化學發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢驗中的應(yīng)用分解

本科畢業(yè)論文題目：化學發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢查中的應(yīng)用學院：化學與環(huán)境工程學院班級：級應(yīng)用化學2班姓名：王俊烽指導(dǎo)教師：李小花職稱：講師完畢日期：年05月2化學發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢查中的應(yīng)用摘要：化學發(fā)光免疫分析技術(shù)（CLIA）是把免疫反映和化學發(fā)光檢測辦法結(jié)合的一種分析技術(shù)。其中免疫反映的特異性和敏捷度都很高。CLIA是在酶聯(lián)免疫分析、放免疫分析和熒光免疫分析背面發(fā)展起來的一種檢測技術(shù)。由于其含有操作簡樸，標記方便，穩(wěn)定度和檢測敏捷度高，速度快，對環(huán)境沒有污染等優(yōu)點因此CLIA在臨床上受到醫(yī)學檢查者和醫(yī)生的一致好評。核心詞：化學發(fā)光免疫分析技術(shù)；基本原理；臨床；醫(yī)學檢查CLIATechnologyAndItsApplicationinTheClinicalLaboratoryAbstract：Chemiluminescenceimmunoassay(CLIA)isananalyticaltechniquetheimmuneresponseandchemiluminescentdetectionmethodscombined.Whichtheimmuneresponseisveryhighspecificityandsensitivity.CLIAistheenzyme-linkedimmunoassay,putimmunoassayandfluorescenceimmunoassaylaterdevelopedadetectiontechnology.Becauseofitssimple,easytomark,highstabilityandsensitivity,speed,noenvironmentalpollution,etc.ThereforeCLIApraisemedicaltestsanddoctorsattheclinic.Keywords:chemiluminescentimmunoassay;fundamental;clinical;medicallaboratory目錄TOC\o"1-3"\u1.CLIA的基本介紹 12.化學發(fā)光免疫分析的原理 32.1CLIA原理 32.2器檢測原理 33.CLIA的分類 43.1發(fā)光免疫物質(zhì)的直接標記分析法 43.2化學發(fā)光免疫物酶催化分析法 43.3發(fā)光免疫物的電化學發(fā)光分析法(ECUA) 44.自動化的CLIA分析系統(tǒng) 45.CLIA技術(shù)有關(guān)問題探討 56.CLIA在臨床檢查中的應(yīng)用 56.1可用CLIA來檢測分析激素 56.2CLIA對類風濕關(guān)節(jié)炎的檢測 66.3CLIA對梅毒的檢測 76.4CLIA對艾滋病（AIDS）病毒的檢測 76.5檢測分析腫瘤標志物 86.6CLIA對糖尿病的檢測 86.7其它物質(zhì)的檢測 87.結(jié)論 9參考文獻 10致謝 12化學發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢查中的應(yīng)用1CLIA的基本介紹：現(xiàn)在，CLIA已經(jīng)獲得了越來越多的關(guān)注，在不同的領(lǐng)域上面都有應(yīng)用，涉及生命科學，醫(yī)學臨床診療，環(huán)境檢測，食品和藥品分析檢測等。