天然藥物化學(xué)-甾體及其苷類(lèi)8

衛(wèi)生部規(guī)劃教材——天然藥物化學(xué)（第5版）STEROIDESANDGLUCOSIDES

SectionOne

Introduction

天然廣泛存在的一類(lèi)化學(xué)成分，種類(lèi)很多，包括動(dòng)植物甾醇（也稱(chēng)固醇）、膽酸、維生素D、動(dòng)物激素、腎上腺皮質(zhì)激素、植物強(qiáng)心苷、蟾酥毒素、甾體生物堿、甾體藥物、昆蟲(chóng)激素等。雖然這些成分來(lái)源不同、生理活性不同，但它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)中都具有甾體母核----環(huán)戊烷駢多氫菲。這類(lèi)成分涉及到生理、保健、節(jié)育、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)等多方面，對(duì)動(dòng)植物的生命活動(dòng)起著重要的作用。一、甾體的定義

又名類(lèi)固醇化合物（steroids），因其結(jié)構(gòu)中都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾核。

1936年給這類(lèi)化合物提出一個(gè)總稱(chēng)“甾體化合物”，“甾”字很形象化地表示了這類(lèi)化合物的骨架，即在含有四個(gè)稠合環(huán)“田”字上面連有三個(gè)支鏈“〈〈〈”。

C-10、C-13上各有一個(gè)甲基，稱(chēng)為角甲基。C-17位有側(cè)鏈。1928-1960年，動(dòng)物激素的發(fā)現(xiàn)和工業(yè)生產(chǎn)。

1960-80年代末，避孕藥物的合成及其應(yīng)用與昆蟲(chóng)激素的發(fā)現(xiàn)。二、研究進(jìn)展1903-1932年，甾醇及膽酸的研究闡明了甾體的碳架結(jié)構(gòu)。三、基本結(jié)構(gòu)和分類(lèi)在甾體母核上，大都存在C-3羥基，可和糖結(jié)合成苷。而C-17側(cè)鏈有顯著差別，根據(jù)C-17側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的不同，可將天然甾類(lèi)分為不同類(lèi)型。分類(lèi)C17側(cè)鏈A/BB/CC/DC21甾類(lèi)羥甲基衍生物反反順強(qiáng)心苷類(lèi)不飽和內(nèi)酯環(huán)順、反反反甾體皂苷類(lèi)含氧螺雜環(huán)順、反反反植物甾醇脂肪烴順、反反反昆蟲(chóng)變態(tài)激素脂肪烴順?lè)捶茨懰犷?lèi)戊酸順?lè)捶此?、立體化學(xué)

甾體母核有七個(gè)手性碳原子，C-5、C-8、C-9、C-10、C-13、C-14、C-17,故理論上應(yīng)有27=128種光學(xué)異構(gòu)體，但由于稠環(huán)的存在及其引起的空間阻礙，實(shí)際上可能存在的異構(gòu)體大大減少，一般只以穩(wěn)定的構(gòu)型存在。1.母核的構(gòu)型：甾體化合物的四個(gè)環(huán)之間，每?jī)蓚€(gè)環(huán)以碳碳單鍵稠和時(shí)，可以是順式的，也可以是反式的。A/B環(huán)有順式(5-βH)或反式(5-αH)稠和。B/C環(huán)是反式稠和（8-βH/9-αH)。C/D環(huán)有順式(14-βH)或反式稠和(14-αH)。（1）正系：A/B環(huán)為順式，B/C反式，C/D反式，C5-H及C10-CH3處于環(huán)平面同一邊，以糞甾烷（coprostane）為代表。510（2）別系或異系：A/B為反式，B/C反式，C/D反式。C5-H及C10-CH3不處于環(huán)平面同一邊，以膽甾烷（cholestane）為代表。105許多甾體化合物，于C5處形成雙鍵，

故區(qū)分A/B環(huán)稠和時(shí)構(gòu)型的因素不存在，

故無(wú)正系、別系的區(qū)別。52.取代基的構(gòu)型：天然甾類(lèi)成分C10、C13、C17側(cè)鏈大多為β-構(gòu)型，以實(shí)線表示。由于C3上有羥基，故取代基的構(gòu)型實(shí)質(zhì)上是指C3羥基的空間排列，有兩種類(lèi)型的異構(gòu)體：

