柴胡疏肝散抗抑郁焦慮的藥理作用研究

柴胡疏肝散抗抑郁焦慮的藥理作用研究

柴胡疏肝散是明代張杰斌《凈月全書(shū)》中的一個(gè)。根據(jù)《傷寒論》中的四逆湯，它是與陳皮、川芍和香料一起形成的。這是治療肝氣郁結(jié)的好方法。它對(duì)壓力抑郁癥也很有效。本實(shí)驗(yàn)研究通過(guò)小鼠自主活動(dòng)試驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和大鼠群居接觸模型觀察柴胡疏肝散的抗抑郁焦慮藥理作用。1材料和方法1.1藥材、香附材料柴胡疏肝散:柴胡6g,枳殼5g,白芍5g,川芍5g,炙甘草3g,香附5g,陳皮6g。以上藥材均由廣州市藥材公司提供,經(jīng)鑒定均為純正藥材。上述藥物按成年人70kg體重劑量的2倍、4倍分別水煎濃縮至含生藥0.62g/mL、1.26g/mL高壓滅菌,4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心昆明種小鼠每次30只,普通級(jí),雄性,體重18～22g,由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。八周齡成年Wistar大鼠36只,普通級(jí),雄性,體重180～220g(購(gòu)自第一軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。將試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為生理鹽水組,柴胡疏肝散高、低劑量組。1.3方法1.3.1活動(dòng)次數(shù)的觀察小鼠連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時(shí)后放入XZC-4A小動(dòng)物自主活動(dòng)測(cè)定儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院制造)中,適應(yīng)3分鐘后,觀察5分鐘內(nèi)的活動(dòng)次數(shù)。1.3.2不動(dòng)時(shí)間檢測(cè)小鼠連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時(shí)后將小鼠尾端2cm處固定于水平面上,使其呈倒掛狀態(tài),頭部離臺(tái)面約30cm,四周以板隔離動(dòng)物視線,記錄小鼠在6分鐘內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間。1.3.3小鼠的不動(dòng)時(shí)間及時(shí)間動(dòng)態(tài)先做預(yù)試驗(yàn),將小鼠放入直徑22cm,水深10cm的水桶,水溫保持25℃,小鼠游泳2分鐘后,開(kāi)始觀察,觀察持續(xù)4分鐘,累計(jì)4分鐘內(nèi)小鼠在水中停止掙扎、呈漂浮狀態(tài)、僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面的持續(xù)時(shí)間(不動(dòng)時(shí)間),將不動(dòng)時(shí)間超過(guò)120秒或低于60秒者小鼠剔除。將合格老鼠隨機(jī)分組,連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時(shí)后按預(yù)試驗(yàn)方法進(jìn)行強(qiáng)迫游泳試驗(yàn),累計(jì)4分鐘內(nèi)小鼠的不動(dòng)時(shí)間。1.3.4觀察指標(biāo)及總體標(biāo)準(zhǔn)以每籠2只進(jìn)行飼養(yǎng),自由飲食,自然光照,每天灌胃給藥或生理鹽水,飼養(yǎng)2周后,每籠大鼠同時(shí)放入敞箱中適應(yīng)8分鐘,連續(xù)2天,第3天將大鼠按體重相近原則配對(duì)(配對(duì)大鼠體重相差一般不超過(guò)15g),測(cè)試前50分鐘,灌胃給藥,測(cè)試時(shí)將重新配對(duì)的相互不熟悉大鼠放入敞箱,在自然光照下進(jìn)行觀察測(cè)試,記錄5分鐘內(nèi)群居接觸時(shí)間,每次實(shí)驗(yàn)后需將屎尿清除,單盲法取兩位觀察者記錄的均值。觀察指標(biāo)包括:嗅、爬上或下鉆、理毛、性探究、跟隨或圍繞轉(zhuǎn)。被動(dòng)接觸如背靠背及攻擊性行為如攻擊性理毛、咬、踢、格斗等,不作為群居接觸行為。1.4統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果以xˉ±sxˉ±s表示,采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,根據(jù)樣本資料方差是否齊同選用單因素方差分析和秩和檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1影響小鼠的獨(dú)立活動(dòng)見(jiàn)表1。2.2影響大鼠懸尾實(shí)驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間見(jiàn)表2。2.3影響大鼠游泳實(shí)驗(yàn)的移動(dòng)率見(jiàn)表3。2.4影響大鼠群接觸模型的影響見(jiàn)表4。3應(yīng)用對(duì)特殊類型大鼠群體和抗抑郁藥的抗壓強(qiáng)度的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)檢測(cè)結(jié)果小鼠強(qiáng)迫游泳和懸尾模型,各自提供了一個(gè)無(wú)可回避的壓迫環(huán)境,實(shí)驗(yàn)中小鼠所體現(xiàn)出來(lái)的不動(dòng)狀態(tài),反映了一種被稱之為“行為絕望和扭曲”(behavioraldespairandvariant)或“對(duì)強(qiáng)壓環(huán)境適應(yīng)的失敗”(failuretoadapttostress)狀態(tài)。這兩種行為絕望模型對(duì)絕大多數(shù)抗抑郁藥敏感,操作簡(jiǎn)單、快捷,被廣泛用于抗抑郁藥物的初篩。作為判斷指標(biāo),不動(dòng)時(shí)間反映了小鼠的一種低落情緒,一種絕望狀態(tài)。不動(dòng)時(shí)間可以被臨床有效的抗抑郁藥及一系列抗抑郁治療方法減少,并且不受抗焦慮藥影響,而那些已知的能導(dǎo)致人抑郁的藥物則可以增加不動(dòng)時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明發(fā)現(xiàn)柴胡疏肝散能明顯縮短懸尾及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中小鼠的不動(dòng)時(shí)間,而對(duì)其自主活動(dòng)無(wú)顯著影響,表明該方均有較好的抗抑郁作用,且無(wú)中樞興奮性作用。大鼠群居接觸實(shí)驗(yàn)不需訓(xùn)練動(dòng)物,沒(méi)有剝奪動(dòng)物的飲食或外加電擊等惡性刺激,且穩(wěn)定可靠,因此,是焦慮行為測(cè)試的可靠動(dòng)物模型,配對(duì)孤養(yǎng)大鼠在一個(gè)陌生的環(huán)境彼此都有渴望接觸的動(dòng)機(jī),但同時(shí)又對(duì)陌生環(huán)境產(chǎn)生恐懼,因而形成矛盾沖突狀態(tài)。表現(xiàn)為大鼠正常的群居相互接觸行為(如嗅、咬、追、理毛等)受到抑制,抗焦慮劑可對(duì)抗這種抑制作用。通過(guò)大鼠群居接觸實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)我們發(fā)現(xiàn)柴胡疏肝散高、低劑量均有增加群居接觸時(shí)間(P<0.05)的作用,表明該方具有對(duì)抗群居實(shí)驗(yàn)所引起的矛盾沖突狀態(tài),減輕動(dòng)物的焦慮程度,增加其活動(dòng)次數(shù),具有明顯的抗焦慮作用。抑郁癥是因情志不舒、氣機(jī)郁滯所引起的一類病癥,是一種包括多種精神癥狀和軀體癥狀的復(fù)雜的情感性精神障礙,臨床表現(xiàn)除有心境低落、興趣喪失、思維遲緩、自我評(píng)價(jià)過(guò)低等精神癥狀外,還包括疲勞、失眠、食欲不振、性欲減退、頭痛頭暈、胸悶心慌、胃痛腹脹、大便不調(diào)等。柴胡疏肝散方中柴胡、香附疏肝理氣,大腹皮、枳殼、木香理