關(guān)于藥企檢查中清潔驗(yàn)證問題分析

Part1、最差條件

理論上，每個(gè)品種涉及的不同設(shè)備的都應(yīng)有確認(rèn)的各自的清潔操作規(guī)程。但在藥品生產(chǎn)實(shí)踐中，企業(yè)不可能也不必要耗費(fèi)人力、物力、財(cái)力對(duì)所有涉及到的設(shè)備逐個(gè)進(jìn)行確認(rèn)。這就需要企業(yè)根據(jù)自身實(shí)際情況，在眾多的條件中通過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估選擇并確定最差條件進(jìn)行清潔驗(yàn)證。最差條件需要考慮的因素有很多，包括：產(chǎn)品或物料的毒性、溶解性、有無顏色與氣味、生產(chǎn)的批量及批次，設(shè)備的容積大小和幾何形狀、表面粗糙程度、材質(zhì)是否容易清潔、是否存在不易清潔的管徑及死角部位、是否存在多品種共線等。清潔驗(yàn)證最差條件的選擇需要進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，最終確定最差條件。在藥品生產(chǎn)企業(yè)檢查中發(fā)現(xiàn)，個(gè)別企業(yè)在對(duì)一些生產(chǎn)控制區(qū)域相關(guān)設(shè)備清潔規(guī)程的制定上，與相關(guān)清潔驗(yàn)證中的最差條件相去甚遠(yuǎn)。如某企業(yè)D級(jí)潔凈區(qū)清潔規(guī)程(文件編號(hào)：*)4.5項(xiàng)下規(guī)定設(shè)備在同品種換批時(shí)不清潔，4.13.2項(xiàng)下規(guī)定設(shè)備在同品種連續(xù)生產(chǎn)超過2周或同品種換批間隔時(shí)間超過3天時(shí)按更換品種的方式進(jìn)行清潔；上述文件的規(guī)定缺乏相關(guān)驗(yàn)證數(shù)據(jù)支持及依據(jù)。又如某企業(yè)化藥片劑與中藥顆粒劑共線，清潔驗(yàn)證方案(文件編號(hào)略)中初步選取阿奇霉素、半夏和胃顆粒作為顆粒劑生產(chǎn)線的清潔驗(yàn)證參照物，選取安乃近作為片劑生產(chǎn)線的清潔驗(yàn)證參照物，選取微生物殘留作為其中一項(xiàng)考察指標(biāo)，最終選取阿奇霉素作為清潔驗(yàn)證參照物，不能反映化學(xué)藥與中成藥共線生產(chǎn)的清潔風(fēng)險(xiǎn)，而清潔驗(yàn)證報(bào)告(文件編號(hào)略)中阿奇霉素回收率試驗(yàn)選取濃度高于線性最高濃度100倍。某藥品生產(chǎn)企業(yè)軟膏真空乳化攪拌機(jī)清潔驗(yàn)證報(bào)告不完整：該設(shè)備用于4個(gè)已上市品種、2個(gè)研究品種的配制，在清潔驗(yàn)證方案中未對(duì)所有使用該設(shè)備的品種進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并明確最難清潔的品種，僅使用了***軟膏作為清潔驗(yàn)證的對(duì)象，對(duì)跟該設(shè)備一體的預(yù)處理鍋(用于配制該品種的基質(zhì)：白凡士林及其它品種的水相)的清潔未納入驗(yàn)證報(bào)告中。Part2、清潔方法

清潔方法包括共線產(chǎn)品更換不同產(chǎn)品清潔方法和相同產(chǎn)品不同批次更換的清潔方法、不同生產(chǎn)設(shè)備的清潔方法、清潔方式是在線清潔還是離線清潔、清潔劑的選擇和種類、清潔時(shí)間、清潔程序、清潔操作動(dòng)作、清潔劑的濃度、清潔劑更換種類的時(shí)間間隔、是否需要預(yù)洗和檢查、清洗后是否需要干燥、清潔后的設(shè)備或器具的儲(chǔ)存方式及條件、清潔劑是否屬于Ⅰ、Ⅱ類溶劑及對(duì)環(huán)境造成影響等內(nèi)容。