食品微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

篇一：食品微生物心得體會(huì)心得體會(huì)本次為期一周的實(shí)驗(yàn)課，讓我更加深入的了解了酸乳中的各種微生物和豐富的微生物的世界。正如我們所知，微生物也有著不同的特征和生活方式，對人類的生活產(chǎn)生著或好或壞的影響。只有當(dāng)我們能真正的了解這些微生物之后，我們才可以更好地與它們和諧共處。這次酸乳中微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)給予了我許許多多的鍛煉，從最開始實(shí)驗(yàn)課題的選取，實(shí)驗(yàn)材料的尋找，小組分工協(xié)作完成實(shí)驗(yàn)，到最后實(shí)驗(yàn)報(bào)告的完善，一切都是我們小組共同努力的結(jié)果，所以說這次大型實(shí)驗(yàn)給我們帶來的益處是無法估量的。當(dāng)然在這次實(shí)驗(yàn)也暴露出了我們很多的問題。實(shí)驗(yàn)前我們準(zhǔn)備的資料不充分，導(dǎo)致了我們實(shí)驗(yàn)開始時(shí)就手忙腳亂，實(shí)驗(yàn)用的原料比例我們都沒能很好的把握。不過隨后經(jīng)過我們的不懈努力，最終還是比較圓滿的完成了任務(wù)。實(shí)驗(yàn)中我們先對培養(yǎng)基進(jìn)行了制備，后來我們計(jì)量了菌落的總數(shù)并加以分析辨別。并對主要的菌種大腸桿菌、霉菌、酵母菌、致病菌，乳酸菌等進(jìn)行了測定和研究。本次實(shí)驗(yàn)我們忙中有樂，十分的開心。這次實(shí)驗(yàn)還增強(qiáng)了我們小組之間配合的默契程度，我們小組分工合作，有條不紊，通過大家共同的努力，我們的實(shí)驗(yàn)完成的很快。而且也使我們每個(gè)人的動(dòng)手能力的都得到了較好的鍛煉。實(shí)驗(yàn)中其他組做的實(shí)驗(yàn)也給予了我們很大的幫助，我們在思路比較阻塞的時(shí)候，大家相互幫助，給了我們很多懇切實(shí)用的建議。并且在不懂的地方老師也耐心細(xì)致的給予了我們指導(dǎo)，使我們受益匪淺。這段實(shí)驗(yàn)時(shí)光讓我覺得大家就是一個(gè)完美的大家庭，很好的團(tuán)結(jié)在了一起?？梢哉f這次實(shí)驗(yàn)不光對于我自己，對于我們整個(gè)班級都是一個(gè)很好的契機(jī)。讓我感覺我們的大家庭變得更加融合，更有凝聚力了?？偟膩碚f我們這次實(shí)驗(yàn)是比較成功的，但是我們在實(shí)驗(yàn)中也存在著很多錯(cuò)誤并且也走了不少彎路。這給我們的警示是，在科研過程中要秉著嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的態(tài)度，在實(shí)驗(yàn)前做好周密的計(jì)劃，預(yù)想到各種狀況，避免錯(cuò)誤的出現(xiàn)。這樣才能更好完美的完成各自的任務(wù)。對于這次實(shí)驗(yàn)我有一些建議，我覺得實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該進(jìn)行多種產(chǎn)品的對比和比較，在進(jìn)行活性檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)設(shè)置空白對照。這樣實(shí)驗(yàn)會(huì)更加嚴(yán)謹(jǐn)，我們分析的數(shù)據(jù)也會(huì)更準(zhǔn)確，而且我覺得還可以放映一些相關(guān)的影視資料，讓我們更加深入的了解現(xiàn)代食品行業(yè)并根據(jù)現(xiàn)階段的發(fā)展情況確定實(shí)驗(yàn)的主流方向，使實(shí)驗(yàn)更接近現(xiàn)實(shí)工業(yè)生產(chǎn)。我覺得通過這些我們會(huì)更有針對性的完成實(shí)驗(yàn)，并且有可能發(fā)現(xiàn)不同的問題，并給出比較合理的處理手段和實(shí)現(xiàn)方式。最后我還是很感謝這次實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槲覀儷@得了這樣一次機(jī)會(huì)，一個(gè)可以證明自己能力的機(jī)會(huì)。我們相信我們能行，相信自己會(huì)把實(shí)驗(yàn)任務(wù)完成的很出色。我希望這樣的實(shí)驗(yàn)?zāi)懿粩嚅_展下去，讓更多的同學(xué)了解微生物，了解我們豐富多彩的食品世界。篇二：食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告項(xiàng)目一:食品中細(xì)菌總數(shù)的測定…………1項(xiàng)目二：革蘭氏染色技術(shù)………………5項(xiàng)目三：飲用水中大腸菌群測定………7指導(dǎo)老師：郭永班級:食品1002班學(xué)號：2010040734姓名：任冠華項(xiàng)目一：食品中細(xì)菌總數(shù)的測定目的本方法規(guī)定了食品中菌落總數(shù)的測定方法。本方法適合于各類食品中菌落總數(shù)的測定。設(shè)備和材料溫箱：36±1℃。恒溫水?。?6±1℃。電爐吸管。廣口瓶或三角瓶：容量為500ml玻璃珠：直徑約5mm。平皿：直徑為90mm。試管。酒精燈。試管架。滅菌刀或剪子。滅菌鑷子。測定步驟檢樣稀釋及培養(yǎng)（1）以無菌操作，將檢樣25g(或ml)剪碎放于含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1∶10的均勻稀釋液。（2）用1ml滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液)，振搖試管，混合均勻，做成1∶100的稀釋液。（3）另取1ml滅菌吸管，按上條操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml火菌吸管。（4）根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì)，選擇2～3個(gè)適宜稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46±1℃水浴保溫)注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照（6）待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。