卵巢過度刺激綜合征患者血清和氣泡液中vegf和il-6的表達(dá)

卵巢過度刺激綜合征患者血清和氣泡液中vegf和il-6的表達(dá)

卵巢刺激綜合征（hhs）是在輔助生殖技術(shù)的控制下發(fā)生的嚴(yán)重并發(fā)癥。發(fā)病率為20%23%，重度發(fā)病率為0.3%5%。OHSS的發(fā)病機(jī)制目前尚未明確,其主要病理生理學(xué)變化是毛細(xì)血管的通透性增加和水鈉潴留,VEGF和IL-6有作用于血管的特性,與血管通透性的改變有關(guān)。本研究從臨床角度出發(fā),探討這兩種因子與OHSS發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,以期為明確OHSS的發(fā)病機(jī)制及臨床預(yù)測和防治OHSS提供依據(jù)。1對象和方法1.1研究主題1.2超聲檢查出的ohss診斷根據(jù)臨床癥狀、體征、超聲檢查的結(jié)果和實驗室檢查結(jié)果,分級依據(jù)1989年Golan等提出的OHSS的分級方案。輕度OHSS:特征是腹脹不適,惡心嘔吐和(或)腹瀉,卵巢增大至5~12cm;中度OHSS:有以上特征并加上超聲檢查發(fā)現(xiàn)腹水;重度OHSS:出現(xiàn)臨床證據(jù)的腹水和(或)胸水,或呼吸困難,甚至出現(xiàn)血容量變化、血黏滯度增加、凝血異常及腎灌注和腎功能下降。1.3vegf和il-6檢測方法收集3組患者肌肉注射hCG日、OPU日及ET日的外周靜脈血標(biāo)本各4ml,置無菌干燥離心管中,立即以3000r/min的速度離心10min,分離出血清,分裝后置-20℃冰箱保存。收集患者取卵時的卵泡液3ml,置無菌干燥離心管中,立即以3000r/min的速度離心,5min后吸出上清液,分裝后置于-20℃冰箱保存。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測VEGF和IL-6,試劑盒由晶美生物工程有限公司提供,IL-6試劑盒最低敏感度0.1pg/ml,批內(nèi)變異系數(shù)<9.5%;VEGF試劑盒最低敏感度15pg/ml,批內(nèi)變異系數(shù)<9.5%。1.4統(tǒng)計分析方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析,分析方法包括:兩組間均數(shù)的比較采用兩獨立樣本t檢驗,三組均數(shù)的比較采用方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1三組患者的vegf水平比較2.1.1不同時期血清vegf水平比較各組內(nèi)患者在IVF周期中血清VEGF呈現(xiàn)周期性變化,在hCG給藥日、OPU日和ET日呈升高趨勢,但不同時期血清VEGF水平的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。如表1所示。2.1.2中重度ohss對血清vegf水平的影響中重度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清VEGF水平均高于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為:0.887,1.151,1.034,P均>0.05。輕度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清VEGF水平和對照組相比,差異也無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為:0.041,0.318,0.349,P均>0.05。中重度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清VEGF水平均高于輕度OHSS組,但差別均無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為:0.869,0.661,1.612,P均>0.05。3組hCG給藥日、OPU日和ET日血清VEGF的水平如表1所示。2.1.3兩組vegf水平比較中、重度OHSS組OPU日卵泡液的VEGF水平最高為1965.81pg/ml,最低為751.65pg/ml,平均為(1485.08±442.28)pg/ml;輕度OHSS組最高為1568.29pg/ml,最低為751.65pg/ml,平均為(1027.28±306.82)pg/ml;對照組最高為1693.02pg/ml,最低為342.94pg/ml,平均(1000.13±383.89)pg/ml。t檢驗結(jié)果顯示:中、重度OHSS組卵泡液VEGF水平明顯高于對照組和輕度OHSS組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為:3.315,2.221,P均<0.05);輕度OHSS組卵泡液VEGF水平稍高于對照組,但兩者相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.162,P>0.05)。2.2三組之間的il-6等級的比較2.2.1不同時期血清il-6水平比較各組內(nèi)患者的血清IL-6水平在IVF周期中有所波動,由低到高依次為hCG給藥日、OPU日和ET日,但不同時期血清IL-6水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。如表2所示。2.2.2兩組hcg給藥日、opu日和et日血清il-6水平比較中重度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清IL-6水平均高于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為:0.891,1.099,1.983,P均>0.05。