在檢查中發(fā)現(xiàn)某企業(yè)清潔操作規(guī)程規(guī)定了不同車間潔凈服分開清洗的要求，但無洗衣機(jī)專用要求的相關(guān)規(guī)定，而且洗完后的潔凈服共用同一車間的整衣間，企業(yè)未對(duì)上述潔凈服清潔環(huán)境與存儲(chǔ)方式可能造成的交叉污染進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。又如某企業(yè)《一般生產(chǎn)區(qū)容器具清潔、干燥標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》(文件編號(hào)略)規(guī)定生產(chǎn)結(jié)束用乙醇浸泡生產(chǎn)器具，然后再水洗，但現(xiàn)場(chǎng)動(dòng)態(tài)檢查時(shí)步驟1工序的操作人員未按規(guī)定操作，對(duì)浸泡用乙醇任意以水進(jìn)行勾兌。某企業(yè)《凍干粉針車間灌裝加塞機(jī)(灌裝部件)、除菌過濾系統(tǒng)清潔效果再驗(yàn)證方案》、《凍干粉針車間KGS10-X2型抗生素瓶灌裝加塞機(jī)清潔、消毒、滅菌操作規(guī)程》、《凍干粉針車間藥液過濾系統(tǒng)清潔、滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》中可拆卸部件清潔程序有兩種清潔方法(常規(guī)清潔方法、2%氫氧化鈉溶液清潔方法)，但驗(yàn)證報(bào)告顯示只驗(yàn)證了其中一種；2%氫氧化鈉溶液清潔方法要求“放入2%氫氧化鈉溶液中浸泡15~30分鐘”，實(shí)際驗(yàn)證選擇浸泡時(shí)間為30分鐘。Part3、取樣方法及取樣點(diǎn)

清潔驗(yàn)證相關(guān)取樣方法包括淋洗取樣法、擦拭取樣法、目視檢查法等。淋洗取樣法適用于無法采用擦拭取樣的區(qū)域，取樣分析結(jié)果可以代表沖洗液中所有被移除的殘留物總和。取樣過程不會(huì)污染設(shè)備、取樣后無需重新清洗、該方法適用于中藥制劑活性成分、清潔劑、生物負(fù)載在線分析。由于該法只能檢測(cè)到溶于沖洗溶劑的殘留物，因此必須確保沖洗液接觸到所有表面以充分檢測(cè)殘留物。該方法關(guān)鍵之處在于沖洗造成樣品稀釋，殘留的分布位置信息有限，導(dǎo)致無法檢出。該方法通常僅限于沖洗整個(gè)設(shè)備。對(duì)舊設(shè)備而言，是否有取樣口，或者取樣口是否容易接近都是要考慮的問題。擦拭取樣法常采用纖維材料擦拭表面，將有殘留物的纖維材料置于溶劑中，用經(jīng)過驗(yàn)證可行的方法分析溶劑中的殘留物。選擇擦拭棉簽前需要評(píng)估棉簽的性質(zhì)，如析出物和脫落物。表面殘留物的回收率還取決于棉簽頭部或擦拭巾的大小和形狀以及把手彈性和長(zhǎng)度。不同材質(zhì)的回收率試驗(yàn)在此方案進(jìn)行前必須完成，應(yīng)由同一個(gè)人至少進(jìn)行三次操作，應(yīng)大于或等于50%，三次結(jié)果的RSD應(yīng)小于等于20%。為確保產(chǎn)品的安全性，在計(jì)算殘留量時(shí)應(yīng)以最低污染的風(fēng)險(xiǎn)，采取回收率最低的材質(zhì)作為最終回收率。目視檢查法盡管直觀迅速，能檢查到取樣不易發(fā)現(xiàn)、集中集聚的小面積污染物，可在清潔驗(yàn)證和日常清潔操作中用于評(píng)估和證明效果、評(píng)估目視檢查限度與允許殘留限度的關(guān)系，適用于一般清洗結(jié)果判定；但由于不能定量，主觀性強(qiáng)。如某些設(shè)備、管道等無法直接觀察的表面，需借助光學(xué)設(shè)備(如纖維內(nèi)窺鏡等)或輔助照明設(shè)備檢查，故不做單一可接受標(biāo)準(zhǔn)。制藥生產(chǎn)設(shè)備種類繁多，各種設(shè)備的構(gòu)造和形狀不盡相同。取樣點(diǎn)的選擇必須具有很強(qiáng)的代表性，取樣點(diǎn)的選擇至關(guān)重要。取樣點(diǎn)的選擇應(yīng)考慮的風(fēng)險(xiǎn)因素包括不限于：接觸的藥物量大、表面粗糙、不光滑的設(shè)備區(qū)域，清潔劑不易接觸的死角、管徑從小到大變化區(qū)域，設(shè)備壓力小、流速低區(qū)域，易吸附主藥或清潔劑區(qū)域等。