菌落計(jì)數(shù)方法做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告（1）平板菌落數(shù)的選擇選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(shí)(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如果有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。（2）稀釋度的選擇應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若有兩個(gè)稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30～300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2則報(bào)告其中較小的數(shù)字。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。菌落數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮出現(xiàn)的問題①接種過程操作速度太慢，導(dǎo)致培養(yǎng)基與接種液無法充分混合。②平板劃線不規(guī)律。③儀器使用不熟練，配合不夠默契。參照國標(biāo)得出結(jié)論部分食品國標(biāo)短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來表示。瓶（桶）裝飲用水菌落總數(shù)限量是≤20cfuml，/總大腸菌群（mpn/100ml或cfu/100ml）不得檢出，耐熱大腸菌群（mpn/100ml或cfu/100ml）不得檢出，大腸埃希氏菌（mpn/100ml或cfu/100ml）不得檢出常溫液態(tài)奶≤10cfu/ml。結(jié)論：自來水（或啤酒）的培養(yǎng)基均未培養(yǎng)出菌落，表示自來水（或啤酒）中菌落總數(shù)合格。土壤（或污水）的培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)有大量菌落，則自來水和啤酒中無超標(biāo)現(xiàn)象，符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。項(xiàng)目二:細(xì)菌涂片制作及革蘭氏染色技術(shù)一．目的學(xué)習(xí)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等細(xì)菌涂片制作、干燥和固定技術(shù)。掌握細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色技術(shù)二．設(shè)備和材料菌種大腸桿菌16h牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)物，金黃色葡萄球菌16h牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)物。溶液和試劑草酸銨結(jié)晶紫染液，革蘭氏碘液，95%乙醇，番紅復(fù)染液等。儀器和其他用品酒精燈，載玻片，顯微鏡，雙層瓶（內(nèi)裝香柏油和二甲苯），擦鏡紙，接種環(huán)，試管架，鑷子，載玻片夾子，濾紙，滴管和無菌生理鹽水等。三．測定步驟1、細(xì)菌涂片制作（1）涂片。用接種環(huán)從試管培養(yǎng)液中取一環(huán)菌，于載玻片中央涂成薄層即可，或先滴一滴無菌水于載玻片中央，用接種環(huán)從斜面挑出少許（2）干燥。涂片后自然干燥，也可在酒精燈上略加熱，使之迅速干燥。（3）固定。固定的方法主要取決于勇什么染色方法，常用的有火焰固定法和化學(xué)固定法，火焰固定法的主要操作要領(lǐng)是：手持載玻片一端，標(biāo)本面向上，在燈的火焰外側(cè)迅速來回移動(dòng)3~4次，約3~4s.2、革蘭氏染色法涂片→干燥→草酸銨結(jié)晶紫（60s）→水洗→革蘭氏碘液媒染（60s）→95%酒精脫色（30s）→水洗→番紅（2min）→水洗→干燥→鏡檢。脫色是革蘭氏染色關(guān)鍵的一步，可直接用95%酒精沖洗脫色，直到流下的酒精無明顯的紫色為止。然后，應(yīng)立即用水沖洗，以避免脫色時(shí)間過長而影響最終染色結(jié)果。另外，挑菌量、固定溫度、染色時(shí)間也是影響結(jié)果的重要因素，只有通過反復(fù)實(shí)踐，才能獲得滿意的結(jié)果。篇三：食品微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察實(shí)驗(yàn)一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌實(shí)驗(yàn)?zāi)康模海?）了解培養(yǎng)基的配置原理和方法，掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準(zhǔn)備工作。（2）掌握高壓滅菌方法及原理實(shí)驗(yàn)原理：（1）培養(yǎng)基的制備原理：培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。從營養(yǎng)角度分析：?營養(yǎng)：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機(jī)鹽等；?適宜的酸堿度(ph值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1mpa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。實(shí)驗(yàn)材料與方法配制培養(yǎng)基所需器材實(shí)驗(yàn)設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器。實(shí)驗(yàn)器材：500ml三角燒瓶、藍(lán)蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。培養(yǎng)基等集中放講臺(tái)前高壓桶內(nèi)，送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項(xiàng)高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養(yǎng)基113℃，15min。倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項(xiàng)：空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。b.瓶口要過火焰。c.左手掀開平皿小口。d.傾注滿皿底再多一點(diǎn)，約10ml（7cm直徑平皿）。e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi)，4℃?zhèn)溆?。分析與討論（1）如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底?把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置，每處抽取數(shù)管(瓶)，標(biāo)上記號，置25℃～30℃培養(yǎng)一周左右進(jìn)行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導(dǎo)致蒸汽不暢，或鍋的結(jié)構(gòu)不合理等原因所致，應(yīng)根據(jù)上述情況進(jìn)行改進(jìn)；如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠，應(yīng)提高壓力或延長滅菌時(shí)間。經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)必不可少的基本知識(shí)?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進(jìn)入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達(dá)到預(yù)防疾病的目的。實(shí)際上，除了在臨床醫(yī)療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過程中都需要避免微生物的污染。實(shí)驗(yàn)二霉菌的接種與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。實(shí)驗(yàn)原理：接種是微生物實(shí)驗(yàn)及科學(xué)研究中一項(xiàng)基本操作技術(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅x擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無菌操作。無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進(jìn)行，所有器皿均須嚴(yán)格消毒，培養(yǎng)基應(yīng)事先做無菌試驗(yàn)，接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時(shí)應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細(xì)菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌，少數(shù)為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長（ph7.5～8.5）。實(shí)驗(yàn)材料與方法（1）實(shí)驗(yàn)材料：實(shí)驗(yàn)設(shè)備：溫箱。實(shí)驗(yàn)器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細(xì)黃鏈霉菌、pda平板、高鹽察氏平板、高氏合成i號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。（2）實(shí)驗(yàn)方法：平板接種：毛霉→pda平板（點(diǎn)植法）啤酒酵母→pda平板（五區(qū)分離劃線法）青霉、曲霉→pda平板（連續(xù)劃線法）小室載玻片培養(yǎng)法：1、取滅菌后小室平皿。2、取無菌pda瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周，用無菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并輕壓使之與載玻片間留有極小縫隙，但不能緊貼載玻片，否則不透氣。注意：接種量宜少，盡可能將孢子分散接種在瓊脂塊邊緣，否則菌絲過于稠密，影響觀察。先在平皿的濾紙上加3～5ml滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標(biāo)記，置28～30℃培養(yǎng)3～5d糧食產(chǎn)品的平板接種：取糧食樣品20g,放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，反復(fù)10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入pda瓊脂內(nèi)，每皿可接種5-10粒。放線菌的接種：取細(xì)黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。注意事項(xiàng)：空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。4.接種環(huán)使用后，先在火焰周圍把環(huán)上標(biāo)本烤干，再燒灼滅菌，以免標(biāo)本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物分析與討論1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素？青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細(xì)黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細(xì)黃鏈菌素2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些？馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？（1）連續(xù)劃線法（青霉、曲霉）青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。