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文檔簡介
地錦草黃酮的提取及其藥敏實驗地錦草(HumifuseEuphorbaiaHerb)別名血見悉、紅絲草、奶疳草、奶漿草。來源為大戟科植物地棉EuphorbiahumifusaWilld.的地上部分。植物形態(tài)一年生葡萄草本,有白色乳汁。莖纖細(xì),近基部分枝,帶紫紅色,無毛。葉對生,長圓形,長4~10mm,寬4~6mm,先端鈍圓,基部偏斜,邊緣有細(xì)齒,綠色或帶紅色,兩面無毛或疏生柔毛。種子卵形,黑褐色,外被白色蠟粉?;ㄆ?~10月,果實7月后漸次成熟。生于平原荒地、路邊、田間。除廣東、廣西外,全國各地均產(chǎn)。采制夏、秋季采收,除去雜質(zhì),曬干。
圖1地錦草植株形態(tài)一、實驗原理(一)地錦草黃酮的提取黃酮是地錦草的主要有效成分之一,具有三環(huán)苯基苯并吡喃結(jié)構(gòu)的呈色化合物。黃酮類化合物均可溶于乙醇,而超聲波的超聲空化作用對細(xì)胞膜的破壞有助于黃酮類化合物的釋放與溶出,超聲波使提取液不斷振蕩,有助于溶質(zhì)的擴(kuò)散,提高了有效成份的提取率以及原料的利用率。本實驗將傳統(tǒng)的回流提取法結(jié)合超聲波法提取地錦草黃酮。(二)地錦草黃酮的純化利用D-101大孔樹脂的吸附與篩選原理,經(jīng)一定的溶劑洗脫不同分子量的化合物,從而得到分離純化,得到總黃酮。二、實驗?zāi)康模ㄒ唬┱莆仗崛〉劐\草黃酮的方法;(二)掌握藥敏實驗的基本步驟。三、實驗用儀器及材料實驗儀器及設(shè)備旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、電子天平、恒溫水浴鍋、恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺、超聲波細(xì)胞粉碎儀、冷凍干燥機(jī)、圓底燒瓶、平皿、漏斗、燒杯等。實驗對象及材料地錦草干燥粉末、80%乙醇、D-101大孔吸附樹脂、牛肉浸膏、蛋白胨、瓊脂、氯化鈉等。四、實驗方法(一)地錦草黃酮的提取1.1粗提物的提取準(zhǔn)確稱取地錦草干燥粉末20g,80%的乙醇200ml超聲25min,轉(zhuǎn)移至500ml的圓底燒瓶,60℃加熱回流2h,共回流2次,過濾,合并濾液,減壓濃縮濾液,濃縮后加少量純凈水,于燒杯中靜置過夜,離心除雜,取上清液。四、實驗方法1.2粗提物的純化將預(yù)處理的D-101大孔吸附樹脂濕法裝柱,先用95%的乙醇洗脫,再用蒸餾水洗脫,直至洗脫液無乙醇?xì)馕?。?0ml粗提液,以2BV/h流速上柱,上柱完畢后靜置吸附30min,吸附后先用蒸餾水洗脫,洗
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