C3-OH,C10-CH3

順式:β型（實(shí)線表示）

C3-OH,C10-CH3反式:α型或epi(表)型

（虛線表示）五、甾類(lèi)成分的顏色反應(yīng)甾類(lèi)成分在無(wú)水條件下，用酸處理，能產(chǎn)生各種顏色反應(yīng)，用這些反應(yīng)來(lái)初步鑒別該類(lèi)成分或供比色分析(1-4常用)。（與三萜化合物類(lèi)似）

1.Liebermann-burchard反應(yīng)樣品溶于冰醋酸，加濃硫酸-醋酐(1:20)，產(chǎn)生紅紫藍(lán)綠污綠等顏色變化，最后褪色。2.Salkowski反應(yīng)樣品溶于氯仿，沿管壁滴加濃硫酸，氯仿層顯血紅色或青色，硫酸層顯綠色熒光。3.三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)將樣品醇溶液點(diǎn)于濾紙上，噴以20%三氯化銻（或五氯化銻）氯仿溶液（不應(yīng)含乙醇和水）干燥后，60-70℃加熱，顯黃色、灰藍(lán)色、灰紫色斑點(diǎn)。4.Rosenheim反應(yīng)：A.樣品25%三氯醋酸乙醇液紅色、紫色分子中有共軛雙烯結(jié)構(gòu)或經(jīng)三氯醋酸作用，生成物具共軛雙烯結(jié)構(gòu)。B.25%三氯醋酸乙醇液---3%氯胺T水液（4：1）樣品熒光反應(yīng)毛地黃強(qiáng)心苷類(lèi)的區(qū)別毛地黃毒苷類(lèi)：黃色羥基毛地黃毒苷類(lèi)：蘭色異羥基毛地黃毒苷類(lèi)：灰黃色6.Lifschutz反應(yīng)：樣品冰醋酸液過(guò)氧苯甲酸結(jié)晶（C6H5COO2H）△H2SO4呈色7.Tortellijaffe反應(yīng)：樣品冰醋酸液2%溴-氯仿液界面呈綠色5.Tschugaev反應(yīng)：樣品冰醋酸液

氯化鋅+乙酰氯淡紅或紫紅△膽甾醇（cholesterol）三氯化銻反應(yīng)黃—紅色2，4-膽甾二烯3，5-膽甾二烯其反應(yīng)機(jī)理較復(fù)雜，無(wú)色的甾體化合物在無(wú)水條件下和濃酸作用，首先是C-3含氧小基團(tuán)的質(zhì)子化而形成烊鹽（此時(shí)加水稀釋可回收甾醇），進(jìn)一步則脫水形成共軛雙鍵，然后產(chǎn)生雙鍵移位或雙分子聚合或氧化等過(guò)程，生成有色物，故有色物多為復(fù)雜混合物。例：SectionTwo

Steroides一、C21甾體化合物

（一）定義C21甾(C21-steroides）是一類(lèi)含有21個(gè)碳原子的甾體衍生物，由植物中分離出的C21甾類(lèi)都是以孕甾烷（pregnane）或其異構(gòu)體為基本骨架。是目前廣泛應(yīng)用于臨床的一類(lèi)重要藥物，具有抗炎、抗腫瘤、抗生育等方面生物活性。1．C21甾苷類(lèi)大都與皂苷、強(qiáng)心苷共存于中藥中如洋地黃葉和種子中，含有強(qiáng)心苷、皂苷及C21甾苷（稱(chēng)為洋地黃醇苷或洋地黃醇苷類(lèi)）。其無(wú)強(qiáng)心作用，水解可生成糖及苷元。杠柳的根皮及樹(shù)皮稱(chēng)北五加皮，其中含多種甾苷，除強(qiáng)心苷--杠柳苷外，還含C21甾苷。2．有些植物，不含強(qiáng)心苷，而含C21甾苷，多存在于蘿摩科。如從牛皮消中得到的牛皮消苷元、本波苷元、林里奧酮等均屬C21甾苷。（三）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)A/B反；B/C反；C/D順。