（2）點(diǎn)植法（根霉、毛霉）根霉與毛霉生長區(qū)域比較大，應(yīng)采用點(diǎn)植法。（3）小室載玻片培養(yǎng)法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）實(shí)驗(yàn)三霉菌的制片與形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法；了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。實(shí)驗(yàn)原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多（約為3-10μm）,常是細(xì)菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細(xì)胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細(xì)胞不變形，具有殺菌、防腐作用，不易干燥，能保持較長時(shí)間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍(lán)色能增大反差。實(shí)驗(yàn)材料：（一）菌種：在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；（二）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。實(shí)驗(yàn)方法：（一）直接制片觀察于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時(shí)再換高倍鏡（二）小室培養(yǎng)觀察將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。觀察原則：毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形狀、大小。根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認(rèn)分生孢子梗、頂囊、小梗和分生孢子。青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生孢子的形狀等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：分析與討論：青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)的每一個(gè)分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進(jìn)行孢子生殖。曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。從皮膚取材查真菌如何檢查？篇四：微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)姓名:趙葉鋒班級：食品科學(xué)113學(xué)號：2011013522大三的第二學(xué)期塊結(jié)束了，這個(gè)學(xué)期操作了四個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)，以及一個(gè)自主設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。通過前階段對四個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作和認(rèn)知的基礎(chǔ)上，展開第五個(gè)實(shí)驗(yàn)的自主設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)分別是菌落總數(shù)測定，霉菌和酵母的檢查和計(jì)數(shù)，乳酸菌的檢驗(yàn)，微生物藥敏試驗(yàn)以及探討環(huán)境因素對微生物生長的影響。這學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)是在上學(xué)期微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上的累積和擴(kuò)展延伸：以培養(yǎng)基的制備與滅菌，玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌，微生物接種技術(shù)和細(xì)菌的革蘭氏染色為技術(shù)基礎(chǔ)進(jìn)行的，以加強(qiáng)學(xué)生基礎(chǔ)理論知識(shí)和基本技能的培養(yǎng)為目的。下面我來談?wù)勎以趯?shí)驗(yàn)中的心得體會(huì)。第一個(gè)實(shí)驗(yàn)是菌落總數(shù)測定。讓我重新認(rèn)識(shí)了一下這個(gè)名詞：菌落形成單位，我現(xiàn)在的理解就是：1ml或者1g待測樣品中菌落的個(gè)數(shù)，一定要注意的是單位是cfu/ml或cfu/g。還有就是要掌握好對高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實(shí)驗(yàn)之前要充分做好預(yù)習(xí)工作，以便實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。由于是測定微生物實(shí)驗(yàn)，就要尤其小心其他雜菌的混入影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此要做好實(shí)驗(yàn)儀器和各種試劑的滅菌，有培養(yǎng)皿，試管，移液槍頭（裝在盒子中），按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水，按各自要求用紗布和報(bào)紙包扎好，送入高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進(jìn)行清洗，并烘干，以免水分沾濕報(bào)紙。滅完菌后取出物品進(jìn)入超凈工作臺(tái)，超近工作臺(tái)的紫外燈在進(jìn)入20分鐘前開啟，并在進(jìn)入時(shí)關(guān)閉，以免影響人體。要對臺(tái)面進(jìn)行消毒處理，用酒精擦拭?？梢栽诘却傊囵B(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進(jìn)行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混，同一個(gè)試管里吸取樣品才能用同一個(gè)槍頭進(jìn)行移液。