設(shè)備存在微生物殘留的風(fēng)險(xiǎn)因素還包括排水口和易積水的區(qū)域。取樣點(diǎn)的選擇應(yīng)在清潔驗(yàn)證方案中詳細(xì)指定、說明，并用圖片、圖表和符號(hào)標(biāo)示明確取樣點(diǎn)的實(shí)際位置。取樣點(diǎn)應(yīng)關(guān)注設(shè)備的特殊位置結(jié)構(gòu)，如坡度、光滑程度、拋光程度、圓弧角、結(jié)合處、盲管、焊縫或密封接縫，以及下料口、沖頭、灌裝頭、管道等處。上述部位清潔劑流速低或不易到達(dá)，易吸附殘留物，一般情況下選擇擦拭取樣。檢查中發(fā)現(xiàn)一些生產(chǎn)企業(yè)對(duì)清潔方式選擇不合理、清潔驗(yàn)證方案中的取樣計(jì)劃未對(duì)取樣位置、取樣量和取樣數(shù)量進(jìn)行詳細(xì)描述，不利于實(shí)際操作，且對(duì)取樣點(diǎn)的合理性進(jìn)行分析不足。如某中藥配方顆粒生產(chǎn)企業(yè)固定料斗混合機(jī)、篩粉機(jī)、振動(dòng)篩清潔規(guī)程中，清潔劑均為飲用水且未用純化水進(jìn)行清洗，清潔效果評(píng)價(jià)僅為目視檢查；某企業(yè)清潔驗(yàn)證殘留物擦拭取樣及樣品制備記錄不完整，存在缺少取樣對(duì)應(yīng)生產(chǎn)批次和取樣時(shí)間信息等問題；某企業(yè)未對(duì)配液罐的清潔前取樣進(jìn)行檢驗(yàn)；某企業(yè)QXJ-120型提升式清洗機(jī)再驗(yàn)證報(bào)告(文件號(hào)：*)制定不詳盡中，未明確所使用到的料斗型號(hào)和清潔驗(yàn)證取樣點(diǎn)；某過篩間的一個(gè)地漏有部分位于地面圓弧地角下，不方便清潔及取樣；某企業(yè)清潔驗(yàn)證報(bào)告(編號(hào)：YZ07-013b-2)中阿奇霉素回收率試驗(yàn)選取濃度高于線性最高濃度100倍；某企業(yè)個(gè)別設(shè)備清潔驗(yàn)證方案設(shè)計(jì)不合理，如：用于肝素芐索氯銨鹽真空干燥托盤的清潔驗(yàn)證方案中規(guī)定只用目視檢查，未取樣做活性殘留檢測(cè)。Part4、殘留物及分析方法

在藥品實(shí)際生產(chǎn)過程中，清潔后的場(chǎng)地和設(shè)備可能存在多種殘留物，如活性成分(原料藥主成分)、輔料、溶劑、降解產(chǎn)物、清潔劑、溶劑、消毒劑、微生物、細(xì)菌內(nèi)毒素、物理微粒等。在實(shí)際清潔驗(yàn)證過程中，往往根據(jù)使用相近設(shè)備組合的產(chǎn)品進(jìn)行分類。同一類別的設(shè)備組合中選擇毒性最強(qiáng)或者最難清潔的殘留物作為參照物質(zhì)，并以此作為清潔驗(yàn)證中要清潔的目標(biāo)，其限度作為清潔驗(yàn)證程度的重要指標(biāo)。藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特性選擇合適的檢測(cè)方法，真實(shí)反映清潔效果。清潔驗(yàn)證的方法驗(yàn)證應(yīng)按照《中國藥典》附錄9101的規(guī)定參照“雜質(zhì)測(cè)定”定量或限度的方法進(jìn)行驗(yàn)證，涵蓋準(zhǔn)確性、精密度、專屬性、線性和范圍，及定量限、檢測(cè)限等內(nèi)容。涉及到藥典方法如細(xì)菌內(nèi)毒素、微生物限度檢驗(yàn)方法，需要確認(rèn)方法適用性，不需要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。清潔驗(yàn)證過程中涉及的所有設(shè)備的儀器儀表必須進(jìn)行校準(zhǔn)，確保獲得數(shù)據(jù)參數(shù)的準(zhǔn)確性。相關(guān)分析方法的選取應(yīng)考慮被檢測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)、及方法本身的靈敏度是否滿足檢測(cè)出限度范圍內(nèi)的殘留物或污染物。