C5、C6位大多有雙鍵；C20位可能有羰基；C17位上的側(cè)鏈多為a構(gòu)型。

C3、C8、C12、C14、C17、C20等位置可能有β–OH；

C21位可能有a–OH。

C11、C12羥基可能和醋酸、苯甲酸、桂皮酸等結(jié)合成酯。

C3–OH有時(shí)和糖縮合成苷類(lèi)存在。ⅠⅡ（四）結(jié)構(gòu)類(lèi)型Ⅲ（五）理化性質(zhì)1．大都是結(jié)晶形化合物；一般親脂性較強(qiáng)（分子中往往存在酯鍵）;可溶于石油醚、乙醚等親脂性溶劑中，不溶于水；C21甾苷類(lèi)水溶性增大。界面及醋酸層顏色變化（藍(lán)、藍(lán)綠色）苷元不同而不同2．具甾體化合物的顏色反應(yīng)。

由于C21甾苷類(lèi)分子中2-去氧糖的存在，故存在Keller—kiliani顏色反應(yīng)（強(qiáng)心苷類(lèi)顏色反應(yīng)）

C21甾苷類(lèi)溶于含少量Fe3+(FeCl3或Fe2(SO4)3)

的冰醋酸，沿管壁滴加濃H2SO4二、海洋甾體化合物

見(jiàn)P316SectionThree

CardiacGlycosides

一、定義強(qiáng)心苷（cardiacglycosides）是存在于植物中具有強(qiáng)心作用的甾體苷類(lèi)化合物，由強(qiáng)心苷元和糖縮合而產(chǎn)生的一類(lèi)苷。

目前臨床應(yīng)用的有二、三十種，用于治療充血性心力衰竭及節(jié)律障礙等心臟疾病，如西地蘭、地高辛、毛地黃毒苷等。但強(qiáng)心苷類(lèi)能興奮延髓催吐化學(xué)感受區(qū)而引起惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)；且有劇毒，若超過(guò)安全劑量時(shí)，可使心臟中毒而停止跳動(dòng)。其中某些強(qiáng)心苷對(duì)動(dòng)物腫瘤有效，主要是細(xì)胞毒作用。1785年，W.Withering使用洋地黃葉治療水腫，到現(xiàn)在已從十幾個(gè)科一百多種植物中發(fā)現(xiàn)強(qiáng)心苷類(lèi)，主要有夾竹桃科、玄參科、蘿摩科、衛(wèi)矛科、百合科、大戟科等等。較重要的植物有黃花夾竹桃、紫花洋地黃、毛花洋地黃、杠柳、鈴藍(lán)、海蔥、福壽草、羊角拗等。動(dòng)物中尚未發(fā)現(xiàn)有強(qiáng)心苷類(lèi)成分，蟾蜍(chanchu)中所含的蟾毒也對(duì)心肌有興奮作用，具強(qiáng)心作用，但其非苷類(lèi)，而屬甾類(lèi)。二、生物合成以甾醇為母體經(jīng)多次轉(zhuǎn)化而逐漸生成涉及到大約20種酶的作用，如還原酶、氧化還原酶、苷化酶、乙?；傅?。毛地黃中的強(qiáng)心苷元的形成過(guò)程：強(qiáng)心苷生物合成途徑：三、化學(xué)結(jié)構(gòu)和分類(lèi)

（一）苷元部分1.基本結(jié)構(gòu)強(qiáng)心苷是由強(qiáng)心苷元（cardiacaglycone）與糖（sugar）二部分構(gòu)成。（1）苷元母核苷元母核A,B,C,D四個(gè)環(huán)的稠合構(gòu)象對(duì)強(qiáng)心苷的理化及生理活性有一定影響。天然界存在的強(qiáng)心苷元B/C環(huán)是反式，C/D環(huán)是順式，A/B環(huán)大多數(shù)為順式----洋地黃毒苷元(digitoxigenin)，少數(shù)為反式----烏沙苷元(uzarigenin)。