再進(jìn)行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后，用右手打開紗布并將錐形瓶拿住，將瓶口靠近酒精燈再進(jìn)行滅菌，左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋，將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi)，不用倒很多，使瓊脂培養(yǎng)基沒過培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的，倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋，緩慢地平方在超凈工作臺(tái)臺(tái)面邊緣處，再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央，蓋上培養(yǎng)皿蓋，然后用手輕輕搖晃，千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號，靜置。如此依次操作下去。靜置一段時(shí)間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時(shí)間再取出進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。我們組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不甚理想，培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的，或者是培養(yǎng)皿壁上也都長著，主要是由于待測樣品打入培養(yǎng)皿后，搖晃不均勻或者太大力了，以至于菌液沒分散開來或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。第五個(gè)實(shí)驗(yàn)是自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素對微生物生長的影響。選取3個(gè)環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進(jìn)行設(shè)計(jì)。根據(jù)前四個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，通過小組探討和交流設(shè)計(jì)出實(shí)驗(yàn)方案。并加以驗(yàn)證。通過自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)可以結(jié)合小組的智慧，加強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神和創(chuàng)新思維，通過實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證理論，增加感性認(rèn)識(shí)，培養(yǎng)獨(dú)立工作能力和思考能力，并使具有過硬的專業(yè)技術(shù)水平。通過這次的實(shí)驗(yàn)，我明白了任何事情丟不是一蹴而就的，而是一個(gè)慢慢積累的過程。雖然實(shí)驗(yàn)結(jié)果不是很理想，但是我參與了過程，通過小組討論我們也分析了失敗的原因，找到了解決的方法，避免了下一次失誤。并且從中理解了團(tuán)隊(duì)討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。篇五：食品微生物檢驗(yàn)課件總結(jié)1食品微生物檢驗(yàn)定義：應(yīng)用微生物學(xué)的理論與方法，研究外界環(huán)境和食品中微生物的種類、數(shù)量、性質(zhì)、活動(dòng)規(guī)律及其對人和動(dòng)物健康的影響。2食品微生物檢驗(yàn)的特點(diǎn)：研究對象及范圍廣2.涉及學(xué)科多樣3.實(shí)用性及應(yīng)用性強(qiáng)4.采用標(biāo)準(zhǔn)化3食品微生物檢驗(yàn)的意義：食品微生物檢驗(yàn)方法為食品監(jiān)測必不可少的重要組成部分。首先，它是衡量食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，也是判定被檢食品能否食用的科學(xué)依據(jù)之一。其次，通過食品微生物檢驗(yàn)，可以判斷食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生情況，能夠?qū)κ称繁患?xì)菌污染的程度作出正確的評價(jià)，為各項(xiàng)衛(wèi)生管理工作提供科學(xué)依據(jù)，提供傳染病和人類、動(dòng)物的食物中毒的防治措施。再次，食品微生物檢驗(yàn)是以貫徹“預(yù)防為主”的衛(wèi)生方針，可以有效地防止或者減少食物中毒和人畜共患病的發(fā)生，保障人民的身體健康；同時(shí)，它對提高產(chǎn)品質(zhì)量，避免經(jīng)濟(jì)損失，保證出口等方面具有政治上和經(jīng)濟(jì)上的重大意義?？傊?，食品微生物檢驗(yàn)的目的：為生產(chǎn)出安全、衛(wèi)生、符合標(biāo)準(zhǔn)的食品提供科學(xué)依據(jù)。4食品微生物檢驗(yàn)的范圍：5食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo)我國衛(wèi)生部頒布的食品微生物指標(biāo)有菌落總數(shù)、大腸菌群和致病菌。（1）、菌落總數(shù)菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間）培養(yǎng)后，所得每g（ml）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。（2）、大腸菌群包括大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的一些中間類型的細(xì)菌。寄居于人及溫血?jiǎng)游锬c道內(nèi)隨大便排出體外。大腸菌群數(shù)越多，說明食品受糞便污染的程度越大。（3）、致病菌（4）、霉菌及其毒素有很多霉菌能夠產(chǎn)生毒素，引起疾病，故應(yīng)檢驗(yàn)。