重樓組織培養(yǎng)及快速繁殖開(kāi)題報(bào)告

重樓組織培養(yǎng)及快速繁殖開(kāi)題報(bào)告報(bào)告者：楊蘇文年級(jí)：醫(yī)學(xué)生物技術(shù)2005級(jí)實(shí)習(xí)單位：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物技術(shù)教研室指導(dǎo)老師：劉紅美博士

預(yù)期效果43重樓組織培養(yǎng)的研究方案2重樓的研究現(xiàn)狀1重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析內(nèi)容概括野生重樓實(shí)物圖一重樓的屬性及研究現(xiàn)狀1、重樓的屬性重樓屬百合科，是多年生的草本植物。全世界該屬植物約有20種10變種和若干變型，分布于歐亞大陸的熱帶至溫帶地區(qū)。我國(guó)主產(chǎn)于云南、貴州、四川、廣西等地。本屬植物主要以根莖入藥，它具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚、止血、抗腫瘤、抗生育、免疫調(diào)節(jié)等多方面的功效。

一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析

重樓形態(tài)葉通常七片,輪生于莖頂,頂端著生一花,故而得名七葉一枝花。分布于海拔700-3200米的地區(qū)，夏秋采挖。野生重樓靠種子和根莖繁殖，種子繁殖需5-7年才能采挖。一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析2、市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析

長(zhǎng)期以來(lái)，人們對(duì)重樓的利用一直依靠天然野生資源，但是由于本屬植物生長(zhǎng)緩慢，每年生長(zhǎng)量非常小，由于長(zhǎng)期過(guò)度的掠奪式的采挖，每年的消耗遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出野生重樓的生長(zhǎng)量。

據(jù)云南白藥集團(tuán)2008年調(diào)查資料顯示，分布于我國(guó)境內(nèi)的野生重樓80％已被開(kāi)采利用，剩下的20％按目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的需求量測(cè)算，大約僅可用3～5年。一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析常言道：物以稀為貴，黃金有價(jià)藥無(wú)價(jià)。故重樓價(jià)格節(jié)節(jié)攀升。19962003200120082006一般統(tǒng)貨，170元/公斤一般統(tǒng)貨，110元/公斤一般統(tǒng)貨，38元/公斤一般統(tǒng)貨，21元/公斤一般統(tǒng)貨，25元/公斤9601030608211103825170（元/公斤）（年）1996年—2008年重樓市場(chǎng)價(jià)格走勢(shì)一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析

在國(guó)內(nèi)，不少知名企業(yè)所生產(chǎn)的藥品中，主藥都包含有重樓。云南白藥集團(tuán)的白藥中，君藥就是重樓四川光大制藥廠“非典”時(shí)名聲大震的抗病毒沖劑中也是重用重樓江蘇南通制藥總廠出品的季德勝蛇藥片，其中用的主藥七葉一枝花及為重樓

一重樓的屬性及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)分析

據(jù)了解，僅國(guó)內(nèi)幾家大型中成藥制藥廠對(duì)重樓的年需求量就達(dá)1500噸左右，醫(yī)院和中藥店配方需求量達(dá)1000噸左右，而全國(guó)野生重樓年收購(gòu)量不足1500噸。造成重樓的供求矛盾在逐漸加劇。幾丁質(zhì)酶在害蟲(chóng)防治中的應(yīng)用三重樓的研究現(xiàn)狀二

近幾年，許多地方雖已開(kāi)始重樓的人工栽培，但重樓種子萌發(fā)時(shí)間長(zhǎng)，出苗率低，而采用根莖直接種植或根莖切段種植，也需要用大量的原料藥。因此，會(huì)加劇用種與原料藥的矛盾。

為了解決這些問(wèn)題，人們?cè)趯で笮路桨笗r(shí)，想到了運(yùn)用植物組織培養(yǎng)的方法來(lái)生產(chǎn)重樓。這一技術(shù)的開(kāi)發(fā)成功，將會(huì)為人工栽培提供大量的種苗，進(jìn)而解決了資源保護(hù)和市場(chǎng)供需的問(wèn)題。重樓的研究現(xiàn)狀二

