診斷課件：溶血性貧血檢查完整版

貧血檢查

(Anemia)貧血的概念

貧血是指循環(huán)血液的血紅蛋白量、紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞壓積低于正常的病理狀態(tài)。正常人的各項(xiàng)血液正常值:Hbg/LRBC×1012/LHCT成年男性120~1604.0~5.50.40~0.50L/L成年女性110~1503.5~5.50.37~0.48L/L新生兒170~2006.0~7.0貧血的分類1.形態(tài)學(xué)的分類2.病生學(xué)的分類正常細(xì)胞性80~10027~3432~36再障,急性失血性,溶貧血血性,骨髓病性貧血大細(xì)胞性貧血>100>3432~36巨幼細(xì)胞性,惡性貧血小細(xì)胞低色素<80<27<32缺鐵性,鐵粒幼細(xì)胞性性貧血單純小細(xì)胞性<80<2732~36慢性感染,炎癥,肝病,貧血貧血分類MCVMCHMCHC病因

(fl)(pg)(%)貧血的形態(tài)學(xué)分類紅細(xì)胞產(chǎn)生的減少

再障、MDS、缺鐵性貧血、巨幼貧、慢性病貧血等紅細(xì)胞破壞或丟失增加

（溶血性貧血）貧血的病生學(xué)分類溶血性貧血檢查

(HemolyticAnemia)

本課重點(diǎn)１.溶血性貧血定義２.溶血性貧血分類３.溶血性貧血常用篩查試驗(yàn)（游離血紅蛋白的檢測(cè)、含鐵血黃素尿試驗(yàn)）４.溶血性貧血幾種特殊檢查（紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)、紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)、抗人球蛋白試驗(yàn)、酸化溶血試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn)）

溶血性貧血定義:

指各種原因?qū)е录t細(xì)胞生存時(shí)間縮短，破壞增多或加速，而骨髓造血功能不能相應(yīng)代償而發(fā)生的一類貧血。

紅細(xì)胞破壞過(guò)程（溶血部位）

血管內(nèi)溶血包括｛

血管外溶血

溶血部位分類血管內(nèi)溶血:

指受到嚴(yán)重?fù)p傷的紅細(xì)胞,直接在血循環(huán)中破壞。*紅細(xì)胞嚴(yán)重受損*破壞在血管內(nèi)*多見(jiàn)于獲得性紅細(xì)胞損傷

溶血部位分類血管外溶血：

紅細(xì)胞破壞發(fā)生在脾肝或骨髓中的單核-巨噬細(xì)胞內(nèi)。*異常紅細(xì)胞（主要為內(nèi)在缺陷）*脾*肝}巨噬細(xì)胞中破壞*骨髓*多見(jiàn)于先天性細(xì)胞缺陷

溶血病因分類

紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷分類｛

紅細(xì)胞外在因素

溶血病因分類紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷

代表性疾病膜：

１.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥２.陣發(fā)性睡眠性Ｈb尿（ＰＮＨ）酶：

１.Ｇ６ＰＤ缺乏癥２.ＰＫ缺乏癥Ｈb：

１.海洋性貧血２.異常Ｈb病

溶血病因分類紅細(xì)胞外在因素?fù)p傷

免疫性非免疫性１.自身免疫性溶貧１.物理因素２.新生兒溶血２.化學(xué)因素３.輸血后溶血３.生物因素４.藥物免疫性溶血４.脾功能亢進(jìn)５.其他：ＳＬＥ淋巴瘤

溶血發(fā)病機(jī)制分類

先天性／遺傳性溶血（主要見(jiàn)于紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷）｛獲得性溶血１.免疫性溶血

}主要見(jiàn)于紅細(xì)胞外

在缺陷２.非免疫性溶血３.獲得性紅細(xì)胞膜缺陷（如ＰＮＨ）溶血性貧血的診斷步驟及臨床思維病史

貧血、黃疸

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加

溶血可能

尋找溶血證據(jù)（結(jié)合珠蛋白測(cè)定、血清膽紅素、尿膽原、尿膽紅素、Hb尿、Rous試驗(yàn)、骨髓涂片）

血管內(nèi)溶血

確定溶血病因

血管外溶血

溶血性貧血共性檢查1.血象和骨髓象變化2.血液生化改變3.尿液改變4.紅細(xì)胞壽命縮短.

溶血性貧血常用篩查試驗(yàn)1.血漿游離血紅蛋白的檢測(cè)2.血清結(jié)合珠蛋白檢測(cè)3.血漿高鐵血紅素清蛋白檢測(cè)4.含鐵血黃素尿試驗(yàn)5.紅細(xì)胞壽命測(cè)定

血漿游離血紅蛋白的檢測(cè)

［原理］

聯(lián)苯胺在酸性溶液和過(guò)氧化氫內(nèi),能受Hb催化，發(fā)生氧化作用，產(chǎn)生一系列顏色反應(yīng)，綠色→藍(lán)色→紫紅。顏色的深淺用光電比色計(jì)檢測(cè)或用已知濃度的Hb來(lái)檢測(cè)其量。

血漿游離血紅蛋白的檢測(cè)

［參考值］〈50mg/L［臨床意義］１.血管內(nèi)溶血時(shí)血漿游離血紅蛋白↑↑２.

