2第一章 第二節(jié) 基因工程 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)_第1頁
2第一章 第二節(jié) 基因工程 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)_第2頁
2第一章 第二節(jié) 基因工程 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)_第3頁
2第一章 第二節(jié) 基因工程 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)_第4頁
2第一章 第二節(jié) 基因工程 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)_第5頁
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文檔簡介

植物會(huì)不會(huì)得癌癥呢？植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的一般操作過程

重組體

DNA間接轉(zhuǎn)化法：植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)方法

DNA直接轉(zhuǎn)化法：

基因槍法電擊法花粉管通道法顯微注射法脂質(zhì)體法化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)法

農(nóng)桿菌介導(dǎo)法病毒介導(dǎo)法

亦稱為載體法，是以生物體為媒介的植物轉(zhuǎn)基因方法，有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和病毒介導(dǎo)法。

間接轉(zhuǎn)化法

農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是以農(nóng)桿菌為媒介對(duì)植物進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的方法。1.農(nóng)桿菌介導(dǎo)法

農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是通過根癌農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒(Tumerinducingplasmid)和發(fā)根農(nóng)桿菌的Ri質(zhì)粒(Rootinducingplasmid)上的一段T-DNA（TransferDNA）區(qū)在農(nóng)桿菌侵染植物形成腫瘤的過程中，T-DNA可以被轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞并插入到染色體基因中。

T-DNA能夠進(jìn)行高頻率的轉(zhuǎn)移,而且Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒上可以插入到50kb的外源基因,因此Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒就成為植物基因轉(zhuǎn)化的理想載體系統(tǒng)。

T-DNA可以將其攜帶的外源基因整合到植物基因組中，T-DNA上較重要的是T區(qū)兩端左右邊界各為25bp的重復(fù)序列。其中14bp是中心,分10bp和4bp兩組,是完全保守的。這兩個(gè)邊界是T-DNA轉(zhuǎn)移所必需的。其中尤以右邊界最為重要。T-DNAvir基因Ti質(zhì)粒的vir區(qū)大小為30kb,分VirA、B、C、D、E、G、H等7個(gè)操縱子,一共有24個(gè)基因共同控制著T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移,

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