影響精液質(zhì)量的因素分析

影響精液質(zhì)量的因素分析

作為一種傳統(tǒng)的臨床檢驗(yàn)方法，其質(zhì)量分析是臨床診斷男性不育的主要方法，也是衡量精子生產(chǎn)能力的重要參考指標(biāo)。精液質(zhì)量分析結(jié)果不僅反映了男性生理狀態(tài),同時(shí)對(duì)男性生育潛能也有一定的預(yù)測(cè)作用。精液質(zhì)量中各參數(shù)的相關(guān)性研究將會(huì)加深對(duì)男性不育的理解,從而為臨床男性不育的診斷治療提供客觀(guān)依據(jù)。我們利用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)(computerassistedsemenanalysissystem,CASA)對(duì)336份精液標(biāo)本進(jìn)行了質(zhì)量分析,手工評(píng)估精子形態(tài),并分析了患者年齡、精子密度和活率等質(zhì)量參數(shù)與精子形態(tài)的關(guān)系。材料和方法一、精子標(biāo)本分析樣本來(lái)自2007年11月至2008年6月在溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院就診的男性不育患者,按世界衛(wèi)生組織(WHO)《WHO人類(lèi)精液及精子—宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》(第4版)標(biāo)準(zhǔn)選擇密度、活率和活力均正常的336份精液標(biāo)本進(jìn)行分析?；颊吣挲g23~50歲,精子密度20.0~404.6×109/L,精子活率50.0%~96.0%。二、患者的年齡和禁忌時(shí)率禁欲3~7d,手淫取精液,置37℃水浴箱內(nèi)液化,并登記患者的年齡和禁欲時(shí)間。液化后用CASA進(jìn)行精液常規(guī)分析,主要分析精液中精子的密度、活率、活力和精液pH值及體積。三、精子正常形態(tài)率進(jìn)行精液常規(guī)分析后的標(biāo)本,根據(jù)精子密度進(jìn)行涂片。自然晾干后,置95%的乙醇中固定15min,固定后的精液涂片用改良巴氏染色法染色,染色封片后在光學(xué)顯微鏡100×油鏡下進(jìn)行形態(tài)分析。按《WHO人類(lèi)精液及精子—宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》(第4版)的方法操作。每片至少讀取200個(gè)精子,計(jì)算精子正常形態(tài)率。正常形態(tài)率≥15.0%為形態(tài)正常,15.0%>正常形態(tài)率≥10.0%為輕度畸形,10.0%>正常形態(tài)率≥5.0%為中度畸形,正常形態(tài)率<5.0%為重度畸形。同時(shí)分析了患者年齡、精子密度和活率對(duì)精子形態(tài)正常率、輕度畸形率、中度畸形率和重度畸形率的影響。四、統(tǒng)計(jì)方法試驗(yàn)中所得的結(jié)果采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果一、精子畸形率選擇精子密度、活率、活力均正常的精液標(biāo)本336份,形態(tài)學(xué)分析至少200個(gè)精子,其中正常形態(tài)率40.5%(136/336)、輕度畸形率30.7%(103/336)、中度畸形率22.0%(74/336)、重度畸形率6.8%(23/336)。二、患者年齡對(duì)精子形態(tài)的影響根據(jù)年齡,將患者分為20~29歲、30~39歲和≥40歲3組,分析患者年齡對(duì)精子形態(tài)的影響,結(jié)果見(jiàn)表1。3組之間在形態(tài)正常率、輕度畸形率、中度畸形率和重度畸形率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。三、精子密度對(duì)形態(tài)的影響根據(jù)精子密度將患者分為A組(20.0~49.9×109/L)、B組(50.0~99.9×109/L)和C組(100.0×109/L以上),分析精子密度對(duì)形態(tài)的影響,結(jié)果見(jiàn)表2。C組形態(tài)正常率明顯高于A(yíng)組(P<0.01),其他組間無(wú)差異(P>0.05)。3組間輕度畸形率無(wú)差異(P>0.05)。A組和B組中度畸形率明顯高于C組(P<0.01、P<0.05),而A、B組間無(wú)差異(P>0.05)。A組重度畸形率明顯高于B、C組(P<0.05),而B(niǎo)、C組間無(wú)差異(P>0.05)。三、精子活率對(duì)形態(tài)的影響根據(jù)精液中活動(dòng)精子的比例(即活率),將患者分為Ⅰ組(50.0%~59.9%)、Ⅱ組(60.0%~79.9%)、Ⅲ組(80.0%~100.0%)。分析精子活率對(duì)形態(tài)的影響,結(jié)果見(jiàn)表3。Ⅱ、Ⅲ組形態(tài)正常率明顯高于Ⅰ組(P<0.05、P<0.01),而Ⅱ、Ⅲ組間無(wú)差異(P>0.05)。3組間輕度畸形率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ組中度畸形率明顯高于Ⅲ組(P<0.05),而Ⅰ、Ⅱ組間無(wú)差異(P>0.05)。