自身免疫性溶血性貧血，珠蛋白生成障礙性貧血可輕度↑。３.血管外溶血時(shí)陰性。含鐵血黃素尿試驗(yàn)（Ｒous） ［原理］

鐵離子在酸化的低鐵氰化鉀溶液中生成藍(lán)色的亞鐵氰化鐵，即普魯士藍(lán)反應(yīng)。［參考值］陰性［臨床意義］１.在溶血初期陰性。２.慢性血管內(nèi)溶血可呈現(xiàn)陽(yáng)性，并持續(xù)數(shù)周,如ＰＮＨ

血清結(jié)合珠蛋白檢測(cè) ［原理］血清結(jié)合珠蛋白(HP)具有與Ｈb結(jié)合形成復(fù)合物的特性。將待測(cè)血清與Hb溶液混合作用后，可用電泳法將HP-Ｈb與多余未結(jié)合Ｈb分開，測(cè)定HP-Ｈb中的Ｈb的量，用以代表HP的含量。［參考值］0.7-1.5g/Ｌ

血清結(jié)合珠蛋白檢測(cè) ［臨床意義］１.各種溶血時(shí)HP↓甚至可測(cè)不出。２.傳染性單核細(xì)胞增多癥，先天性無(wú)結(jié)合珠蛋白血癥↓甚至可測(cè)不出。３.肝細(xì)胞病變↓↓，肝外阻塞性黃疸↑。４.感染，創(chuàng)傷，惡性腫瘤，紅斑狼蒼，糖皮質(zhì)激素治療，口服避孕藥，可↑

血漿高鐵血紅素清蛋白檢測(cè)［原理］

生化法為高鐵血紅素清蛋白能與硫化銨形成銨血色原，光譜儀觀察在５５８nm處有一吸收帶。電泳法為醋酸纖維膜電泳，出現(xiàn)一條高鐵血紅素清蛋白區(qū)帶。［參考值］陰性［臨床意義］陽(yáng)性表示為嚴(yán)重血管內(nèi)溶血

紅細(xì)胞壽命測(cè)定 ［原理］用51Cr標(biāo)記紅細(xì)胞檢測(cè)紅細(xì)胞半衰期［參考值］２５-３２天［臨床意義］１.溶血性貧血時(shí)常小于15天。２.這是確定溶血性貧血的可靠方法。溶血性貧血特殊檢查1.紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)

2.紅細(xì)胞酶缺陷的檢測(cè)3.珠蛋白生成異常的檢測(cè)

4.自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)

5.

陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥檢測(cè)

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈠紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)㈡紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)㈢自身溶血試驗(yàn)及糾正試驗(yàn)

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈠紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)［原理］：紅細(xì)胞在低滲氯化鈉溶液中細(xì)胞逐漸膨脹甚至破裂而出血，紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)時(shí)測(cè)定紅細(xì)胞對(duì)不同濃度低滲氯化鈉溶血的抵抗力，即紅細(xì)胞的滲透脆性。［參考值］：開始溶血：0.42%-0.46%NaCl溶液完全溶血：0.28%-0.34%NaCl溶液

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈠紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)［臨床意義］：相差0.０４%以上才有診斷價(jià)值。

1.↑：遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥、溫抗體型自身免疫性溶血性貧血。２.↓：海洋性貧血血紅蛋白病、缺鐵性貧血、某些肝硬化及阻塞性黃疸。

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈡紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)

［原理］：紅細(xì)胞孵育過(guò)程中，葡萄糖的消耗增加，貯備的ATP減少,導(dǎo)致紅細(xì)胞膜對(duì)陽(yáng)離子的主動(dòng)傳遞受阻，鈉離子在紅細(xì)胞內(nèi)凝集細(xì)胞膨脹，滲透脆性增加。

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈡紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)

［參考值］未孵育50%溶血為4.00-4.45g/L

NaCl37°C孵育24h50%溶血為4.65-5.9g/LNaCl

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)㈡紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)

［臨床意義］：常用于輕型遺傳性球性細(xì)胞增多癥，遺傳性非球形細(xì)胞溶貧的診斷和鑒別診斷。1.↑：見(jiàn)于遺傳性球形細(xì)胞增多癥，遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥，遺傳性非球形細(xì)胞溶貧。2.↓：見(jiàn)于珠蛋白生成障礙性貧血，缺鐵性貧血，鐮形細(xì)胞貧血，脾切除術(shù)后。

紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)自身溶血試驗(yàn)及糾正試驗(yàn)［原理］:

正常人紅細(xì)胞溫育后的輕微溶血在給予葡萄糖和不同程度后的糾正。［參考值］:正常人紅細(xì)胞溫育２４～４８ｈ后輕微溶血在給予葡萄糖和ＡＴＰ后糾正紅細(xì)胞膜缺陷的檢測(cè)［臨床意義］:

