第三章、基因工程常用受體細(xì)胞_第1頁(yè)
第三章、基因工程常用受體細(xì)胞_第2頁(yè)
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第二節(jié)

宿主細(xì)胞選擇原則1、容易獲得較高濃度的細(xì)胞;2、安全,不致?。?、遺傳背景清楚,容易進(jìn)行DNA重組操作及遺傳改造;4、產(chǎn)物的產(chǎn)量高(表達(dá)水平和穩(wěn)定性)、生物活性高5、產(chǎn)物容易提取純化。6、容易進(jìn)行代謝調(diào)控;7、易培養(yǎng)(生長(zhǎng)速度、營(yíng)養(yǎng)需求、氧耗量等),培養(yǎng)成本低宿主細(xì)胞分類及特點(diǎn)分類:原核細(xì)胞(大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、鏈霉菌等)真核細(xì)胞(酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞)一、原核表達(dá)系統(tǒng)的特點(diǎn)(一)優(yōu)點(diǎn):1、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,基因組成及功能相對(duì)清楚,易于遺傳操作及轉(zhuǎn)化2、生理代謝途徑及表達(dá)調(diào)控機(jī)制相對(duì)清楚,便于表達(dá)調(diào)控3、生長(zhǎng)迅速,要求條件低(大腸桿菌倍增時(shí)間為17分鐘),易于大規(guī)模培養(yǎng)。(二)缺點(diǎn)1、不能識(shí)別剪切內(nèi)含子,不能表達(dá)基因組DNA,只能表達(dá)cDNA;2、缺乏真核生物的蛋白質(zhì)加工修飾系統(tǒng),不能進(jìn)行蛋白酶解、糖基化、磷酸化、乙?;?、硫酸化、酰胺化等修飾作用;

蛋白酶解作用:從蛋白前體中切去一段氨基酸序列,從而獲得功能性分子

糖基化意義:賦予蛋白獨(dú)特的結(jié)合性并增強(qiáng)穩(wěn)定性3、不具備真核生物的蛋白質(zhì)復(fù)性系統(tǒng)(

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