6食品微生物檢驗(yàn)的發(fā)展：(一)致病菌檢測階段（二）指示菌檢測階段（三）微生態(tài)制劑檢測階段（四）現(xiàn)代基因工程菌和尚未能培養(yǎng)菌的檢測7微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室（一）微生物檢驗(yàn)室基本條件總要求：對各室的共同要求是高度的清潔衛(wèi)生，也就是要盡可能地創(chuàng)造無菌條件。基本條件：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必須具備顯微鏡工作，微生物分離培養(yǎng)工作及基本化學(xué)工作順利進(jìn)行的基本條件。具體要求：1、光線明亮，但避免陽光直射室內(nèi)；2、潔凈無菌，地面與四壁平滑，便于清潔和消毒；3、空氣清新，應(yīng)有防風(fēng)、防塵設(shè)備；4、要有安全，適宜的電源和充足的水源；5、具備整潔、穩(wěn)固、適用的實(shí)驗(yàn)臺(tái)，臺(tái)面最好有耐酸堿、耐腐蝕的黑膠板；6、顯微鏡及實(shí)驗(yàn)室常用的工具、藥品應(yīng)設(shè)有存放櫥柜。（二）微生物檢驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)守則在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí)要時(shí)刻記住：我們實(shí)驗(yàn)的許多對象可能是病原微生物，如果不慎發(fā)生意外，不僅自身招致感染，而且可能造成病原微生物的傳播。檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必須遵守以下守則：1、包、衣物等勿帶入實(shí)驗(yàn)室2、應(yīng)戴口罩、帽子，換用專用鞋。3、保持安靜、有秩序，禁止飲食、吸煙等。4、檢驗(yàn)前應(yīng)登記日期、批號，詳記檢驗(yàn)序號，日期，程序和結(jié)果5、室內(nèi)保持整潔，完畢后清理桌面。6、無菌室應(yīng)備有專用開瓶器、金屬勺、接種針等，使用前后應(yīng)灼燒滅菌。7、無菌室內(nèi)應(yīng)備有盛放3％來蘇水或5％石炭酸溶液的玻璃缸，內(nèi)浸紗布數(shù)塊；備有75％酒精棉球；無菌室每次使用前后，用紫外燈照射。8、吸過菌液的吸管，投入上述玻璃筒中，不得放桌上；菌液流灑桌面，用抹布浸沾上述溶液泡在污染部位，半小時(shí)后可抹去。若手上沾有活菌，也應(yīng)在上訴消毒液中浸泡10～20min，再以肥皂及水洗刷。9、遇火險(xiǎn)，應(yīng)立即關(guān)閉電門、煤氣門，如果酒精、乙醚、汽油等著火，切勿用水，應(yīng)以沙土等滅火。10、離開前用肥皂將手洗凈，脫去工作服、帽、專用鞋。關(guān)閉門窗以及水電煤氣等開關(guān)。幾種意外情況的處理：（1）皮膚破傷：先除盡異物，用蒸餾水和生理鹽水洗凈后，涂以2％碘酒。（2）灼燒傷：涂以凡士林、5％的鞣酸或2％的苦味酸。（3）化學(xué)藥品腐蝕傷：若為強(qiáng)酸腐蝕，先用大量清水沖洗后，再用50g/l碳酸氫鈉或氫氧化銨溶液洗滌中和；若為強(qiáng)堿腐蝕，也先用大量清水沖洗后，再用5％醋酸或5％硼酸溶液洗滌中和。若受傷的是眼部，經(jīng)上述處理后，最后滴入橄欖油或液體石蠟1～2滴。使用前準(zhǔn)備：用紫外線殺菌燈進(jìn)行空氣消毒，開燈照射30min后關(guān)燈，間隔30min后方可進(jìn)入室內(nèi)工作；霉菌較多時(shí)，先用5％石炭酸全面噴灑室內(nèi)，再用甲醛熏蒸；細(xì)菌較多時(shí)，可采用甲醛與乳酸交替熏蒸。一般情況下，可酌情間隔一定時(shí)間用2ml/m3甲醛溶液或20ml/m3丙二醇溶液熏蒸消毒。無菌室的熏蒸消毒主要采用甲醛熏蒸消毒法。1、加熱熏蒸2、氧化熏蒸（甲醛熏蒸后關(guān)門密閉應(yīng)保持12小時(shí)以上，為減弱甲醛刺激，熏蒸后12h，再量取等量氨水，速放入室內(nèi)，同時(shí)敞開門窗以放出剩余刺激性氣體。）（三）無菌室無菌程度測定測定無菌室無菌程度一般采用平板法：滅菌的15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基蓋暴露于無菌室內(nèi)不同地方，10min后，蓋好皿蓋。倒置于37攝氏度培養(yǎng)24h后，觀察菌落情況，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。每皿內(nèi)菌落數(shù)不超過4個(gè)，則可認(rèn)為無菌程度良好，若菌落數(shù)很多，則應(yīng)對無菌室進(jìn)一步滅菌，滅菌后再檢驗(yàn)。（四）常用儀器超凈工作臺(tái)是箱式微生物無菌操作工作臺(tái)，占地面積小，使用方便。其工作原理是借助箱內(nèi)鼓風(fēng)機(jī)將外界空氣強(qiáng)行通過一組過濾器，凈化的無菌空氣連續(xù)不斷地進(jìn)入操作臺(tái)面，并且臺(tái)內(nèi)設(shè)有紫外線殺菌燈，可對環(huán)境進(jìn)行殺菌，保證了超凈工作臺(tái)面的正壓無菌狀態(tài)。高壓蒸汽滅菌鍋是應(yīng)用最廣、效果最好的濕熱滅菌器，可用于培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄的培養(yǎng)物以及耐高熱藥品、紗布、采樣器械等的滅菌。高壓蒸汽滅菌鍋的種類有手提式、直立式以及橫臥式等多種，它們的構(gòu)造和滅菌原理基本相同。高壓滅菌鍋為一雙層金屬圓筒，兩層之間盛水，外壁堅(jiān)厚，其上方或前方有金屬厚蓋，蓋上裝有螺旋，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而器內(nèi)蒸汽壓力可升高，其溫度也相應(yīng)增高。高壓蒸汽滅菌鍋上還裝有排氣閥、安全閥，用來調(diào)節(jié)滅菌鍋內(nèi)蒸汽壓力與溫度并保障安全；高壓蒸汽滅菌鍋上還裝有溫度壓力表，指示內(nèi)部溫度與壓力。常用玻璃器皿微生物檢驗(yàn)室所用玻璃器皿，通常以中性硬質(zhì)玻璃制成。硬質(zhì)玻璃能耐受高熱、高壓，同時(shí)，其中游離堿含量較低，不至于影響基質(zhì)的酸堿度。試管，培養(yǎng)皿，三角瓶，刻度吸管，試劑瓶，玻璃缸，玻璃棒，玻璃珠，滴瓶，玻璃漏斗，載玻片、凹玻片及蓋玻片，發(fā)酵罐，注射器及其大小針頭，量杯、量筒。新玻璃器皿洗滌新玻璃器皿因含有游離堿，應(yīng)先在清潔液或2%鹽酸內(nèi)浸泡數(shù)小時(shí)，再用自來水沖洗干凈。