藥分第3章 供試品前處理與測定方法效能指標

第三章供試品前處理與測定方法效能指標§1.定量分析樣品的前處理方法1.概述含鹵素藥物與芳環(huán)連接,牢固；與脂肪鏈C連接,不牢固。含金屬藥物金屬鹽或配位化合物,如酒石酸銻鉀等,不牢固；金屬原子直接與碳原子結(jié)合,如卡巴胂,牢固。2.不經(jīng)有機破壞的分析方法

(1)直接測定法：金屬原子不直接與碳原子相連，如富馬酸亞鐵；(2)直接回流后水解測定法：

含鹵素藥物+NaOH

回流間接銀量法測定(加過量AgNO3再用NH4SCN返滴定)(3)硫酸水解后測定法(4)氧化還原后測定法a.堿性還原后測定法，如泛影酸的測定NaI+AgNO3

AgI+NaNO3

NaOH+Zn粉回流，

+NaIb.酸性還原后測定法，如碘番酸的測定碘番酸+HAc+ZnI-

銀量法測定c.汞齊化法：d.利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測定含量Sb5+

Sb3++I2+2K+

H+KIFe3+

Fe2++I2

H+KI3.經(jīng)有機破壞的分析方法有機破壞方法4.HNO3-HClO4

法適用于血、尿、組織等4.HNO3-H2SO4

法不適用于含堿土金屬有機藥物3.H2SO4-硫酸鹽法含砷、銻有機藥物2.灼燒（干法）

4200C1.氧瓶燃燒法不適用于含易揮發(fā)性金屬有機藥物

氧瓶燃燒法

硬質(zhì)瓶(測F時用石英瓶)

稱樣

先通氧氣后點火

吸收液(H2O或H2O+NaOH等)碘苯酯氧瓶燃燒I2(I-)NaOHI-

Br2+HAcIO3-

KII2S2O32-

滴定三氯叔丁醇膽影酸泛影酸碘他拉酸碘番酸碘苯酯鹽酸胺碘酮諾氟沙星醋酸氟輕松磺溴酞鈉葡萄糖酸銻鈉富馬酸亞鐵酒石酸銻鉀汞撒利卡巴胂§2.生物樣品分析的前處理技術(shù)目的：(1)藥物進入體內(nèi)后，經(jīng)吸收、分布、代謝，然后排出體外。在體液、組織和排泄物中除了游離型藥物之外，還有藥物的代謝物、藥物與蛋白質(zhì)形成的結(jié)合物、以及藥物或其代謝物與內(nèi)源性物質(zhì)(如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸苷、硫酸酯綴合物)等多種形式存在，需要分離后測定藥物及代謝物；(2)生物樣品的介質(zhì)組成比較復(fù)雜，主要影響是蛋白質(zhì)。1.常用樣品的種類、采集和貯藏

1.血樣血漿的制備：將采取的血液置含有抗凝劑(肝素、草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA、氟化鈉等)的試管中，混合后，以25003000rpm

離心5min使與血細胞分離，分取上清液即得。獲取量大血清的制備：將采取的血樣在室溫下至少放置30min到1hr，待凝結(jié)出血餅后，用細竹棒或玻璃棒輕輕地剝?nèi)パ?，然后?0003000rpm離心分離5

10min，分取上清液即得。

獲取量少藥物結(jié)合型游離型能到達靶器官，有療效OK!不能通過血管壁保存：短期40C長期-200C(1)唾液由腮腺、頜下腺、舌下腺和口腔粘膜內(nèi)許多散在的小腺體分泌液混合組成。1.0031.008pH6.27.6用唾液作為樣品測定藥物濃度的優(yōu)點不受時間、地點限制，可反復(fù)采集無痛苦、無危險有些唾液中藥物濃度可以反映血漿中游離型藥物濃度(2)尿液水尿素鹽主要成分采集方式隨時尿晨尿白天尿夜間尿時間尿自然排尿立即測定，超過24hr應(yīng)加防腐劑(苯、甲苯、醋酸、濃HCl)2.生物樣品分析前處理技術(shù)

根據(jù)生物樣品的類型進行分離、純化。如血漿或血清需除蛋白，使藥物從蛋白質(zhì)結(jié)合物中釋放；唾液樣品則主要采用離心沉淀除去粘蛋白；尿液樣品常采用酸或酶水解使藥物從綴合物中釋出，當原型藥物排泄在尿中時，可簡單地用水稀釋一定倍數(shù)后進行測定。樣品處理步驟與分析方法的選擇(1)去除蛋白質(zhì)：a.加入與水相混溶的有機溶劑，如乙睛、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、四氫呋喃，使蛋白質(zhì)分子內(nèi)及分子間