)脈壓(MAP)、左室內(nèi)壓峰值(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、±dp/dtmax(左室壓力上升/下降的最大變化速率)等血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo),作為心功能評(píng)價(jià)。結(jié)果表明與基礎(chǔ)值比較,空白對(duì)照組心臟舒縮功能減退,MAP、LVSP及±dp/dtmax下降,HR、LVEDP上升(P<0.01)。而欣怡膠囊不同劑量組各項(xiàng)指標(biāo)均有一定改善,高劑量組更為顯著(P<0.05~0.01);提示欣怡膠囊具有改善急性心肌缺血大鼠血流動(dòng)力學(xué),保護(hù)心功能的作用。2.2圖結(jié)構(gòu)影響圖于震等利用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支的方法造成大鼠急性心肌缺血—再灌注損傷,觀察九香氣霧劑(麝香、冰片為主)對(duì)急性心肌缺血—再灌注損傷大鼠心電圖的影響。結(jié)果表明九香氣霧劑能明顯降低大鼠因冠脈結(jié)扎所致急性心肌缺血期和再灌注期心電圖ST段抬高或壓低的幅度,與生理鹽水組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。謝人明等以垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血為模型,以恬爾心為對(duì)照,觀察中藥益氣通脈口服液對(duì)心肌缺血的作用。結(jié)果表明垂體后葉素所致的大鼠急性心肌缺血心電圖ST段升高和T波升高;益氣通脈口服液具有抗急性心肌缺血作用,且在一定用量范圍內(nèi)有劑量依賴性的對(duì)抗作用。2.3中藥止血湯對(duì)急性心肌缺血兔循環(huán)no和et的影響宮麗鴻采用結(jié)扎麻醉兔冠狀動(dòng)脈左前降支中段的方法,造成實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血的模型,探討中藥活血化瘀湯(人參、黃芪、當(dāng)歸、川芎、桃仁、水蛭、生地、炙甘草)對(duì)急性心肌缺血兔循環(huán)NO和ET的濃度的影響。結(jié)果顯示,急性心肌缺血時(shí)ET明顯升高,NO明顯下降,中藥活血化瘀湯可以提高NO濃度和降低ET水平。2.4對(duì)心肌缺血的作用童延清等觀察了心血通注射液(大血藤、丹參、山楂3種中藥的水溶性提取物按照8:4:3的比例組成)對(duì)大鼠垂體后葉素實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的血清肌酸磷酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)。結(jié)果表明心血通注射液可以抑制CK和LDH的溢出,減小實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的范圍。孫曉紅等探討仙人活心膠囊(淫羊藿、人參、瓜蔞、三七、丹參等)對(duì)冠心病心肌缺血心肌損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。結(jié)果表明仙人活心膠囊能明顯降低血清LDH、α-羥基丁酸酶(α-HBD)、CK及CK-MB活性;能明顯改善垂體后葉素所致的大鼠心電圖ST-T段的偏移。譚達(dá)全等采用垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血模型,觀察血府逐瘀湯對(duì)大鼠血清乳酸脫氫(LDH)、肌酸激酶(CK)的影響。結(jié)果證明,血府逐瘀湯能明顯降低CK、LDH的含量,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。2.5益心膠囊對(duì)3、6-keto-pgf1表達(dá)的影響周亞濱等觀察了益心膠囊(丹參、瓜蔞、乳香、五靈脂、延胡索、積殼、柴胡、白芍)對(duì)急性心肌缺血家兔模型血漿PGI2及心肌組織6-keto-PGF1α含量的影響。結(jié)果顯示,模型組6-keto-PGF1α水平明顯低于假手術(shù)組,兩組比較差異顯著(P<0.05);益心膠囊組6-keto-PGF1α水平均較模型組升高,差異顯著(P<0.05)。提示益心膠囊能夠顯著提高實(shí)驗(yàn)性心肌缺血損傷家兔血漿及心肌組織PGI2含量,對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能具有保護(hù)作用。2.6克心絞痛滴鼻劑對(duì)大鼠心肌生化指標(biāo)的影響司秋菊等采用腦垂體后葉素20U/kg腹腔注射誘發(fā)心肌缺血,并觀察了蜈蚣有效成分的作用。結(jié)果表明,模型組LDH、MDA明顯升高,SOD、NO水平顯著降低,蜈蚣治療組SOD、NO含量顯著提高,LDH、MDA明顯降低。