（2）溫度計(jì)檢查法用一支150℃的水銀溫度計(jì)（其結(jié)構(gòu)原理與體溫溫度計(jì)相似），使用前先將其水銀柱甩到0℃以下，插入滅菌物品內(nèi)層，按常規(guī)滅菌，滅菌完畢后，取出觀察，確定是否達(dá)到要求的溫度滅菌效果檢驗(yàn)常用方法將有芽孢的細(xì)菌放在培養(yǎng)皿內(nèi)，用紗布包好，按常法滅菌。滅菌后取出培養(yǎng)皿，經(jīng)培養(yǎng)后若無細(xì)菌生長，即表示滅菌效果良好。玻璃器皿的滅菌一般常用的玻璃器皿，在洗凈晾干后，才能滅菌。試管、三角燒瓶等，在滅菌之前，管口和瓶口塞好棉塞，在干熱滅菌器內(nèi)160℃，2h滅菌。培養(yǎng)皿滅菌前，用牛皮紙或廢報(bào)紙包好，每二對或五對為一包，排列在滅菌箱擱架上進(jìn)行干熱滅菌。吸移管滅菌前，口上塞一小棉球，每支用紙包扎好，或置于金屬盒里，放在滅菌器內(nèi)滅菌。（六）幾個(gè)基本概念回顧：一、滅菌殺滅物體中或物體上所有微生物（包括病原微生物和非病原微生物）的繁殖體和芽孢的過程稱為滅菌，即滅菌是殺滅或消滅一定環(huán)境中的所有微生物。滅菌的方法分為物理滅菌法和化學(xué)滅菌法兩大類。二、消毒用物理的、化學(xué)的或生物學(xué)的方法殺滅病原微生物的過程稱為消毒。具有消毒作用的藥物稱為消毒劑，一般消毒劑在常用濃度下，只對細(xì)菌的繁殖體有效，對于細(xì)菌芽孢則無殺滅作用。三、防腐防止或抑制微生物生長繁殖的方法稱為防腐。用于防腐的藥物稱為防腐劑。某些藥物在低濃度時(shí)是防腐劑，在高濃度時(shí)則為消毒劑四、無菌無菌是不含有活的微生物的意思。防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的方法叫無菌技術(shù)活無菌操作。進(jìn)行微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，須嚴(yán)格注意無菌操作。8食品微生物檢驗(yàn)的一般步驟9采樣的要求1、嚴(yán)格遵守樣品采集的操作規(guī)程。2、所采樣品必須具有代表性。3、采樣操作要防止污染，防止變質(zhì)、損壞、丟失。4、不得加入防腐劑、固定劑等。5、樣品采集和現(xiàn)場測定必須有二人以上參加。10食品微生物檢驗(yàn)的取樣方案①國際食品微生物學(xué)規(guī)范委員會(huì)（icmsf）取樣方案；②美國fda微生物學(xué)取樣方案；③世界糧農(nóng)組織（fao）取樣方案;4其他方案。一、icmsf方法根據(jù)危害度的分類，將取樣方案分成二級法和三級法。在中等或嚴(yán)重危害的情況下使用二級抽樣方案，對健康危害低的則建議使用三級抽樣方案。i類危害：老人和嬰幼兒食品及在食用前可能會(huì)增加危害的食品；ⅱ類危害：立即食用的食品，在食用前危害基本不變；ⅲ類危害：食用前經(jīng)加熱處理，危害減小的食品。將檢驗(yàn)指標(biāo)對食品衛(wèi)生的重要程度分成一般、中等和嚴(yán)重三檔在進(jìn)行詳細(xì)敘述之前，先解釋四個(gè)代號：n：系指同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)。c：最大可允許超出m值的樣品數(shù)。m：微生物指標(biāo)可接受水平的限量值。m：微生物指標(biāo)的最高安全限量值。①二級法：設(shè)定取樣數(shù)n，指標(biāo)值m，允許有≦c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于m值。二級抽樣方案:自然界中材料的分布曲線一般是正態(tài)分布，以其一點(diǎn)作為食品微生物的限量值，只設(shè)合格判定標(biāo)準(zhǔn)m值，超過m值的，則為不合格品。檢查在檢樣是否有超過m值的，來判定該批是否合格。②三級法：設(shè)定取樣數(shù)n，指標(biāo)值m，附加指標(biāo)值m，介于m與m之間的樣品數(shù)c。按照三級采樣方案設(shè)定的指標(biāo)，在n個(gè)樣品中，允許全部樣品中相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值小于或等于m值；允許有≦c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)值在m值和m值之間；不允許有樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于m值。例如：冷凍生蝦的細(xì)菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)n=5，c=3，m=10，m=100，其意義是從一批產(chǎn)品中，取5個(gè)檢樣，經(jīng)檢樣結(jié)果，允許≤3個(gè)檢樣的菌數(shù)是在m~m值（10~100）之間，如果有3個(gè)以上檢樣的菌數(shù)是在m~m值（10~100）之間或一個(gè)檢樣菌數(shù)超過m值（100）者，則判定該批產(chǎn)品為不合格品。11食品微生物檢驗(yàn)采樣原則能采取完整包裝的樣品就不拆開取樣，必須拆開包裝取樣的應(yīng)按無菌操作進(jìn)行取樣。12樣品的送檢要求1、要快速運(yùn)送：不要超過3小時(shí)；2、若路途遙遠(yuǎn)，可在1~5℃低溫下運(yùn)送；3、要注意防污染、防散漏、防變質(zhì)；4、要填寫檢驗(yàn)申請單。13樣品的保留（1）陰性樣品：在發(fā)出報(bào)告可及時(shí)處理；（2）陽性樣品：在發(fā)出報(bào)告以后3天才能處理樣品；（3）進(jìn)口食品的陽性樣品：要保留6個(gè)月才能處理。（4）微生物檢驗(yàn)不進(jìn)行復(fù)檢14無菌技術(shù)（一）什么是無菌技術(shù)指在微生物實(shí)驗(yàn)工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。（二）無菌環(huán)境無菌室；無菌柜；超凈工作臺(tái)1、無菌室（1）無菌室的結(jié)構(gòu)：更衣間、緩沖間、操作間（2）無菌室的消毒和防污染每日（使用前）紫外線照射（1~2小時(shí)）.每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時(shí)）.每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進(jìn)行消毒。