C11,C12和C19位可能連羰基；C4,5、C5,6、C9,11、C16,17可能有雙鍵。（2）取代基苷元母核上的C3,C14位上都有羥基：C3位-OH多為β-型---洋地黃毒苷元，少數(shù)為α-型(命名時(shí)冠以“表”字)——3-表洋地黃毒苷元(3-epidigitoxigenin)。C14位-OH都是β-型(C/D環(huán)順式)。C10，C13，C17位有側(cè)鏈，C10，C13多為β-CH3。C17位側(cè)鏈為不飽和內(nèi)酯環(huán)。1417101315

這兩類(lèi)大都是β-構(gòu)型，個(gè)別為α-構(gòu)型，α-型無(wú)強(qiáng)心作用。

2.結(jié)構(gòu)類(lèi)型根據(jù)C17位側(cè)鏈的不飽和內(nèi)酯環(huán)不同分為：甲型：C17位側(cè)鏈為五元環(huán)的△

-

內(nèi)酯乙型：C17位側(cè)鏈為六元環(huán)的△

,

-δ內(nèi)酯甲型強(qiáng)心苷元：C17位上連五元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即△αβ-γ-內(nèi)酯----強(qiáng)心甾烯型。以強(qiáng)心甾（cardenolide）為母核命名。乙型強(qiáng)心苷元C17位上連六元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即△αβ，γδ----雙烯-δ-內(nèi)酯，分為海蔥甾二烯和蟾蜍甾二烯。以海蔥甾（scillanolide）或蟾蜍甾(bufanolide)為母核命名。

（1）6-去氧糖如：L-夫糖、D-雞納糖等。（2）6-去氧糖甲醚如：L-黃夾糖、D-洋地黃糖等。（二）糖部分構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖又20多種，根據(jù)C2位上有無(wú)-OH分為α-OH糖及α-去氧糖兩類(lèi)。后者主要見(jiàn)于強(qiáng)心苷。1.

-羥基糖除廣泛分布于植物界的D-葡萄糖、L-鼠李糖外，還有：轉(zhuǎn)572.

-去氧糖（1）2,6-二去氧糖如：D-洋地黃毒糖等。（2）2,6-二去氧糖甲醚如：L-夾竹桃糖、D-加拿大麻糖等。（三）構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖對(duì)強(qiáng)心作用的影響構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖數(shù)目和種類(lèi)不同，對(duì)強(qiáng)心苷活性影響不同。P334甲型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性(活性)規(guī)律一般為：

苷元<單糖苷>二糖苷>三糖苷單糖苷的毒性次序?yàn)椋?/p>

葡萄糖苷>甲氧基糖苷>6-去氧糖苷>2,6-去氧糖苷

乙型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性規(guī)律一般為：

苷元>單糖苷>二糖苷

乙型強(qiáng)心苷元的毒性>相應(yīng)的甲型強(qiáng)心苷元（四）糖和苷元的連接方式強(qiáng)心苷中，多數(shù)是幾種糖結(jié)合成低聚糖形式再與苷元的C3-OH結(jié)合成苷，少數(shù)為雙糖苷或單糖苷。糖和苷的連接方式有三種：Ⅰ型:苷元-(2,6-去氧糖)X-(D-葡萄糖)YⅡ型:苷元-(6-去氧糖)X-(D-葡萄糖)YⅢ型：苷元-（D-葡萄糖）Y

一般初生苷其末端多為葡萄糖。（五）結(jié)構(gòu)舉例四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)

（一）理化性質(zhì)1.性狀：強(qiáng)心苷多為無(wú)色結(jié)晶或無(wú)定形粉末中性物質(zhì)有旋光性C17側(cè)鏈為

-構(gòu)型的味苦，α-構(gòu)型味不苦，但無(wú)效對(duì)粘膜有刺激性2．溶解度強(qiáng)心苷的溶解性與所連糖的種類(lèi)和數(shù)目有關(guān);一般可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等極性溶劑；難溶于乙醚、苯、石油醚等非極性溶劑;