Arakawe在1975年左右第一種發(fā)表了化學發(fā)光免疫技術(shù)，到現(xiàn)在為止CLIA已經(jīng)成長為一類優(yōu)秀的并且成熟的超微量活性物質(zhì)的測量技術(shù)。CLIA是在放射免疫分析的辦法上發(fā)展來的一類新的技術(shù)手段，重要有兩類，第一類是免疫反映系統(tǒng)第二類是化學發(fā)光系統(tǒng)。免疫反映系統(tǒng)和酶聯(lián)免疫技術(shù)同樣，經(jīng)常使用雙抗體夾心法（圖1.1）、競爭法（圖1.2）、間接法（圖1.3）等反映模式。CLIA測量辦法是免疫反映中含有高特異性、結(jié)合體或測量新的標記免疫分析技術(shù)。這種辦法的使用范疇廣，近來十幾年成長的特別快，是現(xiàn)在非常優(yōu)秀的一種對疾病的檢測辦法，固然這和全世界各個國家的推廣尚有在免疫分析辦法中它的應(yīng)用頻率高有很大關(guān)系。在與熒光法和酶免法的對比中CLIA的精確性和敏捷性比前兩者都要高出諸多倍，能夠完全換取酶聯(lián)免疫分析和放射免疫分析。但是從現(xiàn)在世界上CLIA的發(fā)展來看，我們國家的免疫診療技術(shù)還是相對落后的，如表1.1我國和世界強國在免疫的應(yīng)用上對比?，F(xiàn)在市場上面的醫(yī)院對CLIA的應(yīng)用很頻繁，對CLIA也很重視。現(xiàn)在醫(yī)院能夠操作化學發(fā)光免疫分析辦法測量激素（黃體生成素、雌二醇、孕酮、睪酮等）；產(chǎn)篩（有關(guān)蛋白、β-HCG、AFP）；腫標（CA-125、CA-135、CA-199、CEA、AFP）；乙肝（表面抗原、表面抗體、e抗原、e抗體、核心抗體）；優(yōu)生（弓形體抗體、風疹病毒抗體、單純皰疹病毒抗體I、單純皰疹病毒抗體Ⅱ、巨細胞病毒抗體）；性?。ㄖгw、衣原體、淋病奈瑟菌）；電解質(zhì)（鉀、鈉、氯、總CO2、鈣、離子鈣）等。CLIA重要含有試劑便宜且使用期長、辦法特異性特別好、自動化程度很高、測量的敏捷度高、檢測范疇廣、辦法穩(wěn)定、得到成果的時間很快等一系列優(yōu)點因此現(xiàn)在各研究人員對這種CLIA技術(shù)非常承認。傳統(tǒng)的生物檢測技術(shù)已經(jīng)逐步的被化學發(fā)光免疫技術(shù)所取代。表1.1中國與世界其它國家免疫診療對比Table1.1Chinaandtherestoftheworldimmunodiagnosticcontrast中國先進國家放射免疫(RIA)在20世紀70年代出現(xiàn)，現(xiàn)在在縣級以上的醫(yī)院使用很日常；此辦法在使用頻率在下滑；廠家在藥品和儀器的開發(fā)上是一體的。在上世紀60年代出現(xiàn)，現(xiàn)在基本在市場上消失了；此辦法壽命已經(jīng)結(jié)束；廠家在藥品和儀器的開發(fā)上是一體的。酶聯(lián)免疫(ELISA)在20世紀80年代初次出現(xiàn)，現(xiàn)在在各級的醫(yī)療單位都有使用，使我們國家免疫治療的最普遍的辦法；辦法處在成熟期；廠家在藥品和儀器開發(fā)上是一體的。在上世紀70年代第一次出現(xiàn)，現(xiàn)在仍然繼續(xù)使用；此辦法的壽命基本快結(jié)束；廠家在藥品和儀器的開發(fā)上是一體的。發(fā)光免疫(CLIA)在上個世紀90年代引進，現(xiàn)在只有極少數(shù)較大的醫(yī)院在一部分項目上面使用；辦法處在成長久；全部靠進口，國內(nèi)沒有廠家生產(chǎn)。在上世紀80年代出現(xiàn)，現(xiàn)在是各個醫(yī)院的重要手段；此辦法處在成熟期；廠家在藥品和儀器的開發(fā)上是一體的。