目前，關(guān)于重樓組織培養(yǎng)的研究報(bào)道屈指可數(shù)，并且還沒(méi)有一套完整的重樓組織培養(yǎng)至移栽存活的體系。因此，為了解決資源保護(hù)和市場(chǎng)需求的問(wèn)題，對(duì)于重樓組織培養(yǎng)及快速繁殖的研究將刻不容緩。重樓的研究現(xiàn)狀二主要參考文獻(xiàn)：[1]李群，葛方蘭，王麗.重樓屬植物初代培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌培養(yǎng)物的建立［J］.四川師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2003，26（6）：624-626.[2]李群，陳麗萍，葛方蘭.重樓屬植物愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)[J].四川師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，29（1）。[3]楊麗云，陳翠，呂麗芬，袁理春.云南重樓的組織培養(yǎng)與植株再生[J].植物生理學(xué)通訊.2008，44（5）。[4]劉旭，陳玉菡，吳中應(yīng)，羅川.重樓市場(chǎng)需求與價(jià)格分析.中國(guó)現(xiàn)代中藥.2007，9（6）[5]侯玉平，胡曉立等.滇重樓切塊繁殖不定芽發(fā)生的組織學(xué)研究.云南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）.2004，26（6）.重樓組織培養(yǎng)的研究方案三1、內(nèi)容簡(jiǎn)要1.1本實(shí)驗(yàn)以重樓的頂芽、葉、莖、根莖、根為主要外植體，通過(guò)調(diào)控不同的激素配比來(lái)篩選出最佳培養(yǎng)基類型（愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽的誘導(dǎo)、增值及生根培養(yǎng)基）。1.2將瓶?jī)?nèi)生根的再生植株，通過(guò)馴化，移栽到自然條件下的栽培基質(zhì)中，獲得優(yōu)質(zhì)健壯的種苗。重樓組織培養(yǎng)的研究方案三重樓組織培養(yǎng)的研究方案三重樓組織培養(yǎng)的研究方案三2、研究方法

主要是依托植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用植物細(xì)胞的全能性，對(duì)野生重樓的無(wú)性繁殖，獲得大量的優(yōu)良種苗。3、研究步驟3.1無(wú)菌體系的建立;3.2誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基的篩選;3.3增殖培養(yǎng)基的篩選;3.4生根培養(yǎng)基的篩選;3.5馴化移栽;重樓組織培養(yǎng)的研究方案三4、技術(shù)路線外植體滅菌無(wú)菌外植體愈傷組織誘導(dǎo)增殖不定芽誘導(dǎo)生根馴化移栽成熟種苗重樓組織培養(yǎng)的研究方案三5、可能出現(xiàn)的技術(shù)問(wèn)題及解決方案（1）外植體滅菌困難。解決方法：可先用200mg/L羧芐西林鈉和頭胞唑林鈉進(jìn)行抑菌，再拿到超凈工作臺(tái)中進(jìn)行滅菌處理。（2）愈傷組織難誘導(dǎo)，易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象。解決方法：通過(guò)多種激素不同搭配地方法進(jìn)行篩選，從而選擇出最佳的培養(yǎng)基。對(duì)于褐化現(xiàn)象，我們可以加入活性炭等方法，降低褐化現(xiàn)象。（3）生根后，移栽不易存活。解決方法：通過(guò)組織培養(yǎng)的種苗要經(jīng)過(guò)從異養(yǎng)到自養(yǎng)的過(guò)渡階段，如在此階段注意種苗的保濕以及防止其感染微生物而腐爛，就能夠成活。重樓組織培養(yǎng)的研究方案三6預(yù)期結(jié)果：6.1獲得重樓誘導(dǎo)愈傷組織、分化不定芽、誘導(dǎo)生根的最適培養(yǎng)基。6.2記錄誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率，增值倍數(shù)，誘導(dǎo)生根的時(shí)間、數(shù)量、直徑和長(zhǎng)度。6.3獲得馴化、移栽的存活率。6.4建立重樓無(wú)性快速繁殖體系。重樓組織培養(yǎng)的研究方案三重樓組織培養(yǎng)的研究方案三預(yù)期結(jié)果：6.1獲得重樓誘導(dǎo)愈傷組織、分化不定芽、誘導(dǎo)生根的最適培養(yǎng)基。6.2記錄誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率，增值倍數(shù)，誘導(dǎo)生根的時(shí)間、數(shù)量、直徑和長(zhǎng)度。6.3獲得馴化、移栽的存活率。6.4建立重樓無(wú)性快速繁殖體系。進(jìn)度安排2009年3月份——2009年4月份：查閱相關(guān)文獻(xiàn)，2009年5月份：選擇及采集外植體，建立無(wú)菌體系2009年6月份——2009年7月份：誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基的篩選2009年8月份——2010年2月份：增殖和生根培養(yǎng)基的篩選2010年3月份：馴化、移栽2010年4月結(jié)題、準(zhǔn)備畢業(yè)論文。重樓組織培養(yǎng)的研究方案三

運(yùn)用組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)對(duì)重樓進(jìn)行研究，不僅為今后重樓的繁殖和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)，還可以解決其資源保護(hù)和開(kāi)發(fā)利用之間的矛盾。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)方面，將帶動(dòng)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展，提高農(nóng)村經(jīng)濟(jì)效益，滿足了市場(chǎng)需求，并且還可以為提高國(guó)家經(jīng)濟(jì)稅收創(chuàng)造條件。預(yù)期效果四ThankYou!人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種