輕度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清IL-6水平和對照組相比,差異也無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為:0.563,0.660,0.922,P均>0.05。中重度OHSS組hCG給藥日、OPU日和ET日血清IL-6水平均高于輕度OHSS組,但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,t值分別為0.892,0.579,0.600,P均>0.05。三組hCG給藥日、OPU日和ET日血清IL-6的水平如表2所示。2.2.3各組opu日卵液il-6表達(dá)水平比較中重度OHSS組OPU日卵泡液的IL-6水平最高為97.99pg/ml,最低為11.99pg/ml,平均(48.66±28.69)pg/ml;輕度OHSS組最高為18.41pg/ml,最低為4.83pg/ml,平均為(12.03±6.47)pg/ml;對照組最高為27.31pg/ml,最低為2.24pg/ml,平均(9.13±6.52)pg/ml。t檢驗結(jié)果顯示:中重度OHSS組OPU日卵泡液IL-6水平明顯高于對照組和輕度OHSS組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為4.319,3.880,P均<0.01);輕度OHSS組的OPU日卵泡液IL-6水平稍高于對照組,但兩者相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.993,P>0.05)。3不同血清中vegf和il-6水平的預(yù)測VEGF和IL-6都是多功能細(xì)胞因子,在血管生成、血管通透性改變的生理病理過程中起中心調(diào)控作用,還參與調(diào)節(jié)卵巢內(nèi)的血管生成,和生殖關(guān)系密切。研究表明,OHSS的主要病理生理變化是毛細(xì)血管通透性增加,而OHSS的毛細(xì)血管通透性增加的重要部位是卵巢,有研究證實卵巢的卵泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞均表達(dá)VEGF,VEGF可增加血管的通透性,故有學(xué)者認(rèn)為,VEGF和OHSS的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。也有研究表明OHSS活動期卵泡液中的IL-6濃度升高,說明IL-6和OHSS的病理生理有密切聯(lián)系。本研究發(fā)現(xiàn),中重度OHSS組OPU日卵泡液VEGF和IL-6水平明顯高于對照組和輕度OHSS組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),提示卵泡液中高水平的VEGF和IL-6與OHSS的發(fā)病有關(guān),并且和OHSS的嚴(yán)重程度有關(guān),為前人的理論提供了依據(jù)。前人的研究發(fā)現(xiàn)OHSS患者取卵日卵泡液中IL-6水平顯著升高,認(rèn)為取卵日卵泡液中的IL-6水平可作為高危者OHSS早期發(fā)展的預(yù)測因子,本研究也得出了相似的結(jié)論。我們認(rèn)為,OPU日卵泡液的VEGF和IL-6水平可作為預(yù)測OHSS發(fā)生的指標(biāo),而且,卵泡液中的VEGF和IL-6水平較高,易于檢測,所以,檢測OPU日卵泡液中VEGF和IL-6水平可以在臨床工作中推廣。此外,本研究中輕度OHSS組的OPU日卵泡液VEGF和IL-6水平稍高于對照組,但兩者相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),原因可能和樣本量較小有關(guān),還有待擴(kuò)大研究的病例數(shù),以進(jìn)一步研究輕度OHSS卵泡液中VEGF和IL-6的水平。本研究在分別對3組間hCG給藥日、OPU日及ET日血清VEGF和IL-6的比較中發(fā)現(xiàn),中重度OHSS組在這3天的血清VEGF和IL-6水平均高于輕度OHSS組和對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05),故我們認(rèn)為測定血清VEGF和IL-6水平不足以預(yù)測OHSS發(fā)展的嚴(yán)重程度,這與Enskog等的研究結(jié)果一致,但不支持Ludwig等的研究,這可能與檢測方法、患者種族差異有關(guān),并且機(jī)體的其他諸多因素也可能影響血清中的VEGF和IL-6水平?，F(xiàn)在臨床常用的預(yù)測OHSS的指標(biāo)是hCG肌肉注射日血清E2值和獲卵數(shù),但有些OHSS患者的hCG給藥日血清E2水平并不高,相反,一些在hCG給藥日血清E2水平很高的婦女卻不發(fā)生OHSS,也有一些婦女取卵很多卻不發(fā)生OHSS,這說明hCG肌肉注射日血清E2值和獲卵數(shù)不能精確地預(yù)測OHSS的發(fā)生。故我們認(rèn)為,把OPU日卵泡液VEGF水平及IL-6水平與hCG肌肉注射日血清E2值和獲卵數(shù)結(jié)合起來,則預(yù)測OHSS的發(fā)生及嚴(yán)重程度將會更準(zhǔn)確。研究對象為2002年3月至2003年2月在本生殖中心因不孕癥接受ART治療的患者45例,根據(jù)有無并發(fā)OHSS以及發(fā)生OHSS的輕重程度,將這些患者分為3組。中、重度OHSS組:共10例,平均年齡(31.90±4.33)歲,不孕年限平均(6.85±4.41)年,體質(zhì)量指數(shù)平均(22.35±1.07)kg/m2。輕度OHSS組:共6例,平均年齡(30.67±3.27)歲