弱親脂性苷微溶于氯仿-乙醇(2:1);親脂性苷微溶于醋酸乙酯、含水氯仿、氯仿-乙醇（3:1）。洋地黃毒苷一般糖基多的原生苷比次生苷或苷元的親水性強(qiáng)、親脂性弱，可溶于水等高極性溶劑而難溶于低極性溶劑，多為無(wú)定形粉末。

洋地黃毒苷是一個(gè)三糖苷，但3分子糖都是洋地黃毒糖，整個(gè)分子只有5個(gè)羥基，故在水溶液中溶解度小(1:100000000)，溶于氯仿（1:40）。

當(dāng)糖基與苷元上的羥基數(shù)目相同時(shí)，苷元上的羥基不能形成分子內(nèi)氫鍵的比能形成分子內(nèi)氫鍵的水溶性大。

如毛花洋地黃苷乙和毛花洋地黃苷丙，都是四糖苷，整個(gè)分子中有8個(gè)羥基，四個(gè)糖的種類(lèi)也相同，苷元上羥基的數(shù)目也相同，僅位置不同，前者是C14,C16二羥基，其中C16羥基能和C17內(nèi)酯環(huán)的羰基形成分子內(nèi)氫鍵，后者是C12,C14–二羥基，不能形成分子內(nèi)氫鍵，所以毛花洋地黃苷丙在水中的溶解度（1:18500）比毛花洋地黃苷乙大。在氯仿中的溶解度，毛花洋地黃苷丙（1:1750）小于毛花洋地黃苷乙（1:550）。烏本苷

但糖基和苷元上羥基數(shù)目的多少對(duì)溶解性也有一定的影響。如烏本苷是一個(gè)單糖苷，卻有8個(gè)羥基，水溶性很大（1:75），難溶于氯仿。3．脫水反應(yīng)強(qiáng)心苷混合強(qiáng)酸（3%-5%HCl）加熱水解時(shí)，苷元往往發(fā)生脫水反應(yīng)。

（1）C14-OH最易發(fā)生脫水反應(yīng)生成縮水苷元。

（2）

同時(shí)存在C14-OH和C16-OH，也易脫水，得到二縮水苷元。15（3）如將C3-OH氧化為酮基，則更使C5叔羥基活化，在溫?zé)釛l件下即可脫水而形成烯酮。同樣，C16被氧化為酮基，也能促使C14-叔羥基脫水而形成烯酮。（4）若C4位有雙鍵，可促使C3-OH與C4-H脫水，生成共軛雙鍵。154．水解反應(yīng)水解反應(yīng)是研究強(qiáng)心苷組成的常用方法，分化學(xué)方法和生物方法兩大類(lèi):化學(xué)方法主要有酸水解、堿水解和乙酰解；生物方法主要有酶水解。糖部分不同，其水解產(chǎn)物難易及產(chǎn)物均不同。（二）苷鍵的水解A.

溫和酸水解：

用稀酸（0.02-0.05mol/L)的鹽酸或硫酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間（半小時(shí)至數(shù)小時(shí)）加熱回流，可使Ⅰ型強(qiáng)心苷水解成苷元和糖。Ⅰ型:苷元-(2,6-去氧糖)X-(D-葡萄糖)Y主要水解苷元和α-去氧糖之間的苷鍵或

α-去氧糖與α-去氧糖之間的糖鍵。而α-去氧糖與葡萄糖之間的糖鍵不易切斷。對(duì)苷元影響較小，不會(huì)引起脫水反應(yīng)。但不適于16位有甲酰基的洋地黃強(qiáng)心苷類(lèi)，在此種條件下，16位甲?；鉃榱u基，得不到原生苷元。Ⅰ型:苷元-(2,6-去氧糖)X-(D-葡萄糖)YB.

