DB43-T+2175-2021辣椒遠(yuǎn)緣雜交胚拯救技術(shù)操作規(guī)程

ICS67.080.20CCSB31 43湖 南 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB43/T2175—2021辣椒遠(yuǎn)緣雜交胚拯救技術(shù)操作規(guī)程TechnicalRegulationforembryorescueofDistantHybridinPepper20212021082920211029湖南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前言1圍2語定義13劑設(shè)備1拯培基備 2拯技流程 2附錄A（料）辣胚拯培基方3前 言GB/T1.1-20201請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由湖南農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本文件由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本文件主要起草單位：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)、湖南省蔬菜研究所。辣椒遠(yuǎn)緣雜交胚拯救技術(shù)規(guī)程本文件適用于辣椒遠(yuǎn)緣雜交胚拯救。下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。2.1遠(yuǎn)緣雜交指不同種、屬或親緣關(guān)系更遠(yuǎn)的植物類型間進(jìn)行的雜交。2.2胚拯救織培養(yǎng)技術(shù)，將合子胚轉(zhuǎn)至適合的培養(yǎng)基中離體培養(yǎng)，使其能正常發(fā)育成完整植株的方式。3試劑和設(shè)備3.1試劑織培養(yǎng)技術(shù)，將合子胚轉(zhuǎn)至適合的培養(yǎng)基中離體培養(yǎng)，使其能正常發(fā)育成完整植株的方式。3試劑和設(shè)備3.1試劑所有試劑等級均為分析純，見表1。表1辣椒遠(yuǎn)緣雜交胚拯救技術(shù)所需試劑3.2儀器設(shè)備1H或H100、500mL（00μ、1mL10m～1℃試劑名稱無機(jī)試劑次氯酸鈉、氫氧化鈉、鹽酸、硝酸銨、硝酸鉀、氯化鈣、七水硫酸鎂、磷酸二氫鉀、碘化鉀、硼酸、四水硫酸錳、七水硫酸鋅、鉬酸鈉、氯化鈷、硫酸亞鐵、EDTA二鈉鹽、有機(jī)試劑酒精、肌醇、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、甘氨酸、葉酸、生物素植物生長調(diào)節(jié)劑萘乙酸、激動素、赤霉素、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸其他瓊脂粉、蔗糖培養(yǎng)基包括胚拯救培養(yǎng)基和幼胚分化成苗培養(yǎng)基，其配方見附錄A。pH121℃，1.05kg/cm215min。授粉收集父本花粉，選取母本植株上將開未開的花苞，去除雄蕊，對其進(jìn)行人工授粉，授粉24h后用75mg/L的2,4-D溶液涂抹母本植株上授粉花苞的花梗。（28±1）℃（20±1）16h/d2000lx。（28±1）℃（20±1）16h/d2000lx。2d～3d905d15d附錄A（資料性）辣椒胚拯救培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基名稱配方成分胚拯救培養(yǎng)基825mg/L950mg/L220mg/L185mg/L85mg/Lmg/L6.2mg/L22.3mg/L8.6mg/Lmg/L0.025mg/L27.8mg/L37.8mg/LEDTAmg/L0.5mg/L0.5mg/L0.5mg/L鹽酸硫胺素、2mg/L0.5mg/L0.05mg/L0.05mg/La0.25mg/L0.2mg/L赤霉素、6g/L瓊脂粉、30g/L蔗糖幼胚分化成苗培養(yǎng)基1650mg/L1900mg/L440mg/L370mg/L170mg/L磷酸二氫鉀、0.83m/Lg6.2mg/L22.3mg/L8.6mg/L水硫酸鋅、0.25m/Lg0.025mg/L0.025mg/L27.8mg/L酸亞鐵、37.3mg/LEDTA100mg/L0