圖1.1雙抗體夾心法[1]圖1.2競爭法[1]Fig1.1DoubleantibodysandwichFig1.2CompetitionLaw圖1.3間接法[1]Fig1.3Indirectmethod2化學發(fā)光免疫分析的原理2.1CLIA原理CLIA的基本原理就是用免疫反映和化學發(fā)光反映結(jié)合的一種定量檢測技術(shù)。這種辦法含有這兩種辦法的優(yōu)點，不僅含有敏捷度高的特點，并且尚有特異性高的特點?；瘜W發(fā)光免疫分析里面最重要的就是免疫系統(tǒng)和化學發(fā)光系統(tǒng)這兩種。放射免疫測量和免疫反映里面的抗原尚有抗體同樣，化學發(fā)光卻是使用某種化合物通過催化劑尚有氧化劑解決出來，在這之后變成激發(fā)態(tài)的化合物，當它變成基態(tài)就能夠把剩余的能量轉(zhuǎn)變?yōu)楣庾拥臓顟B(tài)，最后就能夠使用發(fā)光測量儀檢測這里面光子的產(chǎn)率。即將要被檢測的抗原、抗體或在磁性顆粒之間的抗原、抗體在與使用了化學發(fā)光劑標記了的抗原、抗體反映。通過磁場和自由狀態(tài)的組合得出的成果很可靠，優(yōu)點就是測量的范疇廣，試劑儲存的時間會更加長，自動化程度更加的高，它的敏捷度和RIA等傳統(tǒng)測量方法比起來更加的高，得到成果的時間更快，試劑在市場上的價格特別便宜。2.2儀器檢測原理在化學反映的檢測中，被氧化后的某些化學基團，以形成激發(fā)態(tài)，并且發(fā)射某些波長的光子而返回基態(tài)。它事實上就是用一種高敏捷度的組合來分析免疫反映和化學反映的手段，也被叫做微量倍增技術(shù)。CLIA有兩個方法，其中的第一種方法就是采用競爭法來測量小分子中間的抗原物質(zhì)。第二個是抗原物質(zhì)的大分子通過夾心法測定。其中固相微觀磁性粒子直徑小，極大地增加了涂層的表面積，抗體或抗原的吸附量，反映速度，并且容易分離和清洗。3CLIA的分類發(fā)光免疫物直接標記分析法、發(fā)光免疫物電化學分析法、發(fā)光免疫物酶催化化學分析法都是根據(jù)運用在免疫分析體系中CLIA不同的辦法而得到。3.1CLIA的直接標記分析法發(fā)光物質(zhì)直接標記免疫物質(zhì)的這種分析辦法就是使用作為抗原物質(zhì)的吖啶酯直接標記抗體，將適宜的測試樣品和抗體進行免疫反映，它會形成抗體-包被的固相抗原，吖啶酯標記抗體復(fù)合物。3.2CLIA的酶催化分析法發(fā)生免疫反映時抗原或者抗體是發(fā)光免疫酶催化化學分析辦法的樣本，發(fā)光的酶是這個反映的標記物。3.3CLIA的電化學發(fā)光分析法(ECUA)化學發(fā)光和電化學是這種分析方法的兩個環(huán)節(jié)，電子給體是三丙胺（TPA），抗體（抗原）是用三聯(lián)吡啶釕所標記的。三聯(lián)吡啶釕是反映的電化學發(fā)光劑。因此電子在電場中的轉(zhuǎn)移體現(xiàn)了互相發(fā)光反映的特異性。4自動化的CLIA分析系統(tǒng)：自動化分析系統(tǒng)就是人們給檢測過程中全部使用儀器完畢，極少使用人工操作完畢的這種儀器的命名，現(xiàn)在國外有許多的廠家已經(jīng)開發(fā)出這種檢測儀，并且有多個型號可供選擇。原理不同的化學發(fā)光信號，它所檢測的數(shù)據(jù)也有很大差別，由于它產(chǎn)生的信號檢測完全不同，因此也就有了使用不同的試劑盒檢測的實驗數(shù)據(jù)不同。表2不同CLIA的比較Table2ComparisonofdifferentmethodsCLIA吖啶酯標記CLIA酶標記CLIAECLIA標記物Apase/HRP三聯(lián)吡啶釕吖啶酯類型夾心法、競爭法速度慢最快快影響因素多少少能不能半自動開放能不行不行成本少多多底物NaOH、H2O2金剛烷、魯米諾電激光5CLIA技術(shù)有關(guān)問題探討檢測辦法不同檢出的值也有差別：檢測成果的影響因素有諸多，如使用期、試劑盒質(zhì)量、儀器的校準、儲存的條件、實驗室的環(huán)境條件等。