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GFP轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞的定向誘導分化及腦內(nèi)移植的實驗研究的開題報告摘要:骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)因其具有較好的增殖和分化潛能,而成為近年來廣泛研究的一個熱點。本研究旨在通過GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù),將GFP基因?qū)隑MSCs中,從而實現(xiàn)對其定向誘導分化為神經(jīng)細胞的能力的研究;同時探究其在小鼠腦內(nèi)移植后對腦組織修復作用的研究?!娟P(guān)鍵詞】GFP轉(zhuǎn)基因;骨髓間充質(zhì)干細胞;定向誘導分化;腦組織修復一、研究背景:近年來,隨著干細胞治療的發(fā)展,BMSCs因其來源廣泛、可定向分化的特點在臨床及實驗室中應用越來越廣泛。而其在神經(jīng)系統(tǒng)修復中的應用,則是一個備受關(guān)注的熱點問題。BMSCs在體內(nèi)經(jīng)過定向誘導分化可被分化為神經(jīng)干細胞,而神經(jīng)干細胞再進一步分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞,進而在神經(jīng)組織修復中發(fā)揮作用。由于細胞的很多功能都是基因表達的結(jié)果,因此通過近年來發(fā)展起來的基因轉(zhuǎn)染技術(shù),向細胞內(nèi)導入外源性基因已經(jīng)成為了分子生物學研究的重要手段。而GFP作為一種典型的標記基因,在分子生物學中得到了廣泛的應用。GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應用,則可以通過GFP的熒光標定,追蹤BMSCs在體內(nèi)的遷移和分化,從而為神經(jīng)系統(tǒng)修復的研究提供了重要的實驗基礎。二、研究問題和研究目的:研究問題:BMSCs能否被定向誘導分化為神經(jīng)細胞?其在小鼠腦內(nèi)的移植后是否能起到修復腦組織的作用?研究目的:1.將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應用于BMSCs中,標定BMSCs在體內(nèi)遷移和分化的過程。2.探究BMSCs對神經(jīng)細胞的定向誘導分化,研究其影響因素。3.將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi),觀察其在腦組織修復中的作用。三、研究內(nèi)容和研究方法:研究內(nèi)容:1.在BMSCs中引入GFP轉(zhuǎn)基因,標定其在體內(nèi)遷移和分化情況。2.通過定向誘導分化,將BMSCs向神經(jīng)細胞方向發(fā)展,觀察其影響因素。3.將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi),觀察其在腦組織修復中的作用。研究方法:1.通過臍帶血中的BMSCs提取BMSCs,經(jīng)過鑒定并增殖到一定程度。2.對BMSCs進行GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù),標定其在體內(nèi)的分化過程。3.通過添加神經(jīng)因子等化學物質(zhì),將BMSCs向神經(jīng)細胞方向誘導分化。4.通過從小鼠神經(jīng)系統(tǒng)損傷模型中選擇小鼠,對定向誘導分化后的BMSCs進行腦移植實驗,觀察其在小鼠腦內(nèi)的修復作用。四、預期研究結(jié)果和意義:預期研究結(jié)果:將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應用于BMSCs中,標定其在體內(nèi)遷移和分化的過程;探究定向誘導分化后的BMSCs能否成熟至神經(jīng)細胞;將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi),觀察其對腦組織修復的作用。預期意義:1.為干細胞治療在神經(jīng)系統(tǒng)修復中的應用提供重要的實驗基礎。2.為神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病
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