強(qiáng)烈酸水解用較濃酸（3%--5%）長(zhǎng)時(shí)間加熱回流或同時(shí)加壓，可水解Ⅱ型和Ⅲ型強(qiáng)心苷，得到定量的葡萄糖?？伤猞?羥基糖。因?yàn)棣廖坏牧u基阻礙了苷原子的質(zhì)子化，使水解較困難。

但此法常引起苷元失去1分子或數(shù)分子水,形成脫水苷元，即次生苷。Ⅱ型:苷元-(6-去氧糖)X-(D-葡萄糖)YⅢ型：苷元-（D-葡萄糖）YC.氯化氫丙酮法(Mannichhe和Siewert法）

Mannich和Siewert將烏本苷置于含1%氯化氫的丙酮中，20℃放置兩周并時(shí)時(shí)振搖，得到原生的烏本苷元單丙酮化合物和氯代L-鼠李糖丙酮化合物,再用稀酸水解烏本苷元單丙酮化合物而得到烏本苷元。此法適于對(duì)鈴藍(lán)毒苷及多數(shù)Ⅱ型苷進(jìn)行水解，可得到原生苷元。多用于單糖苷。某些Ⅱ型苷如黃甲次苷也用此法得不到原生苷而是縮水苷元。P3242.酶水解法含強(qiáng)心苷的植物中，有水解葡萄糖的酶，無(wú)水解α-去氧糖的酶，所以能水解除去分子中的葡萄糖而保留α-去氧糖。

蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有的苷鍵，能將強(qiáng)心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，常用來(lái)研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。紫花洋地黃苷A紫花苷酶洋地黃毒苷+D-葡萄糖紫花洋地黃苷B紫花苷酶羥基洋地黃毒苷+D-葡萄糖

3.堿水解法強(qiáng)心苷的苷鍵為縮醛結(jié)構(gòu)，可被酸或酶水解，而不被堿水解。堿試劑主要使分子中的?；?、內(nèi)酯環(huán)裂開(kāi)、△20（22）轉(zhuǎn)位及苷元異構(gòu)化等。（1）?；乃庠趶?qiáng)心苷的苷元或糖基上常有?；嬖冢话憧捎脡A試劑處理使酯鍵水解脫去?；??！鳱aHCO3,KHCO3-----使α-去氧糖上的?；?，而α-羥基糖及苷元上的?；嗖槐凰?；▲Ca(OH)2,Ba(OH)2----使α-去氧糖、α-羥基糖及苷元上的?；?；

▲NaOH堿性太強(qiáng)，不但使所有?；?，還使內(nèi)酯環(huán)破裂，故很少使用。（2）內(nèi)酯環(huán)的水解NaOH或KOH的水溶液使內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂，酸化后又閉環(huán)。但在強(qiáng)心苷的醇溶液中加NaOH或KOH內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂，酸化后不能閉環(huán)。甲型強(qiáng)心苷在醇性KOH溶液中，通過(guò)內(nèi)酯環(huán)的雙鍵轉(zhuǎn)移和質(zhì)子轉(zhuǎn)移形成C22活性亞甲基，C14羥基質(zhì)子對(duì)C20的親電性加成作用而生成內(nèi)酯型異構(gòu)化苷，再經(jīng)皂化作用開(kāi)環(huán)而生成開(kāi)鏈型異構(gòu)化苷。乙型強(qiáng)心苷在醇性KOH溶液中，不發(fā)生雙鍵轉(zhuǎn)移，但內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂生成酯，再脫水形成開(kāi)鏈型異構(gòu)化苷。五．顏色反應(yīng)

強(qiáng)心苷顏色反應(yīng)很多，根據(jù)顏色反應(yīng)發(fā)生在分子的不同部位可分為三類(lèi)：

（一）作用于甾體母核的反應(yīng)：

1.Liebermann-burchard反應(yīng)

2.Salkowski反應(yīng)

3.三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)

（二）作用于α,β不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)：

甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，發(fā)生雙鍵轉(zhuǎn)移，生成活性亞甲基，故可與活性亞甲基試劑作用而顯色。

乙型強(qiáng)心苷無(wú)此類(lèi)反應(yīng)。

1.Legal反應(yīng)（亞硝酰鐵氰化鈉試劑）：

取樣品1-2mg，溶于2-3滴吡啶中，加一滴3%亞硝酰鐵氰化鈉溶液和一滴2mol/LNaOH溶液，樣品液呈深紅色并漸漸褪去。

2.Raymond反應(yīng)（間二硝基苯試劑）：

取樣品約1mg，以少量的50%乙醇溶解后加入0.1ml1%間二硝基苯乙醇溶液，搖勻后再加入0.2ml20%NaOH溶液，呈紫紅色。3.Kedde反應(yīng)

