JJF(京) 3024-2023 核酸定量熒光計(jì)校準(zhǔn)規(guī)范

北 京 市 地 方 計(jì) 量 技 術(shù) 規(guī) 范JJF（京）3024-2023核酸定量熒光計(jì)校準(zhǔn)規(guī)范CalibrationSpecificationforFluorescenceMetersofNucleicAcid2023-6-1發(fā)布 2023-7-1施北京市市場(chǎng)監(jiān)督管理局 發(fā)布JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023JJF(京)3024-JJF(京)3024-2023CalibrationSpecificationforFluorescenceMetersofNucleicAcid歸口單位：北京市市場(chǎng)監(jiān)督管理局本規(guī)范委托北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院負(fù)責(zé)解釋本規(guī)范主要起草人：趙佳（京市量檢科學(xué)究院）梁 亮北京計(jì)量測(cè)科研究）常棟天計(jì)量督檢科學(xué)究院）劉彥河省計(jì)監(jiān)督測(cè)研院）參加起草人：范培蕾（北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院）李冉（北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院）劉然（北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院）尹金山（北京良山信誠(chéng)科技有限公司）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023II目 錄引 言 （II）1范圍 （1）2概述 （1）計(jì)量特性 （1）校準(zhǔn)條件 （1）環(huán)境條件 （1）測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備 （1）校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法 （2）示值誤差 （2）測(cè)量重復(fù)性 （2）校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá) （2）復(fù)校時(shí)間間隔 （3）附錄A校準(zhǔn)記錄格式（推薦） （4）附錄B校準(zhǔn)證書內(nèi)頁格式（推薦） （6）附錄C示值誤差的不確定度評(píng)定示例 （7）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023IIII引 言JJF1071-2010JJF1001-2011《通用計(jì)量術(shù)語及定JJF1059.1-2012礎(chǔ)性系列規(guī)范。JJF1836-2020JJF1828-2020《ATP本規(guī)范為首次發(fā)布。JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE1核酸定量熒光計(jì)校準(zhǔn)規(guī)范范圍DNA（10~100）ng/μL概述（以下簡(jiǎn)稱熒光計(jì)的原理是熒光染料和核酸分子特異性結(jié)合后在特?zé)晒庥?jì)由光源、檢測(cè)倉(cāng)、控制面板以及數(shù)據(jù)采集信號(hào)處理系統(tǒng)組成計(jì)量特性儀器各項(xiàng)計(jì)量特性指標(biāo)見表1。表1核酸定量熒光計(jì)計(jì)量特性指標(biāo)計(jì)量項(xiàng)目計(jì)量特性示值誤差不超過±20%測(cè)量重復(fù)性≤10%注：以上計(jì)量特性要求是基于雙鏈DNA測(cè)量模式得到，僅供參考，不作為判定依據(jù)。校準(zhǔn)條件環(huán)境條件4.1.1（15～30）℃。4.1.2（15～70）%。4.1.3供電電源：電壓（220±22）V，頻率（50±1）Hz。測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備DNA（10～100）ng/μL10%=2。（1～10）μL（20～200）μL，經(jīng)計(jì)量檢定合格。校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法示值誤差DNA3（1）計(jì)算。XXX0100%X0式中：ΔX——示值誤差，%；

（1）3，ng/μL；X0——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值，ng/μL。測(cè)量重復(fù)性1（10~100）ng/μLDNA10（2）計(jì)算測(cè)量重復(fù)性。RSD