2、超凈工作臺(tái)超凈臺(tái)的使用與保養(yǎng):（1）風(fēng)速保持在0.32-0.48米/秒;（2）使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上;（3）讓超凈臺(tái)預(yù)工作10~15分鐘;（4）使用完畢后，用70%酒精將臺(tái)面和臺(tái)內(nèi)四周擦拭干凈.（四）無菌操作1、無菌操作目的：（1）保證待檢物品不被環(huán)境中微生物的污染；（2）防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員。2、進(jìn)入無菌室前的準(zhǔn)備（1）定期檢查無菌環(huán)境的空氣是否符合規(guī)定；（2）用紫外線滅菌處理30~60分鐘；（3）檢查無菌器材是否完備；（4）洗手消毒；（5）手部消毒后，再穿戴無菌工作服。3、檢驗(yàn)操作過程的無菌操作要求（1）在操作中不應(yīng)有大幅度或快速的動(dòng)作；（2）使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放。（3）在正火焰上方操作；（4）接種用具在使用前、后都必須灼燒滅菌；（5）在接種培養(yǎng)物時(shí)，協(xié)作應(yīng)輕、準(zhǔn)。（6）不能用嘴直接吸吹吸管。（7）帶有菌液的吸管、玻片等器材應(yīng)及時(shí)置于盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒。15微生物的接種將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種。常用的接種方法有以下幾種：１）劃線接種２）三點(diǎn)接種３）穿刺接種４）澆混接種５）涂布接種６）液體接種７）注射接種８）活體接種分離純化方法：１.傾注平板法２.涂布平板法３.平板劃線法16菌落形態(tài)學(xué)bacterialcolonymorphology?有莢膜的細(xì)菌菌落較大并且表面光滑，而沒有莢膜的則表面較粗糙；?具有芽孢的細(xì)菌菌落表面常有褶皺并且不透明。?沒有鞭毛不運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌，特別是球菌，常形成較小、較厚、邊緣較整齊的菌落；有鞭毛的細(xì)菌則較大而扁平，邊緣波狀、鋸齒狀等；17細(xì)菌的生化反應(yīng)檢查法由于細(xì)菌各自酶系統(tǒng)不同，新陳代謝的產(chǎn)物也有所不同，而這些產(chǎn)物又各具有不同的生物化學(xué)特性。為此，可利用生物化學(xué)的方法來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的細(xì)菌，這種試驗(yàn)稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)。1.在培養(yǎng)物中加入某種底物與指示劑，經(jīng)接種、培養(yǎng)后，觀察培養(yǎng)基的ph值變化。2.在培養(yǎng)物中加入試劑，觀察它們同細(xì)菌代謝產(chǎn)物所生成的顏色反應(yīng)。3.根據(jù)酶作用的反應(yīng)特性，測定酶的存在。4.根據(jù)細(xì)菌對理化條件和藥品的敏感性，觀察細(xì)菌的生長情況。生化試驗(yàn)的注意事項(xiàng)1、待檢菌應(yīng)是新鮮培養(yǎng)物。培養(yǎng)18-24h。2、待檢菌應(yīng)是純種培養(yǎng)物。3、遵守觀察反應(yīng)的時(shí)間。觀察結(jié)果的時(shí)間，多為24或48小時(shí)。4、應(yīng)做必要的對照試驗(yàn)。5、提高陽性檢出率，至少挑取2-3個(gè)待檢的疑似菌落分別進(jìn)行試驗(yàn)。生化試驗(yàn)分類（一）糖類代謝試驗(yàn)（二）氨基酸和蛋白質(zhì)代謝試驗(yàn)（三）有機(jī)酸鹽和銨鹽代謝試驗(yàn)（四）酶類試驗(yàn)18糖(醇)發(fā)酵試驗(yàn)原理糖類是作為碳源和能量來源提供細(xì)菌合成菌體成分必需的原料，由于細(xì)菌各自有不同的酶系統(tǒng)，故對糖(醇)類的分解能力不盡相同。有的能分解某些糖類，生成酸又生成氣體，有的雖能分解這些糖類但只能生成酸不能生成氣體，有的則根本不能分解。借此特點(diǎn)，可作為鑒定細(xì)菌的依據(jù)之一。該試驗(yàn)檢查細(xì)菌對加在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的特殊的糖發(fā)酵(降解)后產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣能力。方法(1)試劑：糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，常用的指示劑主要有酚紅、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫和酸性復(fù)紅等。前二者顏色反應(yīng)較敏感，但穩(wěn)定性較差。后二者比較穩(wěn)定。特別是對發(fā)酵遲緩的細(xì)菌，培養(yǎng)時(shí)間較長，則以后二者為優(yōu)。(2)培養(yǎng)基：液體糖發(fā)酵管，半固體糖發(fā)酵管，固體糖發(fā)酵管，雙糖(或三糖)高層斜面發(fā)酵管。(3)操作：以無菌操作的方法將經(jīng)分離培養(yǎng)的純種細(xì)菌接種到糖(醇)發(fā)酵培養(yǎng)基中，置溫箱內(nèi)，按各類菌所要求溫度(通常為37℃)經(jīng)一定時(shí)間(數(shù)小時(shí)至二周)培養(yǎng)，然后觀察結(jié)果。記錄：產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，陽性，以“+”表示產(chǎn)酸產(chǎn)氣，陽性，以“⊕”表示不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，陰性，以“-”表示19甲基紅(mr)試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌分解葡萄糖的過程中產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步被代謝成為乳酸，乙酸，甲酸等。使培養(yǎng)基的ph下降至4.5以下，加入甲基紅指示劑出現(xiàn)紅色為陽性；有些細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，最終的酸類較少，培養(yǎng)基ph較高，加入