（3,5-二硝基苯甲酸試劑）

取樣品的甲醇或乙醇溶液于試管中，加入3,5-二硝基苯甲酸試劑3-4滴，產(chǎn)生紅或紫紅色。

4.Baljet反應(yīng)（堿性苦味酸試劑）

取樣品的甲醇或乙醇液于試管中，加入堿性苦味酸試劑數(shù)滴，呈現(xiàn)橙或橙紅色。有時(shí)需放置15min后顯色。1.

Keller-kiliani(K-K)反應(yīng)

此反應(yīng)是α-去氧糖的特征反應(yīng)，對(duì)游離的α-去氧糖或或在反應(yīng)條件下能水解出α-去氧糖的強(qiáng)心苷都可顯色。取樣品1mg溶于5ml冰乙酸中，加一滴20%三氯化鐵水溶液，傾斜試管，沿試管壁加入5ml濃硫酸，若有α-去氧糖存在，乙酸層漸呈藍(lán)或藍(lán)綠色。但若不顯色，不能說(shuō)明無(wú)α-去氧糖。（三）作用于α-去氧糖的反應(yīng)2.占噸氫醇反應(yīng):取樣品加入占噸氫醇試劑，置沸水浴中3min呈紅色。

3.過(guò)碘酸-對(duì)硝基苯胺反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈深

黃色斑點(diǎn)，紫外燈下為棕色背底上現(xiàn)黃色

熒光斑點(diǎn)。

4.對(duì)-硝基苯肼反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈紅色或紫

紅色。對(duì)α-去氧糖和葡萄糖結(jié)合的，K-K

反應(yīng)陰性的也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。

5.對(duì)-二甲氨基苯甲醛反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈灰

紅色斑點(diǎn)。五、強(qiáng)心苷的提取分離強(qiáng)心苷含量很低，多與糖類(lèi)、皂苷、色素、鞣質(zhì)等共存，這些成分的存在可影響強(qiáng)心苷在溶劑中的溶解度。同時(shí)，強(qiáng)心苷的原生苷和次生苷共存，且很多結(jié)構(gòu)相似的苷同存，故提取較難。因酸堿可使強(qiáng)心苷發(fā)生水解、脫水和異構(gòu)化，故提取分離時(shí)應(yīng)注意控制酸堿性。一、提取原生苷:抑制酶的活性(冷凍干燥、快速提取、快速干燥)MeOH、70%EtOH提取。次生苷:利用酶的活性,EtOH、EtOAc提取。二、純化1.用乙醚、氯仿脫脂；2.用鉛鹽法除去水溶性雜質(zhì)；3.吸附法三、分離常用方法：重結(jié)晶、逆流分配法、層析法六、強(qiáng)心苷的波譜特征UV

甲型：

max220nm(lg

4.34)

乙型：

max295-300nm(lg

3.93)IR

不飽和內(nèi)酯環(huán)的羰基峰:1800-1700cm-1兩個(gè)峰。甲型:1756cm-1;

1783cm-1（強(qiáng)度隨溶劑增加而減弱）。乙型:1718cm-1;

1740cm-1MS

甲型：m/z111,124,163,164

乙型：m/z109,123,135,136

若分子量>500，應(yīng)用FAB-MS或FD-MS可將糖-分子-分子打斷，靈敏度高；分子離子峰較強(qiáng)；提供糖鏈連接順序和糖的種類(lèi)信息；樣品用量少。1H-NMR18,19

-CH3

1.0;

18-CH3>

19-CH3

C10-CHO

10-9.5;C10-CH2OH?；?/p>

4.5-5.0(J=12Hz,2H,ABq);C3-H

3.90(m)成苷后向低場(chǎng)位移；

C16-H(若無(wú)含氧基團(tuán)取代)

2.0-2.5(m);C17-H

2.80(J=9.5Hz,m或dd)4.內(nèi)酯環(huán)五元內(nèi)酯環(huán)