3組間重度畸形率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。精子密度、活率和形態(tài)正常的特點(diǎn)注意引起睪丸精子發(fā)生障礙本研究對(duì)336份精液精子密度、活率和活力均正常的標(biāo)本進(jìn)行了形態(tài)學(xué)分析,其中正常形態(tài)率為40.5%(136/336)、輕度畸形率為30.7%(103/336)、中度畸形率為22.0%(74/336)、重度畸形率為6.8%(23/336)。結(jié)果表明,患者年齡對(duì)精子的形態(tài)正常率沒(méi)有影響,而精子密度和活率對(duì)其有顯著的影響。人正常精子形態(tài)率下降是睪丸生理機(jī)能不良的一種反應(yīng),與其功能密切相關(guān),任何精子形態(tài)上的缺陷都將導(dǎo)致其功能下降,進(jìn)而影響男性生育力。研究認(rèn)為精子形態(tài)正常率不僅與精卵結(jié)合、頂體反應(yīng)和精子穿卵等受精過(guò)程息息相關(guān),而且精子形態(tài)正常與否在一定程度上也反映了精子染色質(zhì)濃縮程度和DNA片段化水平,從而對(duì)胚胎發(fā)育及輔助受孕起到一定的預(yù)測(cè)作用。因此準(zhǔn)確的形態(tài)分析結(jié)果為臨床判斷男性的生育能力提供有力依據(jù),同時(shí)可據(jù)此確定不育夫婦的臨床治療手段。隨著年齡的增長(zhǎng),睪丸間質(zhì)細(xì)胞和支持細(xì)胞數(shù)量和功能下降、睪丸灌注減少、睪丸持續(xù)的組織沉積,導(dǎo)致精子發(fā)生障礙。有研究發(fā)現(xiàn)精子的形態(tài)正常率隨年齡的增長(zhǎng)有顯著降低的趨勢(shì)。而本研究分析發(fā)現(xiàn)不同年齡段的正常形態(tài)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與之相比較,差異可能在于兩方面:一方面,選擇的患者所處的年齡不同,前者的研究未去除其中的少弱畸形精子癥患者,本研究則是選擇精子密度、活率和活力均正常的患者作為研究對(duì)象;另一方面,前者的研究患者年齡覆蓋各個(gè)年齡段,而本研究的患者年齡介于20~45歲之間,還沒(méi)有達(dá)到影響精液質(zhì)量的年齡階段。作為精液質(zhì)量分析中的2個(gè)重要參數(shù),精子密度和活率對(duì)生育能力有一定的預(yù)測(cè)作用。精液精子密度是睪丸生精功能的標(biāo)志,按照《WHO人類(lèi)精液及精子—宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》(第4版)的標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)精子密度低于20×106/mL即認(rèn)為有生育困難,低于5×106/mL即判斷為男性不育;而精子活率則反映了精子在附睪正常的成熟運(yùn)輸過(guò)程和精漿成分的正常組成。正常的精子密度和活率除了反映男性正常的生育能力外,也是精卵結(jié)合、發(fā)生頂體反應(yīng)和精卵融合等正常受精過(guò)程的重要保證。馬玉涵等研究發(fā)現(xiàn)精子形態(tài)異常組精子曲線(xiàn)速度、擺動(dòng)性和平均路徑速度均顯著高于精子形態(tài)正常組,而精子形態(tài)異常組精子平均移動(dòng)角度、直線(xiàn)性和前向性均顯著低于精子形態(tài)正常組;形態(tài)正常精子百分率與曲線(xiàn)速度、擺動(dòng)性和平均路徑速度呈顯著正相關(guān),而與側(cè)擺幅度有顯著負(fù)相關(guān)。本研究也發(fā)現(xiàn),隨著精子密度的增加,精子形態(tài)正常的患者比例明顯增加,而中重度畸形的患者比例出現(xiàn)顯著降低。這說(shuō)明精子形態(tài)與精子運(yùn)動(dòng)方式密切相關(guān):超激活運(yùn)動(dòng)后精子頭部畸形會(huì)導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)方式的差異;弱精癥精液中精子的中段和尾部畸形顯著增加。然而作為精液質(zhì)量中的3個(gè)關(guān)鍵參數(shù),精子密度、活率和形態(tài)三者總是相伴產(chǎn)生的,關(guān)于精子密度和活率對(duì)形態(tài)的影響可能只是次要原因,而外界因素在精子發(fā)生、成熟和運(yùn)輸過(guò)程中的作用才是可能導(dǎo)致精子密度、活率和形態(tài)發(fā)生變化的主要原因。精液質(zhì)量分析是評(píng)估男性不育的起始。以《WHO人類(lèi)精液及精子——宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》(第4版)為參考,當(dāng)重復(fù)精液質(zhì)量分析結(jié)果均異常時(shí),即診斷為男性不育。因此,在絕大多數(shù)臨床病例診斷中男性不育和精液質(zhì)量指標(biāo)的異常是聯(lián)系在一起的。然而由于人精子具有異質(zhì)性,即使來(lái)自有生育能力人的精液中也存在異