常用清潔驗(yàn)證分析方法有高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法(TLC)、分光光度法(UV)、總有機(jī)碳(TOC)檢測(cè)法、電泳分析法、pH值和電導(dǎo)率檢測(cè)法等。高效液相色譜法(HPLC)具有專屬性高、靈敏度高、檢出限低等特點(diǎn)。對(duì)于組分明確、純度高的品種來說，基本能反映清潔效果。但檢測(cè)所用設(shè)備、對(duì)照品等成本較為昂貴，可能分析時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。薄層色譜法(TLC)具有專屬性高、靈敏度高、可定量的優(yōu)點(diǎn)。但終點(diǎn)目視無法定量，且樣品制備時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。分光光度法(UV)專屬性較高，靈敏度高；但無法定量檢測(cè)?？傆袡C(jī)碳(TOC)檢測(cè)法可在線監(jiān)測(cè)測(cè)定包括水溶性物質(zhì)在內(nèi)的有機(jī)物殘留，樣品可快速周轉(zhuǎn)，在中藥制劑清潔驗(yàn)證中較常用；但僅適用水溶性樣品，且專屬性較差。電泳分析法對(duì)生物藥品有專屬性，檢測(cè)靈敏度高；但存在檢測(cè)成本昂貴、不能處理變性蛋白質(zhì)、樣品周轉(zhuǎn)時(shí)間長(zhǎng)的不足。pH和電導(dǎo)率檢測(cè)法常用于在線清洗系統(tǒng)的清洗終點(diǎn)判斷，優(yōu)點(diǎn)是可快速測(cè)定和在線監(jiān)測(cè)，經(jīng)濟(jì)方便且應(yīng)用廣泛；但僅適用水溶性樣品，專屬性較差。部分生產(chǎn)企業(yè)清潔驗(yàn)證工作中的殘留物檢測(cè)用樣品處理方式、分析方法選擇上存在一定問題，如某企業(yè)《F線在線清洗、滅菌效果再驗(yàn)證方案》未對(duì)殘留量的分析方法進(jìn)行確認(rèn)；某企業(yè)清潔殘留限檢測(cè)方法采用《清潔驗(yàn)證中***殘留分析方法驗(yàn)證報(bào)告和不同材質(zhì)上的回收率研究》(文件編號(hào)：*)中樣品處理方法為“棉簽加入10mL水中，超聲處理10min”，與擦拭樣品檢驗(yàn)原始記錄中樣品處理方法不一致；某企業(yè)殘留檢驗(yàn)項(xiàng)目不合理(如僅對(duì)清潔劑殘留進(jìn)行檢測(cè)、僅進(jìn)行目視殘留檢測(cè)、設(shè)備堿液浸泡清洗后不測(cè)試pH值等)，具體限度數(shù)值(如紫外吸光度小于特定數(shù)值等)制定依據(jù)不充分，未按驗(yàn)證方案規(guī)定項(xiàng)目進(jìn)行全項(xiàng)檢測(cè)等。Part5、人員培訓(xùn)

從事相關(guān)清潔驗(yàn)證的人員的組成和組織情況是確保清潔驗(yàn)證有效實(shí)施的首要條件。對(duì)于參與清潔驗(yàn)證的相關(guān)人員，特別是與清潔驗(yàn)證相關(guān)設(shè)備清潔的操作人員，必須對(duì)相關(guān)的清潔操作規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格培訓(xùn)。取樣操作人員應(yīng)是企業(yè)的QA或QC人員，要求接受過清潔驗(yàn)證方案培訓(xùn)，熟悉取樣位置和取樣方法，能解釋取樣過程中的要求和程序的基本原理，應(yīng)定期再培訓(xùn)和并通過考核。絕大多數(shù)企業(yè)在清潔驗(yàn)證工作人員組建和培訓(xùn)方面較為重視，但一些企業(yè)在對(duì)從事相關(guān)清潔驗(yàn)證的人員的培訓(xùn)內(nèi)容不夠全面和細(xì)致，如某企業(yè)取用于測(cè)TOC樣品的操作人員不熟悉在取樣前應(yīng)避免使用乙醇消毒手套，以免對(duì)樣品造成的污染的相關(guān)知識(shí)；某企業(yè)對(duì)執(zhí)行