C21-H

4.50-5.00(J=18Hz,寬s或t或ABq)C22-H

5.60-6.0（寬s）

六元內(nèi)酯環(huán)

C21-H

7.2（s）

C22-H

7.8（d）

C23-H

6.3（d）

糖分子上的質(zhì)子端基氫：

-D-glc

aaJ=6-8Hz

-L-rha

aeJ=2Hz13C-NMR一般用比較的方法。伯碳仲碳叔碳季碳醇碳烯碳羰基碳

12-2420-4135-5727-4365-91119-172177-210可判斷A/B環(huán)的構(gòu)象

10-CH3

A，B環(huán)上的碳

5

-甾體20較5

-甾體高場(chǎng)2-85

-甾體12六、強(qiáng)心苷的生理活性強(qiáng)心苷為心臟興奮劑，主要作用是延長(zhǎng)傳導(dǎo)時(shí)間，興奮心肌。其強(qiáng)心作用主要取決于苷元部分，但糖部分可增加強(qiáng)心苷對(duì)心肌的親和力，故對(duì)強(qiáng)心苷的生理活性也有影響。（一）苷元結(jié)構(gòu)與強(qiáng)心作用的關(guān)系1.強(qiáng)心苷元甾體母核必須具有一定的構(gòu)象和C17位連接的不飽和內(nèi)酯環(huán)及其

-構(gòu)型是不可缺少的，若異構(gòu)化為

-型或開(kāi)環(huán)或不飽和內(nèi)酯環(huán)被氫化或雙鍵位移，均無(wú)毒性或毒性顯著降低。2.C14位上-OH只有是

-構(gòu)型的才有效,C14-

OH如與鄰近的碳原子上的H脫水形成雙鍵或與C8脫氫成氧橋，均使強(qiáng)心作用減低或消失。C14-

OH可能是保持氧的功能和C/D環(huán)為順式構(gòu)象的重要因素。3.A/B環(huán)順式的甲型強(qiáng)心苷元，C3-OH必須是

-構(gòu)型，

-型無(wú)活性。4.C10-CH3氧化成羥甲基或醛基或羧酸后，可影響強(qiáng)心作用的強(qiáng)度或毒性，但不是決定因素。5.引入5

、11

、12

-OH有增強(qiáng)活性作用，而引入1

、6

、16

-OH有降低活性作用。6.在母核上引入雙鍵，對(duì)強(qiáng)心作用的影響不一致，引入

4（5）與引入5

-OH的影響相似，能增強(qiáng)活性，而引入

16（17）則活性消失或顯著下降。7.無(wú)論在苷元或糖基上增加乙?；加性鰪?qiáng)活性的作用。主要分布薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科、龍舌蘭科等單子葉植物中。1.定義

具有螺甾烷類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)母核的一類(lèi)皂苷。2.分布

一、概述SectionFour

SteroidalSaponins

3.生物活性

抗生育：殺滅精子、抗早孕主要用作合成甾體避孕藥和激素類(lèi)藥物的原料。

降血糖:偽原知母皂苷AⅢ和原知母皂苷AⅢ

降低膽固醇和免疫調(diào)節(jié)

抗真菌、殺蟲(chóng)等防治心腦血管疾病：地奧心血康膠囊——含8種由黃山藥中提取的甾體皂苷，總量在90%以上，治療冠心病。心腦舒通——由蒺藜(jili)果實(shí)中提取的總甾體皂苷，用于心腦血管疾病的防治。盾葉冠心寧——從盾葉薯蕷中提取的水溶性皂苷?？鼓[瘤：從百合科植物Ornithogalum

Saundersiae中分離出一種皂苷OSW-1,此化合物對(duì)人的正常細(xì)胞幾乎沒(méi)有毒性，而對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞具有強(qiáng)烈毒性。體外生理活性實(shí)驗(yàn)表明，它的抗癌活性比目前臨床應(yīng)用的順鉑、紫杉醇等高100倍，有望成為一類(lèi)新的抗癌藥物。二、化學(xué)結(jié)構(gòu)（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

1.分子具螺縮酮的結(jié)構(gòu)