且蜈蚣大劑量(5g/kg)較小劑量(2.5g/kg)治療組作用更加明顯。王華等采用垂體后葉素及冰水應(yīng)激法致大鼠心肌缺血模型,并觀察克心痛滴鼻劑對(duì)模型大鼠心電圖、心肌酶、SOD、MDA的影響。結(jié)果表明克心痛滴鼻劑可改善心肌缺血大鼠心電圖表現(xiàn),降低LDH、CK及MDA的含量,升高SOD含量。提示克心痛滴鼻劑可改善心肌供血,防治心肌損傷,提高抗氧化能力,從而起到防治冠心病心絞痛的作用。韓麗華等用高脂高膽固醇飼料致兔動(dòng)脈粥樣硬化模型,觀察寬胸丹(瓜蔞、陳皮、枳實(shí)、川芎、水蛭、蒼術(shù)、甘草)的作用。結(jié)果表明,模型組較正常組SOD活性降低,LPO、oxLDL值增高,差異有顯著性(P<0.05);寬胸丹大、小劑量組均能明顯增加SOD活性、降低LPO、oxLDL值,與模型組比較差異有顯著性(P<0.05),且優(yōu)于多烯康組(P<0.05)。2.7各組大鼠血漿通脈顆粒干預(yù)前后主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈的變化肖純等采用高脂飲食(含5%豬油、0.5%膽固醇)復(fù)制成動(dòng)脈粥樣硬化模型,觀察通脈顆粒(制首烏、紅參,麥冬、川芎、郁金、枳實(shí)等)治療前后血脂水平變化及主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈病理形態(tài)改變。結(jié)果表明各模型組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)血漿甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白均明顯上升,但通脈顆粒干預(yù)組上升幅度低于模型組,其中大劑量組上升幅度最小,與其他各組比較有顯著性差異(P<0.05);空白對(duì)照組主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈正常,其余各組均有不同程度粥樣斑塊形成和冠狀動(dòng)脈狹窄;主動(dòng)脈斑塊厚度、斑塊覆蓋面積占整條主動(dòng)脈面積的百分比以及狹窄冠狀動(dòng)脈百分比,大小劑量組均比模型組小,而大劑量組最小(P<0.05)。提示通脈顆?？娠@著降低動(dòng)脈粥樣硬化免模型的血脂水平、延緩動(dòng)脈粥樣斑塊的發(fā)生發(fā)展。2.8對(duì)水肌缺血的作用張賽英等采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈所致心肌缺血的大鼠模型,觀察心痛靈對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的作用。結(jié)果表明心痛靈能降低血清酶活性,調(diào)節(jié)內(nèi)皮素/降鈣素基因相關(guān)肽(ET/CGRP)之間的平衡。2.9治療組采用治療法,增加生物組織化學(xué)細(xì)胞增殖,提高表型轉(zhuǎn)變陳可冀等用球囊擴(kuò)張損傷豬冠狀動(dòng)脈左前降支中段的方法建立再狹窄模型,并在術(shù)前2天開始給芎芍膠囊(川芎總酚和赤芍總苷制成芎芍膠囊)小劑量(0.02g·kg-1·d-1)、大劑量組(0.04g·kg-1·d-1),持續(xù)至術(shù)后4周。結(jié)果表明,芎芍膠囊可通過抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和表型轉(zhuǎn)變(影響平滑肌細(xì)胞增殖相關(guān)基因蛋白表達(dá)和細(xì)胞跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)),誘導(dǎo)新生內(nèi)膜中增生的細(xì)胞發(fā)生凋亡,對(duì)動(dòng)脈損傷后內(nèi)膜中細(xì)胞增殖水平進(jìn)行調(diào)控;減少球囊損傷后新生內(nèi)膜中的膠原沉積,使其排列趨于規(guī)則;抑制動(dòng)脈損傷術(shù)后病理性血管重塑,從而共同起到抑制豬冠狀動(dòng)脈球囊損傷后內(nèi)膜增厚、減少管腔喪失、預(yù)防最狹窄形成的作用。2.10總皂苷對(duì)isop所致大鼠心肌缺血病理損傷程度的作用機(jī)制探討張騰等應(yīng)用異丙腎上腺素(ISOP)復(fù)制心肌缺血損傷的動(dòng)物模型,采用光、電鏡技術(shù)和基因表達(dá)芯片技術(shù)驗(yàn)證三七總皂苷的作用并探索其分子作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能夠顯著減輕ISOP所致的大鼠心肌缺血病理損傷程度;在基因表達(dá)譜的研究中共篩選出80條差異表達(dá)基因,其中模型/正?；虮磉_(dá)譜中篩選出58條差異表達(dá)基因,模型/治療基因表達(dá)譜中篩選出24條差異表達(dá)基因。認(rèn)為三七總皂苷可能是通過多條途