競爭法與雙位點夾心法是最典型的不同反映模式，在統(tǒng)計學上不同的測定值含有不同的意義，由于前者使用的是含有高度特異性的兩株單克隆抗體，因此測定值相對于競爭法來說要低。即使反映模式完全相似，由于抗體的親和力和特異性不同，因此相對于測定值來說也有一定的影響。另外影響測定值的因素尚有標記物的活性、固相抗體的制備、原則品的差別等。6CLIA在臨床檢查中的應(yīng)用6.1可用CLIA來檢測分析激素激素是含有高效能的，它是由內(nèi)分泌細胞或者內(nèi)分泌腺所分泌的一種生物活性物。細胞之間重要就是依賴這種物質(zhì)完畢信息的傳遞。對于檢測甲狀腺激素、性激素等一類的激素，可根據(jù)診療狀況和診療后來恢復(fù)狀況等數(shù)據(jù)來提供，測量的特異性和敏捷度從而能夠較好的改善。Vutyavanich等[2]使用CLIA測量了血清中含有的催乳素、促卵泡生成素、睪丸素、促黃體生成素，CLIA檢測技術(shù)能夠較好的測量激素的含量。Schmidt-Gaykd等[3]用以前的放射免疫法與測量的降鈣素比較后，得出CLIA技術(shù)有更高的精密度和精確度，能夠較好的被臨床所使用，使得檢測成果更加的精確。Karlsson等[4]用CLIA技術(shù)檢測了患有甲狀腺病癥的病人，這個辦法和其它的辦法比起來含有更加的精確、快速以及敏捷度高的特點。甲狀腺病癥有內(nèi)科診療和外科診療。內(nèi)科診療有甲亢尚有甲狀腺的炎癥。其中炎癥里面又有急性的病癥、亞急性的病癥和慢性的病癥。在內(nèi)外科的治療里面分辨它們的根據(jù)是：在檢測的時候內(nèi)科的甲狀腺能力和健康人的有區(qū)別，外科檢測時它卻顯示的是和健康人的同樣。內(nèi)科和外科之間卻不是完全獨立的，它們的病理也是能夠彼此變更的，特別是內(nèi)科某些時候也需求外科的診療。趙德臣等[5]測定甲狀腺激素的具體環(huán)節(jié)是采集血樣，放在沒有放抗凝劑的采血管里面。靜置待凝固后來離心，低溫保存，樣品收集一周左右，全部樣品一起測量。CLIA用的儀器是e411。試劑盒用的是和儀器相配套的。測量的是病人血清里面的血清游離三碘甲腺原氨酸、血清游離甲狀腺素、促甲狀腺激素的含量。完全按照試劑盒的闡明，在準備測量的血清里面加入需要的試劑，混合后，在常溫環(huán)境下靜置，把反映條放在熒光儀上面檢測讀取數(shù)據(jù)。使用CLIA和其它辦法比較起來對患有甲狀腺病人的檢查，得出的成果是對假陽性的檢查效率更加好，而在假陰性的檢查上面卻比其它辦法更低。固然CLIA法在檢查里面特異性和敏捷度都要比其它辦法高出諸多。6.2CLIA對類風濕關(guān)節(jié)炎（RA）的檢測RA是人體關(guān)節(jié)發(fā)病，從而造成人體畸形的一類本身免疫系統(tǒng)的慢性病癥。RA的發(fā)病狀況和遺傳、感染、性激素都有很大的關(guān)聯(lián)。在上世紀90年代，抗風濕藥藥品出現(xiàn)在市場上面，對RA的治療有了很大的變化。Sehellekens[6]用化學試劑合成了環(huán)瓜氨酸肽（CCP），其中CCP能夠用來作為ELISA反映的吸附實驗，在這之后諸多研究都研究擬定了CCP對于RA的病情治療有較好的敏捷度和特異性。CCP抗體測量已經(jīng)能夠被用來當成一類全新的判斷RA的血清學辦法。徐雪亮等[7]使用CLIA測量了RA患者血清中的CCP，發(fā)現(xiàn)CLIA法測量抗CCP的敏捷度和酶聯(lián)免疫法比起來要高諸多，對RA辨析的敏捷度和特異型也都要高諸多。所需要的時間非常少。白伊娜等[8]使用了ECLIA分析和ELISA檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的相似性對比，用上面這兩個方法測量抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的最后實驗數(shù)據(jù)對比得出電化學發(fā)光免疫分析和酶聯(lián)免疫測量抗CCP抗體有非常好的統(tǒng)一性。