CMT2L型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型的基因鑒定學(xué)與行為學(xué)分析的開題報(bào)告

CMT2L型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型的基因鑒定學(xué)與行為學(xué)分析的開題報(bào)告開題報(bào)告：題目：CMT2L型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型的基因鑒定學(xué)與行為學(xué)分析研究背景和意義：CMT2L型是一種遺傳性周圍神經(jīng)病變，主要特征是雙側(cè)腳背部肌肉的弱化和萎縮，患者還可能出現(xiàn)感覺異常和疼痛。該病的發(fā)病機(jī)制目前還不完全清楚，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球范圍內(nèi)有數(shù)百萬人患有各種類型的遺傳性周圍神經(jīng)病變。轉(zhuǎn)基因小鼠模型是研究人類疾病發(fā)病機(jī)制的重要手段之一，目前已經(jīng)有一些CMT2L型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型被建立，但是這些模型的基因鑒定學(xué)和行為學(xué)分析還不夠完善。因此，本研究擬通過對CMT2L型轉(zhuǎn)基因小鼠模型的基因鑒定學(xué)和行為學(xué)分析，深入研究CMT2L型的發(fā)病機(jī)制，為該病的早期診斷和治療提供新思路和新方法。研究目的：1、建立具有CMT2L型表型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型；2、通過基因鑒定學(xué)分析，確定形成CMT2L型表型所涉及的關(guān)鍵基因；3、通過行為學(xué)分析，探究CMT2L型表型與小鼠行為的關(guān)系；4、為CMT2L型的早期診斷和治療提供新思路和新方法。研究內(nèi)容和方法：本研究將采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，以小鼠作為實(shí)驗(yàn)對象，建立具有CMT2L型表型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。通過體重、運(yùn)動(dòng)能力、神經(jīng)傳導(dǎo)速度等指標(biāo)，評估模型的表型特征。同時(shí)，利用生物信息學(xué)、基因組學(xué)等方法，對模型的基因鑒定進(jìn)行深入研究，明確涉及CMT2L型發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵基因。最后，通過行為學(xué)分析，研究CMT2L型表型與小鼠行為的關(guān)系。具體方法如下：1、克隆目標(biāo)基因，設(shè)計(jì)合適的sgRNA，并經(jīng)過體外轉(zhuǎn)錄和翻譯，制備CAS9和sgRNA復(fù)合物。2、將CAS9和sgRNA復(fù)合物導(dǎo)入小鼠胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)，并篩選出成功編輯目標(biāo)基因的干細(xì)胞。3、將編輯基因的干細(xì)胞注入到小鼠胚胎中，進(jìn)行小鼠胚胎移植。4、通過鑒別檢測，篩選出具有目標(biāo)突變的小鼠，并進(jìn)行后代繁殖。5、通過相應(yīng)的指標(biāo)測定、生物信息學(xué)分析和行為學(xué)實(shí)驗(yàn)等方法，評估CMT2L型轉(zhuǎn)基因小鼠模型的表型特征，確立涉及CMT2L型發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵基因，并探究CMT2L型表型與小鼠行為的關(guān)系。時(shí)間安排：本研究將在2022年9月開始，計(jì)劃為期3年，具體時(shí)間安排如下：第一年：建立CMT2L型轉(zhuǎn)基因小鼠模型，并對其進(jìn)行初步評估。第二年：進(jìn)行CMT2L型轉(zhuǎn)基因小鼠模型的基因鑒定學(xué)分析，并從多個(gè)角度深入探究CMT2L型發(fā)病機(jī)制。第三年：通過行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，探究CMT2L型表型與小鼠行為的關(guān)系，并為該病的早期診斷和治療提供新思路和新方法。研究預(yù)期成果：1、建立具有CMT2L型表型的轉(zhuǎn)基因小鼠模型；2、鑒定出涉及CMT2L型發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵基因；3、研究CMT2L型表型與小鼠行為的關(guān)系，為該病的早期診斷和治療提供新思路和新方法。研究的重要性：本研究將通過建立CMT2L型轉(zhuǎn)基因小鼠模型，鑒定出涉及該病發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵基因，并探究CMT2L