可用作遺傳性球形細(xì)胞增多癥和先天性非球形細(xì)胞性溶血性貧血的鑒別診斷。遺傳性球形細(xì)胞增多癥時(shí)，經(jīng)孵育后溶血明顯增強(qiáng)。加入葡萄糖及加入ATP后孵育，溶血均得到明顯糾正；I型先天性非球形細(xì)胞性溶血性貧血(葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷癥)時(shí)自身溶血加重，加葡萄糖和ATP均可使溶血部分糾正；Ⅱ型先天性非球形細(xì)胞性溶血性貧血(丙酮酸激酶缺陷癥)自身溶血明顯增強(qiáng)，加入葡萄糖孵育，溶血不能糾正．只有加入ATP才能糾正。

紅細(xì)胞酶缺陷的檢測(cè)㈠高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)㈡氰化物-抗壞血酸試驗(yàn)㈢變性珠蛋白小體生成試驗(yàn)㈣葡萄糖-6-磷酸脫氫酶熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和活性測(cè)定㈤丙酮酸激酶熒光篩選試驗(yàn)和活性測(cè)定

珠蛋白生成異常的檢測(cè)㈠血紅蛋白電泳㈡胎兒血紅蛋白酸洗脫試驗(yàn)㈢胎兒血紅蛋白測(cè)定或HbF堿變性試驗(yàn)㈣HbA2定量測(cè)定㈤限制性內(nèi)切酶譜分析

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)㈠抗人球蛋白試驗(yàn)㈡冷凝集試驗(yàn)㈢冷熱雙相溶試驗(yàn)

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)㈠抗人球蛋白試驗(yàn)（Ｃoombs）［原理］

不完全抗體IgG無(wú)法架接兩個(gè)鄰近的紅細(xì)胞，而只能和一個(gè)紅細(xì)胞抗原相結(jié)合。抗人球蛋白抗體是完全抗體，可與多個(gè)不完全抗體的Fc片段相結(jié)合，導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，稱為抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性說(shuō)明病人紅細(xì)胞表面上包被有不完全抗體。而間接Coombs試驗(yàn)陽(yáng)性則說(shuō)明病人血清中存在著不完全抗體。直接抗人球蛋白試驗(yàn)原理：利用抗人球蛋白血清可與體內(nèi)已被不完全抗體或補(bǔ)體致敏紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集反應(yīng)，可檢查紅細(xì)胞是否已被不完全抗體所致敏，如新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)、自身免疫性溶血性貧血以及藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的自身抗體。間接抗人球蛋白試驗(yàn)原理：用已知抗原的紅細(xì)胞測(cè)定受檢血清中相應(yīng)的不完全抗體；或用已知抗體的抗血清測(cè)定受檢紅細(xì)胞上相應(yīng)的抗原。常用于血型鑒定、抗體的檢出和鑒定、輸血前交叉配血試驗(yàn)以及其他特殊研究。

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)㈠抗人球蛋白試驗(yàn)（Ｃoombs）

［參考值］直接、間接抗人球蛋白均呈陰性反應(yīng)。［臨床意義］1.陽(yáng)性：見(jiàn)于新生兒溶血病，自身免疫性溶血性貧血，SLE，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，惡性淋巴瘤，甲基多巴及青霉素型等藥物性溶血反應(yīng)。2.AIHA大多屬于溫抗體型(IgG)，但也有小部分屬冷抗體型(IgM)，故必要時(shí)應(yīng)用于4°C條件下進(jìn)行試驗(yàn)，排除假陰性反應(yīng)。

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)㈠抗人球蛋白試驗(yàn)（Ｃoombs）

［臨床意義］3.AIHA大多為IgG型抗體，還有IgG+C3型，C3型，極少數(shù)IgG亞型，IgA，IgM型，故應(yīng)使用廣譜的抗人球蛋白血清進(jìn)行試驗(yàn)，必要時(shí)須加用上述各種單價(jià)抗血清，以提高檢出陽(yáng)性率。4.間接Coombs試驗(yàn)主要用于RH或ABO妊免疫型新生兒溶血病母體血清中不完全抗體的檢測(cè)。很少用于AIHA診斷。

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)㈠抗人球蛋白試驗(yàn)（Ｃoombs）

［臨床意義］3.AIHA大多為IgG型抗體，還有IgG+C3型，C3型，極少數(shù)IgG亞型，IgA，IgM型，故應(yīng)使用廣譜的抗人球蛋白血清進(jìn)行試驗(yàn)，必要時(shí)須加用上述各種單價(jià)抗血清，以提高檢出陽(yáng)性率。4.間接Coombs試驗(yàn)主要用于RH或ABO妊免疫型新生兒溶血病母體血清中不完全抗體的檢測(cè)。很少用于AIHA診斷。

自身免疫性溶血性貧血檢測(cè)冷熱雙