王慧燕等[9]用CLIA測定抗環(huán)瓜氨酸肽抗體有較好的特異性，但是敏捷性仍然還是有點低，這樣，可能使有極少的病人病情查不出。因此在醫(yī)學上最佳在檢測血清類風濕因子和抗CCP抗體一起進行，這樣就能夠提高RA的檢測率。6.3CLIA對梅毒的檢測馬江濤等[10]報道梅毒是一種性傳輸疾病，它是由蒼白螺旋體引發(fā)的慢性傳染疾病。此病的傳染性特別強，并且就現(xiàn)在來看這種病在我們國家的狀況是每年都在上升?，F(xiàn)在在實驗室里面的測量方法重要是甲苯胺紅不加熱血清實驗（TRUST）和快速血漿反映素環(huán)狀卡片實驗（RPR）等。侯曉菁等[11]采用了化學發(fā)光免疫分析與梅毒螺旋體明膠凝集實驗這兩個辦法，對7913個血清樣本進行梅毒螺旋體特異性的測量，對比測量后發(fā)現(xiàn)CLIA分析這種抗體的敏捷度比梅毒螺旋體明膠凝集實驗高諸多，CLIA的陰陽性符合率能夠達成99.95%和100%，并且化學發(fā)光免疫分析辦法簡樸測試時間快、重復(fù)性好，這種辦法能夠大量的選擇梅毒病菌。在醫(yī)學檢測時能夠和甲苯胺紅不加熱血清和RPR一起測量，這樣能夠測量出極少的假陽性尚有鉤狀效應(yīng)，最后得到的數(shù)據(jù)更值得信賴。王華等[12]報道了在使用了CLIA測量的方法后，已經(jīng)能夠得到含有特異性的抗原蛋白，因此，現(xiàn)在對于梅毒的檢測能夠使用CLIA檢測的辦法。CLIA在梅毒的檢測在醫(yī)學上處在非常重要的地位。6.4CLIA對艾滋?。ˋIDS）病毒的檢測AIDS是一種獲得性免疫缺點綜合征，由于感染艾滋病病毒（HIV）而產(chǎn)生的傳染病，到現(xiàn)在為止，世界上除了防止以外再也沒有其它的特別有用的診療辦法。隔絕輸血的時候以外感染，盡早發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒感染者，然后使用有效的隔離辦法是現(xiàn)在世界上重要的控制辦法。在現(xiàn)階段有很大的研究都擬定化學發(fā)光免疫分析比酶聯(lián)免疫敏捷度更加好，并且黃疸、溶血及脂血對它的影響非常小，因此假陽性率更少[13]。陳慶如[14]報道ECLIA測定艾滋病病毒的含量使用的辦法為：用生物素抗艾滋病病毒抗體,使用三聯(lián)吡啶釕標記的艾滋病病毒抗體和即將檢測的標本化學作用,再放入人組織多肽抗原檢測試劑,最后就能夠得到標本里面艾滋病病毒的陰陽性臨界值。ECLIA法結(jié)合了諸多的先進技術(shù)很大程度的優(yōu)化了測量方法的敏捷度,并且新使用的儀器能夠達成測量時候的自動化和原則化,很大程度的減少了人為操作的誤差,能夠給醫(yī)學檢測提供更加精確的數(shù)據(jù)。電化學發(fā)光免疫分析法檢測血清中艾滋病病毒的全過程都是在密閉的系統(tǒng)里面進行,很大程度的減少了病毒的傳染和對試劑的污染。數(shù)據(jù)測量有較好的特異性。精確度比ELISA好諸多,檢測的寬度也比ELISA高好幾倍。是現(xiàn)在比較好的一種檢測辦法。6.5檢測分析腫瘤標志物腫瘤細胞分裂或生長的時候機體和腫瘤細胞發(fā)生化學反映或者有部分腫瘤細胞釋放、合成從而生成的一種物質(zhì)叫做標志物，其中涉及癌基因產(chǎn)物、激素、酶（同工酶）及蛋白質(zhì)等。病人體內(nèi)組織、體液、血液或細胞中含有腫瘤標志物?；瘜W發(fā)光免疫分析能夠?qū)Σ∪梭w內(nèi)惡性及良性腫瘤細胞實施手術(shù)后來的監(jiān)察和體外的早期病情的判斷，固然也能夠找到新的腫瘤細胞。Raslan和Shabin[15]比較了兩種標志物即健康孕婦和胎膜早破孕婦陰道液中的含量：人絨毛膜促線性激素和甲胎蛋白（AFP），胎膜早破的孕婦與健康孕婦相比陰道積液中的人絨毛膜促線性激素和甲胎蛋白有明顯性的增高，其中最高的是甲胎蛋白的特異性和敏感性。