(XiX) 1i1

（2）式中：

XRSD——相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，%；10，ng/μL；Xi——單次測(cè)定值，ng/μL；n——測(cè)定次數(shù)；i——測(cè)定的序號(hào)，i=1～10。校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在校準(zhǔn)證書上反映。校準(zhǔn)證書應(yīng)至少包括以下信息：；JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE3復(fù)校時(shí)間間隔建議復(fù)校時(shí)間間隔一般不超過一年。復(fù)校時(shí)間間隔的長(zhǎng)短是由儀器的使用情況、使用者、儀器本身質(zhì)量等因素決定，送校單位也可根據(jù)實(shí)際使用情況自主決定復(fù)校時(shí)間間隔。如果儀器經(jīng)維修、更換重要部件或?qū)x器性能有懷疑時(shí)，應(yīng)重新校準(zhǔn)。附錄A校準(zhǔn)記錄格式（推薦）記錄編號(hào):委托單位:儀器名稱:型號(hào):制造廠:出廠編號(hào):環(huán)境溫度：相對(duì)濕度：校準(zhǔn)日期:校準(zhǔn)依據(jù)：主要計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器名稱測(cè)量范圍不確定度/準(zhǔn)確度等級(jí)/最大允許誤差檢定/校準(zhǔn)證書編號(hào)溯源單位有效期至一、示值誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）（ng/μL）示值誤差（%）擴(kuò)展不確定度（k=2）JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE5二、測(cè)量重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）平均值（ng/μL）（%）擴(kuò)展不確定度（k=2）校準(zhǔn)員： 核驗(yàn)員： 附錄B校準(zhǔn)證書內(nèi)頁格式（推薦）校準(zhǔn)結(jié)果校準(zhǔn)項(xiàng)目校準(zhǔn)結(jié)果示值誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）示值誤差（%）擴(kuò)展不確定度（k=2）測(cè)量重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）測(cè)量重復(fù)性（%）擴(kuò)展不確定度（k=2）校準(zhǔn)員： 核驗(yàn)員： JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-2023PAGEPAGE7附錄C示值誤差的不確定度評(píng)定示例概述測(cè)量方法ThermoFisherQubiit4（10～100）ng/μL3差。測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)DNA（10～100）ng/μLrel≤10%=2。（1～10）μL（20～200）μL。測(cè)量模型示值相對(duì)誤差的測(cè)量模型為：XXX0100%式中：

X0?X——示值誤差，%；

（C.1）ˉ3，ng/μL；X0——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值，ng/μL。cu Xc22 2212cu Xc22 2212u X0uX

（C.2）式中，靈敏度系數(shù)c

X

1，靈敏度系數(shù)c

XX。0 0 01 X X0不確定度來源分析

2 X X2示值誤差校準(zhǔn)結(jié)果的不確定度來源主要為：a）測(cè)量平均值引入的不確定度分量uXb）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值引入的不確定度分量u(X0)。各不確定度分量的評(píng)定測(cè)量平均值引入的不確定度分量uX（0~100ng/uL31.485.7ng/μLDNA10C.1。按照貝塞爾公式（C.3）計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差，計(jì)算得出的標(biāo)準(zhǔn)偏差即為單次測(cè)量值的不確定度，實(shí)3（C.4）計(jì)算，計(jì)算結(jié)果見表C.1。nn(XX)2ii1 n13uXs3

（C.3）（C.4）表C.1重復(fù)性引入不確定度數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）s（ng/μL）uX（ng/μL）31.435.435.135.936.036.135.135.035.234.934.50.520.3185.781.482.481.882.382.181.481.781.882.282.30.370.22標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值引入的不確定度分量uX0（C.5計(jì)算得到標(biāo)準(zhǔn)不確定度uX0，C.2。

u

U0X0Uk

（C.5）表C.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）rel=2)標(biāo)準(zhǔn)不確定度uX031.49.8%1.54ng/μL85.73.0%1.29ng/μL合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度JJF（京）3024-2023JJF（京）3024-202399C.3和。按照公式（C.2）C.3。表C.3合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度標(biāo)準(zhǔn)值（ng/μL）測(cè)量值（ng/μL）平均值（ng/μL）c1uXc2u(X0)uX12331.435.435.135.935.50.0320.31-0.0361.545.7%85.781.482.481.881.90.0120.22-0.0111.291.5%擴(kuò)展不