Sakaida等[16]測量了肝病患者細胞色素Ｃ的含量，比較得出了色素Ｃ可能會成為肝衰竭的一種全新的標志物。Mao等[17]檢測了cyfra21-1的濃度、鱗狀細胞癌抗原、血清中癌胚抗原，從而達成了對食管癌患者術(shù)后病情監(jiān)測及診療的目的。6.6CLIA對糖尿病的檢測糖尿病的類別能夠分成兩種形式的癥狀：第一種類型是胰島素依賴型，第二種類型是非依賴型。這兩種類型的患者含有不相似的地方就是“三多一少”（平時吃飯吃的比較多、飲水也飲的特別多、隨時都想尿、人長的比較瘦）的癥狀不是特別的明顯[18]，最重要的是非依賴型的患者極少能盡早的發(fā)現(xiàn)病癥，如果不能及時的發(fā)行病癥并且就醫(yī)就會對患者造成很大的影響，因此對病人的早期判斷和病癥確實立就特別核心。對糖尿病患者測量胰島素原、胰島素、C肽是經(jīng)常使用的幾個辦法，依靠這些測量的數(shù)據(jù)能夠懂得胰島素合成與分泌功效[19]。謝瑋[20]等人對50例已確診的非依賴型糖尿病病人進行饅頭餐測試，成果顯示吃了饅頭的病人自己體內(nèi)的胰島素即使比沒吃的時候高但還是比正常人低諸多。這種狀況的因素是胰島β細胞被高血糖所約束，讓它的反映能力減少了。因此在臨床上能夠通過CLIA測量胰島素和C肽的辦法來分析判斷糖尿病的病情。6.7其它物質(zhì)的檢測CLIA技術(shù)還能夠進行測定酶、葉酸、細胞因子、維生素、細菌、免疫球蛋白及基因等其它的某些微量物質(zhì)[21,22]。7結(jié)論化學發(fā)光免疫分析辦法作為一種含有發(fā)展前景的免疫分析辦法，現(xiàn)在已經(jīng)體現(xiàn)出來了諸多優(yōu)點，如試劑便宜且使用期長、辦法特異性好、自動化程度和測量的敏捷度都很高、檢測范疇廣、辦法穩(wěn)定、得到成果的時間快等?；瘜W發(fā)光免疫分析辦法現(xiàn)在已被廣大的醫(yī)學工作者和研究者所承認，傳統(tǒng)的生物檢測技術(shù)必將逐步的被化學發(fā)光免疫技術(shù)所取代?，F(xiàn)在應(yīng)用于臨床疾病治療和診療中的全自動化學發(fā)光免疫分析儀器能進行全自動分析，對檢測者不僅無害，并且試劑穩(wěn)定，速度快，能夠得出精確的成果。展望將來，CLIA技術(shù)本身一定會不停改善與完善，朝著更快速、精確、敏捷度高和智能化的方向進步。隨著我們國家高新精密儀器制造業(yè)技術(shù)的發(fā)展和進步。小型的，更加智能化的化學發(fā)光免疫分析儀器在微型自動化的化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)研制上將獲得更大的進步。CLIA必將會為臨床診療提供非常重要的根據(jù)?；瘜W發(fā)光免疫分析技術(shù)在將來的應(yīng)用上必將迎來全新的高峰。參考文獻[1][2]VutyavanichT,PiromlertamornW,SirirungsiW,etal.FrequencyofYchromosomalabnormalitiesininfertileThaimenwitholigozoospermiaandazoospermia[J].AsianJAndrol,(9):68-75.[3]Schmidt-GaykH,SpanuthE,KonttingJ,tal.Performanceevaluationofautomatedassaysforbeta-Crosslaps,NMID-Osteocalcinandintactparathyroidhormone（BIOROSEMulticenterStudy）[J].ClinChemLabMed,,42(1):90-95.[4]KarlssonSL,IndridasonOS,FranzsonL,etal.AlgengiogorsakirafleiddskalkvakaohofsmedelfullordinnaahofudborgarsvaedinuPrevalenceofsecondaryhyperparathyroidism(SHPT)andcausalfactorsinadultpopulationinReykjavikarea[J].Laeknabladid,,91(2):161-169.[5]趙德臣,張瑜.化學發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫法檢測AFP的比較[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,；14(1):106．[6]SehellekensGA,VisserH,DeJongBA,etal.Thediagnosticpropertiesofrheumatoidarthritisantibodiesrecognizingacycliccitrullonatedpeptide[7]徐雪亮,繆怡,張琦.電化學發(fā)光法檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的辦法學評定[J].中國醫(yī)學檢查雜志,,10(4):232-233.[8]白伊娜，宋寧，李萍，等.電化學發(fā)光免疫測定與酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體比較[J].中華臨床免疫和變態(tài)反映雜志，，6(4):241-246．[9]王慧燕，王玲莉，謝奇朋，等.化學發(fā)光免疫測定抗CCP抗體對類風濕關(guān)節(jié)炎的診療價值[J]．中國衛(wèi)生檢查雜志,,1(25):210-212.[10]馬江濤,陳衛(wèi)等高危人群梅毒檢測成果分析[J].航空航天醫(yī)學雜志.，23(1)：17-19.[11]侯曉菁,梁艷,陳潔等.化學發(fā)光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的實驗評價[J].檢查醫(yī)學,,25(5):365-367.[12]王華,李代渝,雷麗明.梅毒螺旋體血清學檢測辦法及應(yīng)用[J].中華檢查醫(yī)學雜志,,30(6):660-661.[13]付小國,王燕華,秦加巍.電化學發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測人類免疫缺點病毒抗體效果評價[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,,8(4):77-78.[14]陳慶如.食管靜脈曲張?zhí)自g(shù)的護理[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,，8(4)：76-77.[15]ShahinM,RaslanH.Comparativestudyofthreeamnioticfluidmarkersinprematureruptureofmembranes:prolactin,betasubunitofhumanchorionicgonadotropin,andalpha-fetoprotein[J].GynecolObstetInvest,63(4):195-199.[16]SakaidaI，KimuraT，YamasakiT，etal.Cytochromccisapossiblenewmarketforfulminanthepatitisinhumans[J].JGastroenterol,,40(2):179-185.[17]MaoYS,ZhangDC,ZhaoXH,etal.SignificanceofCEA,SCCandCyfra2l-1serumtestinesophagealcancer[J].Zhonghu